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  • 简介:摘要目的探讨不同剂量率60Co γ射线照射对辐射诱导基因表达水平改变影响。方法60Co γ射线照射3例正常人离体外周血,剂量率分别为0.2、1.0和2.0 Gy/min,照射剂量为0、1、2、4和6 Gy,照射后24 h收集细胞,实时荧光定量(PCR)法对11个基因(CDKN1A、MDM2、PCNA、FDXR、GADD45A、PHPT1、ASTN2、TNFSF4、POLH、GDF-15和PPM1D)mRNA表达水平进行相对定量检测;逐步回归法构建不同剂量率基因组合表达模型。结果不同剂量率0.2、1和2 Gy/min 60Co γ射线照射后,辐射诱导11个基因相对表达量随照射剂量增加而升高,具有显著剂量依赖性(R2=0.744~0.998,P< 0.05);0.2 Gy/min 60Co γ射线照射2 Gy后,CDKN1A、FDXR、PHPT1和TNFSF4基因表达量明显高于1和2 Gy/min剂量率组,差异具有统计学意义(t=3.73、5.73、2.44、2.77、3.53、2.68、2.43、2.05,P< 0.05);2 Gy/min 60Co γ射线照射6 Gy后,PPM1D基因表达量明显高于其他两个剂量率组(t=3.82、2.54,P< 0.05);不同剂量率基因组合表达模型由2~3个基因组成,回归方程R2值为0.951~0.976(P< 0.05)。结论在0.2~2 Gy/min剂量率范围内,不同剂量率60Co γ射线照射可能会影响辐射诱导人外周血基因表达水平改变。

  • 标签: 电离辐射 基因表达 剂量率
  • 简介:摘要目的探究长链非编码RNA(LncRNA)LINC00672对乳腺癌细胞他莫昔芬(tamoxifen,TAM)敏感影响及其相关机制。方法以人乳腺癌细胞MCF-7为体外模型,建立TAM抵抗细胞系(抵抗组)及相应亲本细胞系(亲本组),Crisper-cas9技术在抵抗组细胞中构建LINC00672干扰细胞系及对照细胞(干扰1组、干扰2组及对照组),实时荧光定量PCR检测细胞LINC00672、Akt及HER2 mRNA表达,Western blot检测细胞总Akt(Akt-pan)、磷酸化Akt(p-Akt)及HER2表达,CCK-8检测细胞对TAM抵抗能力。结果亲本组细胞LINC00672、Akt及HER2 mRNA表达分别为(1.000±0.086)、(1.000±0.254)及(1.000±0.208),TAM IC50值为(1.417±0.153)μmol/L;抵抗组细胞LINC00672、Akt及HER2 mRNA表达分别为(4.286±0.593)、(4.175±0.274)及(2.519±0.389),TAM IC50值为(12.029±1.016)μmol/L;对照组细胞LINC00672、Akt及HER2 mRNA表达分别为1.000±0.093)、1.000±0.090)及1.000±0.097),TAM IC50值为(10.58±0.639)μmol/L;干扰1组细胞LINC00672、Akt及HER2 mRNA表达分别为(0.331±0.023)、(0.892±0.044)及(0.458±0.077),TAM IC50值为(6.250±0.836)μmol/L;干扰2组细胞LINC00672、Akt及HER2 mRNA表达分别为(0.304±0.016)、(0.919±0.050)及(0.416±0.080),TAM IC50值为(4.764±0.553)μmol/L。与亲本组相比,抵抗组细胞LINC00672、Akt及HER2 mRNA表达均显著上调(P<0.01),同时细胞Akt-pan、p-Akt及HER2蛋白表达上调,TAM IC50值显著增高(P<0.01);与对照组相比,干扰1组及干扰2组LINC00672及HER2 mRNA表达显著降低(P<0.01),而Akt表达无显著变化(P>0.05),细胞p-Akt及HER2蛋白表达显著降低,而Akt-pan蛋白表达无显著变化,同时细胞TAM IC50值显著降低(P<0.01)。结论LINC00672可能参与乳腺癌细胞TAM抵抗形成,其潜在机制与促进HER2/p-Akt通路有关。

