简介：HER-2基因在乳腺癌发生、发展中起着举足轻重的作用[1-2]。HER-2过表达与晚期乳腺癌患者无进展生存期（progression-freesurvival,PFS）和OS缩短显著相关[3]。HER-2蛋白包括三个区域,即胞外区域（extracellulardomain,ECD）,跨膜区域与胞内酪氨酸激酶区域。在基质金属蛋白酶的作用下,HER-2ECD可从乳腺癌细胞表面裂解并游离到血液中[4]。

简介：摘要目的分析肺炎链球菌丝氨酸/苏氨酸激酶StkP胞外区(EC-StkP)基序(motif)在与β-内酰胺类抗生素结合中的作用。方法分别将EC-StkP的3个motif(SXXK)依次和全部突变为AXXA，将突变后得到的质粒导入受体细胞进行克隆表达，SDS-PAGE联合凝胶图像分析系统检查目的重组突变蛋白(EC-rStkP)表达情况，Ni-NTA亲和层析法分别提纯突变蛋白。采用等温滴定量热法(ITC 200)和表面等离子共振法(Biacore t200)检测突变蛋白与青霉素(PCN)和头孢噻肟(CTX)结合能力。结果PCN和CTX均不能与第1个、第3个以及3个motif均突变的蛋白质结合，但第2个motif突变后还能与CTX有较弱结合，而与PCN却不能结合。结论肺炎链球菌StkP激酶胞外区的3个motif都能与β-内酰胺类抗生素结合，且以与第1个motif和第3个motif结合为主。

简介：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，全球每年新发病例达138万，是女性恶性肿瘤的首要死亡原因［1-2］。人类表皮生长因子受体2（humanepidermalgrowthfactorreceptor2，HER2）基因在近20％乳腺癌中高表达，与患者预后差、生存期短相关［3］。HER2蛋白包括3个区域，即胞外区域（extra-cellulardomain，ECD），胞内酪氨酸激酶区域和跨膜区域。在基质金属蛋白酶的作用下，HER2ECD可从乳腺癌细胞表面裂解并游离到血液中，能通过ELISA技术检测患者血清中HER2ECD表达水平［4］。

简介：目的：融合表达表皮生长因子受体（EGFR）胞外功能区,为制备针对该分子的特异性抗体提供可用的靶标抗原。方法：通过PCR扩增EGFR胞外区基因,将其克隆入真核表达载体pABhFc中,重组质粒瞬时转染HEK293T细胞,进行EGFR的瞬时分泌表达,纯化获得电泳纯级的分泌蛋白,并通过ELISA、Western印迹、Biacore3000系统对融合蛋白进行鉴定。结果：经测序证实扩增得到了正确的EGFR胞外区基因序列,SDS-PAGE初步确认获得了单、双体的EGFR胞外区,ELISA检测证实双体融合蛋白hFc-EGFR可与商业化的EGF特异性结合,Western印迹检测证实单体融合蛋白His-EGFR可与商业化抗体特异性结合;经Biacore3000蛋白分子相互作用系统测定,双体融合蛋白hFc-EGFR与商业化抗体爱必妥的亲和力达0.5nmol/L。结论：利用哺乳动物细胞HEK293T分泌表达系统获得了结构正确的单、双体2种类型的EGFR胞外区融合蛋白纯品,将用于抗EGFR特异性抗体的筛选。

简介：摘要目的探索含有流感病毒血凝素茎部α螺旋区（HAα）和6个串联重复M2蛋白胞外区域（6M2e）的融合蛋白的表达和制备方法，并对其在小鼠体内的免疫效果进行评价。方法采用去除高变区的鞭毛蛋白序列，将HAα和6M2e插入到原高变区位点，构建重组质粒pET28a-FljBΔD2D3-HAα-6M2e。在大肠埃希菌中诱导表达后进行纯化和鉴定，并评估其细胞毒性。最后将制备的融合蛋白免疫BALB/c小鼠，采用ELISA方法检测小鼠血清特异性抗体效价，实时荧光PCR法检测小鼠IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-ɑ的mRNA水平，CCK-8法检测脾细胞的增殖。结果成功构建重组质粒pET28a-FljBΔD2D3-HAα-6M2e，蛋白表达最适条件为1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）37 ℃诱导10 h，通过镍柱纯化获得高纯度的无毒融合蛋白。免疫小鼠后抗M2e-IgG和抗HAα-IgG的抗体ELISA效价均达到1∶102 400，且与对照组相比差异有统计学意义(t=0.33，P=0.774；t=7.60，P=0.001)。各类细胞因子的mRNA水平升高，其中实验组IFN-γ转录水平为38.74±3.65，蛋白水平为（66.03±3.31）pg/mL，高于对照组（t=21.33，P=0.003；t=10.21，P<0.01）。结论成功制备了高纯度的融合蛋白FljBΔD2D3-HAα-6M2e，能有效刺激小鼠产生抗M2e-IgG和抗HAα-IgG，具有良好的免疫效果，为流感疫苗候选物研发奠定了基础。

