简介：为明确SOC1基因在叶片中的生理作用,克隆到烟草中SOC1基因的完整开放阅读框,全长806bp。农杆菌介导转化烟草后,获得26棵转基因植株,其中23棵鉴定为阳性植株,转化率为88.46%。与野生型烟草K326相比,获得的SOC1过表达烟株开花提前,株高增加,叶片宽大。半定量RT-PCR结果显示,SOC1过表达不影响叶片中Rubisco大亚基、蔗糖磷酸合成酶和蔗糖合成酶基因的表达水平,但提高了抗坏血酸氧化酶的表达水平;提高了碳酸酐酶活性、蔗糖含量和还原性抗坏血酸含量,并降低了抗坏血酸过氧化物酶活性。表明SOC1可能通过影响氧化还原状态而提高碳酸酐酶活性和光合速率。

简介：摘要目的探讨不同浓度过氧化氢(H2O2)对A549细胞组蛋白去乙酰化酶-2(HDAC-2)和丝裂原激活蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响。方法选择不同浓度H2O2(0、100、200、400、600、800 μmol/L)干预A549细胞2 h、4 h、8 h、12 h、24 h和48 h，采用噻唑蓝(MTT)法检测不同干预时间点A549细胞存活率，乳酸脱氢酶(LDH)实验检测不同干预时间点A549细胞生长受抑情况，采用Western blot法检测12 h时HDAC-2和MKP-1蛋白表达水平。结果1．MTT结果显示，不同浓度H2O2干预A549细胞，与对照组(H2O2浓度为0 μmol/L)相比，随H2O2浓度提高，不同干预时间点(2 h、4 h、8 h、12 h、24 h和48 h)A549细胞存活率均呈下降趋势。2.LDH检测结果显示，不同浓度H2O2干预A549细胞，与对照组(H2O2浓度为0 μmol/L)相比，随H2O2浓度提高，不同干预时间点(2 h、4 h、8 h、12 h、24 h和48 h)A549细胞抑制率均呈上升趋势。3.不同浓度H2O2干预A549细胞12 h时，随H2O2浓度增加，HDAC-2蛋白表达水平呈浓度依赖性下降(F＝14.588，P<0.01)，MKP-1蛋白表达水平呈浓度依赖性升高(F＝64.297，P<0.01)。结论H2O2可通过调控HDAC-2及MKP-1的表达，参与肺细胞氧化应激性损伤过程。

简介：摘要目的寻找颈椎后纵韧带骨化（OPLL）患者骨化后纵韧带组织与邻近未骨化的后纵韧带组织的差异表达蛋白，探讨OPLL发生的病理生理学机制。方法选取5例2018年1至3月在北京大学第三医院骨科接受颈椎前路减压手术的颈椎OPLL患者，手术中切除的骨化的后纵韧带组织作为OPLL组，手术中切除的临近未骨化的后纵韧带组织作为对照组，采用基于数据非依赖采集的蛋白质组学技术筛选差异表达的蛋白，通过文献查询明确差异表达蛋白功能，找到在OPLL发生发展中起作用的蛋白质。结果OPLL组与对照组相比，共有9个蛋白有差异表达（差异倍数≥2和P<0.05），在骨化后纵韧带组织中的表达均上调，主要与核苷酸转运与代谢、细胞外结构、翻译、核糖体结构与生物发生、一般功能预测、信号转导机制等相关。文献查询后发现其中5个蛋白的功能可能与OPLL的发生发展相关，包括胶原α-1（Ⅱ）链（COL2A1）、基质Gla蛋白（MGP）及信号肽、CUB和EGF-样结构域包含蛋白1（SCUBE1）、骨调节蛋白（OMD）、成纤维细胞生长因子结合蛋白2（FGFBP2）。结论本研究筛选到的与OPLL相关的差异表达蛋白，对OPLL病理生理学研究及其生物标志物的发现提供了基础。

简介：多数临床医师对活血化瘀等中药治疗超早期脑出血持慎重怀疑态度，目前，缺乏确切的实验和临床证据证明脑出血超早期应用活血化瘀中药是否有益。本研究选择大鼠脑出血后12、72h2个不同时间点作为开始应用三七总皂苷治疗的时间，观察三七总皂苷超早期应用，对脑出血大鼠微管相关蛋白-2（MAP-2）及神经生长相关蛋白-43（GAP-43）表达及脑水肿的影响。

