简介:目的:构建以绿色荧光蛋白eGFP为报告基因的毕赤酵母表达载体,为后续致病真菌功能基因的eGFP融合基因过表达作铺垫。方法:利用In-Fusion系统构建eGFP的表达载体PPICZαB-eGFP,氯化锂转化毕赤酵母X33,通过含Zeocin(100μg/mL)抗性的YPD培养基筛选,将得到的菌落X33-eGFP以引物3'-AOX/5'-AOX及eGFP-F/eGFP-R进行PCR,产物行琼脂糖凝胶电泳、测序验证eGFP片段是否成功插入,最后甲醛诱导表达。结果:以X33-eGFP为模板的PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果显示片段eGFP成功插入至载体中,测序验证无突变。经甲醛诱导后的毕赤酵母X33-eGFP在蓝色荧光激发下,可观察到发出绿色荧光。结论:成功建立了毕赤酵母X33-eGFP,且证明了eGFP片段可以在毕赤酵母AOX启动子中得到表达。
简介:Inordertoacknowledgethemulti-infectiondataofSTDpatientsandimprovetheprophylaxisandtherapyforSTDs,297patientsand30healthypeoplewereexaminedusingtheHSV-2plasmaantibody.TheresultsshowedthatallkindsofSTDpatientswereinfectedbyHSV-2indifierentratios.thehighestratiooccurringinsyphilispatients.
简介:目的:探讨男性肿瘤患者化疗后勃起功能状况。方法:选取我院2011年1月至2013年12月间的50例初次接受化疗的男性肿瘤患者为研究对象,采取国际勃起功能指数-5(IIEF-5)进行评估化疗前后勃起功能状况。结果:治疗有效率为58.0%。其中,CR14例,PR15例,PD21例,SD0例。化疗前勃起功能障碍32.0%,化疗后勃起功能障碍83.0%,化疗前后勃起功能障碍发生率比较差异有统计学意义(P<0.05);化疗后消化道肿瘤、鼻咽癌、肺癌、淋巴瘤、软组织肿瘤患者IIEF-5评分较化疗前有不同程度的降低,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗后不同病理类型间IIEF-5评分比较无统计学意义(P>0.05)。结论:临床中男性肿瘤患者实施化疗后会增加勃起功能障碍,增加其发病率。
简介:Objective:TounderstandthechangeofTh1/Th2andTc1/Tc2balanceinpatientswithsecondaryearlysyphilis.Methods:PeripheralbloodThandTccellsubpopulationswereexaminedbythree-colorflowcytometryin30patientswithsecondaryearlysyphilisand20healthysubjects.Results:PercentagesofCD3^+,CD4^+TcellsandtheratioofCD4^+/CD8^+andNKcellsinsyphiliticpatientsweresignificantlylowerthaninthecontrolgroup(P<0.001),butnostatisticaldifferencewasfoundinpercentagesofCD8^+andCD19^+cellsbetweenthetwogroups(P>0.05).ThepercentageofTh1cellsandratiosofThl/Th2andTcl/Tc2insyphiliticpatientswereclearlydecreasedascomparedtothoseincontrois(P<0.001-0.01),whereaspercentagesofTc0andTc2cellsinsyphiliticswashigherthanthoseincontrols(P<0.001).Conclusion:Therecouldbeadisturbanceofcellularimmunityandtherelativelyintactfunctionofhumoralimmunityinsecondarysyphilis.ItispostulatedthatthepolarizationtowarddevelopmentofTh2andTc2cellsandtheirassociatedcytokinesmightbeinvolvedintheincompleteclearanceoftreponemesandthedevelopmentofchronicinfection.
