简介：摘要动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是一种病因复杂的慢性炎性疾病，是心脑血管等血栓性疾病的主要病因之一。细胞发生焦亡时，其过程伴有大量的炎性因子释放，又称为细胞炎性坏死。细胞焦亡与AS部位细胞死亡及炎症反应密切相关，内皮细胞(endothelial cells，ECs)焦亡释放黏附，趋化及促炎因子诱导早期动脉血管炎症反应，巨噬细胞(macrophages，MPs)焦亡加剧动脉粥样化病变和粥样斑块不稳定性，平滑肌细胞(smooth muscle cells，SMCs)焦亡诱导粥样斑块纤维帽破裂，促进疾病发展。因此，有效抑制细胞焦亡为研究预防和治疗AS提供新的思路。

简介：摘要动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是一种发病机制复杂的慢性疾病。AS斑块内巨噬细胞与AS发生发展的各个阶段密切相关，是AS重要的参与者及潜在的治疗靶标。近年来研究表明细胞的程序性死亡，如经典的细胞凋亡和最近发现的细胞焦亡、铁死亡等在许多疾病中影响着疾病的进展。现就AS斑块内巨噬细胞发生的凋亡、焦亡和铁死亡进行概述，探讨它们在AS发生发展中的作用以及尚待解决的问题，以期为AS的防治提供新的策略和靶点。

简介：摘要目的探讨miR-449a对于血管平滑肌细胞表型转化、增殖和迁移的作用。方法首先构建携带miR-449a抑制剂、miR-449a mimic的质粒和携带KLF4 siRNA的病毒，并将其转染到血管平滑肌细胞当中，用即时荧光定量PCR检测miR-449a的量，用Western blot检测KLF4的表达量，并检测表型转化相关代表蛋白SM-MHC、α平滑肌肌动蛋白、骨桥蛋白。同时，用CCK-8和细胞划痕试验来评估细胞的增殖和迁移状况。用免疫荧光检测蛋白表达量及细胞结构变化。用荧光素酶报告基因实验来证实miR-449a与KLF4之间的关系。结果实验发现，miR-449a的下调可以增加KLF4的表达以此达到促进血管平滑肌细胞表型转化的作用，并增加其增殖和迁移能力。结论可以通过上调miR-449a降低KLF4的表达，从而抑制血管平滑肌细胞的表型转化及降低其增殖和迁移能力。

简介：摘要目的观察外源性硫化氢对高静止压力下兔血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响并探讨其可能分子机制。方法血管组织贴块法分离兔胸主动脉VSMC并于100 mmHg静止压力下培养，实验分为对照组，培养液含0.2%胎牛血清(FBS)但不含NaHS，10%FBS组及NaHS组(培养液含10%FBS且含50mmol/L NaHS)。应用5－溴脱氧尿嘧啶核苷法检测VSMC的增殖，并用Western－blotting法检测VSMC的内源性胱硫醚－γ－裂解酶(CSE)、钙调蛋白(Calmodulin，p－CaM /CaM)、CyclinD1蛋白水平。结果与10%FBS组相比，NaHS可显著抑制100 mmHg压力下兔VSMC的增殖(0.50±0.03比0.26±0.03，P<0.05)。相比于对照组，10%FBS组CSE蛋白表达水平显著降低(1.21±0.10比0.33±0.04，P<0.05)，p－CaM、CylinD1二者表达显著增加(0.23±0.04比0.86±0.04与0.22±0.03比1.19±0.06，P<0.05)。与10%FBS组相比，NaHS组CSE蛋白表达水平显著增加(0.33±0.04比1.11±0.11，P<0.05)，而p－CaM、CyclinD1蛋白表达水平均显著降低(0.86±0.04比0.26±0.05与1.19±0.06比0.51±0.03，P<0.05)。结论外源性硫化氢通过细胞内CSE/硫化氢信号通路抑制高静止压力下的兔VSMC增殖可能与p－CaM与CyclinD1表达抑制有关。

