简介：目的探讨阿托伐他汀对大鼠冠状动脉微栓塞（CME）后心肌细胞凋亡及caspase-12活化的影响及意义。方法选择存活的60只大鼠随机分为假手术组、CME组、灌胃对照组、他汀组，每组15只；后3组经左心室注入微栓塞球构建CME模型；他汀组术前7d给予阿托伐他汀10mg／kg灌胃，灌胃对照组给予等量生理盐水灌胃，1次jd，连续7d。各组术后6h分别应用心脏超声检测心功能指标；TUNEI。检测心肌细胞凋亡；免疫印迹法检测活化caspase3及caspase12的表达。结果与假手术组比较，CME组I，VEF显著下降，左心室短轴缩短率和心排血量下降及左心室舒张末内径增加（P〈0．05）；与CME组比较，他汀组心功能明显改善（P〈0．05）。与假手术组比较，cME组心肌细胞凋亡率、活化caspase3、caspase-12含量显著增加（P〈0．05），与CME组比较，他汀组心肌细胞凋亡率、活化caspase3、caspase-12含量显著减少（P〈0．05）。结论阿托伐他汀预处理治疗，可改善心功能，其机制可能是，阻断心肌细胞凋亡caspase12介导的内质网应激凋亡途径的激活。

简介：[摘要]目的：观察miR-146a激动剂干预前后，高糖诱导心肌细胞中miR-146a的表达和炎症因子、p38MAP/NF-κ信号传导通路的激活情况，探讨糖尿病心肌病（DCM）的干预靶点。方法：将实验动物豚鼠分为4组，每组10只，分别为：正常对照组、高糖诱导组、miR-146a激动组、阴性核苷酸组。各组心肌细胞均继续培养48 h后收集细胞及培养基上清进行指标测定。各组心肌细胞建模培养后分别进行免疫荧光实验计算单个细胞面积及相同面积下细胞数，Western blot法检测心肌细胞NF-κB p65蛋白、p38MAPK 蛋白、IL-6和TNF-α的表达，RT-PCR检测心肌细胞miR-146a的表达。结果：1、α-actinin免疫荧光染色可见高糖诱导组较正常对照组心肌细胞明显肥大，细胞表面积增大，相同视野里心肌细胞个数明显减少，心肌细胞α-actinin成有规则的条索状排列，表明高糖诱导组心肌肥大细胞模型诱导成功；2、与正常对照组比较，高糖诱导组心肌细胞p38MAPK蛋白、NF-κB p65 蛋白、L-6及TNF-α的浓度水平均显著上升，且高糖诱导组miR-146a的表达亦明显增加。3、与高糖诱导组相比，miR-146a激动组p38蛋白、NF-κB蛋白、IL-6和TNF-α浓度又有显著增加，miR-146a的表达亦明显增加，且差异均具有统计学意义（P＜0.05）。而阴性核苷酸组与高糖诱导组比较，p38MAPK蛋白、NF-κB蛋白、IL-6及TNF-α、miR-146a的表达无明显改变。结论：miR-146a可以调控高糖诱导心肌细胞炎症因子水平及p38MAP/NF-κ信号传导通路的激活，这可能是DCM的干预靶点。

简介：摘要目的探讨沉默长链非编码RNA SNHG7(LncRNA SNHG7)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation，H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其对miR-181b-5p的靶向调控作用。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞，将其随机分为对照组、H/R组、H/R+si-NC组、H/R+si-SNHG7组、H/R+si-SNHG7+anti-miR-NC组和H/R+si-SNHG7+anti-miR-181b-5p组。检测乳酸脱氢酶、丙二醛的含量与超氧化物歧化酶的活性；用流式细胞术检测细胞凋亡率；用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SNHG7、miR-181b-5p的表达量；用双荧光素酶报告实验验证SNHG7、miR-181b-5p的靶向关系；蛋白免疫印迹法检测Bax和Bcl-2蛋白的表达量。结果与对照组相比，H/R组心肌细胞中SNHG7的表达显著升高(P<0.05)，miR-181b-5p的表达水平显著降低(P<0.05)，乳酸脱氢酶、丙二醛的含量显著升高(P<0.05)，超氧化物歧化酶的活性显著降低(P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(P<0.05)，Bax蛋白水平显著升高(P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05)；与H/R组、H/R+si-NC组相比，H/R+si-SNHG7组乳酸脱氢酶、丙二醛的含量显著降低(P<0.05)，超氧化物歧化酶的活性显著升高(P<0.05)，细胞凋亡率显著降低(P<0.05)，Bax蛋白水平显著降低(P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05)；双荧光素酶报告实验证实SNHG7可靶向结合miR-181b-5p；干扰miR-181b-5p的表达可减弱沉默SNHG7对H/R诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡的作用。结论沉默SNHG7可能通过上调miR-181b-5p的表达抑制H/R诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡，从而对心肌细胞发挥保护作用。

