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  • 简介:竞争性寡聚脱氧核糖核酸识别转录因子DNA结合域,抑制了转录因子对基因转录调控,转录因子E2F作为潜在治疗靶点,可以用于抑制肾小球系膜细胞血管内皮细胞增生,在部分异常增生疾病中显示了一定应用前景.

  • 标签: E2F 治疗靶点 细胞周期 DNA结合域 异常增生疾病
  • 简介:目的:研究SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白与CYP4F3相互作用。方法:应用免疫共沉淀、GST—pulldown、BIACORE实验验证SARS—CoVN蛋白与CYP4F3相互作用。结果:SARS—CoVN蛋白与CYP4F3能够相互作用,BIA-CORE实验证实CYP4F3与SARS—CoVN蛋白亲和常数为Ko=4.3×10^-11。结论:SARS—CoVN蛋白与CYP4F3在细胞内、外均能形成复合物,这为进一步探讨SARS—CoVN蛋白在SARS致病机理中作用奠定了基础。

  • 标签: SARS冠状病毒 N蛋白 CYP4F3 相互作用
  • 简介:本论文在对污水处理工艺认识基础上,重点分析A^2/O工艺,得出A^2/O工艺在污水处理生产不可忽视地位.A^2/O工艺生物处理部分主要由厌氧池、缺氧池和好氧池三个部分组成.厌氧主要是释放磷,同时对有机物进行部分氨化;缺氧池主要是用来脱氮;好氧池能够去除BOD还能进行消化吸收磷,功能多样.

  • 标签: A^2/O工艺 脱氮除磷
  • 简介:利用酵母双杂交试验,鉴定了细胞内信号传导蛋白SMAD3SMAD4相互作用。通过SMAD3SMAD4各突变体同源异源相互作用双杂交反应,确定SMAD4介导信号传递功能区在中间连接区,SMAD3功能区在C末端。

  • 标签: SMAD3 SMAD4 酵母双杂交
  • 简介:C3d补体C3不可再被酶解最小片段,在抗原特异性免疫建立之前,C3d可识别非己抗原并与之共价结合,增强了抗原递呈细胞递呈能力、降低了B细胞活化阈、提高特异性抗体滴度、促进抗体亲和力成熟等.近年来研究显示,C3d还可以促进抗原特异性细胞免疫应答水平并改变机体免疫应答模式.所以,C3d连接固有性免疫获得性免疫桥梁.本文对C3d分子生物学特征、生物学功能以及作为分子佐剂可能分子机制进行了简要总结.

  • 标签: C3D 免疫应答 分子机制
  • 简介:人工合成了芋螺毒素SO3基因片段,通过链延伸方法获得了SO3全长基因.在此基础上,将SO3基因插入到含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体基因pTIG-Trx表达载体中,构建含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体SO3融合基因重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)Origmia(DE3)/DsbC并得到了表达,该融合蛋白主要以包涵体形式存在.为进一步研究芋螺毒素SO3跨血脑屏障转运治疗作用奠定了基础.

  • 标签: 转铁蛋白受体 单链抗体 芋螺毒素SO3 血脑屏障 大鼠 融合蛋白
  • 简介:目的:构建带Myc标签LC3B—PLA2基因真核表达质粒,获得LC3B—PLA2融合蛋白,并应用LC3B—PLA2研究Atg4B对LC3B切割作用。方法:以本实验室保存乳腺文库为模板,PCR扩增获得LCgB序列,与PLA2G]O拼接后插入pCMV—Myc载体,用构建重组质粒转染HEK293T细胞,Western印迹检测融合蛋白表达,用LC3B—PLA2与Atg4B共转染方法检测Atg4B对LC3B切割作用。结果:菌液PCR、重组质粒双酶切及测序均表明重组质粒构建成功,Western印迹结果表明融合蛋白在HEK293T细胞中获得表达,LC3B—PLA2真核表达蛋白能够应用于Atg4B对LC3B切割作用研究。结论:构建了pCMV—Myc—LC3B—PLA2真核表达质粒,LC3B—PLA2融合蛋白在Atg4B对LC3B切割作用研究中至关重要,为进一步研究Atg4B在自噬过程中作用奠定了基础。

  • 标签: LC3B-PLA2 Atg4B 自噬 重组质粒
  • 简介:利用O-超家族芋螺毒素具有保守信号肽编码序列特性,采用RACE方法,对线纹芋螺O-超家族芋螺毒素cDNA进行克隆、序列测定,并经化学合成,获得一种新型高活性芋螺多肽毒素SO3。该肽含25个氨基酸残基,其序列为CKAAGKPCSRIAYNCCTGSCRSGKC-NH2,有三对二硫键。对其进行了正确折叠及活性筛选。结果表明,该肽折叠主峰对小鼠脑内给药100ng,可明显观察到小鼠颤抖现象,对小鼠有明显镇痛作用,而非正确折叠则无反应。

