简介：摘要目的研究miR-9靶向己糖激酶2（hexokinase 2，HK2）对乳腺癌细胞增殖的调节作用。方法取乳腺癌组织及癌旁组织，检测miR-9及HK2的表达水平；培养乳腺癌MCF-7细胞，分为空白对照组、NC组、miR-9组、NC-siRNA组、HK2-siRNA组，检测细胞活力、HK2及cleaved caspase-3表达水平，验证miR-9对HK2的靶向结合。结果乳腺癌组织中miR-9的表达水平低于癌旁组织（0.52±0.08 vs 1.05±0.25，t=16.685、P<0.000），HK2的表达水平高于癌旁组织（0.73±0.14 vs 0.34±0.08，t=17.587、P<0.000），miR-9与HK2呈负相关；miR-9组细胞的OD490水平、HK2表达水平、包含HK2基因mRNA 3’UTR的双荧光素酶报告基因的荧光活力低于NC组（0.58±0.09 vs 1.04±0.21、0.51±0.08 vs 1.18±0.24、41.11±9.28 vs 148.28±29.59，t/P=4.027/0.007、5.297/0.002、6.912/0.001），cleaved caspase-3表达水平高于NC组（1.08±0.26 vs 0.42±0.09、t/P=4.797/0.003）；HK-siRNA组细胞的OD490水平、HK2表达水平低于NC-siRNA组，cleaved caspase-3表达水平高于NC-siRNA组。结论miR-9能抑制乳腺癌细胞的增殖，其机制可能与靶向抑制HK2表达，增加下游cleaved caspase-3表达有关。

简介：摘要目的探讨在人肝癌细胞中微小RNA(microRNA，miR)-384对己糖激酶2(HK2)的调节机制。方法应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法检测43例肝癌组织及癌旁组织中miR-384和HK2基因的表达水平，分为肝癌组织组及癌旁组织组；利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-384与HK2 3’端非编码区(3’UTR)的具体结合位点，分为miR-384模拟物(mimics)组，空白对照(NC)组和HK2短发夹核糖核酸(shRNA)组；利用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验观察miR-384和HK2对肝癌细胞HepG2(购自中国科学院上海细胞库)增殖能力的影响；采用挽救实验进一步验证HK2基因是否可以逆转miR-384对HepG2细胞增殖的调控作用。两样本均数间比较采用t检验。结果肝癌组miR-384表达水平低于癌旁组织组(0.42±0.07比1.11±0.06，t＝18.210，P<0.01)，差异有统计学意义，肝癌组HK2含量高于癌旁组织组(2.02±0.15比1.51±0.13，t＝13.320，P<0.01)，差异有统计学意义；miR-384 mimics与HK2 3’UTR-wt共转染组荧光素酶活性低于对照组(0.34±0.03比0.21±0.01，t＝12.140，P<0.05)，差异有统计学意义。而miR-384 mimics与HK2-3’UTR-mut共转染组荧光素酶活与对照组比较，差异无统计学意义(0.22±0.03比0.21±0.01，t＝1.140，P> 0.05)。转染miR-384 mimics组HK2的mRNA表达水平低于对照组(1.62±0.17比2.11±0.12，t＝6.304，P<0.01)，差异有统计学意义。CCK-8实验分析结果显示，miR-384 mimics组HepG2细胞的增殖能力低于对照组(0.82±0.07比1.31±0.11, t＝2.941，P<0.01)，差异有统计学意义。同样，HK2 shRNA组HepG2细胞的增殖能力也低于对照组(0.85±0.07比1.32±0.11，t＝2.424，P<0.01)，差异有统计学意义。miR-384 mimics和HK2过表达质粒共转染组HepG2细胞的增殖能力与NC组比较，差异无统计学意义(1.32±0.02比1.32±0.14, t＝1.040，P>0.05)。结论miR-384可通过靶向调控HK2的表达，抑制HepG2细胞的增殖能力。