简介：摘要目的探讨沉默信息调节因子1（SIRT1）的氧连乙酰葡萄糖胺（O-GlcNAc）糖基化修饰介导的核因子（NF）-κB信号通路对心肌细胞损伤的调节作用。方法为了分析O-GlcNAc糖基转移酶（OGT）对SIRT1功能的影响，将H9c2细胞分为正常葡萄糖（NG）组、高糖（HG，30 mmol/L）组、HG+对照小干扰RNA（HG+siNC）组、HG+OGT siRNA（HG+siOGT）组、HG+对照质粒（HG+vector）组、HG+OGT过表达质粒（HG+OGT）组，每组6个复孔。为了分析O-GlcNAc糖基化对SIRT1蛋白功能的影响，将H9c2细胞分为NG组、HG组、HG+二甲基亚砜（HG+DMSO）组、HG+OGT抑制剂（HG+Ac-5SGlcNAc）组和HG+OGA抑制剂（HG+NButGT）组，每组6个复孔。为了分析O-GlcNAc修饰位点突变对SIRT1功能的影响，将H9c2细胞分为NG组、HG组、HG+Vector组、HG+SIRT1WT组和HG+SIRT1S549A组，每组6个复孔。采用Western blotting检测细胞中SIRT1蛋白表达和O-GlcNAc糖基化修饰水平，以及NF-κB信号通路表达水平，使用2′，7′-二氯荧光素和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测试剂盒检测细胞活性氧（ROS）和凋亡水平，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清中炎症因子［白细胞介素（IL）-6、IL-1β和肿瘤坏死因子α（TNF-α）］水平。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果与NG组相比，HG组H9c2细胞中SIRT1蛋白降低（P<0.001），OGT的表达水平升高（P<0.001），同时H9c2细胞ROS和凋亡水平增加（P<0.05），NF-κB信号通路介导的炎症反应被激活（P<0.05）；与HG+siNC组和HG+DMSO组比较，HG+siOGT组和HG+Ac-5SGlcNAc组H9c2细胞中SIRT1的O-GlcNAc修饰水平均降低（P<0.001），细胞内ROS和凋亡水平降低（P<0.05），NF-κB信号通路介导的炎症反应被抑制（P<0.05）；与HG+Vector组和HG+DMSO组比较，HG+OGT组和HG+NButGT组H9c2细胞中SIRT1的O-GlcNAc修饰水平增加（P<0.05），细胞ROS和凋亡水平增加（P<0.05），NF-κB信号通路介导的炎症反应被激活（P<0.05）。与HG+SIRT1WT组比较，HG+SIRT1S549A组中H9c2细胞增殖能力降低（P<0.01），细胞ROS和凋亡水平均增加（P<0.01），NF-κB信号通路水平增加（P<0.001）。结论高浓度葡萄糖通过增加SIRT1蛋白的O-GlcNAc糖基化修饰水平，抑制SIRT1的蛋白水平和功能，并导致细胞内NF-κB信号通路的激活，增加高糖诱导的细胞炎症反应，促进心肌细胞损伤。