简介：目的阿尔茨海默病（AD）的主要病理机制是β-淀粉样蛋白（Aβ）的聚集,本实验利用大鼠皮层神经元研究钙调磷酸酶抑制剂他克莫司（FK506）对Aβ产生的影响及可能的机制。方法体外培养大鼠皮层神经元,过表达突变型APP基因,将细胞分为4组,分别为对照组,FK506低剂量、中剂量及高剂量组。MTT法检测细胞活力;ELISA检测细胞分泌Aβ40及Aβ42水平;Westernblot及实时荧光定量PCR检测β-分泌酶（BACE1）和synaptophysin的蛋白及基因表达。结果与模型组比较,FK506显著降低Aβ40及Aβ42水平、下调BACE1的表达并上调synaptophysin的表达。结论FK506可减少大鼠皮层神经元分泌Aβ,阻止突触的丢失,其作用机制可能与抑制BACE1表达有关。

简介：目的研究转录因子扭曲基因（Twist）在喉鳞癌（LSCC）中的表达及其通过对上皮型钙黏附蛋白（E-cadherin）、神经型钙黏附蛋白（N-cadherin）的作用在判断肿瘤的生物学行为方面的意义。方法采用免疫组织化学SP法及反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测49例喉鳞癌及20例癌旁组织中Twist、E-cadherin和N-cadherin基因的表达情况。结果Twist在喉癌组织中的阳性表达率（61.22%）明显高于癌旁组织（25%）（P〈0.01）；Twist在喉癌组织中的mRNA相对表达量（0.93±0.39）明显高于癌旁组织（0.57±0.24）（P〈0.01）；Twist在喉癌中蛋白及mRNA表达均与淋巴结转移、临床分期相关，而与肿瘤病理学分级、临床分型及年龄无关。在mRNA及蛋白水平，Twist与E-cadherin，N-cadherin与E-cadherin的表达均呈负相关；Twist与N-cadherin均呈正相关。结论Twist在喉鳞癌中过度表达,可能通过分别上调N-cadherin和下调E-cadherin的表达，进而在喉鳞癌的浸润、转移过程中发挥重要作用。

简介：摘要目的了解伴有2型糖尿病的结直肠癌(CRC)患者癌组织中胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)－Ras和晚期糖基化终产物受体(RAGE)－高迁移率族蛋白1(HMGB1)通路蛋白的表达特点，并探讨其意义。方法选取行手术切除治疗的59例CRC患者，其中伴有2型糖尿病者29例(CRC/DM组)，单纯CRC患者30例(CRC组)。采用免疫组织化学的方法检测手术切除癌组织中IGF1R、Ras、RAGE和HMGB1的表达，比较两组间表达的差异，分析表达与患者临床病理特征的关系。结果CRC/DM组IGF1R和Ras表达的阳性率均为65.5%(19/29),具有IGF1R＋ Ras＋免疫表型的患者占51.7%(15/29)，均明显高于CRC组[分别为33.3%(10/30)、36.7%(11/30)和20.0%(6/30)；P值分别为0.013、0.027和0.011]，二者的表达在CRC/DM组呈正相关(r＝0.479，P＝0.017)。CRC组和CRC/DM组RAGE蛋白表达的阳性率分别为70.0%(21/30)和72.4%(21/29)，HMGB1蛋白表达的阳性率分别为46.7%(14/30)和58.6%(17/29)，差异均无统计学意义(P＝0.358，P＝0.838)。但是CRC/DM组具有RAGE＋ HMGB1＋免疫表型患者所占比例[55.2%(16/29)]明显高于CRC组[26.7%(8/30)] ,差异有统计学意义(P＝0.026)，二者的表达在CRC/DM组呈正相关(r＝0.578，P＝0.003)。临床病理分析结果显示，在CRC组和CRC/DM组癌组织中，IGF1R、Ras、RAGE和HMGB1的表达与患者的性别、年龄、分化程度、肿瘤长径、T分期和淋巴结转移均无相关关系(均P>0.05)。结论IGF1R－Ras和RAGE－HMGB1通路可能参与了2型糖尿病患者发生CRC的过程。

