简介：摘要目的探讨微小RNA191-5p（miR-191-5p）对胃癌细胞迁移、克隆形成和增殖的影响。方法采用实时定量-聚合酶链反应（Real-time PCR）检测分析了来自山西省肿瘤医院的60例胃癌患者的胃癌组织（C组）及其癌旁正常组织（N组）中miR-191-5p的表达水平；应用pcDNA3.1载体构建过表达miR-191-5p的重组质粒（pcDNA-mRNA-191-5p），实现miR-191-5p在胃癌细胞中的过表达，用miRNA-191-5p inhibitor实现miR-191-5p在胃癌细胞中的低表达；分别用划痕愈合实验、克隆形成实验和CCK-8法检测细胞迁移、克隆形成和增殖能力；Targetscan预测miR-191-5p与周期素依赖性激酶6（CDK6）的结合位点，并通过双荧光报告基因验证；Western印迹检测miR-191-5p对p21和CDK6蛋白表达的影响。结果与N组相比，C组中有53例（88%）胃癌组织中出现miR-191-5p的表达下调；C组miR-191-5p的表达水平为0.43±0.13，显著低于N组的0.88±0.12，P<0.001，过表达miR-191-5p能显著抑制胃癌细胞的迁移、克隆形成和增殖能力，差异有统计学意义（P<0.05）；双荧光报告基因证实miR-191-5p与CDK6的3′UTR结合；Western印迹显示胃癌细胞中pcDNA-miR-191-5p下调了CDK6表达而上调了p21表达。结论miR-191-5p表达下调可能参与胃癌的发生发展，过表达miR-191-5p能下调CDK6并抑制胃癌细胞生长。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-216a、miR-324-5p、miR-29a在急性胰腺炎（AP）患者外周血中表达的意义及与胰腺炎并发肝损伤的相关性。方法采用病例对照研究设计，选取2017年6月至2019年5月商丘市第一人民医院收治的130例AP患者，分为轻症AP组（MAP组）和中重症AP组（SAP组），肝损伤组54例（MAP 20例、SAP 34例）与非肝损伤组76例（均为MAP）；另选取40名健康志愿者为健康组。比较MAP组、SAP组、健康组以及肝损伤组与非肝损伤组外周血miR-216a、miR-324-5p、miR-29a表达水平，并分析其与临床指标相关性；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析外周血各miRNA水平对AP并发肝损伤的预测价值。结果MAP组、SAP组外周血miR-216a、miR-29a水平均高于健康组，miR-324-5p水平低于健康组（均P<0.01）；SAP组外周血miR-216a、miR-29a水平均高于MAP组，miR-324-5p水平低于健康组（均P<0.01）。Balthazar CT评分、急性生理与慢性健康状况评分（APACHEⅡ）评分、C反应蛋白水平、住院时间与外周血miR-216a、miR-29a水平均呈正相关（均P<0.05），与miR-324-5p水平呈负相关（均P<0.05）。肝损伤组外周血miR-216a、miR-29a水平高于非肝损伤组，且在肝损伤组中SAP患者高于MAP患者（均P<0.05）；肝损伤组外周血miR-324-5p水平低于非肝损伤组，且肝损伤组中SAP患者低于MAP患者（均P<0.05）。外周血miR-216a、miR-324-5p、miR-29a预测AP并发肝损伤的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.694、0.750、0.814。结论miR-216a、miR-29a水平在AP患者外周血中表达增高，miR-324-5p水平降低，与Balthazar CT评分、APACHEⅡ评分、C反应蛋白水平、住院时间关系密切，且对AP并发肝损伤有一定预测价值，其中miR-29a预测价值最高。

