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  • 简介:目的:从航天诱变向日葵种子中提取高质量总RNA。方法:采用改进SDS法,提取缓冲液与氯仿同时作用液氮研磨材料后,用酸酚-氯仿抽提次,经LiCl过夜沉淀、DNaseⅠ处理、1/2体积无水乙醇沉淀多糖,最后加入1/10体积醋酸钠2倍体积无水乙醇沉淀总RNA,用琼脂糖凝胶电泳与紫外分光光度法测定产量与纯度,用PT-PCR鉴定RNA质量。结果:提取RNA电泳条带清晰,D260nm/D230nm、D260nm/D280nm值分别为2.09、2.00,其产量为35.30μg/100mg,用PT-PCR能扩增出肌动蛋白基因片段。结论:采用该方法提取总RNA纯度高、完整性好,适于进分子生物学研究

  • 标签: RNA提取 向日葵 航天诱变 多酚 多糖
  • 简介:目的:建立种便捷而经济将DNA溶液填充至显微注射针方法,以提高显微注射法转基因效率。方法:将通常用于转移胚胎口吸管稍加改进,吸取DNA溶液,从尾部直接注入显微注射针。结果:采用本方法填充显微注射针,可在2-5min完成DNA填充。结论:与传统方法相比,本法经济而高效,可加快显徽注射法制作转基因动物实验进程。

  • 标签: DNA填充 显微注射 口吸管 微量上样器
  • 简介:目的:研究针对出血性梗塞性脑血管病患者早期诊断以及治疗对其康复预后作用.方法:150例初发脑血管病患者按照病因分为梗塞组与出血组.均实施早期诊断与治疗.对比结果以及相关监测指标变化.结果:梗塞组患者合并慢性病以及并发症比例均少于出血组(P〉0.05),梗塞组住院时间显著少于出血组(P〈0.05).两组患者治疗后日常生活活动(BI)肢体功能恢复(FM)评分均显著高于治疗前,梗塞组明显高于对照组(P〈0.05);两组治疗后病残程度(AS)评分均显著低于治疗前,梗塞组明显低于对照组(P〈0.05).结论:脑血管病患者实施早期诊断与治疗,可以有效改善其临床症状,恢复患者正常机体功能.

  • 标签: 脑血管病 康复 预后
  • 简介:目的:探讨联合检测人附睾蛋白4(HE4)、血清糖类抗原125(CA125)199(CA199)绝经后卵巢可综合征(PMPOS)应用价值。方法:采用化学发光法(CLIA)检测125例PMPOS患者60例健康志愿者(对照组)血清HE4、CA125CA199水平,其中PMPOS患者分为良性肿瘤组(良性组,n=50)恶性肿瘤组(恶性组,n=75)。结果:PMPOS恶性组患者血清HE4、CA125CA199水平均显著高于良性组,有统计学差异(P〈0.05);也显著高于对照组,有统计学差异(P〈0.05)。良性组CA125水平略高于对照组,有统计学差异(P〈0.05);但CA199HE4水平与对照组比较无明显差异,无统计学差异(P〉0.05)。三者联合检测用于诊断PMPOS恶性肿瘤敏感度达到81.2%,而特异度也保持90.0%。结论:联合检测HE4、CA199CA125可有效提高对PMPOS恶性卵巢肿瘤诊断效率,具有较大临床意义。

  • 标签: 人附睾蛋白4 糖类抗原125 糖类抗原199 绝经后卵巢可及综合征
  • 简介:分离鉴定不同生物基因差异序列,有助于功能基因分离,揭开物种间进化规律,阐明某些疾病相关基因作用机理。本文简述了几种近年来常用筛选差异基因方法,特别是最新发表杂交监控差异分析法(HMDA)原理、适用范围及其特点,重点探讨了HMDA法真核基因组差异序列筛选中技术性突破及其研究前景。

  • 标签: 基因组 差异序列 杂交监控差异分析法
  • 简介:通过对华宁县开展林权管理配套工作现状分析,提出了存在集体林权制度主体改革遗留问题、林业服务中心工作机制不够完善林业投融资体制有待进步深化等问题,针对存在问题提出了妥善处理遗留问题、加强队伍建设规范森林资源评估机构等解决对策.