简介：摘要目的探讨距骨骨软骨损伤(osteochondral lesions of the talus，OLT)软骨基质金属蛋白酶-1 (matrix metalloproteinase-1，MMP-1)的表达与磁共振T2值之间的关系及其在距骨骨软骨损伤的机制。材料与方法收集30例踝关节距骨骨软骨损伤行微创治疗术患者及30名健康志愿者，均行3.0 T常规踝关节磁共振成像(magnetic resonance imaging，MRI)及T2-mapping功能成像，测量距骨软骨T2值。术后离体距骨骨软骨行苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining，HE)和Western Blot法分析距骨骨软骨MMP-1的表达，统计学分析距骨骨软骨T2值与MMP-1蛋白表达的相关性。结果距骨骨软骨损伤以内中侧最为多见(磁共振6分区法)，距骨骨软骨T2值随软骨损伤Mankin分级明显增大(P＜0.05)。软骨MMP-1蛋白表达高级别与低级别差异明显(P＜0.05)。软骨T2值与软骨MMP-1表达呈线性相关趋势，Pearson分析距骨骨软骨损伤T2值增加与MMP-1蛋白表达增加呈直线性正相关(r=0.821，P＜0.0001)。结论距骨骨软骨损伤以内中侧最为多见，距骨骨软骨磁共振T2值随软骨损伤分级逐级递增；距骨骨软骨损伤磁共振T2值与MMP-1蛋白表达呈正相关，距骨骨软骨磁共振T2-mapping功能成像T2值定量分析可在体、无创性预测不同级别软骨损伤MMP-1蛋白的表达含量，为临床治疗OLT提供影像学定量依据。

简介：摘要目的探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)和驱动蛋白超家族23(KIF23)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法收集2015年2月至2020年11月临沂市人民医院和临沂市肿瘤医院病理学确诊的97例乳腺癌组织和对应癌旁组织，使用免疫组织化学方法检测上述组织中MACC1和KIF23表达，进行χ2检验统计学分析两者的表达与乳腺癌临床病理学参数之间的关系。结果MACC1在乳腺癌组织中阳性表达率为71.13%(69/97)，明显高于在癌旁组织中阳性表达率[18.56%(18/97)]，两者差异有统计学意义(χ2＝54.205，P<0.01)。KIF23在乳腺癌组织中阳性表达率为65.98%(64/97)，明显高于在癌旁组织中阳性表达率[20.62%(20/97)]，两者差异有统计学意义(χ2＝40.648，P<0.01)。MACC1在表达水平与乳腺癌肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移明显相关(χ2＝5.026、7.570、4.478，P<0.05)，差异有统计学意义。KIF23表达水平与乳腺癌肿瘤大小、组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(χ2＝5.206、8.521、5.165、6.8206，P<0.05)，差异有统计学意义。结论检测乳腺癌组织中MACC1和KIF23的表达有助于判断乳腺癌生物学行为。

简介：摘要目的研究骨髓细胞白血病蛋白1（myeloid cell leukemia-1，Mcl-1）的两种异构体骨髓细胞白血病蛋白1长型（myeloid cell leukemia-1-long，Mcl-1L）和骨髓细胞白血病蛋白1短型（myeloid cell leukemia-1-short，Mcl-1S）在恶性多形性腺瘤（malignant pleomorphic adenoma，MPA）中的表达，并评估该类患者的预后。方法收集2011年6月至2017年7月开滦总医院、华北理工大学口腔医学院两院口腔颌面外科手术治疗并成功随访的MPA患者56例，良性多形性腺瘤患者52例，通过实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）和蛋白质印迹法检测Mcl-1L和Mcl-1S在MPA中的表达水平，观察两者mRNA及蛋白表达水平，并与良性多形性腺瘤组织对比蛋白水平，分为高表达和低表达组，并经Kaplan Meier曲线分析总体生存时间，Log Rank检验比较组间差异。Cox多因素回归生存分析患者预后相关因素。结果qPCR分析显示与良性多形性腺瘤组织相比，Mcl-1L mRNA在66.1%（37/56）的MPA患者中呈高表达，Mcl-1L在腮腺、舌下腺及其他部位的MPA中mRNA表达水平（分别为2.21±1.07、2.12±1.08、1.83±0.81）均显著高于良性多形性腺瘤组织（1.00±0.19）（P<0.01）。蛋白质印迹法结果显示，Mcl-1L在腮腺、舌下腺及其他部位MPA中的蛋白表达（分别为1.02±0.43、0.71±0.29、0.70±0.30）均显著高于良性多形性腺瘤组织（0.39±0.08）（P<0.01）。Mcl-1L高表达与肿瘤大小（P=0.002）、淋巴结阳性（P=0.045）显著相关。Mcl-1L高、低表达者的Kaplan-Meier生存曲线差异有统计学意义（P=0.017），Mcl-1L高表达患者的生存时间[（24.79±9.71）个月]显著短于Mcl-1L低表达的患者[（30.59±9.01）个月]（P=0.017）。Cox多因素回归生存分析证实Mcl-1L高表达是患者预后不佳的独立危险因素。结论Mcl-1L高表达与MPA患者整体生存时间呈负相关。