简介：摘要目的基于p38MAPK通路研究血府逐瘀汤含药血清减轻心肌细胞缺氧复氧损伤的作用。方法制备低剂量、中剂量、高含量血府逐瘀汤含药血清，培养心肌H9c2细胞并分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。除对照组外，其余各组给予缺氧复氧处理，同时用含有10%空白血清或10%含药血清的培养基进行干预，检测培养基中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)及磷酸肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme，CK-MB)的含量、心肌细胞的存活率及凋亡率、细胞中B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白质(Bcl-2-associated X Protein，Bax)、裂解型caspase-3(cleaved caspase-3)、磷酸化p38MAPK(phosphorylation-p38MAPK，p-p38MAPK)、磷酸化JNK(phosphorylation-JNK，p-JNK)、磷酸化ERK(phosphorylation-ERK，p-ERK)的表达水平。结果与对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组相比，模型组培养基中LDH、CK-MB的含量、凋亡率、细胞中Bax、cleaved caspase-3、p-p38MAPK、p-JNK的表达水平均显著升高，存活率及细胞中Bcl-2、p-ERK的表达水平均显著降低，组间差异均具有统计学意义(F值分别9.39、10.27、13.28、13.09、14.59、10.40、8.17，8.31、11.37、9.38，P值均<0.05)。与模型组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组心肌细胞培养基中LDH、CK-MB的含量明显减少[LDH(U/L)：(185.68±25.73)比(131.22±18.29)，(104.57±13.27)，(78.34±10.93)；CK-MB(U/L)：(24.58±4.48)比(16.79±2.15)，(11.32±1.46)，(9.01±1.25)，P值均<0.05]；心肌细胞的存活率明显增加、凋亡率明显降低[存活率(%)：(42.59±6.29)比(56.51±5.62)，(67.32±6.11)，(80.34±8.27)；凋亡率(%)：(27.68±5.56)比(17.03±2.84)，(12.55±2.02)，(8.68±1.09)，P值均<0.05]；心肌细胞中Bcl-2的表达水平明显增加、Bax及cleaved caspase-3的表达水平明显降低[Bcl-2：(0.24±0.05)比(0.37±0.06)，(0.59±0.09)，(0.77±0.12)；Bax：(0.88±0.15)比(0.64±0.09)，(0.49±0.08)，(0.34±0.06)；Cleaved caspase-3：(1.15±0.32)比(0.90±0.14)，(0.67±0.10)，(0.38±0.06)，P值均<0.05]；心肌细胞中p-p38MAPK的表达水平明显降低[(1.22±0.20)比(0.93±0.13)，(0.78±0.07)，(0.47±0.06)，P值均<0.05]；各组间p-JNK、p-ERK的表达水平无明显变化(P>0.05)。结论血府逐瘀汤含药血清能够减轻心肌细胞缺氧复氧损伤，其作用机制可能与抑制p38MAPK通路激活有关。

简介：目的研究热休克因子1（HSF1）及凋亡信号调节激酶1（ASK1）对过氧化氢（H2O2）刺激后心肌细胞内活性氧簇水平（ROS）变化的影响。方法对不同组培养心肌细胞分别单独转染质粒HSF1，ASK1，及共转染HSF1＋ASK1，48h待其充分表达后用1mmol／LH2O2刺激心肌细胞30min，检测细胞内ROS水平，并与相应转染后未刺激组及未转染的对照组比较，观察ROS水平的变化。结果（1）所有H2O2刺激组心肌细胞内ROS水平均高于相同转染条件下的非刺激组（P〈0．05）；（2）相同H2O2刺激条件下，各组ROS水平：HSF1组低于对照组（P〈0．05），ASK1组与对照组无显著差异，HSF1＋ASK1组与单转HSF1组相比有升高的趋势；（3）相同H2O2刺激条件下，各组刺激后比刺激前ROS水平增高的幅度：HSF1组低于对照组（P〈0．05），ASK1组与对照组无显著差别，HSF1＋ASK1组与单转HSF1组相比有升高的趋势。结论在H2O2刺激条件下，HSF1可通过降低心肌细胞内的ROS水平来发挥细胞保护作用，而ASK1对细胞内ROS水平无影响，但其可干扰HSF1对ROS的抑制作用。

简介：摘要目的探讨乙型肝炎病毒相关慢性肝病的能量代谢特点，并分析能量代谢指标与患者继发细菌感染风险的相关性。方法收集和分析2017年11月至2020年11月福建医科大学孟超肝胆医院收治住院的183例患者的回顾性资料，包括慢性乙型肝炎患者79例、乙型肝炎肝硬化患者51例和乙型肝炎肝衰竭患者53例，其中肝衰竭患者和失代偿期肝硬化患者被定义为重症肝病组；使用Quark RMR间接能量代谢检测仪（购自意大利COSMED公司）检测患者的能量代谢情况，并记录患者住院期间发生的继发细菌感染事件。连续变量数据采用Shapiro-Wilk检验和正态Q-Q图分析数据的正态分布情况，符合正态分布，采用均值±标准差进行描述；不符合正态分布，则采用中位数和四分位间距进行描述。采用Levene检验对数据进行方差齐性检验，方差齐且符合正态分布，采用t检验比较两组样本的均值；采用单因素方差分析比较3组样本的均值，然后采用Tukey's检验进行两组间比较。方差不齐或不符合正态分布，则采用Wilcoxon秩和检验比较两组差异；采用Kruskal-Wallis检验（H检验）比较3组样本的差异，然后采用Dunnett检验（Z检验）进行两组间比较。分类变量数据采用卡方检验进行分析。采用Logistic回归分析筛选独立危险因素，变量纳入标准为P < 0.05。结果3组患者的呼吸熵（RQ）和非蛋白呼吸熵（npRQ）差异有统计学意义（P < 0.05），其中慢性乙型肝炎组的RQ和npRQ较乙型肝炎肝硬化组、乙型肝炎肝衰竭组均显著升高（P值均< 0.05）。3组患者的脂肪氧化率和碳水化合物氧化率差异有统计学意义（P < 0.05），其中与乙型肝炎肝硬化组和乙型肝炎肝衰竭组相比，慢性乙型肝炎组的脂肪氧化率较低，碳水化合物氧化率则较高（P < 0.05）。3组患者的静息能量消耗实测值和预测值、蛋白质氧化率差异均无统计学意义。在重症肝病患者中，继发细菌感染发生率为48.39%（45/93），与非感染组相比较，感染组的RQ值和npRQ值均显著下降（P < 0.05），而FAT%则显著升高（P < 0.05）。Logistic回归分析结果显示，γ-谷氨酰转移酶、胆固醇和npRQ为重症肝病患者继发细菌感染的独立危险因素，其中γ-谷氨酰转移酶升高、胆固醇和npRQ下降提示继发细菌感染风险增加。对乙型肝炎肝衰竭患者的亚组分析也同样提示，与非感染组相比较，继发细菌感染组的RQ值和npRQ值均显著下降（P < 0.05），而脂肪氧化率则显著升高（P < 0.05）。结论乙型肝炎病毒相关慢性肝病患者普遍存在能量代谢异常，其中低RQ、npRQ、碳水化合物氧化率和高脂肪氧化率与疾病的严重程度相关；而npRQ下降与重症肝病患者的继发细菌感染风险相关，可作为临床预后指标。

