简介:白玉蜗牛的蛋白腺、肝脏、肌肉、血液经pH为7.4的磷酸缓冲液抽提,80%饱和硫酸铵沉淀粗分离,QSepharoseHP强阴离子交换色谱及SuperdexG-75葡聚糖凝胶色谱分离得到白玉蜗牛各组织的凝集素(Achatinafulicassp.Lectin,AFL).血细胞凝集实验显示:AFL对兔血红细胞具有高凝集活性,其最小凝集质量浓度为0.065μg/mL;热处理15min后不同组织提取的AFL热稳定性不同,其中血液AFL在60℃处理后仍然具有较好的凝集活性.不同糖与不同组织提取的AFL对兔血红细胞的凝集抑制作用有明显差异,揭示了不同组织AFL可能与不同糖存在特异性结合.
简介:对我国云南昆明相思子进行了分离纯化及特性研究,相思子经稀酸浸泡,抽提,硫酸铵分级沉淀,酸化Sepharose4B亲和层析,DEAE-SepharoseFF阴离子交换层析,分离到两种毒素成分P1、P2和一种凝集素P3。通过SDS-PAGE测定分子量P1、P2,分别为68Kd、62Kd,P3为129Kd;亚基分子量P1为36Kd、33Kd、31Kd,P2为35Kd、29Kd,P3为39Kd、37Kd、31Kd;P1、P2、P3的等电点分别为6.9、6.2-6.3、5.3;中性糖含量分别为9.4%、3.3%、10.5%;凝集兔红细胞的最小凝集浓度分别为19.0μg/ml、2.5μg/ml、0.3μg/ml;对小鼠腹腔注射LD50分别为25.8μg/ml、2.4μg/ml、1.2mg/kg。
简介:摘要目的探讨血常规中冷凝集素的测定方法及意义。方法对30例冷凝集素标本在室温常规测定,37℃温箱孵育30分钟后测定比较血细胞结果并做不同温度下肉眼观察及涂片显微镜检查进行分析。结果对两次测定结果进行分析,两次测定过程变化程度由大到小变化MCH、MCHC、RBC、HCT、MCV和WBC,两测定变化差异具有统计学意义(P<0.05)。血浆与O型脐血RBC混匀后在4℃、37℃下均无聚集。30例标本冷凝集素效价检测结果平均效价(1.070.8)与正常对照30例平均效价(1.03.5)差异有统计学意义P<0.05。所有标本的血浆与健康成人O型RBC混合后,在4℃的温度环境下聚集,37℃的温度环境下解聚;血浆与O型脐血RBC混合后,在4℃和37℃的环境下均无聚集。结论联合MCH≥35g/L和仪器报警信息、冷凝集素试验、血清学、抗体特异性鉴定等方法共同检测血常规标本中冷凝集素有重要意义,对受冷凝集素影响的血常规标本必须置37℃温箱孵育30min消除冷凝集素影响后进行重新测定才能发出检验报告。
简介:泥蚶肌肉提取液经硫酸铵二步分级沉淀后,再经DEAE-Sepharose(FastFlow)离子交换和SephacrylS-200-HR分子筛层析,从中分离纯化得到泥蚶肌肉凝集素.经测定,该凝集素分子量约为238kDa,为单个亚基的蛋白质,其相对分子量为60kDa,分子中含3.27%的糖.在氨基酸组成中,谷氨酸(Glu)含量最高,其次是丝氨酸(Ser)和天门冬氨酸(Asp).泥蚶肌肉凝集素对人和动物红细胞均有凝集作用,其中对兔的红细跑的凝集活性最高.该凝集素对兔的红细胞的凝集活性不被测试的10种浓度为200mmol·L^-1的糖所抑制.pH6.0~7.0时具有较强活性;热稳定性较高,在30-50℃的温度范围内对兔红细胞的凝集仍保持原有活性,60℃以后活力下降;凝集活性依赖于Ca^2+.