简介：摘要目的探讨血清C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)的表达水平与糖尿病肾病不同程度肾脏损害的关系。方法选取2019年1月至2019年5月本院就诊的患者，符合NKF-KDOQI标准的2型糖尿病肾病患者为糖尿病肾病组(DN组，41例)，再依据肾小球滤过率估计值(eGFR)将其分为两个亚组{EDN组[21例，肾小球滤过率(GFR)为30～90 mL/min，eGFR(1～3期)]及LDN组(20例，GFR≤29 mL/min，eGFR 4～5期)}；选取非糖尿病慢性肾脏病患者为慢性肾脏病组(CKD组，30例)，同样根据eGFR将其分为两个亚组[ECKD组(10例，GFR为30～90 mL/min，eGFR 1～3期)及LCKD组(20例，GFR≤29 mL/min，eGFR 4～5期)]；选取同期体检中心健康个体为正常对照组(NC组，30例)；分析CTRP3与性别、年龄、体重指数(BMI)、葡萄糖(FBG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、血肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys C)、尿素(BUN)、尿酸(UA)、超敏C反应蛋白(CRP)等指标的关系，分析CTRP3在不同组内表达水平的差异性及与上述指标的相关性。结果①DN组及CKD组的血清CTRP3水平[(284.33±32.92)ng/mL vs.(314.42±20.82)ng/mL]低于NC组[(375.57±18.02) ng/mL]，各组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)；②Spearman相关性分析结果，CTRP3与Cys C、BUN、TG之间均存在明显负相关(r<0，P<0.05)；CTRP3与HDL、eGFR之间存在明显正相关(r>0，P<0.05)；与性别、年龄、BMI、FBG、UA、TC、LDL之间的无相关性(P>0.05)；CTRP3与Scr、hs-CRP之间均存在明显的负相关(r<0，P<0.05)；③EDN组的CTRP3、FBG、HDL明显高于LDN组，BUN、TG水平明显低于LDN组，差异均有统计学意义(P<0.05)；EDN组的Scr明显低于LDN组，eGFR明显高于LDN组，差异均有统计学意义(P<0.05)；④多元线性回归结果显示：TG、eGFR与血清CTRP3水平有相关性(P<0.05)；⑤ECKD组的CTRP3、HDL明显高于LCKD组，Cys C、UA水平明显低于LCKD组，差异均有统计学意义(P<0.05)；ECKD组的Scr、hs-CRP明显低于LCKD组，eGFR明显高于LCKD组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病肾病患者血清CTRP3水平较正常人低，且CTRP3水平随肾功能减退而逐渐减低；实验结果显示CTRP3与TG、hs-CRP之间均存在明显的负相关，TG、eGFR为血清CTRP3的独立影响因素，可推测出CTRP3水平与糖脂代谢紊乱、炎症相关；CTRP3可能参与慢性肾脏病肾功能的损害过程，在糖尿病肾病患者中尤为显著。

简介：摘要目的分析淋巴增强因子1(lymphoid enhancer factor-1，LEF-1)与P53蛋白在肝门部胆管癌组织中的表达及临床意义。方法回顾性分析2010年3月至2017年12月唐山市人民医院就诊的50例肝门部胆管癌患者的临床资料，采用免疫组织化学方法检测P53蛋白突变情况，同时检测LEF1蛋白在胆管癌癌组织及癌旁正常组织中的表达，分析LEF1的表达情况及与临床病理参数的相关性，同时探讨P53蛋白突变情况与LEF1蛋白表达的相关性及与患者预后的关系。结果LEF1蛋白在癌组织的阳性表达率为62.00%(31/50)，高于癌旁正常组织的阳性表达率36.00%(18/50)，两者比较差异有统计学意义(χ2＝6.763，P＝0.016)；P53蛋白突变型的胆管癌患者28例，野生型22例，在P53蛋白突变型的患者中LEF1阳性率为75.00%(21/28)，明显高于P53野生型组(45.45%，10/22)，两组比较差异有统计学意义(χ2＝4.565，P＝0.03)。LEF1表达与肿瘤的分化程度、TNM分期、淋巴结转移以及P53蛋白突变有关(P均<0.05)，LEF-1的表达与P53蛋白突变表达呈正相关(r＝0.295，P＝0.042)。P53蛋白突变型患者1年累计生存率明显低于P53蛋白野生型患者(60%与81%，P＝0.042)，LEF1阳性表达患者的1年累计生存率亦明显低于阴性表达患者(53%与82%，P＝0.018)。结论LEF-1在肝门部胆管癌组织中高表达，且高表达患者的预后较差。P53蛋白突变的肝门部胆管癌患者LEF-1阳性表达增高，且P53蛋白突变患者预后差。