简介：摘要目的研究微小RNA（miR）-513a-3p调控己糖激酶2（HK2）对结直肠癌细胞增殖和糖代谢的影响。方法2019年5月至2020年2月分别用miR-513a-3p模拟物、miR-513a-3p抑制物和miR对照物转染结直肠癌SW480细胞，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-513a-3p在结直肠癌SW480细胞、正常结直肠细胞及各结直肠癌SW480细胞转染后的表达水平；CCK-8法检测miR-513a-3p对细胞增殖的影响；Brd/PI掺入实验检测miR-513a-3p对糖代谢的影响；蛋白质印迹法检测HK2表达水平。结果结直肠癌SW480细胞miR-513a-3p表达水平明显低于正常结直肠细胞（0.43 ± 0.06比1.00 ± 0.02），差异有统计学意义（t = 7.024，P = 0.003）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR对照物和转染miR-513a-3p抑制物（1.18 ± 0.24比0.45 ± 0.04和0.22 ± 0.03），转染miR对照物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR-513a-3p抑制物，差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显低于转染miR对照物，转染miR-513a-3p抑制物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显高于转染miR对照物，差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后葡萄糖摄取量及乳酸和硫氧还蛋白互作蛋白（TXNIP）表达水平明显低于转染miR对照物（1.02 ± 0.04比1.90 ± 0.06、0.88 ± 0.03比1.45 ± 0.04和0.16 ± 0.02比0.86 ± 0.06），转染miR-513a-3p抑制物后葡萄糖摄取量及乳酸和TXNIP表达水平明显高于转染miR对照物（2.35 ± 0.09比1.90 ± 0.06、1.67 ± 0.08比1.45 ± 0.04和2.01 ± 0.15比0.86 ± 0.06），差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后HK2表达水平明显低于转染miR对照物（0.20 ± 0.01比1.02 ± 0.04），差异有统计学意义（t = 8.367，P<0.05）；转染miR-513a-3p抑制物后HK2表达水平明显高于转染miR对照物（1.91 ± 0.07比1.02 ± 0.04），差异有统计学意义（t = 4.279，P<0.05）。结论miR-513a-3p对于结直肠癌细胞的增殖和糖代谢有明显的抑制作用，并且其调控机制与miR-513a-3p抑制细胞中HK2蛋白的表达有关。

简介：摘要目的研究微小RNA（miR）-513a-3p调控己糖激酶2（HK2）对结直肠癌细胞增殖和糖代谢的影响。方法2019年5月至2020年2月分别用miR-513a-3p模拟物、miR-513a-3p抑制物和miR对照物转染结直肠癌SW480细胞，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-513a-3p在结直肠癌SW480细胞、正常结直肠细胞及各结直肠癌SW480细胞转染后的表达水平；CCK-8法检测miR-513a-3p对细胞增殖的影响；Brd/PI掺入实验检测miR-513a-3p对糖代谢的影响；蛋白质印迹法检测HK2表达水平。结果结直肠癌SW480细胞miR-513a-3p表达水平明显低于正常结直肠细胞（0.43 ± 0.06比1.00 ± 0.02），差异有统计学意义（t = 7.024，P = 0.003）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR对照物和转染miR-513a-3p抑制物（1.18 ± 0.24比0.45 ± 0.04和0.22 ± 0.03），转染miR对照物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR-513a-3p抑制物，差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显低于转染miR对照物，转染miR-513a-3p抑制物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显高于转染miR对照物，差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后葡萄糖摄取量及乳酸和硫氧还蛋白互作蛋白（TXNIP）表达水平明显低于转染miR对照物（1.02 ± 0.04比1.90 ± 0.06、0.88 ± 0.03比1.45 ± 0.04和0.16 ± 0.02比0.86 ± 0.06），转染miR-513a-3p抑制物后葡萄糖摄取量及乳酸和TXNIP表达水平明显高于转染miR对照物（2.35 ± 0.09比1.90 ± 0.06、1.67 ± 0.08比1.45 ± 0.04和2.01 ± 0.15比0.86 ± 0.06），差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后HK2表达水平明显低于转染miR对照物（0.20 ± 0.01比1.02 ± 0.04），差异有统计学意义（t = 8.367，P<0.05）；转染miR-513a-3p抑制物后HK2表达水平明显高于转染miR对照物（1.91 ± 0.07比1.02 ± 0.04），差异有统计学意义（t = 4.279，P<0.05）。结论miR-513a-3p对于结直肠癌细胞的增殖和糖代谢有明显的抑制作用，并且其调控机制与miR-513a-3p抑制细胞中HK2蛋白的表达有关。

简介：摘要：己糖激酶 -2（ Hexokinase-2 ， HK2）最近被发现可以在高血糖中通过糖酵解产生更多的代谢通量，其主要是通过葡萄糖介导的 HK2的稳定到蛋白质的水解来完成。而这导致糖酵解中间体的异常增加，引起线粒体功能障碍和己糖胺、蛋白激酶 C 和二羰基应激途径的激活。 HK2 相关的糖酵解过载解释了糖尿病与血管并发症相关的组织特异性发病机制，并在缺血再灌注损伤和细胞衰老的发病机制中起重要作用。这一新的致病机制假说为糖尿病的治疗提供了新的思路。