简介：目的观察静息能量代谢率（restingmetabolicrate,RMR）在评价糖皮质激素肾阴虚及肾阳虚证模型中的作用。方法BALB/c雄性小鼠分为对照组、模型组、金匮肾气丸组、知柏地黄丸组,后三组小鼠均给予含皮质酮的饮用水,对照组给予含1%乙醇的饮用水。采用封闭式流体压力呼吸计测定动物RMR。实验结束,处死小鼠,检测肾周脂肪、附睾脂肪、股四头肌、胫骨前肌重量指数;采用ELISA法检测血清激素水平;肝脏、肾脏组织HE染色观察;检测肝组织丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量、琥珀酸脱氢酶（succinatedehydrogenase,SDH）活性、细胞色素c氧化酶（cytochrome-c-oxidase,COX）活性、ATP水平。结果与对照组比较,模型组能量代谢率在实验开始第2天即显著升高,第4天达最高（P〈0.01）,之后逐渐降低,至第66天显著降低（P〈0.05）。皮质酮造模66d显著降低小鼠血清甲状腺素（T4）含量,升高脂肪重量指数、降低肌肉重量指数、升高MDA水平、抑制SDH、COX活性及ATP水平。两补肾药均能降低动物死亡率,降低肝组织MDA含量,并且金匮肾气丸能升高模型组第4天及66天的能量代谢率（P〈0.05）,能显著提高肝组织SDH活性、COX活性及ATP水平（P〈0.01）,知柏地黄丸未观察到类似作用。结论静息能量代谢率对评价糖皮质激素肾阴虚/肾阳虚证模型具有一定作用。

简介：摘要目的探讨鸭跖草调控NADPH氧化酶4(Nox4)对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞凋亡及炎性因子表达的影响。方法利用H/R诱导H9c2细胞损伤，用不同浓度鸭跖草提取物处理细胞，噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性，流式细胞术检测细胞凋亡，试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)水平，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平，蛋白质印迹法(Western blot)检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、Nox4蛋白表达，实时荧光定量PCR(qPCR)检测Nox4 mRNA表达。用si-Nox4转染H9c2细胞，并经H/R处理，观察抑制Nox4对H/R心肌细胞H9c2的细胞活性、凋亡，以及SOD、MDA、LDH和炎性因子的影响。用pcDNA3.1-Nox4转染H9c2细胞，并用鸭跖草提取物和H/R处理，评价其对H9c2细胞活性、凋亡，以及SOD、MDA、LDH和炎性因子的影响。结果H/R处理后，H9c2细胞的存活率和SOD活性显著降低，细胞凋亡率以及Caspase-3、Bax蛋白、MDA、LDH、TNF-α、IL-1β、IL-6、Nox4 mRNA、Nox4蛋白表达量明显增加(P<0.05)。10 μg/ml和20 μg/ml鸭跖草提取物显著提高H/R处理后H9c2细胞的细胞存活率、SOD活性，明显降低凋亡率和Caspase-3、Bax蛋白、MDA、LDH、TNF-α、IL-1β、IL-6、Nox4 mRNA、Nox4蛋白表达量(P<0.05)，与抑制Nox4表达的作用结果一样。过表达Nox4能逆转鸭跖草提取物对H/R诱导的心肌细胞活性、SOD活性的促进作用，和对细胞凋亡以及对Caspase-3、Bax蛋白、MDA、LDH、TNF-α、IL-1β、IL-6表达的抑制作用。结论鸭跖草通过调控Nox4表达保护H/R诱导的心肌细胞损伤，提高细胞活性，并抑制细胞凋亡及炎性因子表达。

