简介：目的构建分泌表达具有生物学活性的重组人胰岛新生相关蛋白（rhINGAP）载体毕赤酵母。方法通过PCR扩增INGAP基因，插入到重组质粒α,／pUC18的α因子信号序列处，再将融合基因αINGAP重组到表达质粒pPIC9K，SalI酶切线性化重组质粒αINGAP／pPIC9K。电穿孔转化毕赤酵母，营养缺陷型培养基MD和G418筛选含高拷贝表达盒的酵母转化子，PCR鉴定是否含有目的基因INGAP，甲醇诱导rhINGAP的表达，Westernblotting鉴定目的蛋白，ELISA法定量测定其含量。结果重组表达质粒αINGAP／pPIC9K经酶切获得758bp片段，符合α因子与INGAP片段融合的长度，筛选得到3个阳性转化子，培养上清含有与抗INGAP抗体反应的蛋白。结论成功构建了分泌INGAP蛋白的毕赤酵母菌株。

简介：摘要目的分析P16蛋白基因在胃癌组织的异常表达及其临床意义。方法选取2017年12月－2018年12月新疆医科大学第二附属医院收治的70例胃癌患者作为研究对象并归为观察组，另选取同期于新疆医科大学第二附属医院健康体检的70例正常人群归为对照组，分别通过免疫组织化学SP法对两组标本进行P16检测，观察两组检测结果并比较。结果对照组P16阳性率为100%，显著高于观察组的42.86%（P＜0.05）。此外包括不同TNM分级、淋巴结转与为转移、胃癌组织分化程度等方面的P16阳性率均存在统计学差异（P＜0.05）。结论P16异常表达和胃癌存在相关性，且TNM分期越高、发生淋巴结转移、癌症组织分化程度越低的胃癌患者P16基因更容易为异常表达，可通过P16对胃癌进行辅助检测及判断预后。

简介：摘要泛连接蛋白（pannexins，Panxs）是一类在脊椎动物中存在，编码缝隙连接蛋白的基因家族，与非脊椎动物连接蛋白Innexin具有25%~33%的序列同源性。Panxs分为三个亚型：Panx1、Panx2和Panx3。Panxs在细胞膜上形成半通道，与ATP释放、Ca2+稳态、神经递质释放、细胞凋亡、免疫反应等密切相关。近年来，Panxs在听觉功能方面的作用受到人们的关注，也存在很大的争议。本文将对耳蜗内Panxs的表达及功能做一综述。

简介：目的探讨鼻咽癌组织中P16蛋白的表达及其意义。方法应用免疫组化S—P法检测P16蛋白在60例鼻咽癌和30例鼻咽慢性炎症组织中的表达。结果60例鼻咽癌中P16蛋白表达阳性率为20％，30例鼻咽慢性炎症黏膜P16蛋白阳性率为100％。角化性鳞癌P16蛋白阳性率明显高于分化型非角化性癌和未分化癌(P<0．01)。淋巴结转移组中P16表达率明显低于无转移组(P<0．01)。结论P16蛋白的缺失可能涉及鼻咽癌的发生发展过程，且与鼻咽癌的细胞分化、转移有关。

简介：摘要目的检测c-myc基因蛋白在颅咽管瘤中表达及特点,探讨它们与肿瘤复发性及侵袭性的关系。方法将44例颅咽管瘤分为复发和非复发两组,采用免疫组化（SP）法，检测c-myc基因蛋白。结果c-myc在复发性颅咽管瘤组中的表达阳性率明显高于非复发性颅咽管瘤组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)；结论c-myc的表达值与颅咽管瘤的复发和侵袭性有关，可以预测肿瘤复发危险性。

