简介：图5　5×10-7M的As2O3作用于MGC-803细胞24h后,5×10-7、10-6M的As2O3处理12～48h的MGC-803细胞经Fcm检测,10-6M浓度的As2O3分别处理培养生长良好的MGC-803细胞6、12、24、48h

简介：眼镜蛇毒对NACC细胞凋亡和细胞周期的影响不同浓度的眼镜蛇毒作用肿瘤细胞24h后,中华眼镜蛇毒能诱导NACC细胞凋亡,蛇毒浓度在20μg/ml时NACC细胞凋亡率为57.4%

简介：目的观察外源性第10号染色体同源缺失磷酸酶和张力蛋白(PTEN)基因对人肺癌细胞株SPC-A-1增殖、凋亡及侵袭的影响,并初步探讨其调控机制。方法取对数期SPC-A-1细胞转染重组腺病毒Ad-PTENGFP、Ad-GFP,分别设为PTEN组、空载组,并检测转染效率,另取不做处理为对照组。MTT法检测并对比各组细胞增殖情况;Hoechst33342荧光染色法检测细胞凋亡情况;Transwell试验检测细胞侵袭能力;分别采用实时荧光定量PCR法、蛋白免疫印迹法检测并对比各组细胞中PTENmRNA和蛋白、粘着斑激酶(FAK)、蛋白激酶B(AKT)mRNA表达情况及pFAK/FAK、pAKT/AKT。结果FACS法检测重组腺病毒Ad-PTEN-GFP、Ad-GFP对SPC-A-1细胞转染效率分别为(82.41±5.46)%、(83.02±6.20)%。PENT组MTT试验不同时刻OD值显著低于对照组和空载组(P<0.05),3组OD值均随时间延长呈显著升高趋势(P<0.05);Hoechst33342荧光染色发现,对照组和空载组细胞形态正常,呈弥散均匀荧光,PTEN组部分细胞核浓染,呈月牙形聚集、颗粒状荧光碎片,PENT组细胞凋亡率显著高于对照组和空载组(P<0.05);PENT组细胞侵袭数目显著少于对照组和空载组(P<0.05);对照组和空载组OD值、凋亡率及细胞侵袭数目比较差异均无显著性(P>0.05);与对照组和空载组比较,PENT组PENTmRNA和蛋白相对表达量显著较高(P<0.05),pAKT/AKT、pFAK/FAK显著较低(P<0.05);对照组和空载组PENTmRNA和蛋白相对表达量、pAKT/AKT、pFAK/FAK、3组AKT、FAKmRNA相对表达量比较差异均无显著性(P>0.05)。结论外源性PTEN基因可显著抑制SPC-A-1细胞增殖及侵袭,促进其凋亡,推测与抑制AKT/FAK信号通路有关。

简介：【摘要】目的 探讨不同浓度 AcD联合肿瘤坏死因子诱导正常人 HL7702肝细胞凋亡及 PI3K/Akt信号通路对此过程的作用。方法 采用 HL7702正常人肝细胞株， MTT法检测 AcD对其存活力的影响； Hoechst33342形态学染色 ;流式细胞仪检测细胞凋亡情况； Westernblot方法检测细胞总 Akt(丝氨酸苏氨酸蛋白激酶）及 p-Akt蛋白表达。结果 AcD联合肿瘤坏死因子可诱导 HL7702肝细胞凋亡，其浓度在 20-50ng/ml范围内呈现剂量效应关系； PI3K/Akt特异性抑制剂 wortmamiin能够增强 AcD联合肿瘤坏死因子诱导的肝细胞凋亡。结论 AcD联合肿瘤坏死因子可诱导肝细胞凋亡，其机理可能是抑制 PI3K/Akt信号通路。

简介：家乡早晨的风景极好,所以,每天早上,我都傍着月牙村西的柳林,踱过一座小桥,走在挤满黄豆苗的田间小路上。下了一个黄土坡,就钻进了一片青杨林。走出了青杨林,往远一望,是无边无际的绿色棉田。刚没膝盖的棉花秧,叶子绿盈盈的,在晨光下闪着亮,泛着光彩。被微风一吹,摇曳着、忽闪着、簇拥着、嬉闹着,朝你身边涌来,直挤得你想往后退。