简介：摘要目的探讨氯化锂对血管平滑肌细胞钙化的影响及其可能的作用机制。方法体外培养人主动脉血管平滑肌细胞，用钙化培养基(无机磷浓度为3 mmol/L)建立平滑肌细胞钙化模型。药物处理组用氯化锂(10 mmol/L)预处理细胞4 h后加入3 mmol/L的无机磷，继续培养细胞数天后用茜素红染色检测细胞钙盐沉积水平，同时应用焦磷酸偶联酶反应底物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)消耗法，酶标仪(OD340)检测细胞外焦磷酸的分泌；实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)和免疫印迹法(Western blot)检测细胞中ankh基因的表达；采用慢病毒感染人主动脉平滑肌细胞的方法，建立对照细胞组和ankh敲低的实验细胞组，并观察其对细胞钙化的影响。结果高磷细胞组钙化检测值为(65.00±2.11)ng/g，较对照细胞组(12.39±0.38)ng/g钙化水平明显升高(P<0.01)。氯化锂预处理细胞的钙化检测值为(24.92±1.87)ng/g，与高磷对照组(60.94±4.51)ng/g比较能显著抑制高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化(P<0.01)；氯化锂预处理明显上调细胞外液中焦磷酸的含量，基础条件下预处理组为(51.70±7.26)×10－3 mmol/g，对照组为(28.71±2.55)×10－3mmol/g(P<0.01)；高磷刺激下预处理组为(34.35±4.27)×10－3mmol/g，对照组为(20.89±4.93)×10－3mmol/g(P<0.05)，同时氯化锂预处理显著升高细胞ankh表达水平(P<0.01)；而敲低ankh使无机磷诱导的血管平滑肌细胞钙化程度显著加重，敲低ankh细胞钙化检测值为(71.73±2.45)ng/g，对照组为(56.19±3.59)ng/g(P<0.01)。结论氯化锂通过上调平滑肌ANKH的表达，升高细胞外液中的焦磷酸水平，抑制高磷诱导下血管平滑肌细胞的钙化。

简介：摘要内皮细胞结构和功能的改变是许多疾病发生的病理基础。细胞焦亡是最近发现的一种细胞程序性死亡方式，表现为细胞不断胀大直至破裂，细胞内容物释放，激发炎性反应。内皮细胞焦亡在动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤、急性肺损伤、创伤性脑损伤、糖尿病等多种疾病的发生、发展中起重要的作用。本文就近年来有关内皮细胞焦亡及其相关疾病的研究现状进行综述。

简介：摘要目的探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)/CXC型趋化因子受体4(CXCR4)在人体颅内动脉瘤(IA)壁中的表达与分布，以及血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化。方法纳入2018年1月至2019年6月长海医院神经外科接受开颅夹闭治疗的IA患者。在12例IA(未破裂和破裂IA各6例)和6例颞浅动脉(STA)组织中，利用高通量测序检测SDF-1α和CXCR4的表达；利用免疫组织化学观察VSMCs表型转化及血管重构；利用CFD软件对IA进行壁面切应力(WSS)对比。应用SPSS 21.0统计软件分析，组间比较采用t检验。结果苏木精-伊红(HE)及免疫组织化学显示与STA比较，动脉瘤壁内VSMCs异常增殖、排列紊乱、细胞解离变性、间隙变大等；瘤壁内VSMCs中SDF-1α、CXCR4及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达均增多，而α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达减少(0.050±0.014比0.017±0.006、0.045±0.010比0.012±0.004、0.040±0.009比0.006±0.004、0.037±0.006比0.060±0.011，t＝3.590、5.360、6.112、-3.324，P<0.05)。高通量测序发现，动脉瘤中SDF-1α、CXCR4和MMP-2表达高于STA[1 723.34±837.69比863.99±444.96、1 348.53±1 013.31比123.93±33.07、2 172.38±944.46比1 187.50±431.23，表达差异倍数变化(FC)＝1.995、10.881、1.829，P<0.05]，α-SMA表达降低(19 430.64±10 833.29比69 054.70±16 140.74，FC＝0.281，P<0.01)；破裂IA中SDF-1α、CXCR4和MMP-2表达高于未破裂IA(2 321.50±259.83比1 125.18±785.85、1 998.29±970.94比698.77±550.43、3 012.64±291.15比1 332.12±427.99，FC＝2.063、2.860、2.262，P<0.05)，α-SMA表达差异无统计学意义(25 597.72±4 241.84比13262.55±12 203.28，FC＝1.930，P>0.05)。破裂IA大部分伴有较低的WSS，未破裂IA大部分伴有较高的WSS。结论人颅内动脉瘤壁的VSMCs中SDF-1α/CXCR4信号通路激活，VSMCs发生表型转化，血管重构明显。较低的WSS可能通过瘤壁内的炎性反应与IA破裂密切相关。