简介:目的:探讨角质形成细胞Jak/sTAT信号传导通路上的STAT1、STAT3、SOCS1、SOCS34个相关基因在银屑病发病中的作用。方法:收集10例银屑病患者皮损区和非皮损区组织各一块,用实时荧光定量PCR检测组织角质形成细胞中STAT4、STAT3、SOCS1、SOCS3mRNA的表达,计算各基因mRNA的相对表达水平,探讨其与银屑病皮损发生的关系。结果:银屑病患者皮损区角质形成细胞STAT1、STAT3、SOCS1、SOCS3基因的mRNA表达水平(△ct值分别为一1.9±1.6、0.6±1.6、0.1±1.0、-0.6±1.1)较非皮损区(△Ct值分别为1.0±1.6、3.7±1.5、4.2±1.2、3.94-1.3)明显增高(P值均〈0.01);银屑病患者中角质形成细胞STAT1、STAT3mRNA的表达水平分别与SOCS1和SOCS3mRNA的表达水平呈正相关(r=0.84、0.83,P值均〈0.01)。结论:角质形成细胞Jak/STAT信号传导通路相关基因可能与银屑病发病有关,需要进行结构与功能相关性的研究以进一步明确。
简介:早泄(PE)是一种常见的男性性功能障碍,目前的研究尚未能揭示所有PE患者的病因,因此进一步阐明PE发病机制以改善PE治疗思路具有重要意义。近年的研究热点显示PE还受遗传因素的影响,PE发病与基因多态性之间的相关性受到了重视,并主要集中在5-羟色胺(5-HT)相关基因研究上。本文旨在综述原发性PE相关5-HT转运体基因启动子区(5-HTTLPR)基因多态性方面的发病机制的研究进展。
简介:背景:口腔扁平苔藓(OLP)是一种病因不明的自身免疫性疾病。其发病机制是以基底层角质形成细胞的凋亡为特征,并由CD8+活化淋巴细胞与基底层细胞表面表达的未知抗原接触而触发。基底膜带(BM)降解,淋巴细胞可移行通过,包括蛋白水解酶中已知的基质金属蛋白酶(MMPs)。目的:本研究旨在评价OLP患者活检标本中MMPs系列的表达,以揭示不同OLP临床类型之间的相关性。方法:研究纳入26例确诊为OLP的患者(14例网状型和12例糜烂型),还有7例健康志愿者作为阴性对照。结果:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)显示糜烂型扁平苔藓(E-OLP)的所有患者MMPmRNAs表达水平都高于网状型扁平苔藓(R-OLP)。而且,MMP-1和MMP-3可能主要与糜烂型的发展有关。本研究还评估了特异性金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)。结论:OLP不同的临床表现与MMPmRNA水平显著相关。糜烂型与网状型口腔扁平苔藓基质金属蛋白基因表达@MazzarellaN@FemianoF.@GombosF.@M.Guiliano$DepartmentofExperimentalM...
简介:Objective:Toconstructarecombinantplasmidcontainingtheoutermembraneprotein2(Omp2)geneofChlamydiatrachomatisandexpressOmp2inE.coli.Methods:Theomp2geneofC.trachomatisserovarDwasclonedintopQE30vectorfollowingPCRamplificationfromgenomicDNA.E.coliM15transformantswereinducedtoexpressthefusionproteinbyIPTGandtheproductwasidentifiedbySDS-PAGEandWesternblot.Results:ConfirmedbyenzymecleavageanalysisandDNAsequencing,acorrectrecombinantplasmidpQE30/omp2wasconstructed.Thefusionproteinfromthetransformantswasapproximately60kDainsizeinSDS-PAGEanalysis,whichcouldspeciallyreactwithanti-6×HismousemonoclonalIgGantibodies.Conclusion:WesuccessfullyexpressedOmp2inE.coilM15,providinganefficientandsimplesystemforassayingtheimmunologicalpropertiesofOmp2.
简介:目的检测寻常性银屑病皮损中miR-320及其下游靶基因survivinmRNA的表达水平。方法采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例寻常性银屑病患者皮损及40名健康对照皮肤中miR-320、survivinmRNA的表达水平,运用双荧光素酶报告实验验证survivin是miR-320的靶基因。miR-320和survivin表达水平两组间比较采用t检验,寻常性银屑病皮损中miR-320与survivin表达的相关性采用Pearson相关分析。结果与健康对照皮肤相比,寻常性银屑病皮损中miR-320表达量为对照组的(0.561±0.11)倍,表达明显下调(t=3.06,P〈0.05);survivinmRNA表达量为对照组的(2.034±0.26)倍,表达水平明显上调(t=3.35,P〈0.05);双荧光素酶报告实验结果提示survivin是miR-320的靶基因,寻常性银屑病皮损中miR-320与survivinmRNA呈负相关(r2=0.634,P〈0.05)。结论miR-320可能通过调控其下游靶基因survivin的异常表达参与寻常性银屑病皮损的形成过程。