简介：摘要目的对己糖激酶法测定血糖与快速血糖仪测血糖的效果进行对比分析。方法本次实验将采取生化仪器法，会认真遵守自动生化分析仪操作手册上的规则，其中校准液为原装OLYMPUS，批号0111A，质控品选取正常值批号526UN、非正常值批号选取178798二个批号。校准液被该项目校准后，检测出有两个表现为正常，而且是二个不同批号、非正常值质控品，检测出在控后检测血糖。肝素钠抗凝剂在被测管检测到，并且向其中注入静脉血，将其搅拌混合均匀。在生化分析仪检测血糖之前，要做的准备工作是把样本血浆分开，于此同时测定血糖，使用的工具是用血糖仪，操作时严格按照按说明书，最终记录检测的数据和结果。结果运用统计法处理之后，得出在P＜0.03的情况下，己糖激酶法与光化学法结果相比，存在相当大的差别，如果血糖浓度值太高时，快速血糖仪测血糖法什么也检测不出来，所以，己糖激酶法测定血糖与快速血糖仪测血糖的结果不能进行对比。结论这两种方法在患者空腹时所测得血糖结果相差不大（检测结果小于12mmol/L时），因此临床医生可以根据患者的病症情况选取合适的方法，为重症患者争取更多的时间，但是务必要使用生化仪法验证该结果。

简介：

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-143靶向己糖激酶对胆囊癌细胞增殖和转移的影响及其分子机制。方法选取2018年6月到2020年6月我院行胆囊癌手术切除的94例胆囊癌组织和癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析组织中miR-143表达水平；采用荧光定量PCR分析正常胆囊上皮细胞株、胆囊癌细胞SGC-996和GBC-SD细胞miR-143表达水平；将体外培养的GBC-SD细胞分为对照组(以携带空载的慢病毒感染)和miR-143组(以携带miR-143的慢病毒感染)，采用荧光定量PCR分析miR-143表达水平；采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖；将两组细胞尾静脉注射建立胆囊癌血行转移模型，检测两组细胞在小鼠肺内形成肿瘤的能力；采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-143的靶基因；采用试剂盒检测两组细胞胞内乳酸水平；采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析靶蛋白及肿瘤转移蛋白表达水平；计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织中miR-143表达水平(1.04±0.13)明显高于胆囊癌组织(0.51±0.11)，差异有统计学意义(t＝3.891，P<0.05)。正常胆囊细胞株HGBEC miR-143表达水平(1.25±0.14)明显高于胆囊癌细胞SGC-996和GBC-SD(0.60±0.11、0.67±0.13)，差异有统计学意义(t＝3.317、3.157，P<0.05)。对照组吸光度(A)值(1.93±0.17)明显高于miR-143组(1.27±0.14)，差异有统计学意义(t＝3.193，P<0.05)。对照组细胞肺内成瘤数量[(16.39±3.18)个]明显高于miR-143组[(8.84±2.16)个]，差异有统计学意义(t＝4.107，P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶显示HK-Ⅱ是miR-143的靶基因。对照组细胞HK-Ⅱ表达水平(1.29±0.11)明显高于miR-143组(0.87±0.10)，差异有统计学意义(t＝3.108，P<0.05)。对照组细胞HK-Ⅱ表达水平(2.09±0.16)明显高于miR-143组(1.48±0.12)，差异有统计学意义(t＝2.816，P<0.05)。对照组细胞胞内乳酸水平[(1.95±0.17) mmol/L]明显高于miR-143组[(1.03±0.21) mmol/L]，差异有统计学意义(t＝4.996，P<0.05)。结论miR-143通过靶向调控胆囊癌细胞HK-Ⅱ表达水平，影响肿瘤细胞糖酵解水平，进而调节胆囊癌细胞增殖和转移等过程。