简介：摘要目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)靶向调控信号转导与转录激活子1(STAT1)的表达，以及其在颈动脉粥样硬化(CAS)血管内皮细胞中的功能。方法将4月龄雄性新西兰白兔按随机数字表法分成4组，每组10只：假手术组(sham组)、模型组、miR-146a-mimics-NC组(对照组)和miR-146a-mimics组(实验组)。分别尾静脉注射LipofectamineTM RNAiMAX和miR-146a-mimics-NC、miR-146a-mimics的混合液到对照组和实验组兔体内，sham组和模型组注射等剂量的生理盐水；采用L-蛋氨酸饲料喂养配合颈总动脉球囊损伤法构建CAS模型，sham组只剥离颈内动脉，不进行球囊扩张和结扎。4周后处死动物留取标本，HE染色、qRT-PCR、Western blot检测各组兔CAS病理改变、miR-146a和STAT1蛋白的mRNA表达、Janus激酶2(JAK2)和磷酸化STAT1(p-STAT1)的表达水平。分别提取标本中颈动脉的血管内皮细胞进行培养，EdU标记、Transwell小室、小管形成、TUNEL染色检测各组细胞的增殖能力、迁移能力、小管生成能力和凋亡。荧光素酶报告基因分析miR-146a和STAT1的调控关系。结果与sham组相比，模型组兔颈动脉标本中miR-146a的表达水平明显降低，而STAT1的mRNA、JAK2和p-STAT1的表达水平明显升高，内皮细胞的增殖能力、迁移能力、小管生成能力降低，细胞凋亡率升高，CAS病理明显；与模型组和对照组相比，实验组兔颈动脉标本中miR-146a的表达水平明显升高，而STAT1的mRNA、JAK2和p-STAT1的表达水平明显下降，内皮细胞的增殖能力、迁移能力、小管生成能力增强，细胞凋亡率下降，CAS病理明显好转，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。荧光素酶报告基因分析证实miR-146a与STAT1靶向结合。结论MiR-146a能靶向调控STAT1的表达，过表达miR-146a能够抑制STAT1的表达，发挥其保护颈动脉内皮细胞的功能。

简介：摘要目的探讨雌激素相关受体α（estrogen-related receptor alpha, ERRα）对脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导大鼠肺微血管内皮细胞（pulmonary microvascular endothelial cells, PMVECs）炎症反应的影响及其机制。方法体外培养PMVECs细胞株，当细胞处于对数生长期时利用慢病毒转染细胞，并构建稳定低表达的ERRα细胞株。将细胞分别为四组：正常对照组（Ctr组）、正常细胞+LPS处理组（Ctr+LPS组）、shERRα1基因敲低组（shERRα1组）和shERRα1基因敲低组+LPS处理组（shERRα1+LPS组）。予20 μg/mL的LPS分别刺激对照组和基因敲低组细胞6、12和24 h后，应用cell counting kit-8（cck-8）检测各组细胞的增殖能力；应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养液中的肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）的浓度，于LPS刺激12 h后采用Western blot检测各组细胞ERRα及NF-κB通路的相关蛋白（p-p65、p65、P-IKBα、IKBα）的表达水平。两组变量比较采用SNK-q检验，多组变量比较采用单因素方差分析，方差不齐时则用秩转换的非参数检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果与对照组相比，shERRα1组ERRα蛋白的表达量明显降低（0.09±0.01 vs 0.15±0.01）；于LPS刺激6、12和24 h后，与对照组相比，shERRα1+LPS组细胞增殖能力明显降低[（99.68±4.53）% vs （48.62±1.60）%]；细胞培养上清液中的TNF-α（ng/mL）、IL-1β（ng/mL）的浓度明显升高，于刺激12 h后变化最为明显（15.76±3.38 vs 5 498.91±367.95；14.41±3.86 vs 6 014.92±277.33）。同时，shERRα1+LPS组p-p65（0.30±0.5 vs 1.05±0.07）、p-IKBα（0.27±0.04 vs 0.77±0.06）表达量明显升高，而IKBα的表达量明显降低（0.96±0.07 vs 0.14±0.04），差异均具有统计学意义（均P<0.05）。结论ERRα基因通过抑制NF-κB信号通路激活，缓解LPS诱导的大鼠肺微血管内皮细胞炎症反应。