简介：目的：研究线粒体外周型苯二氮卓受体（PBR）对缺氧复氧损伤所致大鼠心肌细胞凋亡、细胞内钙离子浓度和蛋白激酶C含量的影响。方法：采用改良的Simpson法分离培养心肌细胞,建立大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤模型,培养融合的细胞随机分为5组：对照组（C组）、缺氧复氧组（HR组）、PBR拮抗剂PK11195组（P组）、PBR激动剂Ro5-4864组（R组）、PK11195＋Ro5-4864组（PR组）。P、R组在缺氧前30min于培养液中分别加入终浓度10^-4mol/LPK11195和Ro5-4864,PR组在缺氧前30min加入以上浓度的两种药物共同孵育,然后再进行缺氧复氧。结果：R组细胞凋亡率（9.4±0.6）%与HR组（26.6±2.7）%比较有统计学意义（P〈0.05）,PR组细胞凋亡（27.4±3.1）%与R组比较有统计学意义（P〈0.01）;R组细胞内钙离子荧光强度（172±29）与HR组（207±22）比较差异有统计学意义（P〈0.01）,PR组（222±26）与R组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;R组细胞蛋白激酶C表达（21±4）%与HR组（12±4）%比较有统计学意义（P〈0.01）,PR组（11±4）%与R组比较有统计学意义（P〈0.01）。结论：PBR激活明显抑制缺氧复氧所致的心肌细胞凋亡,该作用是通过抑制细胞内钙离子浓度增加和激活蛋白激酶C信号转导通路实现的。

简介：摘要目的探讨miRNA-499a-5p靶向CD38对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤的影响及作用机制。方法体外培养H9c2心肌细胞，采用H2O2诱导心肌细胞损伤模型。实验分为对照组、H2O2组、H2O2＋阴性对照(NC)组和H2O2＋miRNA-499a-5p组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)法分别检测心肌细胞中miRNA-499a-5p和CD38的表达，噻唑蓝(MTT)法检测心肌细胞存活率，试剂盒检测活性氧簇(ROS)水平和乳酸脱氢酶(LDH)活性，Annexin V-FITC/PI双染法检测心肌细胞凋亡率，Western blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)的表达量。双荧光素酶报告基因试验检测miRNA-499a-5p和CD38的靶向关系。结果H2O2组心肌细胞中miRNA-499a-5p、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt的表达水平及心肌细胞存活率与对照组相比均明显降低(P<0.05)，而CD38和Bax的表达水平、ROS水平、LDH活性及细胞凋亡率均明显升高(P<0.05)。H2O2＋miRNA-499a-5p组心肌细胞中miRNA-499a-5p、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt的表达水平及心肌细胞存活率与H2O2组相比均明显升高(P<0.05)，而CD38和Bax的表达水平、ROS水平、LDH活性及细胞凋亡率均明显降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因试验证实了CD38是miRNA-499a-5p的靶基因。结论miRNA-499a-5p能够通过抑制CD38的表达减轻H2O2诱导的心肌细胞损伤，该作用机制可能与PI3K/Akt信号通路有关。

简介：目的观察灯盏花素对大鼠心肌缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡及NF-kB通路信号分子α7nAChR、p65、IkB-α的影响。方法40只SD大鼠随机均分为假手术组、缺血再灌注组、灯盏花素低剂量组(25mg/kg·d)和灯盏花素高剂量组(50mg/kg·d),每组各10只。4组均制备缺血再灌注模型,其中灯盏花素治疗组术前连续1周腹腔注射灯盏花素;假手术组以及缺血再灌注组分别注射等量的生理盐水。随后处死,取出心脏检测心肌组织梗死面积;TUNEL法检测心肌细胞的凋亡指数;蛋白印记法检测α7nAChR、p65、IkB-α蛋白的表达。结果缺血再灌注组较假手术组心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数以及IkB-α蛋白显著增加(P<0.01),p65和α7nAChR蛋白显著减少(P<0.05);灯盏花素高低剂量组较缺血再灌注组心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数以及IkB-α蛋白显著降低(P<0.01),p65和α7nAChR蛋白显著增加(P<0.05),并呈现剂量依赖性。结论灯盏花素预处理能有效减少大鼠心肌缺血再灌注损伤以及心肌细胞凋亡,其机制可能为上调α7nAChR,从而通过NF-kB通路抑制心肌细胞的凋亡,发挥心肌保护作用。

