简介：目的：融合表达表皮生长因子受体（EGFR）胞外功能区,为制备针对该分子的特异性抗体提供可用的靶标抗原。方法：通过PCR扩增EGFR胞外区基因,将其克隆入真核表达载体pABhFc中,重组质粒瞬时转染HEK293T细胞,进行EGFR的瞬时分泌表达,纯化获得电泳纯级的分泌蛋白,并通过ELISA、Western印迹、Biacore3000系统对融合蛋白进行鉴定。结果：经测序证实扩增得到了正确的EGFR胞外区基因序列,SDS-PAGE初步确认获得了单、双体的EGFR胞外区,ELISA检测证实双体融合蛋白hFc-EGFR可与商业化的EGF特异性结合,Western印迹检测证实单体融合蛋白His-EGFR可与商业化抗体特异性结合;经Biacore3000蛋白分子相互作用系统测定,双体融合蛋白hFc-EGFR与商业化抗体爱必妥的亲和力达0.5nmol/L。结论：利用哺乳动物细胞HEK293T分泌表达系统获得了结构正确的单、双体2种类型的EGFR胞外区融合蛋白纯品,将用于抗EGFR特异性抗体的筛选。

简介：在我们的现实生活中,为了追求经济的快速发展和城市化建设的不断推进,林业的基础地位有所弱化。但近年来,在工业化进程不断加快的基础上,'三农'问题又再度被重点提出和关注。通化县是林业大县,不断地创新林业发展新思路,不仅有利于巩固林业的基础地位,还能够有力的推动我县经济的发展。

简介：用于防治器官移植排斥反应的药物CsA发挥作用必须由体内受体蛋白亲环素(CyP)来介导。CyP是一个功能相关的蛋白家族,具有肽基脯氨酸顺/反异构酶(PPIase)活性,能催化细胞内蛋白质的折叠、装配和运输。CyP自身抗体与某些自身免疫病也有关系。亲环素A(CyPA)是免疫抑制剂CsA在体内的主要受体蛋白。本研究对CyPA基因进行了克隆和序列测定,并构建了表达载体,在大肠杆菌中获得高水平表

简介：用PCR技术获得抗菌肽-X基因、TNFα基因,与温度诱导的表达载体pRC连接成为重组表达载体,导入大肠杆菌TG1,通过温度诱导表达重组蛋白.将重组质粒转入不同的表达菌中进行表达,经SDS-PAGE选出EcoliBL21(DE3)为最佳表达的宿主菌.培养后,离心得菌体,经超声破碎离心得包涵体,溶解后用CNBr切割并透析,最后经CM52纤维素柱分离纯化得到有活性高纯度的抗菌肽-X.

简介：地方高校省级重点实验室在国家科技创新体系中扮演重要角色,是高校人才培养、科学研究和服务地方的重要平台。本文总结了浙江省碳材料技术研究重点实验室在建设和管理中存在的问题以及优化和改进方面的经验。在此基础上,就如何提高地方高校省级重点实验室管理水平进行了探讨,以推进其发展。

简介：近些年来,古生物类国家地质公园虽然一直都保持着逐渐增多的势态持续发展着,但是实际上,这些地质公园仍然存在着很多问题.本文通过对古生物类国家地质公园的现状探讨研究,对园区的改善提出一些建议.

简介：皮肤癌是一种常见的恶性肿瘤,大部分是基底细胞癌和鳞状细胞癌,85%以上的基底细胞癌好发于颜面部[1].皮肤癌好发于暴露部位,尤以头面部居多[2].我院与2012年1月份为一例99岁左面部皮肤癌患者行放疗,取得了理想的效果.临床上的皮肤癌以放射性治疗为治疗首选,皮肤癌位置表浅,边界清楚,直视下照射定位精确,对放射线特别敏感,而且皮肤耐受性较高,但考虑到患者99岁的高龄并因骨折行动不便,肿瘤放疗风险大,几家医院均未收治.现为病人的整个放疗过程护理做如下的报道.

简介：目的：通过对一例1例桥小脑角肿瘤患者的护理病例讨论,探讨围手术期护理措施.方法：对我科收治的1例桥小脑角肿瘤患者进行护理经验总结.结果：通过精心的护理和治疗,病人恢复良好.结论：加强桥小脑角占位围手术期的护理,是患者康复的关键.

简介：在信息时代,学校的教育理念和教学模式发生巨大改变。学生个体差异的客观存在,导致传统教学模式无法高效实现分层教学。翻转课堂,使得学生成为学习过程中的主体,促进了个性化教学的实现和学生的全面发展。本文从翻课堂模式,探讨计算机基础课程教学的思路。

