定量PCR检测乙肝患者HBV-DNA及其意义研究

定量PCR检测乙肝患者HBV-DNA及其意义研究

许琳

（衡阳市中心医院检验科湖南省衡阳市421001）

摘要：目的探讨乙肝患者HBV-DNA采用定量PCR检测的临床价值。方法选择2017年11月-2018年11月期间我院收治的疑似乙肝患者350例为研究对象，运用定量PCR法检测HBV-DNA，并且对其临床资料进行回顾性分析。结果本组的350例患者中，68例确诊为乙肝，检出率为19.43%，其中23例为重度乙肝，占33.82%，18例为中度，占26.47%，27例为轻度，占39.71%，其中轻度组的HBV-DNA含量高于重度组（P<0.05），并且中度组的HBV含量低于轻度和重度组（P<0.05）；同时，240例为HBeAg（-）/HBeAg（+），110例为HBeAg（+）/HBeAb（—），并且两组的HBV-DNA含量比较有统计学意义（P<0.05）。结论大部分抗-HBE阳性患者的HBV依然持续复制，运用定量PCR检测，有助于明确患者病情。

关键词：定量PCR；HBV-DNA；乙型肝炎

乙型肝炎是比较常见的一种慢性疾病，其发病与感染HBV有关，具有起病隐匿、病程长、迁延不愈的特点，如果不及时治疗，容易出现诸多并发症如肝硬化、肝癌等，严重的情况下，甚至危及患者生命安全。有研究发现，血清HBeAg（+）作为病毒复制活跃的一个标志，而HBeAg（+）向HBeAb（+）转变通常表示病变的静息和病毒的免疫清除，但是在大部分HBeAg（+）的慢性乙肝患者血清中，依然能够检出HBV-DBA-1，表示持续感染，甚至诱发病毒血症[1]。因此，本文对定量PCR法运用在乙肝患者HBV-DNA检测中的临床效果进行了探讨，如下报道。

1.资料和方法

1.1一般资料

选择我院2017年11月-2018年11月期间收治的350例疑似乙肝患者为研究对象，年龄12-66岁，平均（38.5±10.6）岁，其中158例为女性，192例为男性。

1.2方法

1.2.1仪器和试剂

选择厦门安普利生物工程有限公司的全自动核酸提纯及荧光PCR分析系统，型号为Anadas9850。

1.2.2检测方法

于清晨空腹状态下，采集5ml肘静脉血，以3000r/min转速进行10min离心处理后，分离血清，保存于-20°C条件下待测。同时，运用定量PCR法对患者血清中的HBV-DNA含量进行检测，操作的过程中，严格按照说明书要求进行。

1.3判断标准

判定试验结果标准：①阴性。血清HBV-DNA含量<5×103拷贝/ml；②阳性。血清HBV-DNA含量≥5×103拷贝/ml。

1.4统计学分析

本次研究数据采用SPSS16.0软件分析，其中计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，组间比较行t检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2.结果

2.1检测结果

本组的350例患者中，68例为全阴，占19.43%，18例抗HBeAb阳性，占5.14%，35例抗-HBsAg阳性，占10.0%，45例抗-HBcAb、HBsAg阳性，占12.86%，小三阳100例，占28.57%，大三阳84例，占24%。同时，在定量PCR法中，HBeAg（+）/HBeAb阳性检出率为97.62%（82/84），而HBeAg（-）/HBeAb（+）阳性检出率为19.49%（23/118），见表1。

3.讨论

乙型肝炎的发病作为HBV慢性感染的一个过程，通过对抗HBV血清转换后的病毒量进行了解，可以为乙肝的临床治疗提供有效依据[2]。通常情况下，血清HBeAg（+）则说明病毒复制活跃，具有较强的传染性，而HBeAg向HBeAb（+）转换后，则说明病毒复制明显减弱[3]。本次研究结果显示，小三阳组的DNA阳性率为19.49%，明显低于大三阳组的97.62%，并且其HBV-DNA含量高于大三阳组（P<0.05），这一结果与马春宇[4]研究报道一致，说明HBeAg是病毒有传染性、活动以及复制的一个重要指标，并且抗-HBe出现，不代表病毒复制完全终止，尤其是慢性乙肝患者，病情有可能转变为肝硬化或慢性肝炎。同时，乙型肝炎病变活动作为宿主免疫对抗原和病毒复制的一个应答状态，HBV含量的高低能够将病毒的复制水平充分反映出来，并且大部分学者认为，HBV复制能够将病变活动启动，与肝炎炎症程度呈正比关系[5]。

综上所述，运用定量PCR法对乙肝患者HBV-DNA水平进行检测，能够明确诊断患者病情，为临床治疗和判断预后提供有效依据，值得推广。

参考文献

[1]阙金亚，余红，刘峰.荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA方法测定乙肝五项指标相关性分析[J].系统医学，2018，3（16）：32-33+39.

[2]王红建，封伟，张健，刘殿武.巢式聚合酶链反应检测血清HBV-DNA对乙肝治疗的临床意义[J].西部医学，2017，29（01）：117-119+122.

[3]杜锴.实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA的价值分析与研究[J].中国现代药物应用，2017，11（01）：55-57.

[4]马春宇.ELISA法和DNA荧光定量PCR法检测乙肝病毒的相关性研究[J].中国实验诊断学，2009，13（07）：957-958.

[5]韩凌，韩冰，舒彤.荧光定量PCR技术检测乙肝患者HBV-DNA的临床意义及其用于中医药预防乙型肝炎的思考[J].中国中医药信息杂志，2005（12）：95-97.