简介：摘要目的探讨自噬是否参与调节亚砷酸钠诱导的人脐静脉血管内皮细胞功能失调。方法分离培养人原代脐静脉内皮细胞，不同剂量亚砷酸钠处理24 h，分别为0（对照）、2、5、10、20、30、50 μmol/L，CCK8法检测细胞活力。根据细胞活力结果确定后续实验染砷剂量，流式细胞术检测细胞内一氧化氮（NO）含量（亚砷酸钠处理4 h），蛋白免疫印迹法（Western blot）检测自噬标志蛋白LC3表达（亚砷酸钠处理0、6、12、24 h），电镜检测自噬体（亚砷酸钠处理12 h）。同时，以0.1 mmol/L 3-MA（自噬抑制剂）预处理人原代脐静脉内皮细胞2 h，然后30 μmol/L亚砷酸钠诱导，与单独30 μmol/L亚砷酸钠组比较上述检测指标。结果成功分离培养人原代脐静脉内皮细胞。与对照组[细胞活力：（99.97 ± 5.33）%，NO含量：42 048.34 ± 789.61]比较，30 μmol/L亚砷酸钠组细胞活力[（73.00 ± 0.86）%]显著下降，细胞内NO含量（23 353.97 ± 971.85）显著降低，差异有统计学意义（P均< 0.01）。30 μmol/L亚砷酸钠分别处理6、12和24 h，LC3Ⅱ表达水平（5.782 ± 2.789、9.692 ± 2.222、5.573 ± 2.941）明显高于处理0 h（1.000 ± 0.383，P均< 0.05），其中12 h时LC3Ⅱ表达水平最高。30 μmol/L亚砷酸钠处理12 h，电镜下观察细胞内自噬体明显多于对照组。与单独30 μmol/L亚砷酸钠组[细胞活力：（68.78 ± 1.55）%；LC3Ⅱ表达水平：5.680 ± 0.545；NO含量：13 025.78 ± 962.61]比较，3-MA预处理组细胞活力[（79.54 ± 4.99）%]升高，LC3Ⅱ表达水平（3.956 ± 0.398）下降，差异有统计学意义（P均< 0.05）；细胞内NO含量（13 988.51 ± 1 671.07）差异无统计学意义（P > 0.05）。结论自噬参与砷诱导的人脐静脉血管内皮细胞功能失调。

简介：摘要目的探索脂多糖（LPS）对大鼠心脏微血管内皮细胞（rCMECs）转录组的调节作用。方法对照组（正常培养rCMECs），LPS组（100 ng/mL LPS处理6 h的rCMECs），每组进行3个生物学重复转录组测序。得到差异基因后，使用实时定量PCR对部分差异基因mRNA的表达进行验证。分别对上调和下调基因进行GO和KEGG富集，并对差异基因进行共表达网络分析。采用独立t检验进行统计学分析。结果LPS处理后，265个基因表达上调，118个基因的表达下调。前10个最显著上调基因为：Mt2a、Cyp7b1、Sod2、Icam1、Ccl2、AC128848.1、Mt1、Cebpd、Serpinb2和Tnfrsf11b。前10个最显著下调基因为：Cavin2、Ankrd1、Edn1、Prss35、Lmod1、Dhrs3、Ttc22、Sema6a、Map2k3和Sema7a。定量PCR的结果表明Mt2a、Sod、Ccl2、Cxcl1、Icam1和Vcaml基因的表达得到了上调（P均< 0.01）；而Cavin2、Ankrd1、Edn1和Prss35基因表达下调（P均< 0.05）。GO和KEGG富集的结果表明，上调基因与内皮细胞对炎性免疫细胞的趋化作用和黏附作用密切相关；而下调基因则是与钙离子信号和G蛋白相关通路以及内皮通透性增加有关。此外，差异基因进行共表达网络分析发现Sod2处于核心位置，提示其可能与LPS诱导的rCMECs的各种变化密切相关。结论LPS调控了rCMECs中大量与炎性免疫细胞进入心肌组织相关基因的表达。