简介：

简介：摘要目的探讨细胞内印度刺猬蛋白(Ihh)表达水平变化对软骨终板细胞的影响与意义。方法2018年5月至12月手术收集山西医科大学附属山西省人民医院骨科31例软骨终板(CEP)组织标本，体外分离人CEP细胞培养至P3代，随机分为过表达组、空载体组和敲减组，分别添加Ihh信使RNA质粒、空载体和Ihh沉默RNA质粒，质粒转染培养48 h后，使用蛋白质印迹法(Western blot)和实时定量聚合酶链反应法(RT-qPCR)检测标本Ihh及相关指标的蛋白和mRNA表达，免疫荧光和原位杂交染色观测细胞表型。3组实验数据因方差不齐，呈正态性分布，选择Welch检验，Games-Howell法组间多重比较。结果质粒干预CEP软骨细胞Ihh水平表达，Westernblot结果显示过表达组、空载体组和敲减组3组细胞中Ihh(0.79±0.09，0.31±0.20，0.04±0.03)、Ⅱ型胶原(Col Ⅱ) (0.18±0.08，0.49±0.14，1.13±0.27)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)(0.78±0.17，0.51±0.12，0.37±0.06)灰度值差异有统计学意义(F＝176.670、37.650、26.070，P<0.01)。RT-qPCR结果显示过表达组、空载体组和敲减组3组细胞中Ihh mRNA(3.13±1.21，0.92±0.18，0.39±0.22)、Col Ⅱ mRNA(0.66±0.13，1.03±0.24，1.64±1.32)和MMP-13 mRNA(9.17±2.35，1.04±0.27，3.56±0.26)相对表达水平差异有统计学意义(F＝17.170、15.890、34.732，P<0.01)。免疫荧光和原位杂交结果显示与空载体组比较，Ihh和MMP-13在过表达组最强，敲减组最弱，而Col Ⅱ在敲减组中最强，过表达组最弱。结论下调软骨细胞内Ihh表达可明显增加Col Ⅱ，减少MMP-13，维持细胞表型，进一步延缓CEP软骨细胞退变。

简介：摘要目的分析维吾尔族、汉族局部晚期食管癌患者的血清差异蛋白相关通路。方法收集维吾尔族食管鳞癌患者28例、汉族食管鳞癌患者35例，同时收集健康体检者静脉血作为健康对照组，将收集的血标本均提取血清。对食管癌与健康对照组进行差异蛋白筛选并导入KEGG数据库，进行进一步分析。结果维吾尔族、汉族食管癌患者与健康对照组比对，分别筛选出83、46个差异蛋白，将维吾尔族、汉族食管癌差异表达的血清蛋白导入KEGG数据库后，分别得到127个、36个差异蛋白的KEGG通路，共筛选出肿瘤相关通路4个。结论Toll-likereceptors（TLR）通路、趋化因子信号通路分别在维吾尔族、汉族食管鳞癌中存在差异，不除外参与肿瘤的发生。

简介：摘要目的观察钙敏感受体（CaSR）在糖尿病大鼠心肌组织中的表达变化。方法30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、糖尿病4周组和糖尿病8周组。高糖高脂饮食4周后腹腔注射STZ（30mg/kg）建立糖尿病模型。通过Westernblot检测心肌组织CaSR和SERCA蛋白的表达。结果与对照组相比，随着病程的延长糖尿病组大鼠心肌CaSR、SERCA蛋白表达降低。结论在糖尿病大鼠心肌组织中CaSR的表达降低，并可能导致钙稳态紊乱参与糖尿病心肌病的发生。

简介：摘要

简介：目的：探索小鼠髁状突形态发育及此过程中RUNX蛋白的表达变化及意义。方法：取胚胎14．5d（E14．5）至出生后7．5d（P7．5）的小鼠下颌骨，制备髁突矢状位切片，苏木素一伊红（HE）染色观察。免疫组化方法检测RUNX蛋白表达分布。结果：E14．5开始，髁突间充质细胞聚集，而后逐渐分化出完整的软骨细胞分层，髁突逐渐由半圆变扁平。免疫组化示RUNXl、2阳性信号主要位于增殖层、前软骨细胞层及部分肥大层细胞，RUNX3阳性信号主要位于前软骨细胞层及肥大层。髁突前后部，RUNXl、2在前软骨细胞层的信号强度较肥大层更高。RUNX整体的表达呈现双峰曲线。结论：髁突前后部成熟较晚，更易发生改建。RUNXl、2协同作用于软骨细胞分化早期，RUNX3调节作用于软骨细胞成熟期。

简介：关节炎泛指在人体关节及其周围组织中一类非特异炎性疾病，种类较多，病因复杂，目前认为该类疾病与各种炎症促发因子、自身免疫反应、病原微生物感染、代谢紊乱、创伤、退行性病变等多种因素有关。近年来研究多围绕软骨退变、滑膜病变等引起的炎症展开，取得了突破性成果。