简介：摘要目的探讨依托咪酯对脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导心肌细胞炎症、凋亡的影响及其可能作用机制。方法将体外培养的大鼠心肌细胞H9c2采用随机数字表法分为5组（每组3个复孔，每组实验重复3次）：正常对照组（Con组）、脂多糖组（LPS组）、脂多糖+20 μmol/L依托咪酯组（E-L组）、脂多糖+50 μmol/L依托咪酯组（E-M组）、脂多糖+100 μmol/L依托咪酯组（E-H组）。Con组正常培养，LPS组加入含浓度1 mg/L LPS的杜氏改良培养基（dulbecco's modified eagle medium, DMEM）培养24 h，E-L组、E-M组、E-H组分别使用不同浓度（20、50、100 μmol/L）依托咪酯与1 mg/L LPS的DMEM培养液培养24 h。再次选取正常培养的心肌细胞采用随机数字表法分为两组（每组3个复孔，每组实验重复3次）：脂多糖+100 μmol/L依托咪酯+anti-微RNA（microRNA, miR）-NC组（anti-miR-NC组）和脂多糖+100 μmol/L依托咪酯+anti-miR-214-3p组（anti-miR-214-3p组）。anti-miR-NC组和anti-miR-214-3p组分别将anti-miR-NC和anti-miR-214-3p转染至心肌细胞，加入含有100 μmol/L依托咪酯与1 mg/L LPS的DMEM培养液培养24 h。ELISA法检测TNF-α、IL-6、IL-1β水平，流式细胞术检测细胞凋亡率，实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR, qRT-PCR）检测miR-214-3p与转导素β1X连锁受体蛋白质1（transducin β-like 1X related protein 1, TBL1XR1）的表达量，双荧光素酶报告实验验证miR-214-3p与TBL1XR1的靶向调控关系，Western blot法检测TBL1XR1、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2, Bcl-2）相关蛋白（Bcl-2-associated X protein, Bax）、Bcl-2的表达量。结果与Con组比较，LPS组TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax水平以及细胞凋亡率、TBL1XR1 mRNA表达升高（P<0.05），Bcl-2蛋白水平和miR-214-3p表达降低（P<0.05）；与LPS组比较，E-L组、E-M组、E-H组TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax水平以及细胞凋亡率、TBL1XR1 mRNA表达呈剂量依赖性降低（P<0.05），Bcl-2蛋白水平和miR-214-3p表达呈剂量依赖性升高（P<0.05）；E-L组、E-M组、E-H组两两比较差异有统计学意义（P<0.05）。miR-214-3p可负向调控TBL1XR1的表达（P<0.05）。与anti-miR-NC组比较，anti-miR-214-3p组TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax水平以及细胞凋亡率升高（P<0.05），Bcl-2蛋白水平降低（P<0.05）。结论依托咪酯可通过调控miR-214-3p/TBL1XR1分子轴从而抑制LPS诱导的心肌细胞炎症及凋亡。

简介：摘要 :目的探究松果菊苷对心肌细胞缺血再灌注损伤 (IRI)的保护作用及 micro?RNA-34a(miR-34a)表达的影响。方法以鼠胚胎 H9c2心肌细胞为研究对象，并建立缺血再灌注损伤模型，分为对照组、松果菊苷低剂量组、松果菊苷中剂量组与松果菊苷高剂量组，对比细胞存活率、细胞凋亡率，并对比 miR-34a水平变化情况。结果四组心肌细胞存活率比较存在差异 P<0.05，由高到底依次为对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组。四组心肌细胞凋亡率比较，差异 P<0.05，由高到底依次为低剂量组、中剂量组、高剂量组、对照组。四组 miR-34a水平存在差异， P<0.05，由低到高依次为对照组、低剂量组、中剂量组与高剂量组。结论松果菊苷具有心肌细胞缺血再灌注损伤保护作用，其发生机制与 miR-34a水平上调存在相关性。