  • 标签: O-超家族芋螺毒素 线纹芋螺 SO3 折叠 活性
  • 简介:目的:探讨恋爱大学生人格特点与社会支持关系。方法:采用卡特尔16种人格问卷(16PF)社会支持量表对231名谈恋爱大学生进行问卷调查。结果:恋爱大学生的人格特征与他们社会支持密切相关,不同社会支持水平恋爱大学生在人格方面存在显著差异。结论:恋爱大学生的人格特征与社会支持关系密切。

  • 标签: 大学生 人格 社会支持
  • 简介:目的评价残存复发鼻咽癌患者接受陀螺刀(陀螺旋转式钴60立体定向放射系统)再程放疗后生存质量.方法以2013年3月至2015年10月来我院进行复查放疗1年后鼻咽癌无瘤生存者为对象,采用头颈部肿瘤患者生命质量测评量表(FACT-H&N)中文版进行问卷调查,以陀螺刀再程放疗后无瘤生存者为观察组,以同期来院复查初程放疗后无瘤生存者为对照组,比较两组生存质量及自觉症状.结果观察组情感状况领域、功能状况领域量表总分明显低于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05);观察组口干、吞咽困难、味觉减退、牙痛症状比对照组严重,差异有统计学意义(P〈0.05).结论残存复发鼻咽癌患者接受陀螺刀再程放疗后生存质量比初程放疗患者下降,主要影响情感状况领域功能状况领域,应予患者健康教育及心理指导以提高生存质量.

  • 标签: 鼻咽癌 残存 复发 生存质量
  • 简介:利用构建犬2型腺病毒E3区缺失质粒pBE3L分别构建了含有不含外源性启动子绿色荧光蛋白(GFP)基因狂犬病病毒糖蛋白(Rgp)基因重组表达质粒pBE3LGFP、pBE3LCGFP、pBE3LRgppBE3LCRgp,并分别对DK细胞进行了转染实验,以检测其表达,结果显示,pBE3LCGFP质粒在转染DK细胞后,于36h即可观察到荧光,72~96h无明显差别,传3代后仍可见表达荧光细胞,pBE3LCRgp质粒转染DK细胞后,于48~96h用间接免疫荧光染色可检测到糖蛋白表达,而pBE3LGFPpBE3Rgp质粒转染DK细胞后经检测均无表达,表明构建E3区缺失性载体不能利用E3区自身启动子进行目的基因表达,但利用外源性启动子可使外源基因获得良好表达.

  • 标签: 犬2型腺病毒 E3区 表达载体
  • 简介:目的:比较并评价涂片抗酸染色法(涂片法)、L-J培养法基因芯片法在分枝杆菌检测中应用价值。方法:对241例需查抗酸杆菌临床标本,采用涂片法、L-J培养法基因芯片法检测分枝杆菌,3种方法检测结果存在分歧标本再进行DNA测序,以培养鉴定结果阳性DNA测序得到分枝杆菌序列为确诊标准。结果:241例标本,涂片法、L-J培养法基因芯片法检测阳性率依次为18.7%、12.0%、15.8%,经卡方检验三者阳性率差异没有统计学意义(P〉0.05);检测灵敏度依次为85.4%、70.7%、93.0%,经卡方检验三种方法灵敏度总体来说有差别(χ2=7.24,P〈0.05),涂片法与L-J培养法以及涂片法与基因芯片法灵敏度差异没有统计学差异,基因芯片法灵敏度高于涂片法(χ2=6.61,P〈0.05);检测特异性依次为95.6%、100.0%、100.0%。38例基因芯片检测阳性患者中有28例为结核分枝杆菌,10例为非结核分枝杆菌。结论:与涂片法及培养法相比较,基因芯片法能够鉴别分枝杆菌菌种,同时具有快速、可靠、准确度高特点,在分枝杆菌感染早期诊断抗菌治疗上具有重要临床价值。

  • 标签: 分枝杆菌 涂片法 L-J培养 基因芯片
  • 简介:收集产重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)CHO工程细胞灌流培养上清,经过Streamline扩张柱床赖氨酸-Sepharose4B柱亲和吸附色谱纯化后,最后产品比性达到600000IU/mg蛋白,rt-PA总活性回收率在98%左右,经还原SDS-PAGE分析主要为高相对分了质量rt-PA蛋白,HPLC分析达到色谱纯,N端15个氨基酸序列pI与文献报道一致。蛋白质印迹实验证实具有t-P