简介：目的：为了解P53蛋白异常表达与非小细胞肺癌(NSCLC)预后的关系。方法：采用S-P免疫组织化学法．检测90例手术切除的NSCLC组织石蜡包埋标本。结果：53．3%(48／90)的标本显示P53蛋白向染色阳性．肺鳞癌和腺癌的阴性率分别为64.3％(36／56)和35%(12／34)。统计学分析显示P53蛋白染色结果与病人年龄、性别及肿瘤分期无显著关系，但与肿瘤组织类型显著相关。P53蛋白染色阳性和阴性组病人中位生存月数分别是24个月和55个月。Kaplan-Meir图显示二组病人术后生存概率有明显差异。逐步回归多因素分析显示P53蛋白染色阳性与病人术后生存时间呈显著负相关。结论：P53蛋白异常表达是非小细胞肺癌预后不良的独立判断指标。

简介：目的探讨凋亡抑制蛋白Livin和促凋亡蛋白Smac在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法利用免疫组化sP法检测46例胰腺癌、15例胰岛素瘤和14例正常胰腺组织中Livin和Smae的表达，分析其与胰腺癌临床病理特征的关系。结果胰腺癌、胰岛素瘤和正常胰腺组织Livin蛋白表达率分别为73．9％（34／46）、73．3％（11／15）和14．3％（2／14）。胰腺癌、胰岛素瘤均高表达，两者间差异无统计学意义，但均显著高于正常胰腺组织（P值均〈0．05）。Livin蛋白的表达与胰腺癌淋巴结转移、组织病理分级及临床分期有关（P〈0．05或〈0．01）。胰腺癌、胰岛素瘤和正常胰腺组织Smac蛋白表达率分别为39．1％（18／46）、100％（15／15）和92．9％（13／14）。正常胰腺和胰岛素瘤组织均高表达，两者间差异无统计学意义，但均显著高于胰腺癌组织（P值均〈0．05）。Smac蛋白的表达与胰腺癌淋巴结转移、组织病理分级、临床分期及患者年龄有关（P〈0．05或〈0．01）。结论Livin可能在胰腺癌的发生、发展中起重要促进作用，而Smac在防止胰腺癌的发生、发展中起一定的作用。

简介：目的探讨人骨形成蛋白-2（BMP-2）全长基因的克隆，及其真核表达重组子构建方法。方法采用Trizol法从人髁状突骨组织中提取制备总RNA，利用逆转录技术转录出BMP-2cDNA，以其为模版，PCR扩增出BMP-2全长基因，与真核表达载体pcDNA3．1（＋）连接．构建真核表达重组子pcDNA3．1（＋）／BMP-2．经酶切和序列分析鉴定重组子的构建情况。结果PCR扩增产物在1200000处有扩增条带．与目的基因大小相符．重组质粒经限制性内切酶HindⅢ和XbaⅠ双酶切后。得到5400000和1200000的BMP-2条带，BMP-2基因已成功克隆且成功与pcDNA3．1（＋）连接。结论成功克隆出人BMP-2基因，并构建其真核表达重组子pcDNA3．1／BMP-2，为进一步研究BMP-2的功能、BMP-2基因在骨髓间充质细胞（hMSCs）中表达以及在骨组织工程中的应用研究奠定了基础．

简介：目的构建含Sonichedgehog（SHH）蛋白N端基因片段的毕赤酵母表达载体。方法通过BamH1、Xho1双酶切、T4连接酶连接，将SHH-N基因片段插入pET22b原核表达载体，构建pET22b-SHH-N质粒；经PCR扩增，产物再与pTA2载体连接，构建pTA2-SHH-N重组质粒；经EcoR1及Not1双酶切、T4连接酶连接，将SHH—N端基因片段插入pPIC9K质粒，构建pPIC9K-SHH-N重组质粒；通过线性化、脱磷酸化，将线性化pPIC9K-SHH-NDNA转染毕赤酵母菌株GS115，最后经PCR扩增和测序鉴定。结果转染的毕赤酵母经PCR扩增和测序证实含有SHH-N基因片段，与原始的基因片段序列完全一致。结论成功地构建含SHH-N蛋白基因片段的毕赤酵母表达载体。