简介：目的：观察胃旁路术（GBP）对自发性2型糖尿病（T2DM）大鼠（GK大鼠）肝细胞葡萄糖转运体-2（GLUT-2）及葡萄糖激酶（GCK）表达的影响，探讨其改善胰岛素抵抗的机制。方法30只8周龄雄性GK大鼠按照随机数字法分为手术组（10只）、假手术组（10只）、饮食配对组（10只），另8周龄雄性SD作为空白对照组（10只）。检测和比较术前及术后1、2、4周各组大鼠空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）水平，应用蛋白印迹（Westernblot）及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测各组术后4周肝脏组织GLUT-2、GCKmRNA及其蛋白的表达情况。结果GK手术组术后1、2、4周FPG（（11.06±0.52）mmol／L、（7.49±0.34）mmol／L、（5.20±0.08）mmol／L）均低于术前水平（17.53±0.57）mmol／L）（均P＜0.05）；术后4周FINS由术前（11.90±0.75）mmol／L升至（14.20±1.23）mmol／L（P＜0.05）；术后4周GLUT-2、GCKmRNA及其蛋白表达明显增加（P＜0.01）。结论GBP能上调T2DM大鼠肝细胞胰岛素信号转导通路中GLUT-2及GCK的表达，增强胰岛素受体后的信号转导，提高胰岛素的敏感性。

简介：用基因方法治愈糖尿病有望在未来成为现实，生物芯片上海国家工程研究中心日前宣布：经过突变改造的葡萄糖激酶基因用于治疗2型糖尿病获得重要进展。

简介：摘要目的在体外研究结直肠癌细胞中人类无翅相关集合位点家族2号基因(Wnt2)对己糖激酶2(HK2)表达的影响，探讨其调控机制。方法使用慢病毒构建高表达Wnt2的人结直肠腺癌细胞(Caco2)稳转株细胞(Caco2-Wnt2、Caco2-NC)和低表达Wnt2的人回盲肠癌细胞(HCT8)稳转株细胞及其对照组(HCT8-shWnt2、HCT8-shNC)；通路富集分析(GSEA)探究Wnt2参与结直肠癌发生发展的可能机制，实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测转染效率和稳转株中8种有氧糖酵解相关分子的表达；信号传导与转录激活因子3(STAT3)通路抑制剂酪氨酸磷酸化抑制剂(AG490)分别在50 mmol/L和100 mmol/L浓度下抑制STAT3磷酸化，固定化蛋白质印迹法(Western blot)检测Wnt2、HK2、STAT3、磷酸化信号转导与转录活化因子3(pSTAT3)的mRNA和蛋白表达水平。组间差异比较采用t检验。结果Wnt2基因被富集到氨基糖和核苷酸糖代谢通路；Caco2-Wnt2组中HK2的mRNA表达水平高于Caco2-NC组(1.937±0.076比1.029±0.013，t＝11.789，P<0.01)，差异有统计学意义，HCT8-shWnt2组中HK2的mRNA表达水平低于HCT8-shNC组(0.375±0.029比1.064±0.016，t＝20.920，P<0.01)，差异有统计学意义；Western blot结果显示，Caco2-Wnt2组中的pSTAT3蛋白表达水平高于Caco2-NC组(0.350±0.004比0.170±0.008，t＝19.068，P<0.01)，差异有统计学意义，HCT8-shWnt2组中的pSTAT3蛋白表达水平低于HCT8-shNC组(0.275±0.014比0.530±0.035，t＝6.829，P<0.01)，差异有统计学意义；同时，Caco2-Wnt2+50 mmol/L组中的HK2的蛋白表达水平低于Caco2-Wnt2+DMSO组(0.362±0.013比1.524±0.023，t＝44.703，P<0.01)，差异有统计学意义；Caco2-Wnt2+100 mmol/L组中的HK2的蛋白表达水平低于Caco2-Wnt2+二甲基亚砜(DMSO)组(0.405±0.018比1.524±0.023，t＝38.749，P<0.01)，差异有统计学意义。结论Wnt2通过STAT3通路调控结直肠癌细胞Caco2和HCT8中HK2的表达。

简介：摘要目的分析一例中国己糖激酶型高胰岛素血症（HK1-HI）患儿的临床特征及基因突变。方法分别抽取患儿及父母亲乙二胺四乙酸钠抗凝血提取基因组DNA，行全外显子测序分析, 对明确或可能与受检者临床表型相关的基因变异采用Sanger测序进行验证。结果患儿于生后5个月起病，二氮嗪治疗有效，组织学分型为弥漫型。HK1基因第12外显子区有一个c.886 C>A（p. L296M）杂合突变，使编码产物的第296位由亮氨酸（Leu，L）变为甲硫氨酸（Met，M），为父系遗传。结论中国儿童中父系遗传的HK1基因外显子区突变,可能会导致HK1-HI的发生，该型起病较早，多对二氮嗪有效，组织学类型多为弥漫型。