  • 标签: 乳腺癌 LINC00672 他莫昔芬 化疗抵抗
  • 简介:摘要目的探索性研究Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)对胃癌细胞SGC-7901生物学行为能力及顺铂化疗敏感影响,分析相关作用机制。方法于2019年1月至2020年12月采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot,WB)检测正常胃上皮黏膜细胞GES1和胃癌细胞SGC-7901中YAP1相对表达量表达差异。实验分为沉默(Lv-shRNA-YAP1)组、阴性对照(Lv-shRNA-NC)组、空白对照组,构建YAP1沉默重组慢病毒颗粒Lv-shRNA-YAP1和阴性对照Lv-shRNA-NC分别转染胃癌细胞SGC-7901,空白对照组不做任何处理,分别采用细胞计数8(Cell Counting Kit-8,CCK8)实验、划痕实验、Transwell实验观察YAP1对胃癌细胞增殖、运动、迁移、侵袭等生物学行为能力影响;向3组细胞加入不同浓度顺铂溶液,采用CCK8实验检测各组细胞存活率及顺铂对细胞半数有效抑制浓度(IC50),取空白对照组、Lv-shRNA-YAP1组细胞加入IC50顺铂溶液,进一步分为空白对照组、Lv-shRNA-YAP1组、顺铂组、Lv-shRNA-YAP1+顺铂组,采用RT-PCR实验和WB实验比较4组细胞中YAP1及其下游靶基因胰岛素样生长因子(insulin like growth factor,IGF)、苏氨酸蛋白激酶(prote in k inase B,Akt)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)表达情况。结果与正常胃上皮黏膜细胞GES1[mRNA(1.00±0.03),蛋白(1.00±0.02)]比较,YAP1在胃癌细胞SGC-7901中呈高表达[mRNA(6.43±0.43),蛋白(2.54±0.13)],差异均有统计学意义(t=11.821、8.371,均P<0.05)。空白对照组胃癌细胞在24 h、48 h、72 h增殖能力分别为(0.44±0.05)、(0.72±0.05)、(0.97±0.04),细胞运动距离(82.32±4.53)%,细胞迁移及侵袭能力分别为(543±43)个、(586±54)个,Lv-shRNA-NC组分别为(0.40±0.05)、(0.68±0.04)、(0.92±0.05)、(84.42±5.42)%、(523±51)个、(573±54)个,Lv-shRNA-YAP1组胃癌细胞在24 h、48 h、72 h增殖能力均明显降低[分别为(0.34±0.04),(0.52±0.04),(0.73±0.05),均P<0.05],细胞运动距离明显较小[(51.42±5.31)%,P<0.05],细胞迁移及侵袭能力均明显降低[分别为(432±44)个、(485±53)个,均P<0.05]。当顺铂浓度为0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 μg/ml时,Lv-shRNA-YAP1组胃癌细胞SGC-7901存活率均明显低于空白对照组和Lv-shRNA-NC组细胞(均P<0.05);Lv-shRNA-YAP1组顺铂对细胞IC50为(1.48±0.33)μg/ml,明显低于空白对照组和Lv-shRNA-NC组[分别为(4.43±0.32)μg/ml,(4.18±0.42)μg/ml,均P<0.05]。空白对照组细胞中IGF、Akt、TGF-βmRNA和蛋白相对表达量分别为(1.00±0.03)、(1.00±0.02)、(1.00±0.04),(1.00±0.02)、(1.00±0.04)、(1.00±0.03),Lv-shRNA-YAP1组分别为(0.58±0.03)、(0.62±0.03)、(0.39±0.03),(0.78±0.03)、(0.73±0.03)、(0.74±0.05),顺铂组分别为(0.67±0.02)、(0.73±0.03)、(0.40±0.02),(0.72±0.04)、(0.74±0.04)、(0.77±0.05),Lv-shRNA-YAP1组和顺铂组细胞中IGF、Akt、TGF-βmRNA和蛋白相对表达量明显优于空白对照组细胞(均P<0.05),Lv-shRNA-YAP1+顺铂组细胞中IGF、Akt、TGF-βmRNA和蛋白相对表达量[(0.70±0.02)、(0.68±0.03)、(0.34±0.04),(0.51±0.03)、(0.46±0.03)、(0.55±0.05)]则明显低于Lv-shRNA-YAP1组和顺铂组(均P<0.05)。结论YAP1蛋白在胃癌细胞SGC-7901中高表达,靶向沉默YAP1蛋白可有效改善胃癌细胞SGC-7901对顺铂敏感性,抑制肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与IGF、Akt、TGF-β表达下调有关。