简介：摘要：目的 探讨肿瘤异常糖链蛋白(TAP)在肿瘤中的表达与临床分析。方法 采患者指端末梢血，制作成标本后在高倍显微镜下找出TAP凝聚物。结果 早期筛查并确诊18例肿瘤患者。结论 TAP使肿瘤的早发现、早诊断、早治疗成为可能，并且还可以实现对肿瘤患者治疗的动态检测。

简介：摘要：本研究主要探讨了温度对重组大肠杆菌生长及外源蛋白表达的影响。在适宜的温度范围内，大肠杆菌的生长速率会随着温度的升高而加快。过高的温度会导致细菌生长受到抑制，同时也会影响外源蛋白的表达。此外，低温可以改善外源蛋白的稳定性和可溶性。本研究旨在为重组大肠杆菌的优化培养提供理论参考，以期提高外源蛋白的表达水平。

简介：摘要目的观察麝香乌龙丸对膝关节骨关节炎(knee osteoarthritis，KOA)患者血清中白细胞介素1(interleukin-1, IL-1)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β，TGF-β1)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase3，MMP3)、基质金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitors of metalloproteinase1，TIMP-1)表达的影响。方法采用前瞻性队列研究方法，观察对象来自于2016年3月至2018年6月华北理工大学附属医院风湿免疫科门诊的KOA患者，应用随机数字表分为两组，即治疗组(麝香乌龙丸治疗)46例和对照组(抗骨增生片治疗)46例。治疗组采用麝香乌龙丸治疗，每次30粒，2次/d；对照组采用抗骨增生片治疗，每次4片，2次/d。治疗周期均为8周。取治疗组和对照组患者血清，采用酶联免疫吸附试验法检测血清中IL-1、TGF-β1 、MMP3、TIMP-1的含量，并统计分析两组治疗后相关指标的差异。结果治疗组完成46例，对照组完成44例。治疗后，IL-1水平分别为治疗组(30.99±2.80) μg/L、对照组(32.90±2.84) μg/L，两组间比较差异有统计学意义(t＝3.21，P<0.001)；TGF-β1水平分别为治疗组(214.87±17.30) μg/L 、对照组(208.85±15.53) μg/L ，两组间比较差异无统计学意义(t＝1.73，P＝0.08)；TIMP-1水平治疗组(139.60±6.79) μg/L 、对照组(135.09±6.16) μg/L ，两组间比较差异有统计学意义(t＝3.29，P<0.001)；MMP3水平治疗组(1.19±0.10) μg/L、对照组(1.23±0.06) μg/L ，两组间比较差异有统计学意义(t＝2.28，P＝0.03)；TIMP1/MMP3比值治疗组111.04±8.81、对照组118.46±12.06，差异有统计学意义(t＝3.34，P<0.001)。结论麝香乌龙丸可以降低IL-1 、MMP3水平；升高TGF-β1 、TIMP-1和TIMP1/MMP3比值的表达水平，从而起到保护关节软骨、改善KOA患者膝关节功能的作用。

简介：目的:癌细胞膜上Pgp糖蛋白的过量表达是肿瘤多药抗性的主要机制。人体内编码Pgp糖蛋白的基因中仅有mdr1涉及多药抗性。本研究中设计了针对mdr1的反义核酸与阿霉素的偶联物,并且对其细胞毒性进行了考察。同时对偶联物对人表皮癌细胞株KBA1内的Pgp蛋白的表达也做了分子水平上的研究。方法:使用MTT法考察偶联物对KBA1细胞的毒性。用HPLC考察偶联物对细胞内阿霉素的积累量的影响。对于Pgp蛋白表达的变化,主要是通过RTPCR及WesternBlot方法进行了研究。结果:偶联物的细胞毒性比寡核苷酸高。在低剂量的偶联物(0.5μmol·L-1)的作用下,细胞对阿霉素的敏感性提高。偶联物能有效的提高细胞内阿霉素的积累量。并且从RTPCR及WesternBlot看,偶联物处理后的细胞内Pgp表达最少。结论:选用合适的基团,对反义核酸进行结构修饰能够较好的增强反义核酸的性能。采用阿霉素作为偶联基团尽管增强了细胞毒性,但是在更大程度上增强了其抑制Pgp蛋白的效力,提高了肿瘤耐药性的逆转倍数,具有一定的潜在应用价值。更多还原