PCR检验在肺结核早期诊断中的应用效果分析

PCR检验在肺结核早期诊断中的应用效果分析

冯昆

冯昆

（盐津县人民医院检验科；云南盐津657500）

【摘要】目的：分析聚合酶链反应PCR检验在肺结核早期诊断中的应用效果。方法：将我院在2017年11月~2018年11月撷取的120例肺结核患者，按照随机平行分组方法，分为研究组、参照组，每组均为60例。研究组经PCR检查，参照组经皮肤结核菌素纯蛋白衍生物PPD检查，对比两组的诊断效果。结果：研究组的诊断阳性率、ROC曲线下的面积AUC情况，和参照组进行比较，均有明显的差异性，P<0.05。结论：肺结核早期诊断中采用PCR检验，可提高诊断阳性率，存在临床方面应用、推广的意义。

关键词：PCR检验；肺结核；早期诊断；应用效果

肺结核，为结核分枝杆菌所致的慢性传染病，会侵及较多的脏器，肺部结核感染发生率最高，而排菌者为主要的传染源[1]。人体感染结核菌后不一定会发病，但是当患者抵抗能力下降/细胞介导变态反应增高，则会引发肺结核，而及时诊治可有效改善患者的预后。主要表现：低热、盗汗、乏力、消瘦、咯血等[2]。PCR，为放大扩增特定的DNA片段分子生物学技术，能提高微量DNA，保证诊断结果的可信度。因此，本次研究撷取近年来收治的肺结核患者作为研究对象，分析PCR检验、PPD检验的临床价值。

1.临床资料、方法

1.1临床相关资料

以随机平行分组方法，将我院在2017年11月~2018年11月撷取的120例肺结核患者，分为研究组和参照组，各60例。研究组男性、女性各35例、25例；年龄搜集范围25~71岁，平均(48.9±4.4)岁；病程搜集范围3~8个月，平均(5.5±2.1)个月。参照组男性、女性各38例、22例；年龄搜集范围26~70岁，平均(48.3±4.3)岁；病程搜集范围4~8个月，平均(6.6±2.3)个月。研究组和参照组病例的临床相关资料，均使用SPSS20.0统计学软件加以严格处理，P＞0.05。

纳入标准：签署知情同意书者、经医院伦理委员会批准[3]者。

排除标准：精神障碍者、并发心肝肾严重疾病者、对本次检查方法禁忌者。

1.2方法

1.2.1参照组通过PPD检查，取生理盐水稀释PPD为0.1ml，在左前臂内侧/右前臂内侧皮下注射，3d后测量并记录反应面积。

1.2.2研究组通过PCR检查，采集清晨患者咳后0.5ml的痰液，添加于5ul浓度为1mmol/LNaOH溶液中混合，置于37度环境下，静置40min。借助离心机的作用，以每分钟1000r的速度，离心处理5min，取出上清液后利用生理盐水洗脱液洗脱处理。然后，对患者胸水、血清实行离心沉淀处理，添加50ml裂解液沸水浴10min。取15ul反应液，添加到0.2ulTap酶中混合，再加20ul石蜡油封顶，以及5ul上清液构成TB-DNA模板。于不同温度下扩增循环35次，最后取20ml的PCR扩增液早期诊断。

1.3观察项目

1.3.1对两组患者的诊断阳性率、工作特征曲线ROC实行分析、比较。

1.3.2诊断效果的评判：PCR检测与紫外线下，可见160bp橙黄色荧光带，则能够判定为阳性；PPD检测3d内，能够观察到患者局部肿大直径≥5mm，即为阳性。

1.3.3AUC更大，则表示诊断的效果越理想。

1.4统计学分析方法

本次研究的临床数据，均输入统计学软件SPSS20.0。计数资料率%和两组诊断阳性率的对比，均借助X2实行统计学检验；计量资料均数差X±S与两组AUC的对比，均通过t实行统计学检验。对比数据为P<0.05时，能够判定存在统计学的意义。

2.结果

2.1研究组和参照组患者在诊断阳性率方面的对比

研究组的诊断阳性率，明显高于参照组的诊断阳性率，组间比较差异存在，P<0.05，如表1。

3.讨论

当前，我国环境污染情况比较严重，并且不同类型的传染疾病传播，导致肺结核发病率持续增长。早期肺结核无明显的表现，具有起病隐匿、临床症状严重、发病急等特点，严重的情况还会威胁到患者的生存质量。所以，及早诊治及其重要，PPD需实行皮肤试验，然后结合患者皮肤试验反应结果作以评判[4]。然而，该种方法的诊断可信度较低。故此，本次研究采用了PCR方法，对肺结核患者实行诊断，研究结果可见经PCR诊断阳性率，显著高于PPD诊断阳性率，有统计学的意义，P<0.05。究其原因，和PPD液纯度不足有直接联系。需要注意的是，AUC为ROC曲线下的面积，≥2种诊断试验识别疾病能力进行比较，试验结果中的AUC数值更大，表示诊断价值就更理想。本次研究结果显示，研究组和参照组的AUC情况相比较，前者明显高于后者和，存在统计学的意义，P<0.05。这和王静[5]等人的报道基本一致，表示PCR方法检测肺结核的价值较高，不会受到患者机体因子、是否产生变态反应、抗体等因素影响。

综上可知，PCR应用于肺结核早期诊断中的效果较好，可为肺结核患者的治疗方案提供数据参照。

参考文献：

[1]施瑞洁，刘文康，范云等.T-SPOT.TB在肺结核早期诊断中的应用研究[J].现代检验医学杂志，2017，32(32):63.

[2]王运利.TB-DNA在结核病诊断中的检测价值[J].疾病监测与控制，2017，11(10):816-816.

[3]蒋莎莉，朱德茂，罗海军等.肺结核患者肺泡灌洗液中结核杆菌检测的方法学评价[J].广东医学，2017，38(01):107-109.

[4]肺泡灌洗液RNA恒温扩增实时检测在肺结核诊断中的应用价值[J].陕西医学杂志，2017，46(5):600-601.

[5]王静，刘立宾，岳永宁等.RNA恒温扩增实时检测技术与荧光定量PCR联合检测肺泡灌洗液对痰涂阴性肺结核的快速诊断价值[J].中华医院感染学杂志，2017，27(2):300-304.