简介：目的:利用慢病毒载体建立稳定表达猪载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F(pAPOBEC3F,简称pA3F)的PK15细胞系。方法:以实验室前期构建的pBPLV-flag-pA3F质粒为模板,PCR扩增pA3F基因,克隆到pLenti-Puro-3Flag载体构建成pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒,Western印迹鉴定其在HEK293T细胞中的表达;将pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒与包装载体共转染HEK293T细胞,包装成Lenti-pA3F慢病毒并测定病毒滴度;将Lenti-pA3F慢病毒感染PK15细胞,通过嘌呤霉素压力筛选并结合有限稀释法,筛选稳定表达pA3F的细胞单克隆株,最终Western印迹检测细胞单克隆株中pA3F的表达。结果:菌落PCR和序列测定表明pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒构建正确,Western印迹显示该质粒可在HEK293T细胞中表达pA3F蛋白;包装了Lenti-pA3F慢病毒,滴度为1.32×10^8TU/mL,慢病毒感染PK15细胞后可检测到pA3F蛋白的表达;经Western印迹鉴定,筛选得到的单克隆细胞可稳定表达pA3F蛋白。结论:建立了稳定表达pA3F的PK15细胞单克隆株,为进一步深入研究猪内源性反转录病毒在pA3F作用下的免疫逃逸机制奠定了基础。

简介：目的:利用昆虫细胞表达系统真核表达并纯化小电导钙激活钾离子通道蛋白1(KCNN1)。方法:以基因重组方法构建杆状病毒穿梭质粒reBacmid-KCNN1,将其转染至杆状病毒/Sf9细胞表达系统表达目的蛋白,并用Western印迹鉴定KCNN1的表达水平;用Ni-IDA-SepharoseCL-6B亲和层析柱纯化裂解细胞上清中的KCNN1,并用Western印迹鉴定纯化结果。结果:KCNN1在Sf9细胞中高效表达,通过亲和层析获得了纯化的KCNN1。结论:膜蛋白KCCN1在昆虫细胞Sf9中的表达与纯化,为深入研究其分子生物学功能提供了材料,也为全长膜蛋白的体外表达提供了一套可借鉴的实验方法。

简介：固执的婆婆稍重的农活,婆婆死活不让我沾边儿,像耙田、割麦、担水这些事,她独揽在身,只让我干些洗衣、放牛之类的轻松活,村里的小媳妇们,都好生羡慕,说婆婆简直把我宠成了亲闺女,自从打工在外的老公,与一个外籍女人偷情的事被曝光,婆婆就用这种近乎自虐的方式,替儿子赎罪.

简介：天刚微亮,一轮红日从远山中冉冉升起。宿舍楼下的花圃里花儿都开了,散发出若有若无的香气。

简介：摘要不论家庭出身，不论残疾与否，每个孩子都是天使。七彩的年华，如绽放的花朵，架着希望的风帆，远航！文化路小学以孩子为本，架构自主灵活的融合教育活动载体，在学校中开展了“1+2”融合教育活动，符合了每个孩子的心愿。拉动了学生进取向上的内需，推动着学校教育的蓬勃开展，实现了快乐教育的育人效果。

简介：

简介：摘要目的探讨人感染H7N9禽流感重症患者的护理要点，以提高护理质量。方法回顾性分析总结我院从2017年4月21日至5月19日收治的9例人感染H7N9禽流感重症病例护理经过。结果9例患者中3例给予有创机械通气和俯卧位通气，安置了气管插管、动静脉导管、尿管等，2例给予ECMO治疗；6例无创通气。未发生导管相关性感染及褥疮等；1例患者治疗过程发生严重情绪失控，经心理护理后好转。3例死亡，6例治愈出院。结论严密监测病情，做好各类导管管理及住院期间患者的心理护理，是成功抢救人感染H7N9禽流感重症患者、提高危重患者生存率的重要保障。