简介：目的:基于重组流感病毒载体的呼吸道合胞病毒(RSV)疫苗的构建及在小鼠体内的免疫保护效果评价。方法:构建并拯救表达RSV A2型G蛋白胞外结构域(Gecto)的重组甲型流感病毒，将其命名为PR8NAGecto/WSN。体外验证重组病毒G蛋白表达与病毒生长动力学后，单剂滴鼻免疫BALB/c小鼠，并评价体液免疫、黏膜免疫与细胞免疫。免疫4周后，分别用RSV A2与RSV B9320进行攻毒，通过小鼠体重变化、肺组织病毒滴度及病理评价免疫保护效果。结果:单剂滴鼻免疫PR8NAGecto/WSN能在小鼠体内产生较强的体液免疫、黏膜免疫及细胞免疫。与对照组比较，免疫组小鼠经RSV A2或B9320两个亚型病毒攻毒后肺病毒载量与肺组织病理均明显改善。结论:单剂滴鼻免疫重组PR8NAGecto/WSN疫苗可在小鼠体内诱导较强的RSV特异免疫应答与攻毒保护。本研究为新型RSV黏膜疫...

简介：目的:基于重组流感病毒载体的呼吸道合胞病毒(RSV)疫苗的构建及在小鼠体内的免疫保护效果评价。方法:构建并拯救表达RSV A2型G蛋白胞外结构域(Gecto)的重组甲型流感病毒，将其命名为PR8NAGecto/WSN。体外验证重组病毒G蛋白表达与病毒生长动力学后，单剂滴鼻免疫BALB/c小鼠，并评价体液免疫、黏膜免疫与细胞免疫。免疫4周后，分别用RSV A2与RSV B9320进行攻毒，通过小鼠体重变化、肺组织病毒滴度及病理评价免疫保护效果。结果:单剂滴鼻免疫PR8NAGecto/WSN能在小鼠体内产生较强的体液免疫、黏膜免疫及细胞免疫。与对照组比较，免疫组小鼠经RSV A2或B9320两个亚型病毒攻毒后肺病毒载量与肺组织病理均明显改善。结论:单剂滴鼻免疫重组PR8NAGecto/WSN疫苗可在小鼠体内诱导较强的RSV特异免疫应答与攻毒保护。本研究为新型RSV黏膜疫

简介：

简介：全区可垂钓水面2000亩，放钓鱼池160个，其中能提供餐饮、娱乐、旅游观光的休闲渔业垂钓户48家，全部集中在民主乡。鱼池均分布在江南中环路、奶牛路、长胜路三条交通要道的两侧，距市中心15公里，南与天恒山接壤，北与松花江相连，水源充足，交通便利、空气清新、景色宜人，是市民垂钓、旅游、观光、度假的好场所。13.4公里的防洪国堤，为我区休闲渔业提供了可靠的安全屏障，48家休闲垂钓点有四大家鱼及丁钞、美国斑点叉尾鲴等名贵鱼种供游客垂钓。还有冬钓馆2个，实现了垂钓业的终年运作。还可提供餐饮总面积5000平方米，住宿总面积5000平方米。休闲设施拥有高中低档客房，配有电视，独立卫生间等宾馆配套设施。餐饮以农家风味饭菜为主，如本地鸡、本地鸡蛋、朝鲜风味狗肉、铁锅炖鱼等农家菜系。娱乐以棋牌、果蔬采摘，冬季滑雪、打冰尜等形式为主。

简介：

简介：摘要：学前教育工作在近年来引起了人们的高度重视。这一教学工作既是未来人类社会发展的基本前提，同时又是人才培养的最基本阶段。在幼教工作中，开展孩子户外区域活动可以帮助孩子在户外良好的自然环境下进行能力的训练和智慧的发展提高。

简介：

简介：区域经济政策是为了解决区域经济问题而存在的,中国在制定区域经济政策时民族问题、尤其是西部地区的民族问题是必须要考虑的因素,2、中外实施区域经济政策对落后地区开发的时机差异 