简介：目的：研究严重急性呼吸系统综合征冠状病毒（SARS-CoV）N蛋白对甘油三酯和总胆固醇含量的影响。方法：检测分析144例SARS患者甘油三脂和总胆固醇含量在发病后的变化;将小鼠随机分组,分别注射生理盐水和SARS-CoVN蛋白,连续给药9d后检测小鼠血清中甘油三酯和总胆固醇含量的变化。结果：SARS患者的甘油三酯和总胆固醇含量随发病时间有升高变化（P〈0.05）,在发病40d前后甘油三酯和总胆固醇含量超标的病例数占本时间段内的病例数的比例显著高于其他时间段,而且超标的含量也明显升高。SARS-CoVN蛋白使小鼠体重明显高于对照组（P〈0.05）,甘油三酯含量在39和51d明显高于对照组（P〈0.05）,总胆固醇含量在21和39d也明显高于对照组（P〈0.05）。结论：SARS-CoVN蛋白可以升高小鼠的甘油三酯和总胆固醇的含量,其升高最为明显的时间段与SARS患者的甘油三酯和总胆固醇含量升高的时间段基本一致。由此推测,SARS-CoVN蛋白可能是促使SARS患者发病后甘油三酯和总胆固醇含量升高的重要原因。

简介：BAC-TO-BAC杆状病毒表达系统是一种快速、高效、便捷的表达系统.将人可溶性CD14(sCD14)基因克隆入pFASTBAC1转移质粒中,重组质粒转化DH10BAC感受态细胞,目的基因通过同源重组插入BacmidDNA中,后者转染sf21昆虫细胞获得重组杆状病毒.利用重组蛋白C-末端的6×His@Tag,经TALON金属螯合色谱将重组病毒感染昆虫细胞获得的无血清培养上清--步纯化得到重组蛋白,计算表明从1L培养基中可纯化到约8mg纯度大于95%的重组sCD14蛋白,免疫印迹结果表明重组蛋白具有与抗6×His单抗和抗CD14单抗结合的抗原性.疑胶迁移实验和细胞活性实验表明重组sCD14蛋白能在体外与LPS结合,并能增强LPS诱导THP-1细胞产生细胞毒性因子.

简介：将甘蔗花叶病毒的CP基因克隆到表达载体pET22b(+),并在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效表达,表达蛋白约占总蛋白的15%.用此蛋白制备了效价高专化性强的抗体.此方法可以解决制备马铃薯Y病毒属病毒的血清时遇到的病毒提纯产量低和寄主蛋白影响等问题.

简介：轮状病毒（rotavirus,RV）是在世界范围内造成婴幼儿和幼年动物病毒性腹泻的最主要病原.A组RV的NSP4蛋白被认为是病毒的肠毒素,近年来的研究发现,这个非结构蛋白NSP4在RV致病过程中起着重要的作用.本文简要综述了多功能肠毒素NSP4的研究进展.

简介：基因芯片技术具有高通量、高度平行性、高度自动化的特点。在对传染病病原体的研究中,基因芯片技术已应用于耐药性相关遗传多态性分析、基因分型、生物种系的遗传进化分析、宿主与病原体相互关系分析、病原体检测等。但在病原体检测方面,与检测细菌相比,基因芯片技术对病毒的高通量检测难度较大。简要介绍了目前基因芯片技术在病毒性病原体检测中的研究进展、所采用探针的类型及设计原则、基因芯片杂交结果的影响因素等。

简介：生物实验是生物学形成和发展的基础,而生物学实验课程的开展则为学生提供了理论与实践相结合的平台。为了探究更有效更科学的生物学实验教学方法,本文阐述了我们在初中生物实验教学中所用的主要方法,并进行了相应的总结和补充。

简介：目的：探讨PICC在重度颅脑损伤患者中的临床应用及护理.方法：回顾性总结2012年9月至2014年3月在我科46例重症患者中应用PICC的临床护理方法.结果：46例患者中,穿刺部位渗血1例,穿刺点感染2例,导管部分脱出1例,导管堵塞1例.并发症总计11%.结论：PICC很好地避免了常规操作造成了反复穿刺,极大地减轻了患者的穿刺痛苦,是神经外科重症患者的理想静脉通路,值得推广应用.

简介：伊春林区141个苗圃,按其所在地理位置,划分南、北、中三片。红松、落叶松、樟子松、红皮云杉等四个主要更新造林树种,苗圃面积2512亩,年平均苗木产量15362万株,苗木病害近年出现加重趋势,特别是个体苗圃因技术力量薄弱,尤为严重。

简介：城市生活垃圾和粪便具有污染物和资源两种概念,在符合国情的前提下利用生活垃圾和粪便生产有机复混肥的研究具有特别重要的意义。混合堆肥的有机质含量以65%为宜,堆肥的最佳C/N比为(25~35):1。

简介：高等植物具有复杂的机制使其对环境的变化做出响应，这种机制是通过长期进化建立起来的。它们能够对出现的生物和非生物胁迫产生响应。在分子水平上，植物对各种胁迫的响应是受多基因表达变化调控的，包括植物激素水杨酸、脱落酸等信号途径在整合、协调植物胁迫过程中起关键作用。近年来的研究表明，在植物响应胁迫这一过程中还进行着表观遗传调控这一进程。我们简要综述了生物胁迫和非生物胁迫对表观遗传的影响以及胁迫印记的产生，并讨论了植物响应胁迫的表观遗传调控机制。

简介：本文是对一种利用树脂吸附来对氨基葡萄糖盐酸盐母液进行纯化方法的研究.方法：采用静态吸附试验和正交试验L9（34）,优化采用阳离子交换树脂纯化母液工艺条件,使得整体收率达到96.5%.结论：该优化条件得到较高产率和纯度的氨基葡萄糖盐酸盐.