  • 标签: Yes相关蛋白1 胃癌 顺铂 化疗敏感性 细胞增殖
  • 简介:摘要目的采用磁共振定量磁敏感图(quantitative susceptibility mapping,QSM)测量单侧大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)狭窄或闭塞患者大脑深部灰质核团铁含量。材料与方法纳入33例单侧MCA狭窄或闭塞患者,采用GE 3.0 T MR进行QSM和常规MRI检查。将原始图像进行处理后得到QSM图像,分别测量病侧和对侧尾状核、壳核、苍白球及丘脑敏感值,采用配对样本t检验比较两侧灰质核团间磁敏感差异。再根据管腔狭窄程度将33例患者分为轻中度狭窄组、重度狭窄组、闭塞组,采用单因素方差分析比较三组患者病侧灰质核团间磁敏感差异。结果33例受试者病侧尾状核、壳核和苍白球磁敏感值较对侧差异有统计学意义(P<0.05),丘脑两侧磁敏感值差异无统计学意义(P>0.05)。上述三组各组间差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论应用QSM技术发现一侧MCA狭窄或闭塞患者病侧灰质核团铁含量均较对侧增高,进一步加深对缺血性脑卒中病理生理过程认识,从而为临床治疗和改善缺血性脑卒中预后提供指导。

  • 标签: 大脑中动脉狭窄或闭塞 缺血性脑卒中 磁共振成像 定量磁敏感图 铁沉积
  • 简介:摘要目的探究奥曲肽敏感试验预测生长抑素受体配体(somatostatin receptor ligands, SRLs)治疗活动性肢端肥大症临床应用价值。方法回顾性分析2011年至2020年间76例未接受过放射治疗活动性肢端肥大症患者临床资料,所有患者均在晨起空腹状态下皮下注射短效奥曲肽100 μg,分别在0、2、4、6和8 h采血测定血清生长激素(GH)水平,所有患者均接受SRLs治疗至少3个月。SRLs治疗有效标准为:治疗后血清随机GH<1 μg/L或GH较基线值下降>80%定义为GH有效;治疗后血清胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)<1.3倍参考范围上限(upper limit of normal, ULN)或IGF-Ⅰ较基线值下降>50%定义为IGF-Ⅰ有效;同时满足GH和IGF-Ⅰ有效标准定义为GH和IGF-Ⅰ均有效。结果奥曲肽敏感试验中基线GH为15.00(6.38,34.20)μg/L,血清GH达到谷值时间为(3.65±1.65)h,GH谷值为1.47(0.50,4.19)μg/L,GH抑制率为89.12%(72.71%,95.09%)。奥曲肽敏感试验中GH抑制率为89.32%时,曲线下面积(AUC)为0.74,预测GH有效敏感度为81.80%,特异度为66.00%;GH抑制率为93.14%时,AUC为0.64,预测IGF-Ⅰ有效敏感度和特异度分别为50.00%、75.60%;GH抑制率为90.71%时,AUC为0.78,预测GH和IGF-Ⅰ同时有效敏感度为83.30%,特异度为70.00%。GH/IGF-Ⅰ有效组较GH/IGF-Ⅰ无效组奥曲肽敏感试验中GH谷值更低、GH抑制率更高、IGF-Ⅰ下降率更高、治疗后IGF-Ⅰ/ULN比值更低(P<0.05)。结论奥曲肽敏感试验中GH抑制率可以用来预测SRLs治疗垂体GH腺瘤疗效,诊断界值为90.71%时敏感度和特异度最高。

