简介:摘要目的观察白细胞介素-33(IL-33)在胆囊癌组织中的表达,并探讨沉默IL-33的表达对胆囊癌细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法收集20例通过手术切除的胆囊癌组织标本,采用免疫组织化学技术检测组织中IL-33的表达,然后将IL-33小干扰RNA(siRNA)转染进人胆囊癌GBC-SD细胞,通过实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法筛选出沉默效率较高的一条siRNA用于后续实验。将实验分为IL-33 siRNA组、未转染组(Blank组)和阴性对照组(NC组),通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法和Transwell小室法分别探索siRNA沉默IL-33后对胆囊癌细胞增殖和侵袭能力的影响。通过蛋白质印迹(Western blot)法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平。率的比较采用χ2检验,两组以上数据采用单因素方差分析,使用Bonferroni法进行组间两两比较。结果IL-33在胆囊癌组织中的阳性表达率(90%)高于正常组织(40%),差异有统计学意义(χ2=8.901,P<0.05)。IL-33 siRNA组胆囊癌细胞在24、48、72 h的吸光度值和侵袭数目显著低于Blank组和NC组(24 h吸光度值分别为1.25±0.07、1.49±0.05、1.48±0.08,48 h吸光度值分别为1.51±0.02、2.15±0.10、2.08±0.02,72 h吸光度值分别为1.80±0.05、2.38±0.07、2.31±0.10,侵袭数目分别为50.25±9.29、243.00±24.32、217.25±14.97),差异有统计学意义(F=12.150、101.400、41.790、145.700,P<0.05)。IL-33 siRNA组中Vimentin的表达低于Blank组和NC组(0.66±0.01、0.87±0.06、0.86±0.04),差异有统计学意义(F=24.710,P<0.05),IL-33 siRNA组中E-cadherin的表达高于Blank组和NC组(0.32±0.02、0.12±0.01、0.17±0.02),差异有统计学意义(F=121.000,P<0.05)。结论IL-33在胆囊癌肿瘤组织中高表达。siRNA沉默IL-33表达后,胆囊癌细胞的增殖和侵袭能力均受到了抑制,同时减弱了EMT过程。
简介:摘要目的观察Bufalin(蟾蜍灵)、AMD3100(普乐沙福)作为药物单独或联合作用于胆囊癌细胞株(GBC-SD)后,观察其对细胞增殖、迁移、凋亡以及CD133表达的影响,探讨其在胆囊癌中的作用。方法收集2017年1月至2021年12月郑州大学第二附属医院手术切除的胆囊癌标本20例,通过免疫组织化学法检测CD133在肿瘤以及癌旁组织的表达的差异。用不同浓度的Bufalin(80、160、320 nmol/L);AMD3100(10、20、40 μmol/L)及联合用药(Bufalin 160 nmol/L+AMD3100 20 μmol/L)干预人胆囊癌(GBC-SD)细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)法观察药物对肿瘤细胞增殖产生的影响,Transwell小室法检测肿瘤细胞迁移能力,膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙锭(PI)法检测细胞凋亡,流式细胞法检测细胞CD133分子表达。率的比较采用χ2检验,组间比较用单因素及双因素方差分析。结果免疫组织化学结果示CD133分子在人胆囊癌组织中的阳性表达率为85%,明显高于癌旁组织表达率[30%,χ2=10.23,P<0.01],表达定位于胞质和胞核,流式结果显示CD133在GBC-SD细胞中阳性表达。Bufalin(80、160、320 nmol/L)作用(24、48、72 h)后与对照比较实验组细胞增殖受到明显抑制(F=21.389、57.231、73.444,P<0.05)。160 nmol/L的Bufalin作用后细胞迁移数为(114.33±5.51),明显低于对照组(270.67±13.65,F=241.989,P<0.01)。