简介：

简介：摘要病理科常规开展的基因扩增检测工作，主要是基于非传染性组织样本的基因检测。新型冠状病毒肺炎疫情的暴发及进展要求提升病毒核酸检测能力，符合要求的基因扩增实验室会越来越多地承担核酸检测工作。因此尽快评估与改造实验室、明确实验室设施要求与安全规范极为重要。该科室结合实验室设施要求以及承担新型冠状病毒核酸检测工作的经验，对病理科基因扩增实验室开展核酸检测工作的设施要求进行分析，为申请开展核酸检测的实验室提供指导和参考。

简介：摘要：随着建筑功能性的增多，越来越多的项目需要维持室内环境的温湿度恒定。空调精度要求高的空调房间在建筑方面也有特殊的要求，以减少外界的扰量对空调房间的影响。我国规范对有精度要求的空调房间的外墙朝向、维护结构最大传热系数、楼层等都有明确的规定。对外窗的结构、朝向和外门的要求都有规定，详见《民用建筑供暖通风与空气调节设计规范》。恒温恒湿空调系统的送风温差应根据气流组织形式、送风口类型、安装高度、气流射程长度及是否贴附等因素确定，并应符合现行国家标准规范要求。对于温湿度精度较高的恒温恒湿场所，国家标准规范对其换气次数也有相应要求。在工程设计中，要根据房间的温湿度精度要求合理选择系统，需对房间的负荷进行详细计算并选取匹配的恒温恒湿空调机组。恒温恒湿空调机组常应用于实验室、档案室、核磁共振机房。本文对这三类场合的恒温恒湿空调进行总结分析，以便于相似场合的恒温恒湿空调设计。

简介：摘要目的：探究实时荧光定量PCR技术快速检测的效果。方法：选取疑似甲型 H1N1流感病毒携带者咽拭子标本作为检测标本，共100份，均采取病毒核酸确诊方式，分析诊断结果。结果：在100例患者中，阳性41例、阳性率为41.00%；在不同分型中，检出甲1型流感病毒29例、所占比为70.73%，检出甲3型流感病毒12例、所占比为29.27%，未检出乙型流感病毒，不同分型的所占比相比，具有显著差异，P＜0.05。结论：对甲型H1N1流感病毒实施实时荧光定量PCR技术快速检测，取得显著的诊断价值，能早期明确疾病，利于后期治疗。

简介：目的建立椰毒假单胞菌酵米面亚种荧光标记扩增片段长度多态性（FAFLP）分型方法,并对4株模式菌株和19株分离菌株进行分型。方法选用4种低频限制性内切酶（ApaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和PstⅠ）和2种高频限制性内切酶（MseⅠ和TaqⅠ）进行组合,对FAFLP预扩增和选择性扩增体系进行优化,用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析,并与VITEK2GN生化结果和16SrDNA序列分析进行比较。结果ApaⅠ-G/TaqⅠ-G组合将19株椰毒假单胞菌酵米面亚种分为7个群,菌株间最低相似度为80.85%,最高相似度为98.77%。PstⅠ-T/TaqⅠ-G组合将19株椰毒假单胞菌酵米面亚种分为10个群,菌株间最低相似度为48.68%,最高相似度为99.67%。两种FAFLP组合均能将菌株进行完全区分,而VITEK2GN和16SrDNA序列分析无法将菌株进行完全区分。结论ApaⅠ-G/TaqⅠ-G组合与PstⅠ-T/TaqⅠ-G组合FAFLP对椰毒假单胞菌酵米面亚种具有足够的分辨率,本研究建立的FAFLP分型方法可应用于椰毒假单胞菌酵米面亚种的分子分型和溯源。

