简介：　　摘 要：目的：比较 Baird-Parker 平板计数法和 MPN 计数法检测食品中金黄色葡萄球菌的结果，比较两种实验方法的优劣。方法：随机采集 90 份食品作为实验样品，分为实验组（食品 25g+ 生理盐水 225ml+1ml 金黄色葡萄球菌菌液）、阳性对照组（ 250ml 生理盐水 +1ml 金黄色葡萄球菌菌液）和样品对照组（食品 25g+1ml 金黄色葡萄球菌菌液）各 30 份，应用 Baird-Parker 平板计数法和 MPN 计数法进行定量计数，统计金黄色葡萄球菌的阳性检出结果。结果：相比之下， MPN 计数法对于金黄色葡萄球菌的阳性检出率（ 35.56%>12.22% ）相对更高（ P<0.05 ）。结论：在食品中金黄色葡萄球菌的实验检测中， MPN 计数法显然是更好的选择，可以获得更加准确的检测结果，可作为食品质量安全评价的重要参考。  　　关键词：食品；金黄色葡萄球菌；检测；实验方法  　　饮食是人们日常生活中的重要活动，是摄入营养和能量的主要途径，维持人体健康活动。饮食安全则关系到人们的身体健康，与相关疾病的发生有着密切的联系，应当引起足够的重视。人们在饮食的过程中，食品受到金黄色葡萄球菌等大肠杆菌以及沙门氏菌多种致病菌的污染，则会增加食物中毒的风险，诱发食源性疾病。在食品生产加工的过程中，致病菌检验是十分重要的环节，对于各类致病菌有着严格的限量标准。在食品安全检验的时候，需要采用高效、灵敏、准确的实验方法，其实验结果能够作为食品安全质量评价的重要参考依据 [1] 。本研究主要对食品中的金黄色葡萄球菌进行实验检测，比较不同实验方法的检测结果，现报告如下。  　　 1 材料与方法  　　 1.1 材料  　　实验样品：随机采集 90 份食品作为实验样品，其中包括饼干 18 份、罐头 15 份、膨化食品 12 份、肉制品 18 份、乳制品 15 份以及方便食品 12 份。培养基：由青岛海博生物技术有限公司生产的 Baird-Parker 平板、琼脂、冻干兔血浆、氯化钠胰酪胨大豆肉汤管（ 10% ），营养肉汤等。试剂：亚碲酸钾卵黄增菌液（广东环凯微生物科技有限公司）。菌株：金黄色葡萄球菌标准菌株（ ATCC29213 ，南京便诊生物科技有限公司）。应用以上样品、培养基、试剂和菌株作为实验材料，进行食品中金黄色葡萄球菌的实验检测。  　　 1.2 方法  　　 1.2.1 样品制备  　　将实验样品分为三组：实验组、阳性对照组和样品对照组各 30 份。在实验组的菌液制备的过程中，在琼脂培养基上培养金黄色葡萄球菌，取新鲜培养物，与 3ml 营养肉汤混合，制成肉汤菌悬液，并在 4℃ 的环境下保存。在实验前进行稀释，经过预试验检测后，选取所需的菌液浓度（ 10-5 稀释浓度）。在样品制备的过程中，在无菌均质袋加入食品 25g （液体样品 25ml ）、生理盐水 225ml 以及 1ml 金黄色葡萄球菌菌液（ 10-5 浓度），获得实验样品。  　　在阳性对照组的样品制备中，将 250ml 生理盐水与 1ml 金黄色葡萄球菌菌液（ 10-5 浓度）混合。而在样品对照组的样品制备中，则是在无菌均质袋加入食品 25g （液体样品 25ml ）、生理盐水 225ml ，均匀混合。  　　 1.2.2 定量检测  　　取实验组、阳性对照组和样品对照组的样品匀液 1ml ，接种于 Baird-Parker 平板之上，在 37℃ 的条件下进行培养， 48h 后对菌落进行观察，行革兰氏染色。完成血浆凝固酶验证后，对金黄色葡萄球菌进行计数，获得计算结果。另外取样液 1ml ，分别接种在 3 个氯化钠胰酪胨大豆肉汤管（ 10% ），在 37℃ 的条件下进行培养， 48h 后各取一环培养物， 在 Baird-Parker 平板上培养 （ 37℃ ， 48h ），对菌落进行观察，行革兰氏染色。