  • 标签: 奥曲肽敏感试验 长效生长抑素受体配体 肢端肥大症 生长激素抑制率
  • 简介:摘要目的探讨胃癌组织中微小RNA-301(miR-301)表达水平与肿瘤细胞对奥沙利铂(L-OHP)化疗敏感关系。方法收集75例新鲜胃癌组织及癌旁黏膜组织,荧光实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测组织中miR-301及B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、生存素(Survivin)、NFKB抑制物与Ras互作因子类似物2基因(NKIRAS2) mRNA表达;将组织制备单细胞悬液,噻唑蓝(MTT)法检测胃癌细胞对L-OHP体外敏感性;分析miR-301与bcl-2、Survivin、NKIRAS2 mRNA在胃癌组织中相关关系。生物信息学技术分析miR-301靶基因。采用t检验、Spearman相关分析等方法进行统计学处理。结果胃癌组织中miR-301表达明显高于癌旁黏膜组织(t=-12.189,P<0.01)。胃癌组织中bcl-2、SurvivinmRNA表达明显高于癌旁黏膜组织(t=18.916、21.220,P<0.01),而NKIRAS2mRNA则低于癌旁黏膜组织(t=-19.311,P<0.01)。MTT结果显示胃癌细胞在L-OHP作用后相对活性为(53.773±21.067)%;以miR-301表达平均值为阈值将胃癌组织分为miR-301高表达组和低表达组,发现高表达组胃癌原代细胞对L-OHP活性高于低表达组(t=-2.903,P<0.01);Spearman相关分析显示,胃癌组织中miR-301与bcl-2,miR-301与Survivin mRNA表达呈正相关(r=0.382、0.477,P<0.01);miR-301与NKIRAS2 mRNA表达呈负相关(r=-0.614,P<0.01)。生物信息学分析显示miR-301对NKIRAS2有直接调控作用。结论miR-301可能通过调控bcl-2、Survivin、NKIRAS2基因表达而影响了胃癌对L-OHP敏感性。

  • 标签: 微小RNA-301 胃癌 奥沙利铂 药物抵抗
  • 简介:摘要目的探讨早期白内障患者单眼及双眼快速对比敏感度(qCSF)与视觉相关生活质量(QOL)关系。方法采用横断面研究设计,纳入2017年3—6月于中山大学中山眼科中心就诊早期年龄相关性白内障患者46例共92眼,测量受检者最佳矫正视力状态下单眼和双眼qCSF;采用美国眼科学会视功能问卷(NEI VFQ-25)评估患者QOL并进行Rasch校准。测量患者最佳矫正视力(BCVA)(LogMAR),根据视力分别定义视力较好眼与视力较差眼。分析视力较好眼、视力较差眼及双眼log对比敏感度曲线下面积(AULCSF)以及截止频率、1.0、1.5、3.0、6.0、12.0、18.0 c/d空间频率下qCSF与QOL评分之间关系。结果受检者QOL总分为(64.13±4.76)分,与视力较好眼、视力较差眼BCVA均呈负相关(r=-0.386,P=0.008;r=-0.413,P=0.004);与双眼、视力较好眼和视力较差眼AULCSF均呈正相关(r=0.531、0.524、0.711,均P<0.001);与双眼、视力较好眼和视力较差眼截止频率qCSF均呈正相关(r=0.504、0.419、0.694,均P<0.01);与双眼、视力较好眼和视力较差眼1.5、3.0、6.0和12.0 c/d空间频率下qCSF均呈正相关(1.5 c/d:r=0.444、0.374、0.513,均P<0.05;3.0 c/d:r=0.544、0.506、0.679,均P<0.01;6.0 c/d:r=0.545、0.530、0.710,均P<0.01;12.0 c/d:r=0.493、0.431、0.558,均P<0.01);与双眼和视力较差眼1.0、18.0 c/d空间频率下qCSF呈正相关(1.0 c/d:r=0.296、0.292,均P<0.05;18.0 c/d:r=0.386、0.321,均P<0.05)。结论不同空间频率下qCSF更全面地反映了白内障患者视功能,早期白内障患者QOL与视力较好眼、视力较差眼和双眼qCSF均有相关性,其中与视力较差眼qCSF相关性较强。