简介：目的探讨微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)对丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶9(MAP3K9)的靶向调控作用及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法向对数生长期胃癌细胞株MGC-803转染miR-148a-3p模拟物(mimics组)和阴性对照(NC组),以未转染的MGC-803细胞为对照组;采用实时定量PCR(QPCR)检测各组miR-148a-3p水平以评价转染效率,MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,分别采用QPCR和Westernblotting检测Bcl-2、Bax、caspase-3及MAP3K9mRNA和蛋白水平,同时采用双荧光素酶报告实验验证miR-148a-3p与MAP3K9的靶向作用关系。结果QPCR结果显示,对照组、NC组和mimics组的miR-148a-3p水平分别为1.021±0.123、1.087±0.196和2.854±0.368,与对照组和NC组比较,mimics组的miR-148a-3p水平升高(P<0.05)。mimics组MGC-803细胞的增殖活力较其余两组减弱(P<0.05)。mimics组MGC-803细胞凋亡率为(15.2±1.6)%,高于对照组的(3.5±0.9%)%和NC组的(4.5±1.1)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组和NC组比较,mimics组的MAP3K9和Bcl-2的mRNA和蛋白水平均下调,而Bax和caspase-3的mRNA和蛋白水平均上调(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实MAP3K9是miR-148a-3p的直接作用靶点。结论MiR-148a-3p可抑制胃癌细胞MGC-803的增殖并诱导其凋亡,可能通过靶向MAP3K9来发挥抑癌作用,调控miR-148a-3p/MAP3K9轴在胃癌防治中有一定应用前景。

简介：通过矿区古地理环境和矿体生成条件等规律的总结,并对地质构造特征的分析,弄清了区域地质构造和矿体变化规律,使企业生产经营经济效益得到了较大的提高。

简介：这些均提示TGFβ1在肝损伤引起的细胞凋亡中起作用,抑制细胞凋亡可达到保护肝细胞损伤的目的,体内及体外试验均发现它们可诱导肝细胞发生凋亡（1）

简介：天空下,我和父亲坐在院子里看天,分别看中一小块蓝,但我们都不说话,也不做事,他写完回忆录,好像就不做事了,我有时会观察他,用我的有限观察他的有限,他把自己活得越来越窄,需要侧着身子才能挤过去.

简介：城市生态系统健康是区域可持续发展的基础.本文以环长株潭城市群作为研究对象,根据压力—状态—响应(PSR)模型,选取25个指标构建城市群城市生态系统健康评价指标体系,采用熵值法确定指标权重,以模糊综合评价法建立评价模型,对环长株潭城市生态系统健康进行评价.结果表明:总体来看,环长株潭城市生态系统健康水平处于“较健康”状态(0.2362),处于一个良性发展阶段;城市群内部健康水平存在较大差异,不同地区的城市生态系统健康状况不同.长沙市和株洲市的隶属度为“健康”,湘潭市和益阳市属于“较健康”状态,岳阳市和常德市属于“临界状态”,衡阳市属于“不健康”状态,娄底市的隶属度为“病态”.未来,环长株潭城市群要加强城市生态服务功能建设,缩小城市群内部差距,提升城市生态系统健康水平.

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简介：摘要： AT9井区丛式井项目是中石化西北分公司首次在塔河油田尝试丛式井组开发技术而布置的两个丛式井平台，其中一号平台共布置 5口水平井，二号平台共布置 2口水平井， 1口定向井， 1口直井。两个平台相距 80m，同台井口彼此间距 8m，平均造斜点在 4000m以上，是国内陆上平均造斜点最深的丛式井组。由于超长直井段，外加方位漂移的不确定性，使得直井段的防碰成为整个项目施工的关键。 AT9-11H井是一号平台的第一口水平井，本文通过其施工过程的详述，探讨了丛式井组钻井技术在该井组应用的难点和重点，对本平台以后井的施工具有指导意义。

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