简介：摘要目的研究微小RNA-16-5p（miR-16-5p）对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）和蛋白质印迹法（Western blotting法）检测人正常成骨细胞hFOB 1.19和骨肉瘤细胞MG63、Saos2、HOS内miR-16-5p、四分子交联体15（TSPAN15）mRNA和蛋白表达。在MG63细胞中转染miR-16-5p或si-TSPAN15，观察其在细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖，Transwell法检测细胞迁移和侵袭，Western blotting法检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、TSPAN15、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）蛋白表达。Starbase网站预测结合双荧光素酶基因报告实验分析miR-16-5p与TSPAN15的靶向关系。将miR-16-5p和pcDNA-TSPAN1共转染，评估高表达TSPAN15对过表达miR-16-5p诱导的MG63细胞增殖、迁移和侵袭的影响。两组间数据的比较采用t检验。结果与hFOB 1.19细胞（1.00±0.12）相比，MG63、Saos2、HOS细胞中miR-16-5p表达量（分别为0.32±0.05、0.40±0.04、0.45±0.06）明显降低（F=156.204，P<0.05），TSPAN15 mRNA和蛋白水平显著提高（F=71.718、110.350，均P<0.05）。过表达miR-16-5p明显减少MG63细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达量及细胞存活率、细胞迁移数量和侵袭数量（F=150.136、117.228、154.971、89.479、98.373、130.880，均P<0.05）。敲减TSPAN15明显降低MG63细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平、细胞存活率、细胞迁移数量和侵袭数量（F=93.206、107.030、109.326、115.625、146.113、139.300，均P<0.05）。过表达miR-16-5p显著降低MG63细胞中p-PI3K、p-AKT蛋白表达量（F=156.755、181.419，均P<0.05）。miR-16-5p靶向调控TSPAN15的表达。高表达TSPAN15可部分逆转miR-16-5p对MG63细胞内TSPAN15、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、p-PI3K、p-AKT蛋白表达、细胞存活率、细胞迁移数量和侵袭数量的抑制作用。结论miR-16-5p通过靶向TSPAN15基因并调控PI3K/AKT信号通路，从而抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭。

简介：摘要目的筛选恶性胶质瘤患者血清外泌体中差异的微小RNA（microRNA），探讨小非编码RNA-376b-3p（miR-376b-3p）对胶质瘤细胞的增殖、侵袭和肿瘤血管生成拟态的影响，并验证其对同源框蛋白D10（HOXD10）的靶向作用。方法通过HiSeq/MiSeq高通量测序技术筛选恶性胶质瘤患者血清外泌体中差异的microRNA表达谱及其靶基因和作用途径。小样本评估候选microRNA在高级别胶质瘤血清外泌体中的表达。采用U87胶质瘤细胞株分别转染对照抑制物、miR-376b-3p抑制物、对照模拟物和miR-376b-3p模拟物后，通过四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）实验、细胞迁移实验、血管形成拟态实验检测miR-376b-3p对胶质瘤细胞的增殖率、细胞侵袭能力和肿瘤血管生成拟态的影响。检测HOXD10的信使RNA（mRNA）和蛋白表达水平，评估miR-376b-3p对HOXD10的调控作用。结果测序筛选到高级别胶质瘤血清外泌体与正常对照之间的差异microRNA个数为144个。在京都基因和基因组百科全书（KEGG）数据库富集到局灶性黏附、肿瘤蛋白多糖等参与胶质瘤调节的通路。小样本验证发现miR-376b-3p在高级别胶质瘤中下调（P<0.01），对高级别胶质瘤的诊断的曲线下面积为0.85（P<0.01）。MTT实验显示转染后48~96 h，miR-376b-3p抑制物组增殖能力高于对照组，转染后48、72 h时，miR-376b-3p模拟物组增殖能力低于对照组。Transwell迁移实验显示，miR-376b-3p抑制物组穿膜细胞数量高于对照抑制物组，miR-376b-3p模拟物组穿膜细胞数量低于对照模拟物组。miR-376b-3p模拟物组的血管形成数低于对照模拟物组。miR-376b-3p抑制物下调了HOXD10的mRNA和蛋白的表达水平，miR-376b-3p模拟物上调了HOXD10的mRNA和蛋白的表达水平。结论miR-376b-3p在高级别胶质瘤患者血清外泌体中下调，而上调miR-376b-3p后能够降低胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力，抑制血管形成拟态的形成，同时能增加HOXD10的表达，有望同时抑制两种形式的血管形成，成为高级别胶质瘤的抗血管生成新的治疗靶点。

简介：【摘要】：本文讨论在中职汽修专业教学汽车《汽车故障分析与排除》课程教学过程中，通过丰田 3AR 发动机的一次 P0420 故障码分析过程实例，向学生讲授汽车故障分析与排除的思路及技巧。

简介：摘要：本文通过与 3P教学法的对比，首次研究了输入加工教学对来华留学生“ V下去”学习的主要效应。结果发现：两种方法有有利于学生对“ V下去”的学习，但是，在解释题上，输入加工教学发到的促学效应更显著。