  • 标签: 林权管理 配套工作 问题 对策 华宁
  • 简介:细胞电生理学对细胞生物学、医学药物开发是极其重要,美国普度大学波特菲尔德等人新近开发了种集成微电子器具(MEMS)系统,与目前电生理学系统相比具有显著优越性能,将对药物开发带来巨大影响。

  • 标签: 细胞生物学 电生理学 药物发现 革命性 芯片 药物开发
  • 简介:目的:建立种简便对抗体相对亲和力进行定性比较酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,以便快速、简便地从大量抗体突变体挑选高亲和力突变体。方法:将待抗体倍比稀释后用直接ELISA方法进行定量,同时用相同浓度抗体作为抗与抗原进行间接ELISA反应,以前者吸光度值为横轴、后者吸光度值为纵轴绘制散点图,通过拟曲线判断抗体亲和力高低,并通过BIA-core法对该方法准确性进行验证。结果:通过该方法获得抗体亲和力高低情况与经测定抗体亲和力得出结果致。结论:该ELISA方法种简便可行、准确有效抗体亲和力定性比较方法,可以应用于不同抗体亲和力成熟比较研究。

  • 标签: 抗体亲和力 定性比较 酶联免疫吸附测定
  • 简介:随着生物科学发展,对于昆虫脑神经递质作用机理研究有着非常重要意义。论文结合笔者研究,探讨了昆虫脑神经递质作用机理,并分析了目前主流研究方法

  • 标签: 昆虫脑 神经递质 作用机理 研究方法
  • 简介:随着经济社会飞速发展生活水平不断提高,人们越来越关注重视由于微生物毒素所导致食品污染问题.在当前涉及所有食品安全问题,最为突出是微生物污染而引发食源性疾病.鉴于此,使用科学方法准确、快速地对食品微生物进行检测,对于有效预防肠道传染病食物中毒至关重要.随着科学技术不断进步,检测食品微生物相关技术也得到了飞速发展,主要包括传统PCR检测技术、电阻电导测定法、快速测试片法、重量分析稀释计理化检测法等.

  • 标签: 食品微生物 检测方法 食品安全
  • 简介:目的:探讨化学发光法梅毒实验诊断应用价值。方法:采用化学发光法、RPR法、TPPA法分别检测150例梅毒患者125例非梅毒患者血清。结果:化学发光法、RPR法、TPPA法对150例梅毒血清标本125例非梅毒血清标本对照组敏感性分别为98.0%、75-3%97.3%,特异性分别为98-3%、81.6%97.5%。化学发光法、TPPA法敏感性特异性明显高于RPR法,差异有统计学意义(P〈0.05);化学发光法TPPA法相比,敏感性特异性差别不大,差异没有统计学意义(P〉0.05);联合3种方法检测,梅毒诊断阳性率可提高到100%。结论:梅毒化学发光检测法具有极高敏感性特异性,是种自动化、定量检测方法,能够用于梅毒准确诊断疗效观察,与传统方法联检可防止误诊、漏诊,具有较大临床应用价值。

  • 标签: 梅毒 血清学诊断 化学发光法
  • 简介:目的:比较并评价涂片抗酸染色法(涂片法)、L-J培养法基因芯片法分枝杆菌检测应用价值。方法:对241例需查抗酸杆菌临床标本,采用涂片法、L-J培养法基因芯片法检测分枝杆菌,3种方法检测结果存在分歧标本再进行DNA测序,以培养鉴定结果阳性或DNA测序得到分枝杆菌序列为确诊标准。结果:241例标本,涂片法、L-J培养法基因芯片法检测阳性率依次为18.7%、12.0%、15.8%,经卡方检验三者阳性率差异没有统计学意义(P〉0.05);检测灵敏度依次为85.4%、70.7%、93.0%,经卡方检验三种方法灵敏度总体来说有差别(χ2=7.24,P〈0.05),涂片法与L-J培养法以及涂片法与基因芯片法灵敏度差异没有统计学差异,基因芯片法灵敏度高于涂片法(χ2=6.61,P〈0.05);检测特异性依次为95.6%、100.0%、100.0%。38例基因芯片检测阳性患者中有28例为结核分枝杆菌,10例为非结核分枝杆菌。结论:与涂片法培养法相比较,基因芯片法能够鉴别分枝杆菌菌种,同时具有快速、可靠、准确度高特点,分枝杆菌感染早期诊断抗菌治疗上具有重要临床价值。

  • 标签: 分枝杆菌 涂片法 L-J培养 基因芯片
  • 简介:结核病仍然困扰着人类健康,我国是22个结核病高负担国家之,早期正确诊断以及及时有效治疗对于控制我国结核病流行是必不可少。传统结核病实验室诊断方法都存在着许多不足,新诊断方法由于没有良好生物标志物而受到了限制。国内外许多研究表明,白细胞介素6(IL-6)结核病中具有潜在诊断价值。在此就IL-6与结核分枝杆菌感染诊断研究进展做综述。

  • 标签: 结核分枝杆菌 白细胞介素6 感染 诊断
  • 简介:EB病毒与鼻咽癌关系密切。EB病毒抗原可用于鼻咽癌早期诊断以提高鼻咽癌病人存活率。本文对EB病毒生活周期及其抗原系统,EB病毒与鼻咽癌之间关系应用EB病毒抗原进行鼻咽癌血清学诊断进展作概括介绍

