简介:1978年我国恢复研究生招生,第一次招收研究生约1万名,而目前我国在校研究生规模已经超过了100万。在我国研究生教育规模超常规发展的情况下,如何确保研究生培养质量已经成为社会各界关注的焦点。针对目前研究生创新意识不强、创新能力不足、综合素质偏低等问题,我们提出建立“上海研究生联合培养基地”(以下简称“联合基地”),期望以“协作式”培养模式,通过实际的重大工程或技术创新研究项目,强化对研究生综合素质和创新能力的培养,从而提高研究生教育质量,使研究生教育更好地支撑经济建设、科技进步和社会发展。建设上海研究生联合培养基地作为全国的研究生教育创新计划项目之一,得到了教育部学位管理与研究生教育司的批准和资助。
简介:摘要:目的:探讨一种适用于脐血来源的体外NK细胞激活和扩增的培养基组合物及培养方法。方法:应用Ficoll法,从健康志愿者捐赠的脐血中分离出PBMC,运用本培养基组合物,包含基础培养基、IL-2、IL-18和非细胞因子类促炎因子(人重组血清淀粉样蛋白A(SSA)和脂多糖(LPS))及培养方法,体外培养2周后,流式细胞仪检测其表面标志物,并隔天计数绘制细胞增殖曲线,观察效应细胞(NK细胞)按效靶比 1:1、5:1、10:1与20:1对肿瘤细胞(K562-Luc)的杀伤作用。结果:通过14d的培养,细胞扩增可达(594±42)倍,最终NK细胞比例(CD3-/CD56+)为(99.38±0.09)%,对靶细胞K562-Luc作用24h的杀伤效率为>90%(效靶比10:1)。结论:利用本方法提供的培养基组合物,成分简单明确,培养得到的NK细胞纯度更高,且具有更快的增殖效率,对肿瘤细胞的杀伤作用强。
简介:摘要目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的条件培养基对人永生化Müller细胞系MIO-M1细胞增生、黏附和分化的作用。方法BMSCs传至第3代进行成骨、成软骨及成脂诱导培养基诱导分化,并分别使用茜素红、阿利辛蓝及油红O染色进行分化鉴定;采用流式细胞仪检测细胞中间充质干细胞标志物CD73、CD90和CD105以及造血干细胞标志物CD34、CD45和人类白细胞DR抗原(HLA-DR)表达。采用免疫荧光染色法检测MIO-M1细胞中Müller细胞标志物SOX9、谷氨酰胺合成酶(GS)、vimentin和胞内视黄醛结合蛋白(CRALBP),视网膜干细胞标志物SOX2、nestin和CHX10,以及细胞增生标志物细胞周期蛋白D3(CCND3)的表达。将MIO-M1细胞分为标准培养基组、293T条件培养基组和BMSC条件培养基组,分别在标准培养基、293T培养上清液和BMSC培养上清液中培养。定量分析各组细胞面积、圆度、伸长系数、周长等形态参数;采用流式细胞仪检测细胞周期,采用成球实验和5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测细胞增生情况。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组培养上清液中血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的表达;采用荧光定量PCR法检测各组细胞中VCAM-1 mRNA表达。采用免疫荧光染色法和荧光定量PCR法分别检测各组细胞诱导分化培养后视网膜神经元标志物蛋白激酶C(PKCα)、Rhodopsin、微管相关蛋白2(MAP2)和β-微管蛋白(Tuj1)的表达变化。结果培养的BMSCs高表达CD73、CD90和CD105,低表达CD34、CD45和HLA-DR,并可成功诱导分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞。MIO-M1细胞表达SOX9、GS、vimentin、CRALBP、SOX2、CHX10、nestin和CCND3。与标准培养基和293T条件培养基组比较,BMSC条件培养基组的MIO-M1细胞形态发生改变,形成细长的纺锤形或多极形态,且细胞面积减少,伸长系数增加,圆度降低,差异均有统计学意义(F=6.973、12.370、6.311,均P<0.01);与标准培养基和293T条件培养基组比较,不同时间点BMSC条件培养基组MIO-M1细胞形成的神经球面积明显增大,差异均有统计学意义(F组别=134.300,P=<0.001;F时间=82.910,P<0.001);与标准培养基和293T条件培养基组比较,BMSC条件培养基组MIO-M1细胞的EdU阳性率和细胞增生指数均显著提高,差异均有统计学意义(F=6.973、74.110,均P<0.05);与标准培养基和293T条件培养基组比较,BMSC条件培养基组的细胞上清液中VCAM-1蛋白质量浓度和细胞中的VCAM-1 mRNA相对表达量均显著升高,差异均有统计学意义(F=13.720、7.896,均P<0.05);MIO-M1细胞在分化条件下,BMSC条件培养基组的MIO-M1细胞在mRNA水平的PKCα、Rhodopsin、Tuj1和MAP2相对表达量较标准培养基组和293T条件培养基组均明显升高,差异均有统计学意义(F=14.490、5.424、14.330、7.405,均P<0.05)。结论BMSC条件培养基可以改变Müller细胞的形态,并促进其增生、黏附和向视网膜神经元的分化。
简介:摘要:基于国家振兴东北老工业基地的政策背景,以研究生专业人才培养为任务目标,分析了高校研究生专业学位联合培养基地建设的意义,针对全国和辽宁省两级高校联合培养基地建设过程中存在的问题,提出相应的建议和对策。为高校专业实践型人才培养和企业选才用人提供借鉴。