简介：摘要：《指南》指出：“幼儿园要以游戏为基本活动，要保证幼儿每天有适量的自主选择和自由活动时间。”《纲要》也指出：“幼儿园要开展丰富多彩的户外游戏和体育活动，培养幼儿参加体育活动的兴趣和习惯。但在实际游戏活动中，存在着游戏材料比较单一，缺乏材料的多样性；游戏场地的开放性不够，缺乏一定的挑战性；游戏指导较简单，缺乏有效性指导；游戏玩法相对统一，缺乏游戏自主性等问题。

简介：摘要：如今户外自主活动逐渐被幼儿园所关注，幼儿园在实践活动中证明了它为孩子们提供了良好的教育价值。幼儿园组织户外活动，主要以孩子为主，选择各种的形式和满足孩子兴趣的户外区域性活动，本论文正是基于上述思想，对“野趣式”户外区域性项目进行了研究，所谓“野趣”，就是到户外进行活动，利用大自然的原始材料，开心地进行游戏，充分地进行游戏。

简介：摘要：《3-6岁儿童学习与发展指南》指出“幼儿每天的户外活动时间一般不少于两小时，其中体育活动时间不少于1小时，季节交替时要坚持。”从实际情况来看，多数幼儿园十分重视户外体育运动，并有专门的场所、器械和时间保证，但户外多样化的、非体育类自主游戏得不到重视，常常处于“放任”状态。幼儿园的户外游戏环境规划需要有效利用自然环境，自然物，规划永久性环境和可变性环境，考虑不同发展水平幼儿的游戏需要，投放适宜的玩具材料，巧妙利用场地空间，合理设置游戏区域，并在不同阶段进行指导，以此来对区域游戏进行组织和开展。

简介：摘要：随着核心素养教育理念的逐步落实，越来越多的幼儿教师意识到开展儿童户外区域运动的重要性，老师可以利用多样化的户外活动帮助幼儿释放天性，使其得到身心健康的成长。然而，从目前的情况来看，并不是所有幼儿园户外区域运动都达到了这样的效果，对此，老师需要进一步探索出儿童内心真实的运动需求，并结合不同教育内容创建富有情境性的运动主题，以此来提升幼儿参与活动的积极性，提高他们的运动效率。另外，老师还需要完善户外区域运动的器械，这样才能带给儿童更好的活动体验，从而改变他们对此类活动的印象，激发其主动参与的积极性。本文结合幼儿的特点，探究改善幼儿园户外区域运动效果的有效措施。

简介：摘要：现阶段，在社会不断发展的社会背景下，游戏化教学成为了教育领域的重点关注的热点话题，特别是针对幼儿及低年级阶段的学习有着积极的意义和深远的影响。与此同时，若想切实的发挥幼儿阶段的教学质量和效率，就必须抓住问题的本质，充分的结合该年龄段幼儿的特点，因材施教，因地制宜。在此基础上，必须进一步加大创新力度和实践力度，从室内与室外两方面着手进行，有效的避免游戏受时间、空间、场地所带来的局限性，积极践行游戏联动机制，加强游戏化课程的思考与行动能力，从而最大程度的激发幼儿的学习兴趣，寓学于乐，在轻松快乐的环境下得到全方面的发展。

简介：【摘要】随着幼儿园课程游戏化核心理念的释放，户外运动受到越来越多幼儿园的重视。户外活动形式多样，为孩子们提供了充足的空间和时间进行锻炼和游戏，大家带着愉悦的心态，开启了一场大胆的探索活动，尝试了各种路线设计和材料选择，活动进行得如火如荼。我们凭借活动对区域联动的主导设计、做好区域联动计划，提高联动效率、设定区域联动游戏规则和内容;做好区域联动游戏材料的置放和设计区域联动的游戏形式等实践活动等几方面进行分析研究。区域联动活动的运用，旨在为相关研究提供参考。

简介：摘要：孩子基础品格的培养是教育的重中之重，也事关孩子品德、观念和技能的养成、完善和提升，是孩子可持续成长的基本要求。本文从户外活动管理的观点入手，探讨儿童户外教育的途径和对策，为进行儿童优质教育提供借鉴。儿童户外区域活动是一种以活动为先、实际为重的现代化教学模式，在完全满足孩子当下生理、心理的活动条件的情况下，采用科学、先进的教育方式，指导幼儿们体验不同情境，从实际的亲身经历中掌握与自然环境交往的技巧，进而培养幼儿的能力，达到教学的真正意义与作用。