简介:摘要目的研究红桂木凝集素(ALL)对小鼠的免疫调节作用。方法首先,在无菌条件下提取Balb/c小鼠骨髓细胞,分离单个核细胞,以重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和白细胞介素4(rmIL-4)协同诱导下培养,培养至第六天,添加TNF-a或者ALL继续培养两天。CCK-8法检测细胞增殖;倒置显微镜观察细胞生长变化;ELISA法测培养上清中IL-12、IFN-γ的分泌水平。其次,小鼠皮内注射OVA和/或ALL;两周后断尾取血,酶联免疫夹心法(ELISA)检测小鼠血清中OVA特异性IgG的浓度。结果ALL能显著促进小鼠骨髓来源树突状细胞(BmDC)的增殖;并促进BmDC分泌细胞因子IL-12、IFN-γ;但不能增强OVA在小鼠体内产生特异性抗体的量。结论ALL在细胞免疫中具有很好的促进BmDC成熟及增殖的作用,但不能增强小鼠对OVA的特异性体液免疫应答。
简介:摘要凝集素Tachylectin-2是从鲎属日本马蹄蟹(Tachypleustridentatus)血细胞大颗粒中分离出来的,其具有236个氨基酸的蛋白质。Tachylectin-2具有五个结合位点,它能特异性地结合NAG、NDG等结构相似的配体,其单个多肽链中包含五个结合位点的特性,强烈地表明该结构具有与碳水化合物结合的特性,可以与病原体表面特异性识别。通过DiscoveryStudio和modeler等手段对tachylectin-2的三维结构进行预测,并验证其与具某些包含N-乙酰基的多糖的配体具有严格的特异性。基于此进一步探究其生物学活性与药物分子设计。
简介:摘要迈瑞BC-2300血细胞分析仪是采用电阻抗血细胞计数原理(库尔特原理)对白细胞、红细胞、血小板进行计数和分类,当定量吸取等渗电解质溶液稀释的细胞之后,就被送到分析仪的检测单元,检测小孔两侧有一对正负电极,连接恒流电源,由于细胞具有不良导体的特性,稀释细胞悬液中的细胞在恒定负压的作用下,通过检测小孔的时候,使小孔感应区内电阻增高,引起瞬间电压变化形成脉冲信号,脉冲数量越多,细胞数量越多,脉冲振幅越高细胞体积越大,由此得出血液中细胞的数量和体积值。当悬液中细胞有凝集时就会发生堵孔,引起分析仪故障,无法完成细胞计数和分类。有微小的凝集时有可能两个细胞同时通过微孔,就会产生重合损失现象,使白细胞、红细胞、血小板计数结果偏低,红细胞、血小板三个平均值异常,红细胞体积分布宽度、血小板体积分布宽度异常。
简介:摘要 半乳糖凝集素 -3( Gal-3)是一种可溶性半乳糖苷结合蛋白,在人体主要由激活的巨噬细胞分泌。近年来许多临床实验证实 Gal-3从多方面参与心力衰竭( HF)发生发展的病理生理学过程,与心脏纤维化和心室重构有直接关系,干预 Gal-3的表达可能是治疗心力衰竭的一种新途径,本文对 Gal-3与心力衰竭关系的研究进展作一综述。
简介:摘要目的总结分析冷凝集素综合征患者常规检验的影响因素及对策。方法选择2010年6月~2013年11月期间我院收治的10例冷凝集素综合征患者为研究对象,采取静脉血分别在25℃检测血常规、37℃温育15min后稀释12条件下下检测血常规,分析总结常规检验的影响因素及对策。结果冷凝集素综合征患者血液在25℃常温下进行检测所得的白细胞、血红蛋白、血小板检测结果明显高于正常对照组,红细胞检测结果低于正常对照组(P<0.05),而在37℃下温育15min并稀释后进行检测所得的白细胞、红细胞检测结果接近正常对照组(P>0.05)。结论冷凝集素综合征是一种罕见疾病,常规检验的主要影响因素是温度,一般采取温育对策减少误差。