简介：【摘要】英语教学的3P教学法已经广泛的应用于我国各个阶段的英语语法教学之中。众所周知，3P教学的方法是从其他国家的教学方式中演变而来的，要想更好的利用这个方法进行英语语法学习，就需要老师对这个方法先进行分析和学习，再利用这个方法对学生进行具体的知识内容讲授。所谓的3P教学法就主要是Presentation呈现、Practice练习和Production 输出，通过这三个部分的讲授，老师可以帮助学生从新学的课文内容之中了解新的知识，也能够让学生弄清楚课堂知识的重点。

简介：

简介：摘要：近年来， P2P网络借贷行业出现大规模的“爆雷”，平台跑路、停业、清盘等现象层出不穷，近日，互金整治办与网贷整治办为化解 P2P网络借贷机构资金兑付来源问题，维护 P2P网络借贷金融消费者合法权益，印发公布了《关于网络借贷信息中介机构转型为小额贷款公司试点的指导意见》。本文正是基于最新有关网络借贷信息中介机构政策文件的发布，探讨怎样在最新指导规范下，如何谋求 P2P网络借贷金融消费者合法权益的保护。

简介：摘 要 随着国家对基础教育投入的增加，小学的教学设施在逐年完善。信息技术教育已成提高学生素质的必修课，为帮助学生树立正确的价值观，必须将德育教育渗透到信息技术教育中。在通过对德育教育的调查分析，提出了德育教育在信息技术教育中渗透的几点措施，以达到学生在掌握信息技术知识的同时，具备较高的德育素质。

简介：

简介：摘要：在阅读教学中激发学生个性思维，让学生学会质疑，展开想象，加强写作练习。

简介：摘要：通过转化案例，鼓励家长积极面对亲子关系，引导家长主动营造良好家庭氛围，采取正面管教和心理疏导，才能给孩子最好的家庭教育。

简介：摘要:现行教材在建立电功率的计算式P=UI时有待优化，教材中通过实验探究只是得出电功率与电流、电压的定性关系，接着“根据进一步的实验”得出三者的定量关系式。笔者通过实验测出电功、时间、电流和电压，根据定义式P =W /t计算出电功率（P），再与电流电压的乘积（UI）相比较，发现二者相等，从而巧妙建立公式P =UI。 关键词:创新实验；优化教材；公式P =UI 物理概念的建构及公式的建立一直都是教学的重点，也是学生学习的难点。笔者在教学中发现，现行教材在建立电学公式（W=UIt或P =UI）的过程时有待优化。在实验探究得出物理量之间的定性关系后，书中说“研究表明”或“根据进一步的实验”便得出了定量关系式。整个公式的建构过程容易让学生感觉有些掉链。笔者在教学中增设验证性实验，通过实验数据的比对，直观反映出物理量之间的定量关系，从而大大降低了学生的理解难度。下面我将实验的背景、器材、方法和数据与大家共享。 一、实验背景：教材有待优化 1．人教版：先建立电功的计算式W=UIt，再根据电功率的定义式P =W /t来推导出P =UI。但是，在建立电功的计算式W=UIt时感觉有些跳跃。教材通过一段告白“加在用电器上的电压越高、通过的电流越大、通电时间越长，电流做功越多。接着“研究表明”便得出了四者的定量关系式，即W=UIt。 2．教科版在内容编排时进行了改进。教材中没有先建立电功的公式W=UIt，而是根据电功率的定义先建立定义式P =W /t。接着通过学生实验探究“电功率跟电流、电压的关系”，从而得出“用电器两端的电压越大，通过用电器的电流越大，电功率越大”的定性关系，再在定性关系的基础上“根据进一步的实验”得出三者的定量关系式P =UI。 新课标理念倡导“物理规律应建立在实验事实基础上，并取得可靠数据后总结得出。”“尽可能让学生经历实验探究过程。”人教版教材直接给出电功的计算式W=UIt,有些突兀；教科版教材虽然归避了这种突兀，但却在实验的基础上由定性关系得出定量关系式，学生较难理解其中的建构过程。 二、实验器材：顺应学生思维 笔者这边用的是教科版教材。学生经历实验探究“电功率跟电流、电压的关系”后，分析实验现象和数据得出结论：通过用电器的电流越大，用电器两端的电压越大，电功率也越大。 师：同学们猜一猜，电功率与电流、电压有怎样的具体关系呢？ 生（甲）：成正比。生（乙）：不一定…… 师:我们能不能设计实验来验证电功率与电流、电压是否成正比，即P =UI是否成立？ 师：有没有办法分别测出电功率(P )、电压(U )和电流(I )呢？ 因为本节课刚刚建立了电功率的定义式，且上一节刚学习了电能表，所以学生很快想到了测电功率的原理：P =W /t。而且测量工具：电能表和秒表都是实验室的常规仪器。 …… 师：对，利用电能表和秒表可以测出电功率。可是，电能表测的是220V的交流电，实验室的电流表和电压表只能测低压直流电，无法测家庭电路中的电流、电压。怎么办？ 学 生一片沉思!此时，老师顺势展示可测量家庭电路中电压、电流的仪表 实验序号 1 2 3 4 电压U/V 227 206 231 211 电流I/A 0.8 0.76 0.34 0.32 UI/W 181.6 156.56 78.54 67.52 闪烁次数 16 14 7 6 电功W/J 9000 7875 3937.5 3375 时间t/s 50 50 50 50 功率P/W 180 157.5 78.75 67.5