  • 标签: EB病毒 鼻咽癌 诊断 抗原
  • 简介:目的:建立检测常见致病菌反向斑点杂交方法方法:将23SrRNA基因芯片用针对12种细菌25~30mer探针加长到30~38mer,2对通用引物序列不变。用地高辛标记下游引物,以尼龙膜为载体制备膜芯片,检验探针/膜杂交特异性敏感性;另外设计1条大肠杆菌K88基因探针、段带K88探针报告基因1对报告基因反向PCR引物,PCR体系增加封口K88报告基因反向引物对,被检样品扩增后进行膜杂交。结果:修改13条探针与参考目标菌株膜上成特异性杂交,对52个参考菌株野外分离株检测准确率为92%;膜杂交敏感性与玻片芯片接近,最小检出量为100fgDNA;尼龙膜上增加K88探针,与3重PCR产物杂交,可以检测到大肠杆菌K88毒力基因。结论:建立反向斑点杂交方法简便快速,检测成本低,可用于仪器设备不足实验室,同时可以加入检测如大肠杆菌K88等致病基因,提高基于保守基因芯片诊断能力。

  • 标签: 反向斑点杂交 RRNA基因 猪致病基因 反向PCR
  • 简介:住院病人因基础疾病以及医护人员诊疗护理过程中所采用各种方法,如某些侵入性检查与治疗、手术、各种引流,以及抗菌素、免疫抑制剂、抗肿瘤药物使用,常常影响、减弱了患者免疫防御功能,导致病原微生物侵入体内,产生院内感染。

  • 标签: 院内感染 控制
  • 简介:蛋白质作为生命活动起重要作用生物大分子,与切揭开生命奥秘重大研究课题都有密切关系。蛋白质分离与检测是蛋白质研究主要技术之。我们就蛋白质检测常规方法、电化学检测方法、分子生物学检测方法、电泳法质谱法等进行了简要综述。

  • 标签: 蛋白质 检测 方法学
  • 简介:目的:探讨Ca2+Na+诱导细胞凋亡最佳浓度及时间,并用甲基绿派诺宁染色法检测凋亡细胞形态变化。方法:分别用不同浓度梯度及时间梯度Ca2+Na+胁迫处理洋葱鳞茎内表皮细胞,得诱导最佳浓度及时间;用甲基绿派诺宁染色法检测诱导凋亡洋葱鳞茎内表皮细胞、大蒜根尖细胞鸡血红细胞形态特征变化。结果:诱导处理最佳Ca2+Na+浓度为0.4mol/L,最适时间约为8h,且CaCl2诱导效果较NaCl好;经甲基绿派诺宁染色,洋葱鳞茎内表皮细胞、大蒜根尖细胞、鸡血红细胞凋亡细胞细胞核均呈蓝紫色,细胞质呈红色。结论:找出了诱导细胞凋亡最适Ca2+Na+浓度时间,并检测到细胞凋亡。

  • 标签: 细胞凋亡 离子胁迫诱导 甲基绿-派诺宁 洋葱鳞茎内表皮 大蒜根尖 鸡血红细胞
  • 简介:目的:在对糖尿病患者临床诊断应用生化指标检测方式,并对其临床应用效果进行观察.方法:选择120例我院进行治疗糖尿病患者,设为观察组,另选120例体检健康志愿者,设为对照组,对所有参与研究样本进行血清甘油三酯、空腹血糖以及2h糖耐受检验,并对两组数据进行分析与对比.结果:观察组患者三方面的指标均出现明显升高,显著高于对照组(P〈0.05).结论:在对糖尿病患者临床诊断应用生化指标检测方式具有着十分显著临床效果,以其痛苦程度小、过程简单、检测费用少以及结果快优点值得临床中进行广泛应用并推广.

  • 标签: 生化检验指标 糖尿病 诊断 临床价值
  • 简介:目的:建立盐酸雷尼替丁有关物质高效液相色谱检测方法方法学研究.方法:采用色谱柱:AgelaVenusilASBC184.6×150mm,流动相为0.08mol/L柠檬酸溶液(用三乙胺调节pH至3.5)-乙腈(80∶20),检测波长为314nm.流速为1.0ml/min;柱温为30?C.结果:采用该方法能将杂质与主成分有效分离,专属性良好,耐用性强,10小内溶液较稳定,经检测限试验证明该方法有效检出杂质.结论:高效液相方法简便,准确度高,专属性好,建议采用此法测定盐酸雷尼替丁有关物质.

  • 标签: 高效液相色谱法 盐酸雷尼替丁 有关物质