简介：结果电泳检测及纯化后DNA产物测序分析均显示TDPCR扩增产物条带特异性、效率较普通PCR扩增产物高,因此我们在VHL基因突变筛查中使用了普通PCR和TDPCR两种方法,在许多普通PCR无产物的基因扩增

简介：　　摘 要：近年来，人们在日常生活中经常会遇到食品卫生安全问题，各种食品安全事故频发，受到社会各界的广泛关注，在此环境下，国家不断加大对食品卫生安全问题的检查与惩处力度，其中多重 PCR检测技术得到比较广泛的应用实践，并取得良好的效果。基于此，本文以 PCR检测技术的含义与优势特点为切入点，对多重 PCR检测技术在食品微生物检测中的应用价值进行了细致分析，旨在为我国食品安全检测工作贡献一份力量。  　　关键词：多重 PCR检测技术 ;食品卫生安全 ;微生物检测  　　 Abstract: in recent years, people often encounter food safety problems in their daily life, and various food safety accidents happen frequently, which are widely concerned by all walks of life. In this environment, the state continues to increase the inspection and punishment of food safety problems, in which multiple PCR detection technology has been widely used and achieved good results. Based on this, this paper takes the meaning and advantages of PCR detection technology as the starting point, and analyzes the application value of multiple PCR detection technology in food microbe detection in detail, in order to contribute to the work of food safety detection in China.

简介：[摘要 ] 目的：探讨长链非编码 RNA(long non-coding RNA,lncRNA)干扰后，在人支气管上皮细胞（ the human bronchial epithelial cells， 16HBE）中的表达情况。方法 :应用 real-timePCR方法检验 lncRNA- ENST00000414355干扰效果。结果 : 正常 16HBE细胞中 ENST00000414355干扰 48h后，三条阳性序列的实验组 ENST00000414355表达均下降，都具有统计学意义 P值均 <0.0001；在氯化镉转化 16HBE成瘤细胞中 ENST00000414355干扰后，第一条阳性序列转染下达到沉默效果，且具有统计学意义 P<0.0001；在氯化镉转化 16HBE第 35代细胞在 ENST00000414355三条阳性序列转染下没有出现沉默效果所示。结论： ENST00000414355在正常 16HBE细胞中干扰效果最明显，在氯化镉转化 16HBE成瘤细胞中只有一条序列有干扰效果。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(longnon-codingRNA,lncRNA)干扰后，在人支气管上皮细胞（thehumanbronchialepithelialcells，16HBE）中的表达情况。方法应用real-timePCR方法检验lncRNA-ENST00000414355干扰效果。结果正常16HBE细胞中ENST00000414355干扰48h后，三条阳性序列的实验组ENST00000414355表达均下降，都具有统计学意义P值均<0.0001；在氯化镉转化16HBE成瘤细胞中ENST00000414355干扰后，第一条阳性序列转染下达到沉默效果，且具有统计学意义P<0.0001；在氯化镉转化16HBE第35代细胞在ENST00000414355三条阳性序列转染下没有出现沉默效果所示。结论ENST00000414355在正常16HBE细胞中干扰效果最明显，在氯化镉转化16HBE成瘤细胞中只有一条序列有干扰效果。

简介：摘要目的探讨分析实时荧光定量PCR检测诊断结核病的应用价值。方法回顾性分析本院收治的80例结核病患者作为本次研究对象。对患者行实时荧光定量检查以及涂片抗酸染色法检查，对比分析两种不同检验诊断方法的结果。结果通过对患者行涂片抗酸染色法检测，发现最终的阳性检测共计为33例41.25％，对患者行实时荧光定量检验，发现最终的阳性检测共计为69例86.25％，实时荧光定量检验诊断方法检出率，相较涂片抗酸染色法检测明显较高，差异显著（P＜0.05）。结论通过对结核病患者行实时荧光定量检验方法诊断，可以取得较高的诊断率，且具有较高的灵敏性和特异度，可以及早为结核病患者的早期治疗提供临床依据，在一定程度上对患者的治疗预后起到直接影响，可以在临床中推广应用。