简介：摘要：社会需求，教学手段的发展，教学技术的更新，教学教育功能的开发，教学设计者的态度和思想，都在影响着当前教育教学效果，提倡以学生发展为目标，建立更加适应学生的教育思想，教学载体多样化，让各具个性的学生，在集中教学中都受益，达到学生全面提升的效果，是我们所追求的课堂教学目标。本文提出，对于每次课的主体知识点，不能“昙花一现”，也不要单线联系，要在“双案——四线”中同时并进，各条线不是互相取代，更不是相互抵触，而是“从A地到B地的并联”关系，知识结构中有，问题练习中有，课本中有，学案中有，ppt课件中仍然有，预习时涉及，互动探究时深入，收尾训练时巩固，坚持每一节课的节奏都是“合奏”与“混响”，这些“自助餐”式的学习载体，总有合适的“音频”或“食品”能够引起学生的“食欲”或“共鸣”。老师就是“编创者兼音乐指挥”，舞台上各个声源如何更和谐，何时发声，发什么样的调子，要融入作曲创编者和指挥者的才智，才可以欣赏到优美的交响乐。一节课的内容看起来不多，但学生的理解情况多，要让每个学生都得到最好的教育，教师就必须坚持多角度付出，无论“课本画块描线”“系统制作课件”“精心编制学案”“知识分层主线”“问题例题训练”“音像动画图片”“生生动态答辩”“引导学生会战”等等，这一宗才构成备课的教学方案，才能为一节优质课创造稳固的基础。在教学管理与实施中，教育的节点和情景信息都不是固定的，更不可能把学情都看作是一致的，在分层教育活动时，无论是人、事、资源、行为，多采用“3+3+3”的划分去操作，又可以将教育的精准度提升三倍以上。

简介：

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简介：摘要心血管疾病是心血管系统基因调节网络失调的结果，而非编码RNA在其发育、生理和疾病病理生理的基因表达中发挥着关键的调节作用。非编码RNA表达具有细胞和器官特异度，在多种人体组织、体液，特别是血液、尿液或脑脊液中，存在与疾病相关的非编码RNA，稳定性高，易获取和检测，对某些疾病具有高敏感度和特异度，有潜力成为心血管疾病危险分层、诊断及预后的生物标志物，目前FDA已经批准lncRNA前列腺癌抗原3应用于临床常规诊断前列腺癌。在治疗方面，已经有以miR-21和miR-34等为靶向的多种药物进入临床试验阶段，使患者结局改善并且耐受性良好。因此，非编码RNA在应用于阐明某些心血管疾病的发病机制、成为新型的生物标志物和靶向治疗药物等方面值得期待。

简介：摘要RNA甲基化是表观遗传转录组学的重要研究领域。N6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine，m6A）是mRNA上最丰富的内部修饰，受到甲基转移酶、去甲基化酶动态可逆的调控，并且通过与m6A读取蛋白的结合影响mRNA的加工和代谢过程，调控基因表达。m6A RNA甲基化修饰的异常与肿瘤的发生发展密切相关，但不同肿瘤中的m6A介导的分子机制和作用尚未完全阐明。随着高通量测序与生物信息学的发展，已有多种方法可对m6A甲基化位点进行检测分析。以m6A修饰蛋白作为临床诊治靶标具有潜在的应用价值，特异性调节剂的开发有望为肿瘤治疗提供新的选择。