简介：摘要目的探讨蛋白质二硫键异构酶（PDI）在糖尿病缺血性心脏病中的作用机制。方法利用H9c2大鼠心肌细胞建立高糖（HG，33 mmol/L葡萄糖）及缺氧/复氧损伤模型（H/G，提前30 min往密闭缺氧盒中灌注95%的氮气及5%的CO2混合气体）和高糖+缺氧/复氧组（HG+H/R）组模型的过表达PDI腺病毒及下降PDI siRNA转染心肌细胞，检测各实验组大鼠乳酸脱氢酶（LDH）活性、丙二醛（MDA）及高分子量脂联素（HMW-APN）的浓度，心肌细胞PDI、脂联素（APN）、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Cleaved Caspase-3）及糖调节蛋白78（Grp78）的表达。结果在HG、H/R以及HG+H/R组细胞模型中PDI的表达与正常组（葡萄糖浓度5.5 mmol/L）相比均明显减少，LDH活性［（179.7±10.4）、（218.4±18.4）、（328.2±5.3）比（91.0±11.0） U/L］、MDA浓度［（7.0±0.4）、（10.0±1.0）、（11.7±1.0）比（4.2±1.8） μmol/L］及Cleaved Caspase-3、Grp78蛋白表达明显升高，同时，APN及HMW-APN的蛋白表达显著减少［（2.01±0.21）、（1.64±0.27）、（1.20±0.14）比（2.62±0.12） μg/L，均P<0.05］。过表达PDI病毒干预后，H9c2细胞在高糖、缺氧/复氧条件下，APN及HMW-APN［（2.86±0.03） μg/L比（3.03±0.10） μg/L、（2.06±0.05） μg/L比（2.31±0.06） μg/L、（1.83±0.07） μg/L比（1.96±0.11） μg/L、（1.20±0.06） μg/L比（1.39±0.09） μg/L］的蛋白表达增加，细胞凋亡和氧化应激情况得到明显改善（均P<0.05）。利用特异性siRNA下降PDI的蛋白后，H9c2细胞在高糖及缺氧/复氧损伤条件下，APN及HMW-APN［（0.75±0.09） μg/L比（0.59±0.09） μg/L、（0.62±0.04） μg/L比（0.53±0.05） μg/L、（0.55±0.14） μg/L比（0.51±0.12）μg/L、（0.48±0.12） μg/L比（0.35±0.08） μg/L］的蛋白表达减少，LDH活性、MDA浓度及Cleaved Caspase-3、Grp78蛋白表达明显升高，细胞凋亡及氧化应激损伤增加（均P<0.05）。结论PDI可能通过调控APN及HMW-APN的蛋白表达，发挥对糖尿病缺血再灌注心肌细胞功能的影响。

简介：目的：通过高温高湿及一般环境有氧运动与减体重相关指标的测试和评价，了解不同环境有氧运动对机体减体重效果的影响。方法：以北京市8名男子自由式摔跤运动员作为研究对象，测试不同环境有氧运动（50min65％VO2max强度）前后体重、等速肌力、能量代谢、反应时等指标。结果：相同生理负荷下在高温高湿和常温常湿两种环境中分别进行一次性有氧运动50min，高温高湿下体重下降1．91％，幅度略大于常温常湿；高温高湿组运动过程中能量代谢较常温常湿组高1．52％，运动后2h能量消耗较常温常湿组高0．95％，睡眠8h的能量代谢较常温常湿组高14．86％，具有显著性差异（P＜0．05）；运动员能够耐受在不同环境温度进行的减控重训练，主观上能够接受（33℃、60％）的热环境；在不同环境中进行有氧运动后，运动员的最大力量、疲劳指数和反应时没有显著性变化，最大峰值力矩、平均功率在不同环境下有氧运动后均出现下降趋势，反应时在不同环境运动后时间有所缩短，表明在不同的环境下进行一次性有氧运动对力量素质、肌肉耐力和反应能力没有表现出显著的不利影响。结论：高温高湿环境中通过有氧运动进行减体重具有相对较好的效果，在减体重期间，为减少力量的丢失，在进行减体重的有氧训练过程中应适当增加力量训练。