  • 标签: 快速对比敏感度 视觉相关生活质量 白内障
  • 简介:摘要目的应用基因表达谱芯片,筛选下咽鳞状细胞癌患者对紫杉醇+顺铂+5-氟尿嘧啶(TPF)方案诱导化疗敏感差异表达基因,并进行初步分析。方法选取2013年1月至2017年12月北京同仁医院头颈外科29例原发下咽鳞状细胞癌患者(男28例,女1例,年龄43~73岁)TPF方案诱导化疗治疗前新鲜肿瘤标本。分为诱导化疗敏感组(16例)和不敏感组(13例)。应用Illumina人类全基因组表达芯片检测2组表达差异,对差异基因进行生物信息学分析。在29例样本基础上增加符合入组条件14例样本,应用反转录实时定量聚合酶链反应(reverse transcription and quantitative real-time PCR,RT-qPCR)技术检测潜在功能核心基因在诱导化疗敏感组患者及诱导化疗不敏感组患者组织中表达差异。采用Graphpad prism 7.0软件对测量结果进行统计分析。结果共筛选出1 381个差异基因。经GO(Gene Ontology)数据库分析,功能上调集合主要包括:细胞外基质隔离、趋化因子受体结合、钾离子通道调节活性等集合;下调集合包括:血管生成调节、钙离子结合、自然杀伤细胞免疫应答活性等集合。经KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)数据库分析,下调通路主要有:细胞外基质受体相互作用通路、过氧化物酶体通路等;上调通路主要有:谷胱甘肽代谢通路、过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator activated receptor,PPAR)信号通路等。其中CD44、IL-6R分别为表达下调基因和上调基因,可能位于核心功能调控位置。经RT-qPCR检测,CD44 mRNA在诱导化疗不敏感组织中相对表达量(0.54±0.06)显著高于诱导化疗敏感组织(0.33±0.04)中相对表达量(P<0.01);IL-6R mRNA在诱导化疗不敏感组织中相对表达量(0.44±0.03)显著低于诱导化疗敏感组织中相对表达量(0.68±0.03),差异有统计学意义(P<0.01)。结论CD44、IL-6R可能是下咽鳞状细胞癌TPF诱导化疗敏感性相关潜在功能性基因。

  • 标签: 下咽肿瘤 癌,鳞状细胞 基因表达谱 诱导化疗 生物信息学
  • 简介:摘要目的分析临床分离西弗射盾子囊霉菌生物学特征及药物敏感性数据,为实验室准确鉴定及临床治疗提供用药依据。方法收集2010年至2019年中山大学附属第一医院及中山市三乡医院分离到西弗射盾子囊霉菌47株,观察并记录其在沙氏平板及科马嘉显色培养基上菌落形态和镜下形态。从NCBI数据库下载西弗射盾子囊霉菌及临床常见念珠菌ITS序列,获取序列通过MEGA 7.0.26采用Neighbor-Joining法构建进化树,对西弗射盾子囊霉菌与临床念珠菌亲缘关系进行分析。所有的菌株使用法国梅里埃公司VITEK 2全自动细菌鉴定及药敏分析仪进行鉴定;采用法国梅里埃公司ATB-FUNG3真菌药敏检测试剂条检测其对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑药物敏感性。结果西弗射盾子囊霉菌落干燥、白色、镶嵌生长;在科马嘉显色培养基呈现蓝色。系统进化分析显示西弗射盾子囊霉与酿酒酵母菌亲缘关系较近。药敏结果显示菌株对于氟康唑具有较高MIC,耐药率为70.2%;对于5-氟胞嘧啶MIC分布范围为MIC50为4.0 μg/ml,MIC90为≥32.0 μg/ml;两性霉素BMIC50为0.5 μg/ml,MIC90为1.0 μg/ml;伊曲康唑MIC50为0.25 μg/ml,MIC90为1.0 μg/ml;伏立康唑MIC50为0.5 μg/ml,MIC90为1.0 μg/ml。结论西弗射盾子囊霉菌对于抗真菌药物具有较高耐药性,微生物实验室应重视真菌培养鉴定和药敏实验,以便临床医生尽早、准确、合理选用抗生素。医院感染管理科需要加强该菌医院感染控制工作。

  • 标签: 西弗射盾子囊霉菌 药物敏感性 生物学特征
  • 简介:摘要目的研究浙江省临床分离沙门菌血清型分布、耐药状况和携带毒力基因特征。方法收集2010年至2017年浙江省9个地区临床分离463株沙门菌,依据沙门菌属Kauffmann-White抗原表对比确定沙门菌属血清型。采用K-B纸片扩散法进行药物敏感试验。采用聚合酶链反应检测菌株11种毒力基因。结果463株沙门菌共检出35种血清型,其中优势血清型为鼠伤寒沙门菌[41.90%(194/463)]和肠炎沙门菌[22.25%(103/463)]。对氨苄西林耐药率[66.52%(308/463)]最高,其次为氨苄西林/舒巴坦[46.87%(217/463];对哌拉西林/他唑巴坦耐药率[3.24%(15/463)]较低;无亚胺培南和美罗培南耐药株;多重耐药菌株188株(40.60%)。毒力基因hilA、ssrB、marT、siiD、sopB、pagN在所有沙门菌株中都存在。毒力基因vexA只在伤寒沙门菌和都柏林沙门菌中检出;毒力基因icmF主要存在于肠炎沙门菌中;毒力质粒基因spvB和pefA表现为成对出现,且主要分布于猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌中;毒力基因cdtB则主要分布于伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌中。结论浙江省临床分离沙门菌以鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌为主,多重耐药形势严峻,且携带多种毒力基因。