简介：摘要目的探讨问号钩端螺旋体(简称钩体)跨血管内皮细胞转运分子机制。方法采用Transwell法了解问号钩体赖株穿越人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)单层能力。采用透射电镜和激光共聚焦显微镜法检测HUVEC内吞问号钩体后形成内吞泡情况。采用细胞内吞抑制试验确定HUVEC内吞问号钩体方式。采用激光共聚焦显微镜法检测HUVEC胞内问号钩体与溶酶体标志分子LAMP1共定位情况。采用暗视野显微镜Petroff-Hausser计数法检测HUVEC胞内问号钩体出胞情况。结果问号钩体赖株能迅速穿越HUVEC细胞单层。问号钩体通过PI3K-微丝依赖的细胞内吞方式进入HUVEC并形成内吞泡。HUVEC胞内问号钩体不与LAMP1共定位，提示问号钩体内吞泡不与溶酶体融合。HUVEC胞内问号钩体通过FAK-微丝/微管途径出胞。结论问号钩体通过跨细胞转运方式穿越人血管内皮细胞导致体内播散并加重病情。

简介：摘要目的探讨赖氨酸甲基转移酶SET8介导AKT信号通路在调控高磷诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）钙化中的作用及机制。方法（1）选取雄性SD大鼠进行体内实验并随机分为假手术组和慢性肾衰竭血管钙化组。取胸主动脉，采用von Kossa染色检测钙化情况；免疫组化法检测SET8和Caspase-3表达情况。（2）体外实验进行原代VSMCs培养，将细胞随机分为正常组和高磷组（10 mmol/L β-甘油磷酸）。采用邻甲酚酞络合酮比色法及茜素红染色检测细胞钙化情况；流式细胞法检测细胞凋亡情况；RT-PCR和Western印迹法检测SET8、AKT和Caspase-3的表达。（3）为进一步验证SET8在VSMCs凋亡中的作用，采用脂质体转染法，分3组：SET8-短发夹RNA（shRNA）组、空质粒组和正常对照组。采用邻甲酚酞络合酮比色法及茜素红染色检测细胞钙化情况；流式细胞法检测细胞凋亡情况；RT-PCR和Western印迹法检测SET8、AKT、Caspase-3的表达。结果（1）体内实验中，慢性肾衰竭血管钙化组的血管钙盐沉积量明显高于假手术组（P<0.05）；免疫组化结果提示，与假手术组相比，血管钙化组SET8表达明显降低，Caspase-3表达明显升高（均P<0.05）；相关分析显示，血管组织SET8表达水平与钙含量、Caspase-3表达呈负相关（r=-0.948，P<0.01；r=-0.961，P<0.01）。（2）体外实验中，高磷组钙盐沉积明显高于正常组（P<0.05）；流式细胞术检测结果显示，高磷组VSMCs的凋亡率明显高于正常组（P<0.05）；RT-PCR和Western印迹显示，与正常组相比，高磷组SET8和AKT的mRNA和蛋白表达下降，Caspase-3的mRNA和蛋白表达升高（均P<0.05）。（3）干扰SET8基因表达后，VSMCs钙化及凋亡率明显增加，AKT的mRNA和蛋白表达下降，Caspase-3的mRNA和蛋白表达升高（均P<0.05）。结论SET8可以抑制血管钙化，其机制之一可能为通过促进AKT活化，抑制Caspase-3的表达，从而抑制VSMCs凋亡，进而参与调控高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化。