CD133分子表达水平为(1.48±0.14),低于对照组(3.22±0.46,F=202.589,P<0.01),细胞凋亡率[(32.57±0.69)%]高于对照组[(16.35±0.33)%,F=171.288,P<0.01]。AMD3100组中,与对照组比较AMD3100 20 μmol/L作用48 h细胞活性为(87.58±7.10)%,40 μmol/L作用48 h为(67.84±0.75)%(F=57.231,P<0.05),40 μmol/L作用72 h[(72.57±10.23)%,F=73.444,P<0.05]使细胞增殖明显受抑。40 μmol/L的AMD3100作用后,与对照组细胞迁移个数[(270.67±13.65)个]明显低于实验组[(193.33±8.08)个,F=241.898,P<0.01]。CD133分子表达水平实验组为3.07±0.11,对照组为3.22±0.46,差异无统计学意义(F=202.589,P>0.05)。凋亡率对照组为(16.35±0.33)%,实验组为(16.37±1.81)%,差异无统计学意义(F=171.228,P>0.05)。联合用药组(Bufalin 160 nmol/L+AMD3100 20 μmol/L)与对照组比较各时间(24、48、72 h)细胞增殖均受到抑制(F=21.389、57.231、73.444,P<0.05);细胞迁移个数为(270.67±13.65)个,实验组为(133.67±6.50)个,差异有统计学意义(F=241.898,P<0.01)。CD133分子表达水平(2.19±0.68)低于对照组(3.22±0.46,F=202.589,P<0.01)。细胞凋亡率[(33.58±1.67)%]高于对照组[(16.35±0.33)%,F=171.228,P<0.01]。结论CD133在GBC-SD细胞中阳性表达,在胆囊癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织。Bufalin、AMD3100可抑制胆囊癌细胞增殖、迁移。Bufalin单独以及与AMD3100联合用药抑制胆可囊癌细胞增殖、迁移、并促进细胞凋亡、抑制CD133分子表达。
简介:摘要目的探讨老年慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)频繁急性加重表型患者的临床特征。方法回顾性分析,选取山西医科大学附属白求恩医院呼吸科2015年8月至2016年9月门诊随诊的93例稳定期老年慢阻肺患者,分为频繁急性加重表型组45例和非频繁急性加重表型组48例,并采集患者体质指数(BMI)、肺功能、吸烟指数(包年)、呼吸状况问卷及血肌酐水平,采用Logistic回归分析老年患者慢阻肺急性加重频率的影响因素。结果慢阻肺频繁急性加重表型患者BMI[19.59(18.08~23.50)kg/m2]低于非频繁急性加重表型[23.36(21.14~25.46)kg/m2],而mMRC量表评分[3.00(1.00~3.00)分]、CAT评分[15.00(8.50~17.50)分]、吸烟指数[60.00(30.00~80.00)包年]均高于非频繁急性加重表型[1.00(0.00~1.00)分、10.00(6.00~13.75)分、37.50(3.75~60.00)包年],差异具有统计学意义(Z=8.898、17.671、7.318、6.589,P=0.003、<0.001、0.007、0.010);慢阻肺频繁急性加重表型患者肾小球滤过率(GFR)[105.13(89.84~114.69)ml·min-1·1.73m-2]低于非频繁急性加重表型[121.74(93.89~142.02)ml·min-1·1.73m-2],差异有统计学意义(Z=6.071,P=0.014);慢阻肺频繁急性加重表型患者第1秒用力呼气容积占预计值百分比[40.10(31.40~56.00)%]低于非频繁急性加重表型[70.65(47.36~85.36)%],差异有统计学意义(Z=17.814,P<0.001)。Logistic回归结果显示,吸烟指数和GFR的OR值(95% CI)分别为1.025(1.006~1.044)和0.957(0.927~0.995)(P=0.009、0.025),即随着吸烟指数增加和GFR降低,慢阻肺频繁加重的风险增加。结论频繁急性加重表型与非频繁急性加重表型老年慢阻肺患者存在差异,频繁急性加重表型老年慢阻肺患者BMI较低、吸烟指数更高、临床症状多、肺功能差,容易发生早期肾脏损伤。