简介：摘要目的探讨Cre-loxP重组酶系统构建的兴奋性神经元腺苷酸活化蛋白激酶α1(AMPKα1)基因特异性敲除模型小鼠大脑能量代谢及认知功能的改变。方法将杂交繁育获得的16只基因型为AMPKα1flox/flox/Camk2a-Cre/ERT2的6月龄小鼠按随机数字表法分为AMPKα1敲除组(n=8)与AMPKα1野生组(n=8)，AMPKα1敲除组小鼠每天腹腔注射0.1 mL他莫昔芬(20 mg/mL，溶于玉米油)以控制AMPKα1基因在兴奋性神经元中的敲除，AMPKα1野生组小鼠每天腹腔注射等量玉米油以作对照。连续注射5 d，并等待7 d后分别采用Morris水迷宫和T迷宫实验检测2组小鼠的空间学习记忆及空间工作记忆能力，采用化学交换饱和转移成像(CEST)观察2组小鼠海马及海马周围皮层的葡萄糖代谢情况，采用Western blotting实验检测2组小鼠海马及海马周围皮层的AMPKα1、谷氨酸受体1(GluR1)蛋白表达情况。结果与AMPKα1野生组比较，AMPKα1敲除组小鼠第3、4天的逃避潜伏期明显延长[(13.90±3.72) s vs. (22.40±6.28) s；(11.95±3.86) s vs. (22.39±9.77) s]，穿越平台次数明显减少[(5.25±1.83)次vs. (1.75±1.28)次]，自由交替率明显降低[(73.21±9.16)% vs. (48.21±11.29)%]，海马及海马周围皮层的葡萄糖代谢水平明显降低(2.77±0.67 vs. 1.51±0.81；2.42±0.95 vs. 1.31±0.83)，海马及海马周围皮层AMPKα1、GluR1蛋白表达明显降低(AMPKα1：0.70±0.05 vs. 0.49±0.03，0.98±0.04 vs. 0.64±0.06；GluR1：1.22±0.18 vs. 0.60±0.11，0.96±0.08 vs. 0.79±0.04)，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论特异性敲除兴奋性神经元AMPKα1基因可导致小鼠大脑葡萄糖代谢异常，从而引起其认知功能障碍，其机制可能与能量代谢障碍引起兴奋性突触障碍有关。

简介：肥胖症在全球广泛流行,是世界共同的健康问题。近期研究表明,除基因、免疫系统等因素,游离脂肪酸等代谢物质引起的外周及中枢神经的胰岛素抵抗也参与到了肥胖症的发病过程中。代谢物信号可引起中枢及外周的神经冲动变化并调节代谢。最近的研究还发现,饱和脂肪酸会干扰下丘脑参与能量代谢平衡神经元的神经冲动。胃肠道旁路手术是目前最有效的病态肥胖症的治疗手段,对肥胖合并的糖尿病的疗效显著优于内科治疗。本文将对Roux-en-Y式胃旁路术改变外周信号并改变中枢系统调节能量代谢平衡功能的机制。

简介：摘要目的了解铁对问号钩端螺旋体生长繁殖和能量代谢的影响，确定LA_2690与LA_3598基因产物为问号钩端螺旋体储铁蛋白及其亚铁氧化酶功能。方法采用Petroff-Hausser计数法了解缺铁对问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型56601株在EMJH培养基中生长繁殖的影响。分光光度法和化学发光法检测缺铁抑制问号钩端螺旋体DNA和ATP合成的作用。采用生物信息学软件分析问号钩端螺旋体LA_2690和LA_3598基因结构与功能。构建LA_2690和LA_3598基因原核表达系统，Ni-NTA亲和层析法提纯目的重组蛋白rLep2690和rLep3598。分光光度法检测rLep2690和rLep3598亚铁氧化酶活性。实时荧光定量RT-PCR检测问号钩端螺旋体56601株感染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和单核细胞(THP-1)时LA_2690和LA_3598基因转录水平变化。结果在缺铁EMJH培养基中，问号钩端螺旋体生长繁殖能力、DNA和ATP合成水平均显著下降(P<0.05)。LA_2690和LA_3598基因产物分别为细菌铁蛋白(Bfr)和细菌DNA结合铁蛋白(Dps)，均含有双亚铁氧化酶中心，但后者缺乏亚铁血红素结合位点和亚铁氧化酶核心。LA_2690和LA_3598基因原核表达系统能高效表达目的重组蛋白rLep2690和rLep3598，提纯后经SDS-PAGE检测均显示为单一的蛋白质条带。rLep2690和rLep3598亚铁氧化酶活性分别为1 238.619和60.052 U/L。感染细胞时，LA_2690和LA_3598基因mRNA水平均显著升高(P<0.05)。结论铁离子参与问号钩端螺旋体生长繁殖、DNA和ATP合成。LA_2690和LA_3598基因(Bfr和Dps)均为问号钩端螺旋体感染细胞时所需，其中LA_2690基因产物具有较强亚铁氧化酶活性。

简介：成肌细胞是指胞浆中含有肌丝的肌组织前体细胞,来源于中胚层干细胞,胚胎发育过程中首先由间充质细胞分化为成肌细胞,然后分裂、融合成多核肌纤维,形成肌小管,再进一步分化为成熟的骨骼肌细胞。成肌细胞具有自我更新和促进肌纤维再生的能力。