简介:为探讨1例急性粒单核细胞自血病原始细胞表达血小板特异性抗原的机制,分离外周血或骨髓单个棱细胞,采用常规染色和普通细胞化学染色观察其形态学特性,采用流式细胞仪双荧光分析免疫表型,单荧光胞浆蛋白标记分析周期蛋白表达和免疫印迹进一步证实周期蛋白D3的表达情况,采用周期蛋白和DNA双标记分析周期蛋白Ds表达与细胞周期的关系。结果表明,在白血病原始细胞中CD13^++HLA-DR^+细胞为94.69%,CD13^++CD34^+细胞为96.86%,CD41a^++CD34^+细胞为41.6%,CD13^++CD41a^+细胞为40.0%,周期蛋白D3表达明显升高,大部分细胞表达周期蛋白D3,周期蛋白D3阳性细胞在细胞周期各时段所占的比例分别为。G1期52.1%,S期9.9%,G2+M期38.0%。结论:周期蛋白D3的异常表达导致此白血病细胞表达血小板特异性抗原,可能在白血病的发生中起重要的作用。
简介:目的制备胃动素受体多克隆抗体和研究该受体在人胃中的组织定位.方法通过合成肽耦联钥孔戚血蓝蛋白(keyholelimpethemocyanin,KLH)制备抗体,以ELISA方法测定效价.用含有GPR38基因(胃动素受体)的质粒转染293细胞株,以RT-PCR方法鉴定.Westernblot和免疫组织化学法检测转染的293细胞和组织中胃动素受体的表达.结果制备的兔抗人的多抗效价达1∶500000,有较好的特异性.成功转染293细胞,该细胞能够瞬时表达胃动素受体,而该受体在人胃窦胃体的黏膜腺上皮中表达.结论应用合成肽-KLH成功地制备了胃动素受体的兔抗人多克隆抗体,用该抗体检测到人胃窦胃体黏膜上皮细胞存在胃动素受体的表达.
简介:目的:对大肠杆菌表达的人源重组肝细胞生长肽进行分离纯化获得目的蛋白rhALR。方法:其表达产物在大肠杆菌中以不溶性包含体形式存在,经过超声破菌、包含体抽提、洗涤处理、使包含体纯度达75%以上,用8mol/L尿素变性溶解包含体沉淀后上清直接稀释复性,再经浓缩、透析、离子交换凝胶过滤等系列纯化步骤。结果:纯化后目的蛋白纯度达95%以上。回收率达20%。
简介:摘要目的通过测定类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)患者血浆蛋白Z依赖的蛋白酶抑制剂(proteinZ-dependentproteaseinhibitor,ZPI)水平,研究探讨ZPI在易栓性疾病RA患者血浆中水平的变化和意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定42例RA患者及33例健康对照者血浆ZPI的水平。结果(1)RA组血浆ZPI水平明显高于对照组血浆ZPI水平,差异有统计学意义(P<0.01);(2)RA组血浆纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)水平、纤维蛋白(原)降解产物(fibrin(-ogen)degradationproducts,FDP)水平明显高于对照组血浆FIB、FDP水平,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)RA组血浆ZPI水平与RA组血浆FIB水平呈正相关(P<0.01)。结论ZPI可能参与了易栓性疾病RA的抗凝血过程,在RA患者体内代偿性增高。
简介:目的检测胃癌组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和E-钙黏附素(E-cadherin)的表达,探讨其与胃癌侵袭转移的关系。方法对我科2003年12月至2004年4月30例胃癌手术患者,采用免疫组化染色检测胃癌组织中MMP-2和E-cadherin的表达情况。结果70%(21/30)的胃癌组织中MMP-2表达阳性。MMP-2表达阳性与浸润深度(P=0.022)、淋巴结转移(P=0.030)和肿瘤分化程度(P=0.043)密切相关,但与性别、年龄、肿瘤位置和直径、Lauren分型及淋巴管侵袭无关(P〉0.05)。46.7%(14/30)的胃癌组织中E-cadherin表达阴性。E-cadherin表达阴性与Lauren分型(P=0.026)、肿瘤分化程度(P=0.011)、淋巴结转移(P=0.038)和淋巴管侵袭(P:0.001)密切相关。结论胃癌组织中MMP-2表达上调和E-cadherin表达下移可能参与肿瘤侵袭转移的发生。
简介:目的:研究端粒酶在胃粘膜异型增生中的表达,探讨端粒酶与胃粘膜异型增生癌变的关系。方法:选择具有5~15年随访资料的胃粘膜异型增生病例54例(癌变11例,未癌变43例),胃癌11例,采用石蜡切片原位分子杂交技术,检测胃癌、胃异型增生组织中端粒酶的hTERTmRNA的表达。采用千屏公司图像分析系统检测组织中端粒酶hTERTmRNA表达着色的面密度,所得数据采用t检验,P<0.001为有显著性差异。结果:11例胃癌组织中,端粒酶着色表达的面密度(阳性目标总面积,统计场总面积)平均值(-↑x±s)0.1748±0.1235,11例随访5~15年癌变的胃粘膜异型增生的端粒酶表达的面密度为0.1824±0.0109,随访5~15年未癌变的胃粘膜异型增生端粒酶表达的面密度平均值为0.0285±0.0190。经t检验,除胃癌组与癌变组之间无显著性差异外,各组分别比较均有显著性差异。表明端粒酶是胃粘膜异型增生癌变的关键性因素,是肿瘤早期检测的指标之一。结论:端粒酶表达是胃粘膜异型增生癌变的关键性因素,检测端粒酶表达,是筛选高危癌变胃粘膜异型增生的有效指标。