简介：摘要目的采用实时荧光PCR方法快速检测公共场所从业人员肠道致病菌，了解实时荧光PCR方法的应用价值。方法随机采集10087份从业人员肛拭子标本分别进行实时荧光PCR方法和培养法检测沙门氏菌和志贺氏菌，分析实时荧光PCR方法的检出率。结果10087份标本中，实时荧光PCR方法共检测出两种肠道菌16例，其中沙门氏菌11例，志贺氏菌5例；阳性率分别为1.09‰和0.5‰。而培养法检测出沙门菌为9例，志贺菌为4例，阳性率分别为0.89‰和0.4‰；另外男性两个致病菌阳性检出率比女性阳性检出率低。结论实时荧光PCR方法可以很好的应用在从业人员肠道致病菌的筛查，该方法可以节省劳动力，降低工作人员的工作强度。并且可以节省从业人员拿到健康证时间。

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简介：摘要目的研究实时荧光定量(RT-PCR)检测乙肝病毒核酸(HBV—DNA)时，自制质控品的扩增循环阈值(CT)作为靶值在室内质控中应用的可行性。方法留取已知HBV—DNA浓度的患者血清和甲、乙、丙、戊肝和HIV血清学标志物全阴性的患者血清，通过一定比例稀释得到预期浓度的质控物，分装并-70℃保存。分别计算出靶值，标准差和变异系数(OCV％、RCV％)，以CT值在±2S为质控警告线±3S为质控失控线，绘制Levey—Jennings质控图。分析结果质控物最佳条件下的、S和OCV分别为27.5、0.65和2.36％；常规条件下的、S和RCV分别为28.7、0.73和2.54％。RCV值<2OCV值，此RCV可以接受。结论自制质控品的CT值作为靶值应用于RT-PCR法HB—VDNA定量的室内质控中，制图方便，结果准确可靠，可以推广。

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简介：目的定量研究细胞间粘附分子基因（ICAM-1mRNA）在不同病理类型颅咽管瘤的表达差异及意义。方法收集30例经手术治疗的颅咽管瘤标本，采用SYBR荧光实时定量PCR法检测ICAM-1mRNA在肿瘤组织的表达，并对表达结果行统计学分析。结果造釉细胞型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量为（62．18±6．43）×10^3copies／μg，鳞状乳头型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量为（1．13±0．17）×10^3copies／μg，造釉细胞型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量显著性高于鳞状乳头型颅咽管瘤（P〈0．01）。结论两种病理类型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达存在显著性差异，此差异性可能与两种病理类型颅咽管瘤不同的肿瘤炎症有关。

简介：摘要目的探讨建立荧光定量PCR法直接检测临床标本的肺炎链球菌并对其进行血清学分型的可行性。方法针对肺炎链球菌种属特异性基因lytA及该菌常见的21种血清型设计荧光探针及引物，构建Taqman荧光定量PCR法。使用荚膜肿胀试验作为金标准检测PCR方法的灵敏度及特异度，选择1209份临床样本同时做培养及PCR方法，比较两种方法的肺炎链球菌检出率及血清分型情况。结果构建Taqman荧光定量PCR法灵敏度及特异度分别为94.2%及70%。Taqman荧光探针PCR法鉴定的主要血清型别为19F（43.7%）、6A/B（17.2%）、23F（13.8%）、19A（6.8%），未能分型的肺炎链球菌为17.2%。荚膜肿胀试验鉴定的主要血清型别为19F（39.1%）、6A/B（17.2%）、23F（9.2%）、19A（5.7%），未能分型的肺炎链球菌为28.7%。1209份临床样本仅培养出16份肺炎链球菌，Taqman荧光定量PCR法检出44例肺炎链球菌，其对临床样本肺炎链球菌阳性检出率更高，其差异有显著统计学意义（χ2=13.39，P<0.001）。结论Taqman荧光探针PCR法灵敏度高、特异度好，能直接对临床样本进行血清学分型，可大幅度缩短肺炎链球菌检测的报告时间。