  • 标签: 组织型纤溶酶原激活剂 纯化 性质
  • 简介:大环内酯类抗生素基因工程近年来生物工程领域研究一个热点,利用基因工程改造大环内酯类抗生素合成基因,已经合成了100多种"非天然”天然化合物,为筛选新抗生素开辟了新途径.本研究以糖多孢红霉菌A226基因组DNA为模板,先用PCR扩增出红霉素合成基因eryKR6两侧片段,再用重叠PCR将其拼接成去除KR6约3.2kbDNA片段,并克隆于pWHM3载体,构建了同源重组质粒pWHM2201.用PEG介导将pWHM2201转入糖多孢红霉菌A226原生质体.PCR鉴定生物活性检测均显示pWHM2201已重组到红霉素合成基因位点.在无抗性R3M斜面上生长两代后,制备重组体原生质体,并涂R3M平皿.利用PCR筛选出KR6敲除突变体糖多孢红霉菌M.

  • 标签: 酮内酯类化合物 3-去氧-3-羰基-红霉内酯B 基因工程 合成
  • 简介:目的:研究肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)对NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路调控作用机制。方法:利用免疫共沉淀免疫印迹在HEK-293T细胞中研究TRAF6与NLRP3相互作用;通过检测乳酸脱氢酶(LDH),在THP-1细胞中研究TRAF6对NLRP3炎症小体信号通路活性影响。结果:TRAF6通过与NLRP3相互作用增加NLRP3稳定性,进而促进NLRP3炎症小体信号通路介导LDH释放。结论:TRAF6通过增加NLRP3稳定性正调控NLRP3炎症小体信号通路。

  • 标签: 肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6) NOD样受体蛋白3(NLRP3) 炎症小体 乳酸脱氢酶
  • 简介:SAMDsTGFβ家族细胞内信号介导者。为了研究SMAD信号传递过程,我们以SAMD为诱饵蛋白用酵母双杂交系统筛选与SAMD相互作用蛋白,发现CyclinB可以与SMAD发生相互作用,并在COS7细胞中证实了该相互作用。提示TGFβ可能通过SMADs与细胞周期素相互作用来调节细胞周期变化。

  • 标签: SMAD3 CyclinB 相互作用
  • 简介:目的:探讨消毒供应中心中干燥不彻底消毒包对消毒效果影响。方法:随机抽取我院消毒供应中心部分干燥不彻底灭菌包以及干燥合格灭菌包作为研究对象,分析产生潮湿包原因并制定针对性预防措施,将干燥包潮湿包应用于临床,对干燥包以及潮湿包消毒效果进行观察。结果:干燥包在临床上感染较少,而潮湿包在临床感染率较高,分别为40%2.0%,P<0.05,具有统计意义。结论:消毒供应中心干燥不彻底消毒包灭菌效果较差,感染率较高,应采取预防措施,较少出现消毒包干燥不彻底现象。

  • 标签: 消毒效果 干燥不彻底 消毒供应中心消毒包
  • 简介:目的:利用慢病毒载体建立稳定表达猪载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F(pAPOBEC3F,简称pA3F)PK15细胞系。方法:以实验室前期构建pBPLV-flag-pA3F质粒为模板,PCR扩增pA3F基因,克隆到pLenti-Puro-3Flag载体构建成pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒,Western印迹鉴定其在HEK293T细胞中表达;将pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒与包装载体共转染HEK293T细胞,包装成Lenti-pA3F慢病毒并测定病毒滴度;将Lenti-pA3F慢病毒感染PK15细胞,通过嘌呤霉素压力筛选并结合有限稀释法,筛选稳定表达pA3F细胞单克隆株,最终Western印迹检测细胞单克隆株中pA3F表达。结果:菌落PCR序列测定表明pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒构建正确,Western印迹显示该质粒可在HEK293T细胞中表达pA3F蛋白;包装了Lenti-pA3F慢病毒,滴度为1.32×10^8TU/mL,慢病毒感染PK15细胞后可检测到pA3F蛋白表达;经Western印迹鉴定,筛选得到单克隆细胞可稳定表达pA3F蛋白。结论:建立了稳定表达pA3FPK15细胞单克隆株,为进一步深入研究猪内源性反转录病毒在pA3F作用下免疫逃逸机制奠定了基础。

  • 标签: 猪载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F 慢病毒载体 猪内源性反转录病毒