  • 标签: 沙门菌属 血清分型 药物敏感试验 沙门菌毒力基因
  • 简介:摘要目的探讨下调微小RNA(miRNA,miR)-21与肾癌细胞舒尼替尼敏感相关性及其机制。方法应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人肾癌细胞株786-O、ACHN和正常肾小管上皮细胞株HK-2中miR-21表达。脂质体Lipofectamine 2000瞬时转染miR-21抑制剂及阴性对照无义序列至肾癌细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,并计算转染前后舒尼替尼24 h半数抑制浓度(IC50)。RT-qPCR及蛋白质印迹法(Western blot)验证miR-21对第10号染色体上缺失与张力蛋白同源磷酸酯酶基因(PTEN)表达影响。应用SPSS 20.0和GraphPad prism 7.0软件分析,两组间比较采用t检验。结果与HK-2比较,miR-21在786-O(0.005±0.001比1.001±0.063,t=27.269,P<0.01)、ACHN(0.005±0.001比0.257±0.060,t=7.218,P<0.01)中呈显著高表达。舒尼替尼对转染前后786-O、ACHN24 h IC50分别为16.52、4.79 μmol/L;15.31、3.66 μmol/L。miR-21抑制剂组PTEN mRNA表达水平显著高于空白对照组(786-O:5.295±1.088比1.005±0.119,t=6.789,P<0.01;ACHN:3.248±0.720比1.017±0.220,t=5.135,P<0.01)及无义对照序列组(786-O:5.295±1.088比0.966±0.212,t=6.763,P<0.01;ACHN:3.248±0.720比0.933±0.175,t=5.414,P<0.01),PTEN蛋白表达差异无统计学意义,但均出现一定程度升高。结论下调miR-21通过调控抑癌基因PTEN表达,影响肾癌细胞对舒尼替尼敏感性,并且能使舒尼替尼在一个较低浓度下发挥抑制肾癌细胞活性作用。

  • 标签: 肾细胞癌 微小RNA-21 舒尼替尼 靶向治疗 化疗敏感性
  • 简介:

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  • 作者: 马秋玲 杨敏 金洁
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2020-08-13
  • 出处:《中华血液学杂志》 2020年第04期
  • 机构:浙江大学医学院附属第一医院血液科,杭州 310003;河南中医药大学第二附属医院血液科,郑州 450002;河南中医药大学,郑州 450046,浙江大学医学院附属第一医院血液科,杭州 310003
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  • 简介:摘要目的探讨高压氧(HBO)处理肺癌A549细胞对常见肺癌化疗药物敏感影响及其作用机制。方法选取顺铂(Cis)、吉西他滨(Gem)及长春新碱(VCR)这3种临床上常用肺癌化疗药物作为研究对象。肺癌A549细胞培养完成后,按照实验要求,将细胞分成8组:对照组(不作HBO及药物处理),HBO组(只作0.20 MPa HBO处理3 h),Cis组(只给予20 μmol/L Cis处理),HBO+Cis组(HBO预处理3 h后加入20 μmol/L Cis),Gem组(只给予20 μmol/L Gem处理),HBO+Gem组(HBO预处理3 h后加入20 μmol/L Gem),VCR组(只给予20 μmol/L VCR处理),HBO+VCR组(HBO预处理3 h后加入20 μmol/L VCR)。CCK-8法检测A549细胞增殖情况;流式细胞术检测A549细胞凋亡率及细胞内活性氧(ROS)水平;Western blotting实验检测A549细胞凋亡蛋白表达。结果HBO+Cis组、HBO+Gem组和HBO+VCR组A549细胞存活率明显低于Cis组、Gem组和VCR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Cis、Gem和VCR单独处理组A549细胞凋亡比例分别为(44.18±1.27)%、(51.64±2.38)%和(40.38±1.59)%,HBO+Cis组、HBO+Gem组和HBO+VCR组A549细胞凋亡比例分别为(62.37±2.46)%、(75.28±3.59)%和(65.29±1.58)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。HBO+Cis组、HBO+Gem组和HBO+VCR组A549细胞中ROS水平明显高于Cis、Gem和VCR单独处理组,差异均有统计学意义(P<0.05)。加入ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)后,HBO+Cis组、HBO+Gem组和HBO+VCR组A549细胞凋亡被抑制,与未加NAC各组A549细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与Cis组、Gem组和VCR组比较,HBO+Cis组、HBO+Gem组和HBO+VCR组A549细胞凋亡蛋白Bcl-2表达水平明显降低,caspase-3、PARP和Bax表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与HBO+Cis组、HBO+Gem组和HBO+VCR组比较,Cis+HBO+NAC组、GEM+HBO+NAC组和VCR+HBO+NAC组A549细胞凋亡蛋白Bcl-2表达水平明显升高,caspase-3、PARP和Bax表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HBO处理能够增强肺癌A549细胞对常见肺癌化疗药物敏感性,其作用机制是通过上调肺癌A549细胞ROS水平实现