简介:背景:Hedgehog信号通路不仅参与骨髓间充质干细胞的成骨向分化,而且是位于RANKL-RANK-OPG系统调节轴上游的重要通路之一,对成骨细胞RANKL的分泌表达具有重要的调控作用,其调控机制已逐步被揭示。目的:对Hedgehog信号通路调控成骨细胞RANKL表达的研究现状进行综述。方法:通过检索CNKI,GoogleScholar,PubMed等数据库,分别以"Hedgehog,成骨细胞,骨髓间充质干细胞,甲状旁腺激素相关蛋白,环磷酸腺苷应答元件结合蛋白,活化T细胞核因子,核因子κB受体活化因子配体"和"Hedgehog,Osteoblast,BMSCs,PTHrP,CREB,NFAT,RANKL"为检索词进行检索,审阅有关Hedgehog信号通路与成骨细胞RANKL表达相关的文献,根据纳入标准最终选取37篇文献进行综述。结果与结论:Hedgehog信号蛋白可促使骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,同时又可以通过上调细胞内甲状旁腺激素相关蛋白的表达,进一步激活下游细胞因子环磷酸腺苷应答元件结合蛋白和活化T细胞核因子,两者协同促使成骨细胞RANKL基因表达,进而增加破骨前体细胞向破骨细胞分化、成熟。
简介:目的探讨多发性硬化(MS)患者外周血淋巴细胞Fas和FasL的表达及其与病情严重程度的关系。方法采用流式细胞术(FCM)检测22例复发缓解型MS患者外周血淋巴细胞Fas和FasL的表达情况,并选择16例同期住院病人作为对照。结果①复发期MS患者Fas表达(18.25±10.69)均高于缓解期MS患者和对照组(分别为11.43±6.83,9.68±5.24);复发期MS患者FasL表达(2.79±2.47)均高于缓解期MS患者和对照组(分别为1.06±0.58,0.76±0.61)。②病损程度为重度的MS患者Fas和FasL的表达(分别为21.63±12.74,3.51±2.06)均高于中度的MS患者(分别为12.82±6.15,1.94±1.13)③MS患者Fas和FasL表达之间呈正相关(r=0.158,P=0.003)。结论Fas和FasL与MS的临床复发和病情的严重程度有关;Fas和FasL涉及MS的发病机制。
简介:摘要目的检测在青年人群的动脉粥样硬化患者中microRNA的差异性表达谱。方法随机选择健康查体的青年人60例,经动脉超声检查分出动脉粥样硬化组及非动脉粥样硬化组,每组各30人。运用荧光定量PCR法检测这60名患者的microRNA的表达,绘制动脉粥样硬化患者的microRNA表达谱;进一步分析microRNA与动脉粥样硬化的相关性。结果(1)在青年动脉粥样硬化人群,可以看到microRNA126、microRNA221、microRNA33、microRNA155、microRNA181b、microRNA222、microRNA21均有差异性表达。(2)和正常人相比,动脉粥样硬化人群中,microRNA126、microRNA221、microRNA33、microRNA155、microRNA181b下降;microRNA222、microRNA21明显升高,差异有明显的统计学意义(P<0.05)。结论(1)在青年动脉粥样硬化及非动脉粥样硬化患者中,明显存在部分microRNA的差异表达;(2)microRNA21、microRNA33、microRNA126、microRNA221、microRNA222、microRNA155、microRNA181b在青年动脉粥样硬化患者中存在差异表达。
简介:目的通过免疫组化检测原发性肝癌中嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)的表达,揭示依赖于嘧啶核苷磷酸化酶转化的化疗药物在临床应用的分子基础.方法从我院外科2001年6月至2004年6月间183例原发性肝癌手术切除标本中随机抽取40例作为实验组.术前均未经任何放化疗.并随机抽取同期肝内胆管结石手术肝切除标本40例,且证实为正常肝组织,作为对照组.使用SP免疫组化法分别检测肝癌细胞与正常肝细胞PyNPase的表达.结果原发性肝癌细胞和正常肝细胞PyNPase的表达指数分别为62.34+/-19.53和12.61+/-10.17,有显著性差异(P<0.05).不同组织分型的肝癌组织的PyNPase的表达也有显著的差异(P<0.05).结论原发性肝癌细胞中PyNPase呈高表达,则提示其对依赖于嘧啶核苷磷酸化酶转化的化疗药物如氟铁龙,希罗达等更为敏感.
简介:【摘要】目的 检测在青年人群的动脉粥样硬化患者中 microRNA 的差异性表达谱。方法 随机选择健康查体的青年人 60 例,经动脉超声检查分出动脉粥样硬化组及非动脉粥样硬化组,每组各 30 人。运用荧光定量 PCR 法检测这 60 名患者的 microRNA 的表达,绘制动脉粥样硬化患者的 microRNA 表达谱;进一步分析 microRNA 与动脉粥样硬化的相关性。结果 ( 1 )在青年动脉粥样硬化人群,可以看到 microRNA126 、 microRNA221 、 microRNA33 、 microRNA155 、 microRNA181b 、 microRNA222 、 microRNA21 均有差异性表达。( 2 )和正常人相比,动脉粥样硬化人群中, microRNA126 、 microRNA221 、 microRNA33 、 microRNA155 、 microRNA181b 下降; microRNA222 、 microRNA21 明显升高,差异有明显的统计学意义 (P<0.05) 。结论 ( 1 )在青年动脉粥样硬化及非动脉粥样硬化患者中,明显存在部分 microRNA 的差异表达;( 2 ) microRNA21 、 microRNA33 、 microRNA126 、 microRNA221 、 microRNA222 、 microRNA155 、 microRNA181b 在青年动脉粥样硬化患者中存在差异表达。