简介：

简介：摘要目的通过构建含有不同大小乘客结构域的Ag43表面展示载体，观察其将外源蛋白HPV16L1展示在细菌细胞表面的效率。方法(1)利用基因工程手段将不同长度的Ag43基因序列连接到pET22b载体，获得4种Ag43表面展示载体：Ag43/138、Ag43/551、Ag43/552、Ag43/700；(2)克隆HPV16L1编码基因序列，利用基因工程手段将其分别连接到上述4种Ag43表面展示载体，获得4种重组蛋白表达载体；(3)HPV16L1-Ag43融合蛋白表达及SDS-PAGE分析；(4)利用胰蛋白酶消化验证HPV16L1蛋白在大肠埃希菌的表面展示。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示PCR扩增获得的Ag43和HPV16L1条带与预期大小一致，表面展示载体和重组蛋白表达载体的基因序列均通过基因测序验证无误。经IPTG诱导后，构建的4种Ag43表面展示载体均能表达HPV16L1蛋白。胰蛋白酶消化后，4种重组蛋白条带均减弱，且Ag43/700-HPV16L1条带减弱最明显。结论成功构建了基于自转运蛋白Ag43的细菌表面展示载体，HPV16L1蛋白可通过构建的4种Ag43表面展示载体表达并展示在大肠埃希菌表面，且仅保留α-螺旋和β-桶状结构域部分的Ag43表达载体即Ag43/700的表面展示效果最优。

简介：摘要目的探讨基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、迁移诱导蛋白7（MIG-7）、细丝蛋白A（FLNa）在结肠癌组织中的表达及其对预后的影响。方法收集2013年1月至2015年12月南京医科大学附属淮安市第一人民医院899例结肠癌患者手术切除的肿瘤标本及其对应的癌旁正常组织。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定结肠癌组织与癌旁正常组织中MMP-9、MMP-2、MIG-7、FLNa的表达水平，分析其与患者临床病理特征及预后的关系。结果结肠癌组织中MMP-2、MMP-9、MIG-7表达水平分别为（481±69）ng/ml、（262±85）ng/ml、（156±23）ng/ml，均高于癌旁正常组织[分别为（136±33）ng/ml、（191±21）ng/ml、（98±18）ng/ml]，差异均有统计学意义（t值分别为41.591、120.224、59.896，均P<0.01）；结肠癌组织中FLNa表达水平为（19.5±3.2）ng/ml，低于癌旁正常组织[（65.4± 8.3）ng/ml]，差异有统计学意义（t=154.902，P<0.05）。结肠癌组织中MMP-9、MMP-2、MIG-7、FLNa表达水平与肿瘤长径、Dukes分期、淋巴结转移、分化程度均有关（均P<0.05）。多因素Cox回归分析结果显示，MMP-9高表达、MMP-2高表达、MIG-7高表达及FLNa低表达均是患者预后不良的独立影响因素（均P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示，MMP-9、MMP-2、MIG-7低表达患者中位总生存期分别为55个月（95% CI 25~78个月）、56个月（95% CI 26~79个月）、54个月（95% CI 25~78个月），均长于高表达患者；而FLNa高表达患者中位总生存期为58个月（95%CI 27~80个月），长于低表达患者，差异有统计学意义（P<0.05）。结论MMP-9、MMP-2、MIG-7、FLNa与结肠癌的发生、发展密切相关，MMP-9、MMP-2、MIG-7高表达和FLNa低表达均影响结肠癌患者预后，可作为临床预后判断的重要指标。

简介：包被浓度为30mg/L37℃时包被时间为2小时,2.3　包被液最适浓度测定　以吸光度1.025的稀释度为包被液最适浓度,用双抗体夹心酶联免疫吸附技术测定血清及体液α1-酸性糖蛋白

简介：

简介：

简介：尼克样1型（Nell-1）蛋白是一种新型外分泌型糖蛋白，具有良好的骨诱导性、软骨诱导性及抑制脂肪形成、抑制炎症反应等特性。本综述总结了Nell-1蛋白是通过何种分子信号级联反应发挥其功能，概括了其应用于组织工程和作为骨质疏松全身治疗药物的最新研究进展，并对Nell-1蛋白在骨、软骨等肿瘤中的定位及其在牙齿发育过程中的作用进行了小结。

简介：异常血红蛋白病是由于遗传缺陷（常染色体显性遗传）致珠蛋白肽链结构异常或合成障碍,使一种或一种以上结构异常的血红蛋白,部分或完全替代了正常的血红蛋白而引起的一组疾病。至今已发现400多种结构异常性血红蛋白病和100多种珠蛋白生成障碍性贫血[1-2]。临床可表现溶血性贫血、