  • 标签: 高压氧 肺癌A549细胞 顺铂 吉西他滨 长春新碱 活性氧
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  • 简介:摘要目的构建围麻醉期护理质量敏感性指标,为监测与评价围麻醉期护理质量提供标准、量化依据。方法以Donabedian"结构-过程-结果"质量评估模型为理论基础,采用约翰霍普金斯循证护理方法拟定指标初稿,德尔菲法确定指标终稿,层次分析法计算各指标权重。结果经过两轮专家函询,专家积极系数均为100%,权威系数为0.903和0.910,肯德尔协调系数为0.139和0.189,差异有统计学意义(P<0.05)。形成了包含3项一级指标,15项二级指标和66项三级指标的围麻醉期护理质量敏感性指标。结论基于循证和德尔菲法构建围麻醉期护理质量敏感性指标具有科学性和可靠性,可为麻醉科护理质量控制和持续质量改进提供参考依据。

  • 标签: 麻醉护理 循证护理 敏感指标 质量控制 德尔菲法 层次分析法
  • 简介:摘要儿茶酚胺敏感性室性心动过速(catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia,CPVT)是由情绪应激或运动诱发一种高致死性遗传性心律失常,可突发快速多态性室性心动过速和室颤,并可能导致晕厥或猝死,预后不良。基因检测是确诊该疾病方法。目前已发现该病与RyR2、CASQ2、TECRL等基因异常有关,其突变会影响钙稳态导致心脏正常电生理活动异常,从而引起延迟后除极,继而引发恶性心律失常。该文对儿茶酚胺敏感性室性心动过速中新型致病基因TECRL基因突变进行综述,通过对既往文献报道中该突变基因认识和学习,以进一步探索该病发病机制,学习应对恶性心律失常发生,并促进对该病进行精准治疗。

  • 标签: 儿茶酚胺敏感性室性心动过速 TECRL基因
  • 简介:摘要目的研究核酸内切酶RNaseH-1对使用端粒替代延长(ALT)机制来延长端粒骨肉瘤细胞放射敏感性影响及机制。方法通过慢病毒转染构建过表达RNaseH-1ALT骨肉瘤细胞U2OS和端粒酶阳性骨肉瘤细胞143B。对转染后细胞使用CCK8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期。克隆形成实验检测放射敏感性,免疫荧光实验检测细胞DNA损伤(γ-H2AX灶点)情况,蛋白印迹法实验检测相关蛋白表达水平。结果过表达RNaseH-1后U2OS细胞增殖能力显著降低,且细胞周期阻滞于G1期(均P<0.05)。U2OS细胞中RNaseH-1过表达使ATM和Chk2磷酸化水平显著升高、同源重组相关蛋白RAD51和BRCA1表达显著降低,并导致细胞中DNA损伤水平显著上升、细胞放射敏感性增强(均P<0.05)。而过表达RNaseH-1不对端粒酶阳性143B细胞产生抑制效应(P>0.05)。结论过表达RNaseH-1抑制了端粒酶阴性骨肉瘤细胞并增强了放射敏感性,其机制可能是RNaseH-1在ALT细胞中抑制同源重组修复并激活ATM信号通路。