简介：以期建立可用于地龙ISSR－PCR分析的最佳反应体系和扩增程序,模板DNA的量、引物浓度、镁离子浓度和Taq酶的量、引物退火温度等都会影响ISSR扩增,将地龙ISSR-PCR扩增体系中的dNTPs浓度定为0.2mmol·L-1

简介：确定了引物809以柴胡基因组DNA为模板扩增的最佳退火温度为54.5℃（见图2a）,因此选择0.3μmol/L作为柴胡ISSR-PCR反应体系中最佳的引物浓度,本实验在25μlISSR-PCR反应体系中对TaqDNA聚合酶设置了0.5

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简介：摘要目的探讨和研究实时荧光逆转录聚合酶链式反应在流感病毒检测中的应用效果。方法采用实时荧光PCR对617例流感样病例患者的咽拭子标本进行流感病毒核酸的测定，对检测出的阳性标本采用MDCK进行培养并分离，对两种方法的检测结果进行分析，对比特异性及灵敏度。结果本组617例标本中实时荧光PCR共检测出阳性标本152例，阳性率24.6%；细胞培养法在此152例阳性标本中共分离出流感病毒79例，阳性率12.8%，实时荧光PCR检测阳性率显著高于细胞培养法，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论实时荧光PCR能够快速有效的检测出流感病毒核酸，是实验室快速诊断的有效手段。

简介：摘要目的分析聚合酶链反应PCR检验在肺结核早期诊断中的应用效果。方法将我院在2017年11月~2018年11月撷取的120例肺结核患者，按照随机平行分组方法，分为研究组、参照组，每组均为60例。研究组经PCR检查，参照组经皮肤结核菌素纯蛋白衍生物PPD检查，对比两组的诊断效果。结果研究组的诊断阳性率、ROC曲线下的面积AUC情况，和参照组进行比较，均有明显的差异性，P<0.05。结论肺结核早期诊断中采用PCR检验，可提高诊断阳性率，存在临床方面应用、推广的意义。

简介：建立一种检测HSV2的实时定量PCR,而实时定量PCR检测出HSV2DNA阳性标本有l9例,HSV2的FQPCR定量检测 

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简介：摘要探讨检测新鲜海螺样品中单增李斯特菌的双重PCR快速检测方法。为检验方法可行性，对市场随机抽取的126份新鲜海螺样品进行检测，选择增菌后3h内快速检出PCR阳性样品26份，应用国家标准方法（GB/4789.30-2010）对PCR阳性结果进行验证，验证结果表明PCR阴性样品中未有单增李斯特菌检出；同时出现两特异条带的PCR阳性样品均有单增李斯特菌检出，只出现单一条带的PCR阳性样品中有1份未检出单增李斯特菌，该双重PCR检测方法的假阳性率为0.99%。

简介：摘要：探讨检测新鲜海螺样品中单增李斯特菌的双重 PCR快速检测方法。为检验方法可行性，对市场随机抽取的 126份新鲜海螺样品进行检测，选择增菌后 3h内快速检出 PCR阳性样品 26份，应用国家标准方法（ GB/4789.30-2010）对 PCR阳性结果进行验证，验证结果表明： PCR阴性样品中未有单增李斯特菌检出；同时出现两特异条带的 PCR阳性样品均有单增李斯特菌检出，只出现单一条带的 PCR阳性样品中有 1份未检出单增李斯特菌，该双重 PCR检测方法的假阳性率为 0.99%。