简介：摘要目的观察let-7f在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导血管内皮细胞炎症反应过程中的变化规律，探讨let-7f参与动脉粥样硬化起始发病过程的分子机制。方法采用双抗体夹心ELISA方法观察不同剂量ox-LDL处理血管内皮细胞时细胞间粘附分子1(ICAM-1)的表达变化情况，RT-qPCR检测不同剂量ox-LDL处理血管内皮细胞时let-7f的表达变化规律，Western blot法分析不同剂量ox-LDL处理血管内皮细胞时核因子κB(NF-κB)的核移位情况和ox-LDL对人脐静脉内皮细胞A20表达及NF-κB通路活化的影响，双荧光素酶报告实验检测let-7f与A20基因的3’-UTR靶向结合，Western blot法检测let-7f对A20表达的调控。结果20 μg/ml ox-LDL可导致血管内皮细胞培养液中ICAM-1的含量明显升高，血管内皮细胞let-7f的表达明显上调(均为P<0.05)，且随着ox-LDL作用剂量的增加，ICAM-1与let-7f的表达变化均呈现明显的剂量效应关系。此外，20 μg/ml ox-LDL可导致血管内皮细胞NF-κB向核内移位，随着ox-LDL作用剂量的增加核内NF-κB明显增多(P<0.05)。100 μg/ml ox-LDL作用于血管内皮细胞，可引起A20下调，IKK被磷酸化，并进一步导致NF-κB磷酸化增多，而let-7f能够与A20基因的3’-UTR靶向结合并明显抑制其表达。结论Let-7f可能通过调控NF-κB信号传导通路的活化参与血管内皮细胞的炎症反应过程，提示let-7f可能成为动脉粥样硬化早期预防和治疗的新靶点。

简介：摘要目的探讨芍药苷对脓毒症心脏微血管内皮细胞（CMECs）通透性的影响及机制。方法体外分离并原代培养大鼠CMECs细胞，待细胞进入对数生长期用于实验。采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）筛选出芍药苷的安全有效浓度10、20、40 μmol/L。将细胞分为空白对照组、脂多糖（LPS）组及低、中、高浓度芍药苷预处理组。空白对照组用完全培养基培养；LPS组在完全培养基中加入1 mg/L的LPS刺激细胞；芍药苷预处理各组分别于LPS刺激前4 h加入10、20、40 μmol/L芍药苷进行预处理。各组细胞于LPS刺激后继续培养24 h，采用辣根过氧化物酶（HRP）法检测大鼠CMECs细胞通透性；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清液中CXC趋化因子配体（CXCL1、CXCL2）水平；采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测细胞中CXCL1、CXCL2的mRNA表达；采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测细胞中磷酸化Src（p-Src）、血管内皮-钙黏蛋白（VE-cadherin）、磷酸化丝裂素活化蛋白激酶（p-MAPK）的蛋白表达。结果与空白对照组相比，LPS组大鼠CMECs细胞通透性明显增加；经不同浓度芍药苷预处理后细胞通透性均有一定程度改善，以40 μmol/L芍药苷组改善最明显，与LPS组比较差异有统计学意义（A值：1.61±0.07比2.13±0.06，P<0.01）。ELISA结果显示，空白对照组大鼠CMECs细胞上清液中有适量CXCL1、CXCL2分泌；但在LPS诱导下，细胞上清液中CXCL1、CXCL2分泌量明显增加；给予不同浓度芍药苷预处理后细胞上清液中CXCL1、CXCL2的分泌量均明显减少，其中40 μmol/L芍药苷对CXCL1的抑制作用最佳，20 μmol/L芍药苷对CXCL2的抑制作用最佳，与LPS组比较差异均有统计学意义〔CXCL1（ng/L）：337.51±68.04比829.86±65.06，CXCL2（ng/L）：4.48±0.11比9.41±0.70，均P<0.01〕。RT-qPCR结果显示，大鼠CMECs细胞中CXCL1、CXCL2的mRNA表达与ELISA结果一致，表现为LPS能够诱导大鼠CMECs细胞中CXCL1、CXCL2的mRNA表达增加；而不同浓度芍药苷预处理后能够明显降低CXCL1、CXCL2的mRNA表达，40 μmol/L芍药苷对CXCL1 mRNA表达的抑制效果最佳，20 μmol/L芍药苷对CXCL2 mRNA表达的抑制效果最佳，与LPS组比较差异均有统计学意义〔CXCL1 mRNA（2-ΔΔCt）：0.543±0.004比0.812±0.089，CXCL2 mRNA（2-ΔΔCt）：10.52±0.71比17.68±1.09，均P<0.01〕。Western Blot结果显示，空白对照组大鼠CMECs细胞中有适量p-Src、VE-cadherin和p-MAPK蛋白表达；LPS刺激后大鼠CMECs细胞中p-Src、p-MAPK蛋白表达明显增加，而VE-cadherin蛋白表达明显下降；经不同浓度芍药苷预处理后，细胞中p-Src、p-MAPK蛋白表达有不同程度降低，但VE-cadherin蛋白表达则呈升高趋势，以40 μmol/L芍药苷组效果最佳，与LPS组比较差异均有统计学意义〔p-Src蛋白（p-Src/GAPDH）：1.02±0.09比1.29±0.05，p-MAPK蛋白（p-MAPK/GAPDH）：0.24±0.02比0.62±0.02，VE-cadherin蛋白（VE-cadherin/GAPDH）：0.64±0.03比0.31±0.02，均P<0.01〕。结论芍药苷能够通过调节CMECs细胞中Src/VE-cadherin通路，抑制炎症相关蛋白及趋化因子的表达和分泌，改善LPS诱导的CMECs细胞通透性。