  • 标签: RNaseH-1基因 骨肉瘤细胞系 端粒的替代延长 放射敏感性
  • 作者: 于淼 张晶 陈玉迪 刘擘 宋晓婷 刘晶 张雪 赵作涛
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2020-09-15
  • 出处:《中华皮肤科杂志》 2020年第09期
  • 机构:北京大学第一医院皮肤性病科 国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心 皮肤病分子诊断北京市重点实验室 100034;北京大学护理学院 100191,北京中医药大学第三附属医院皮肤性病科 100029,北京大学第一医院皮肤性病科 国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心 皮肤病分子诊断北京市重点实验室 100034
  • 简介:摘要目的检验中文版瘙痒患者生活质量问卷(ItchyQoL)信效度以及敏感性。方法对英文版ItchyQoL进行翻译、回译和文化调试,确定中文版问卷条目。2019年1-12月于北京大学第一医院皮肤科门诊纳入218例皮肤源性瘙痒患者进行调查研究。在患者入组时和入组后2周使用中文版ItchyQol问卷、皮肤病学生活质量指数(DLQI)、数值评定量尺(NRS)进行评估。采用验证性因子分析中文版ItchyQoL结构效度,Cronbach′s α系数估计问卷内部一致性。采用Spearman相关系数分析中文版ItchyQoL与DLQI、NRS评分相关性(聚合效度)以及中文版ItchyQoL、DLQI、NRS变化量相关性(敏感性)。结果中文版ItchyQoL共计22个条目,包含"症状"、"功能活动"和"情绪"三个维度,这些维度Cronbach′ s α系数分别为0.946、0.883、0.953,提示内部一致性极好。在入组后2周时,NRS与ItchyQoL总分强相关(rs = 0.700,P<0.01),与"情绪"、"功能活动"、"症状"维度评分均呈中度相关(rs分别为0.452、0.673、0.692,均P<0.01);DLQI与ItchyQoL总分强相关(rs = 0.887,P<0.01),与"功能活动"、"症状"维度评分呈强相关(rs分别为0.886、0.750,均P<0.01),与"情绪"维度评分呈中度相关(rs = 0.674,P<0.01)。与入组时比,2周后ItchyQoL问卷总分变化量与NRS变化量呈中度相关(rs = 0.642,P<0.01),与DLQI变化量呈强相关(rs = 0.757,P<0.01);ItchyQoL问卷中"症状"与"功能活动"评分变化量与NRS变化量分别呈中度相关(rs分别为0.648,0.549,均P<0.01),"情绪"评分变化量与NRS变化量呈弱相关(rs = 0.225,P<0.01);ItchyQoL问卷中"症状"与"功能活动"评分变化量与DLQI变化量均呈强相关(rs分别为0.755,0.703,均P<0.01),"情绪"评分变化量与DLQI变化量呈中度相关(rs = 0.401,P<0.01)。而且,入组2周后不同NRS和DLQI评分组间患者中文版ItchyQoL问卷总分和各维度评分差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论中文版ItchyQoL具有良好信效度,可用于我国皮肤源性瘙痒患者生活质量评估。

  • 标签: 瘙痒症 生活质量 问卷调查 结果可重复性
  • 简介:摘要目的探讨磁敏感序列—增强T2*加权血管成像(enhanced T2 star weighted angiography,ESWAN)序列多定量参数预测子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)状态价值。材料与方法回顾性分析35例EC患者资料,其中MSI 13例,微卫星稳定(micro satellite stability,MSS)22例,所有患者术前均行1.5 T MRI检查,扫描序列包含ESWAN,经后处理生成幅度图、相位图、R2*图和T2*图。由两名观察者分别测量两组病例肿瘤实质区幅度值、相位值、R2*值和T2*值,采用组内相关系数检验两名观察者对各参数值测量结果一致性,采用独立样本t检验或Mann-Whitney U检验比较两组病例各参数值差异,采用受试者工作特征曲线评估有差异参数预测EC MSI效能。结果两名观察者测量各组数据一致性较好(ICC> 0.75)。MSI组R2*值[(15.303±2.274) Hz]大于MSS组[(13.051±1.595) Hz],MSI组T2*值[(71.883±8.323) ms]小于MSS组[(84.246±12.553) ms],差异具有统计学意义(P<0.05);两组间幅度值、相位值无统计学差异(P>0.05)。R2*值和T2*值预测EC MSIAUC、敏感度、特异度分别0.797、84.6%、63.6%和0.787、84.6%、68.2%。结论ESWAN序列R2*值、T2*值能够预测EC MSI,具有一定临床应用价值。

  • 标签: 子宫内膜肿瘤 磁共振成像 微卫星不稳定 预测