简介：

简介：目的建立克罗诺杆菌的特异、灵敏的TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR检测方法。方法根据GenBank公布的克罗诺杆菌MMS基因高保守序列，设计特异引物和TaqMan—MGB探针，建立和优化反应体系，用25种其他常见致病菌评价反应体系的特异性，用克罗诺杆菌MMS基因重组质粒构建实时荧光定量PCR标准曲线，对重组质粒、纯菌和人工模拟污染样本进行灵敏度试验，并与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR比较，配对t检验分析两种方法对Ct值和荧光强度的差异。结果采用TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR检测克罗诺杆菌MMS基因仅需40min，与25种非目标菌无交叉反应，仅对克罗诺杆菌有特异性扩增；所构建方法线性关系良好，相关系数r2=0．999，扩增效率为99．972％，对重组质粒、纯菌、人工模拟污染样品标本的灵敏度分别达10拷贝／反应、3．8和38cfu／ml；与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR相比，TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR的Q值更小、△Rn值更高，灵敏度和分辨率差异均有统计学意义（Ct：t=-14．406，P〈0．01；△Rn：t：14．230，P〈0．01）。结论本研究建立的TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR反应体系能够快速、特异、灵敏地检测克罗诺杆菌MMS基因，可用于婴幼儿奶粉中克罗诺杆菌的快速筛查和鉴定，具有较大的的应用价值和推广价值。

简介：摘要目的分析实时荧光定量RT-PCR法对手足口病病原体的定量检测。

简介：

简介：【摘要】

简介：【摘要】目的：分析呼吸道病原体多重实时荧光定量PCR的检测对诊断效能的影响。方法：选取本院2021年11月—2022年4月发热门诊就诊的30例呼吸道感染者为研究对象，将其设为实验组，本组采取多重实时荧光定量PCR的检测。以本院2020年11月—2021年4月就诊的30例患者为对照组。比较两组的某抗菌药物使用频度、复诊率、检测周转时间。结果：某抗菌药物使用频度比较显示，实验组显低（P＜0.05）。复诊率比较显示，实验组显低（P＜0.05）。检测周转时间比较显示，实验组显短（P＜0.05）。结论： 呼吸道病原体多重实时荧光定量PCR的检测的效果较好，能够减少某抗菌药物使用频度，降低复诊率，及缩短检测周转时间。

简介：摘要：目的：分析结核病患者接受实时荧光定量检验的效果。方法：从2020年1月-2023年1月期间院内收治的结核病患者内随机选择115例，对其实施实时荧光定量、染色法，前者为实验组，后者为对照组，对比效果。结果：实验组检查阳性率为86.96%，对照组检查阳性率为53.33%。实验组检查阳性率显著高于对照组，且特异性也高于对照组，对比P＜0.05。结论：对结核病患者实施实时荧光定量检测，可以提高阳性率、特异性，值得临床应用。

简介：摘要：目的：实时荧光PCR法与PCR-反向点杂交法在HPV检测中的对比研究。方法：选取我院2023年5月至2024年5月宫颈癌筛查的162例患者为研究对象，分别行实时荧光PCR法与PCR-反向点杂交法对样本进行HPV检测，以病理组织学检查结果为金标准，对比两种方法在HPV检测中的阳性检出率、一致性以及性能评估。结果：病理组织学检查结果为阳性122例，阴性40例；实时荧光PCR法和PCR-反向点杂交法在HPV检测中阳性检出率分别为70.99%和66.67%，差异无统计学意义（P＞0.05），两种方法检测符合率为90.74%，kappa值为0.78；实时荧光PCR法在HPV检测中灵敏度、特异性和准确度均高于PCR-反向点杂交法（P＜0.05）。结论：两种检测方法具有较高度的一致性，均可广泛用于宫颈癌筛查；实时荧光PCR法在HPV检测中临床诊断价值更高，具有更高的灵敏度、特异性和准确度，操作更方便，检测用时更短，更适合临床实验室推广应用。