简介：摘要目的探讨骨形成蛋白2(BMP2)信号通路在颅内动脉瘤中的表达情况及其介导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的作用机制。方法将健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型组(n＝32)和假手术组(n＝32)。模型组通过结扎左侧颈外动脉、翼颚动脉及右侧颈总动脉制备颅内动脉瘤模型，假手术组不结扎血管。两组于术后3个月处死，采用电镜和HE染色法判断成模情况；采用免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹法分别检测BMP2及下游磷酸化Smad1/5(p-Smad1/5)在两组大鼠前交通动脉复合体VSMCs中的表达情况。进一步离体培养大鼠脑动脉的VSMCs，分为对照组、BMP2组(加入BMP2 100 ng/ml)以及Smad6＋BMP2过表达组(转染Smad6过表达载体＋BMP2 100 ng/ml)。采用TUNEL法检测各组细胞的凋亡情况，进一步采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞中BMP2、Caspase3及p-Smad1/5的表达情况。结果电镜和HE染色结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠前交通动脉复合体的血管壁均发生不同程度的瘤样病变，且VSMCs发生明显的重构和凋亡，说明建模成功。免疫组织化学染色结果显示，模型组大鼠前交通动脉复合体中的Caspase3(0.25±0.03)和BMP2(0.12±0.03)相对表达量均较假手术组(均为0.06±0.01)增加(均P<0.05)。蛋白免疫印迹法结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠BMP2(分别为：0.75±0.07、0.50±0.04)和p-Smad1/5(分别为：0.73±0.07、0.27±0.04)的相对表达量均明显增高(均P<0.05)。TUNEL法检测离体VSMCs，结果显示BMP2组[(74.63±6.05)%]和Smad6＋BMP2组[(45.92±1.08)%]的细胞凋亡率均较对照组增加[(4.35±0.65)%，均P<0.01]；但Smad6＋BMP2组的细胞凋亡率较BMP2组低(P<0.01)。蛋白免疫印迹法结果显示，BMP2组和Smad6＋BMP2组的p-Smad1/5、Caspase3的相对表达量均较对照组增加(均P<0.01)；但Smad6＋BMP2组的p-Smad1/5、Caspase3相对表达量均较BMP2组低(均P<0.05)。结论BMP/Smad信号通路在颅内动脉瘤中被激活，且可能通过BMP2上调p-Smad1/5进而促进VSMCs凋亡。

简介：摘要脑微出血(cerebral microbleeds，CMBs)是脑小血管病的一种影像学表现。目前越来越多的观点认为，血管内皮损伤在CMBs的发病过程中起着重要作用。血管内皮功能障碍所致的血脑屏障破坏以及炎症反应可能促进了CMBs的发生和发展。同时，CMBs病灶周围含铁血黄素的沉积也可能触发炎症反应。不过，相关的机制以及因果关系尚未完全阐明。文章对与CMBs相关的血管内皮炎性因子及其在CMBs发病中的作用机制进行综述。

简介：摘要大电导钙激活钾离子通道是一种具有钙离子敏感性及电压依赖性且对血管张力调节具有重要作用的膜离子通道，糖尿病时血管平滑肌细胞大电导钙激活钾离子通道结构及功能发生改变，说明糖尿病血管病变可能与大电导钙激活钾离子通道异常有关。活性氧是体内一类氧的单电子还原产物，高血糖状态下活性氧生成增加。目前越来越多的证据表明高血糖状态下活性氧影响大电导钙激活钾离子通道功能，但具体机制尚不完全清楚。本文主要综述活性氧对糖尿病血管平滑肌细胞大电导钙激活钾离子通道的影响及其机制。