简介：摘要目的探讨乙肝患者HBV-DNA采用定量PCR检测的临床价值。方法选择2017年11月-2018年11月期间我院收治的疑似乙肝患者350例为研究对象，运用定量PCR法检测HBV-DNA，并且对其临床资料进行回顾性分析。结果本组的350例患者中，68例确诊为乙肝，检出率为19.43%，其中23例为重度乙肝，占33.82%，18例为中度，占26.47%，27例为轻度，占39.71%，其中轻度组的HBV-DNA含量高于重度组（P<0.05），并且中度组的HBV含量低于轻度和重度组（P<0.05）；同时，240例为HBeAg（-）/HBeAg（+），110例为HBeAg（+）/HBeAb（—），并且两组的HBV-DNA含量比较有统计学意义（P<0.05）。结论大部分抗-HBE阳性患者的HBV依然持续复制，运用定量PCR检测，有助于明确患者病情。

简介：摘要目的探讨在实施阴道细菌检验过程中，分析PCR检验法以及细菌培养法的临床应用价值。方法选择我院2016年09月～2018年09月收治的阴道细菌检验患者162例作为本次实验研究观察对象；观察组81例以及对照组81例患者的分组依据为阴道细菌检验方法的不同；观察组PCR检验法；对照组细菌培养法；通过对比检出率以及特异度等，以突出PCR检验法的临床应用价值。结果在检出率以及特异度方面，两组阴道细菌检验患者之间的差异显著（P<0.05）。结论临床在实施阴道细菌检验的过程中，有效应用PCR检验法，临床表现出较高的检出率以及特异度，并且检验步骤较为便捷，最终可以获得显著的阴道细菌检验效果。

简介：摘要目的探讨在流感病毒检测中采用实时荧光定量PCR仪进行检验的临床效果。方法选择我院2018年1月至2018年12月收治180例流感病样病例为研究对象，使用咽拭子采集标本，使用实时荧光定量PCR法进行流感病毒核酸的测定，如果为阳性则执行MDCK培养同时进行分离，评估检验结果特异性、灵敏度的差异。结果实时荧光定量PCR仪检出阳性64例，阳性率为35.56%（64/180），细胞培养法分离出流感病毒35例，阳性率为19.44%（35/180），PCR仪检验阳性率高于细胞培养法，P<0.05。细胞分离培养法对实时荧光PCR法的灵敏度、特异性分别为54.69%（35/64）、100.00%（116/116）。结论对流感病毒检测采用实时荧光定量PCR仪效果更为理想，值得推广。

简介：摘要目的探讨丙酮酸激酶缺乏症和ABO亚型鉴定诊断中运用PCR测序技术的临床效果。方法选择ABO血型正反定型不符和丙酮酸激酶缺乏症患儿各1例为研究对象，通过提取外周血DNA，设计引物进行PCR测序、扩增，运用生物信息学软件分析先证者基因型，对PCR测序技术的临床价值进行分析。结果在1例丙酮酸激酶缺乏症患儿中，发现先证者PKLR基因的7号和9号外显子区分别存在2处杂合突变，通过蛋白预测软件分析，提示两个突变导致酶活力降低和蛋白结构改变；而1例B（A）亚型患儿存在ABO基因多个变异，其第6和7外显子区分别存在2处和11处杂合变异，根据A101等位基因标准，将其血型判断为B（A）04/O06血型。结论临床上将PCR测序技术运用在丙酮酸激酶缺乏症和ABO亚型鉴定诊断中可以使诊断的灵敏度和特异性提高。

简介：【摘要】目的：探讨免疫组织化学（ IHC）及 PCR技术在淋巴结结核病理诊断中的应用价值。方法：选取我院收治的 50例疑似淋巴结结合患者作为研究对象对象，石蜡包埋组织标本，并以分别行 IHC及 PCR检测，以临床最终诊断为金标准，比较两种方法的检测价值。结果：临床最终确诊淋巴结结核 49例，确诊率为 98%；以临床最终诊断结果为金标准， IHC、 PCR诊断灵敏度、特异度及准确度比较无统计学意义（ P>0.05）。结论： IHC及 PCR技术在淋巴结结核病理诊断中均有较高敏感度及准确度，可作为优先病理诊断方式使用。

简介：