简介:目的建立泰泽氏病原体(Ty)纯化方法,获得纯的菌体供抗原研究,为ELISA诊断抗原的制备提供依据;并尝试建立Ty隐性感染血清学抗原检查方法。方法选择特异性抗体包被磁珠,从感染大鼠肝脏中富集和纯化Ty;用SDS-PAGE和Westernblot技术考察纯化Ty的蛋白和抗原图谱;同时用免疫磁珠分离技术(IMS)直接检查隐性感染大鼠肠道上皮细胞内的Ty。结果用辛酸-硫酸铵纯化的Ty单克隆抗体M5以0.5μg/10^7beads以上浓度包被抗IgG抗体预结合的磁珠4h,可最大效率地富集Ty;分离反应进行1h,敏感性达到1矿菌体/mL;吖啶黄染色镜检法可以直接、快速地观察到结合于磁珠上的细菌;抗原分析表明,IMS较好地去除了肝组织和真核细胞成分,纯化的TvRJ株具有3个免疫优势的抗原成分,相对分子质量(Mr)分别为160×10^3、116×10^3、55×10^3;此外,IMS法可直接从隐性感染大鼠盲肠上皮细胞中检测到少量寄生的Ty。结论用IMS技术可有效地富集和纯化Ty,并可以作为Ty隐性感染血清学抗原检查的候选方法。
简介:确定审前调查的范围、内容和重点做好审前调查的依据应该是该审计项目的审计工作方案,审前调查应围绕审计工作方案确定的目标进行,结合审计工作方案中审计范围、内容和重点,确定审前调查的范围、内容和重点。全面详细了解涉及被审计单位的有关情况其中包括:1.收集、了解与审计事项有关的法律、法规、规章、政策和其他与被审计单位宏观经济环境有关的文件资料。2.对曾经审计过的单位,应当注意查阅过去审计的情况,利用原有的审计档案资料,了解以前年度审计发现的问题,以前年度审计意见、决定及其落实情况及其他重要事项。3.要求被审计单位提供与审前调查有关的各种资料,包括被审计单位的类型;成立的时间、背景,发展历程和现有生产规模或收支规模;财政财务隶属关系;机构设置、人员编制情况;职责范围或者业务经营范围;银行账户、会计报表及其他有关的纸质和电子会计资料;财务会计机构及其