简介：摘要目的探讨丙酮酸乙酯（EP）对热打击后血管内皮细胞增殖活性的影响。方法将人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）分别置入不同温度设置（39℃，41℃，43℃）的细胞培养箱内进行热打击4 h，或放入相同温度设置（43℃）的细胞培养箱内接受热打击不同时间（2 h，3 h，4 h）（时间点选取的依据——以上时间点是根据预实验的结果来选择的，预实验中43℃持续热打击5 h时细胞大部分都出现坏死脱壁，崩解成细胞碎片），对照组（CONT）则始终置于37℃细胞培养箱中培养，然后在倒置显微镜下观察各组细胞的形态学变化，并采用CCK-8试剂盒检测各组细胞的增殖活性；根据上述实验结果选取合适的热打击温度（43℃）及时间点（4 h），予以浓度为10 mmol/L的EP进行干预，然后采用CCK-8试剂盒检测细胞的增殖活性。结果随着热打击温度不断升高或热打击时间不断延长，镜下细胞的形态逐渐发生变化，以43℃热打击4 h组(HS组）细胞的形态变化最为明显；另外随着热打击温度的不断升高和热打击时间的不断延长，细胞的增殖活性逐渐降低，且与对照组（CONT）相比，均以43℃热打击4 h组细胞的增殖活性降低最为显著（F=25.79，P<0.001），而且与热打击组（HS）相比，EP干预组（HS+EP）细胞的增殖活性明显增高（P<0.001）。结论EP可以明显减轻热打击对HUVECs增殖活性的影响，有助于缓解高热所造成的血管内皮细胞活性的改变。

简介：摘要目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（OSAS）患儿血管内皮细胞功能状态及影响血管内皮细胞功能的相关因素。方法横断面研究。纳入自2015年6月1日至2016年3月1日在北京儿童医院耳鼻咽喉头颈外科就诊，年龄3~11岁的习惯性打鼾患儿355例（男245例、女110例）为研究对象。对研究对象行整夜多导睡眠监测，同时完成血管内皮细胞功能检测。根据阻塞性睡眠呼吸暂停低通气指数（OAHI）将研究对象分为原发鼾症组（107例）及OSAS组（248例），通过t检验或秩和检验比较两组儿童在睡眠检查结果等的差异，采用单因素和多因素相关分析探索影响血管内皮细胞功能的相关因素。结果355例患儿纳入研究，其中OSAS组和原发鼾症组在年龄、性别、体质指数Z值上差异无统计学意义（P均>0.05）。OSAS组OAHI、氧减指数和呼吸相关觉醒指数明显高于原发鼾症组[5.2（2.2,13.2）比0.4（0.1,0.7），4.1（2.0,13.1）比0.5（0.1,1.0），2.5（1.0,4.8）比0.4（0.1,0.9），Z=-14.957、-11.790、-10.378，P均<0.01]，最低血氧饱和度及反应性充血指数（RHI）明显低于原发鼾症组[0.89（0.85,0.92）比0.94(0.91,0.95),1.2±0.2比1.1±0.1，Z=-9.337，t=5.354，P均<0.01]。单因素线性回归分析显示，RHI与年龄（参数估计值=0.017,P<0.01）、性别（参数估计值=0.065,P<0.01）、OAHI（参数估计值=-0.023, P<0.01）、氧减指数（参数估计值=-0.019, P<0.01）、呼吸相关觉醒指数（参数估计值=-0.031, P<0.01）及最低血氧饱和度（参数估计值=0.067, P=0.045）呈线性相关，与体质指数Z值呈二次项关系。多因素线性回归分析显示，年龄（参数估计值=0.015, P<0.01）、体质指数Z值（参数估计值=0.040, P<0.01）、体质指数Z值二次项形式（参数估计值=-0.010, P<0.01）、呼吸相关觉醒指数（参数估计值=-0.020, P<0.01）和RHI独立相关。结论OSAS组血管内皮细胞功能明显低于原发鼾症组，夜间阻塞性呼吸事件相关的频繁觉醒可能是导致OSAS患儿血管内皮细胞功能障碍的危险因素。