简介：目的：观察胰岛素抵抗（insulinresistance，IR）形成过程中，己糖胺途陉（hexosaminebiosynthesispathway，HBP）的变化；初步探讨HBP过度活跃对胰岛素信号传导系统的影响。方法：以谷氨酸脱氢酶（GDH）法测定HBP限速酶-GFAT（Glutamine：fructose-6-phosphateamidotransferase）活性。以高脂高糖饲料诱导C57BL／6N小鼠形成IR动物模型。以高浓度的中效胰岛素诱导HIRc细胞建立IR—HIRc细胞模型。用westernblot方法检测胰岛素信号系统之蛋白表达及其磷酸化水平的变化。结果：以高脂高糖饲料喂养8周后，C57BL／6N小鼠可产生明显的IR；

简介：摘要目的建立高效液相色谱法测定盐酸溴己新葡萄糖注射液中盐酸溴己新的含量。方法采用AgilentC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为0.1%磷酸二氢钾溶液（用2.0mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.0）－乙腈（2080），柱温40℃，检测波长250nm，流速为1.0ml/min。结果盐酸溴己新进样量在10.024～100.24μg/ml范围内与峰面积有良好的线性关系，平均回收率为99.1%（RSD=0.3%，n=6）。结论该法简便、结果准确、可靠，可用于盐酸溴己新葡萄糖注射液的质量控制。

简介：

简介：目的：了解试纸法快速测定血糖结果与参考方法测定结果的符合程度。方法：用SurestepPlus稳步倍加型血糖仪快速测定血糖与BeckmanSynchronCXΔ测定血清糖作参考对照。结果：6份毛细血管(末梢)全血，静脉全血，静脉血清用试纸法快速测定血糖与静脉血清已糖激酶法测定血糖结果之间差异无显著意义。结论：试纸法快速测定全血血糖结果与参考方法测定血糖结果高度正相关r=0．981。

简介：摘要葡萄糖激酶（GK）是维持机体血糖稳态的关键酶，主要在人体胰腺和肝脏中表达。GK作为葡萄糖传感器，感知葡萄糖浓度变化，调节胰岛素/胰高糖素分泌，尤其是改善胰岛素早相分泌，并促进肝糖原合成，有效维持人体血糖动态平衡。糖尿病患者胰岛细胞和肝细胞的GK活性降低，控糖激素分泌及肝糖原合成异常，血糖稳态失衡，激活GK的活性可使患者恢复血糖稳态。

简介：摘要目的探讨二维及彩色多普勒超声对甲状腺微小乳头状癌(PTMC)的诊断价值，以提高PTMC的术前超声检出率。方法2011-2012年经我院手术病理证实的80例甲状腺癌患者中，其中小于1.0cm的PTMC患者约为36例，该36例患者行二维及彩色多普勒超声扫描并经手术病理证实。通过对该36例PTMC患者的术前超声表现进行回顾性分析，探讨PTMC的二维声像图和彩色多普勒特征。结果PTMC多表现为甲状腺内低回声肿块，边界不清，无明显包膜，L/T(纵横比)≥1，肿块内出现微小钙化及丰富血流信号，肿块后方回声衰减。结论高频超声是检诊PTMC的首选方法和最佳手段，为临床治疗提供有价值的信息。

简介：近年来自发性跟腱损伤的发生越来越多。特别是生活物质水平的提高，群众体育的普及，发病率有逐步增多的趋势，严重影响患者生活质量。自2002年12月～2008年1月，我科收治6例自发性跟腱断裂患者，采取手术治疗并结合己丁糖处理，术后功能恢复满意，现报道如下。

简介：摘要目的观察盐酸溴己新葡萄糖注射液治疗小儿肺炎的临床疗效。方法将我院2013年1月至2013年9月82例小儿肺炎患儿随机分成两组，对照组给予吸氧、止咳、化痰、抗病毒、抗感染等常规对症治疗；治疗组在此常规治疗的基础上给予100ml（盐酸溴己新4mg与葡萄糖5g）盐酸溴己新葡萄糖注射液1-100ml不等剂量（儿童根据体重计算）静脉滴注，一日一次，连续使用5-7天，对比两组疗效。结果对照组总有效率为77.5%，治疗组总有效率为95.2%，治疗组疗效明显优于对照组。结论盐酸溴己新葡萄糖注射液治疗小儿肺炎疗效显著，无明显不良反应，值得临床推广使用。