完成血浆凝固酶验证后，采用 MPN 计数方法，对金黄色葡萄球菌进行计数，计算各组实验样品中金黄色葡萄球菌的阳性检出结果。  　　 1.3 统计学处理  　　以 SPSS19.0 统计学软件进行数据的处理和分析，应用（ ±s ）和（ % ）进行计量和计数，由 t 值和 χ2 检验， P<0.05 代表对比具有统计学意义。  　　 2 结果  　　根据 Baird-Parker 计数，在 90 份样品中，检出金黄色葡萄球菌阳性 11 份，阳性率为 12.22% 。而根据 MPN 计数，在 90 份样品中，检出金黄色葡萄球菌阳性 32 份，阳性率为 35.56% 。  　　 3 讨论  　　金黄色葡萄球菌属于革兰氏阳性菌，是一种常见的致病菌种。人体受到金黄色葡萄球菌的侵袭，容易引起呼吸道和肺部感染、胃肠道疾病以及全身感染性疾病，对患者的身体健康造成损害。金黄色葡萄球菌广泛存在于自然界，而饮食是该病菌侵袭人体的主要途径。在人们的日常饮食中，由于食品中存在金黄色葡萄球菌，容易引发食物中毒，同时还会引起多种病症。为了预防“ 病从口入”，需要加强对食品质量安全的检查， 对于食品中存在的金黄色葡萄球菌有着严格的限量要求。在食品的生产加工环节，需要严格把控，并需要进行微生物检验，实施定量检测方法，根据金黄色葡萄球菌的检出结果，评价食品质量安全 [2] 。  　　在金黄色葡萄球菌的实验检测中，一般采用 Baird-Parker 平板计数法和 MPN 计数法。本组实验结果显示，在 90 份食品中金黄色葡萄球菌的定量检测中， MPN 计数法对于金黄色葡萄球菌的阳性检出率为 35.56% ，显著高于 Baird-Parker 平板计数法的 12.22% ，充分说明 MPN 计数法是比 Baird-Parker 平板计数法更好的实验检测方法。  　　在实验检测中应用 Baird-Parker 平板计数法，在 Baird-Parker 平板上接种培养，统计金黄色葡萄球菌数量。但是该实验过程易受到其他菌种的干扰，导致检出率的降低。在食品的微生物检测中，金黄色葡萄球菌只是致病菌的一种，还大量存在着其他菌种，金黄色葡萄球菌在其中的含量不高，这在一定程度上影响到了 Baird-Parker 平板计数的准确性。而 MPN 计数法在实验检测中的应用，则是利用氯化钠胰酪胨大豆肉汤进行增菌处理，然后在 Baird-Parker 平板上接种培养，能够减少其他菌种的干扰，获得准确的检测结果，其对于金黄色葡萄球菌的阳性检出率更高。另外，受到实验样品理化性质、细菌依附等因素的影响， MPN 计数法的检测结果也会受到一定的干扰和影响。为了提高食品中金黄色葡萄球菌检测结果的准确性，可联合应用 Baird-Parker 平板计数法和 MPN 计数法，充分发挥两种实验方法的优势，满足不同条件的下金黄色葡萄球菌定量检测 [3] 。  　　综上所述， Baird-Parker 平板计数法、 MPN 计数法等不同实验方法均可应用于食品中金黄色葡萄球菌的检测，其中 MPN 计数法的应用效果更高，能够准确检出金黄色葡萄球菌的分布情况，便于采取有效的控制措施，为食品质量安全管理提供了重要支持。  　　参考文献：  　　 [1] 胡金强，雷俊婷，白艳红，等 . 食品中金黄色葡萄球菌 PCR-ELISA 检测技术建立 [J]. 食品工业科技， 2016 ， 37 （ 20 ）： 63-67.  　　 [2] 周莉，王永，王法云，朱海华，张立攀 . 食品中金黄色葡萄球菌概况及新型检测技术研究进展 [J]. 中国酿造， 2016 ， 35 （ 02 ）： 1-4.  　　 [3] 李荔枝，胡萍 . 快速检测食品中金黄色葡萄球菌及其肠毒素型的研究进展 [J]. 江西農业学报， 2018 ， 23 （ 08 ）： 144-146.

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