简介：摘要目的探讨分析我院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的毒力基因和耐药基因基本情况。方法选择2016年12月-2018年2月期间我院住院患者中分离到的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌150株为研究对象，使用PCR法对MRSA菌株进行毒力基因和耐药基因分析。结果150株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对tst、pνl、psm—mec、sasX、qacA/B、tetM、ermA/B/C、aph（3’）-Ⅲ、aac（6’）/aph（2’’）以及mecA的阳性率分别为0、96.67%、93.33%、74.67%、38.67%、90.0%、96.67%、77.33%、96.67%以及100%。结论MRSA同时携带毒力基因和耐药基因，与人体感染性疾病的转归、病程以及种类等有关。

简介：摘要目的评价hsa_circ_0081596在人神经细胞氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)损伤中的作用。方法培养人神经母细胞瘤细胞，采用随机数字表法将细胞(5代以内)分为4组(n＝20)：对照组(C组)、OGD/R组(O组)、OGD/R+小干扰RNA(siRNA)组(S组)、OGD/R+siRNA阴性对照组(I组)。C组细胞在37 ℃、5%CO2正常条件下培养，O组细胞铺于6孔板或96孔板待完全贴壁，氧糖剥夺4 h后复糖复氧24 h制备OGD/R损伤模型。S组和I组分别转染hsa_circ_0081596 siRNA及其阴性对照，72 h后建立OGD/R模型。采用qRT-PCR法测定hsa_circ_0081596和线粒体分裂蛋白1(Fis1)mRNA的表达水平，采用Western blot发测定Fis1的表达水平，采用CCK-8法确定细胞存活率，采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果与C组比较，O组hsa_circ_0081596、Fis1及其mRNA表达上调，细胞存活率降低，凋亡率升高(P<0.05)；与O组比较，S组hsa_circ_0081596、Fis1表达下调，细胞存活率升高，凋亡率降低，I组hsa_circ_0081596、Fis1表达上调，细胞存活率降低，凋亡率升高(P>0.05)。结论hsa_circ_0081596可通过上调Fis1表达参与人神经细胞OGD/R损伤的病理生理机制。

简介：摘要目的探讨心房颤动（房颤）患者血浆环状RNA表达谱以及在导管射频消融术后复发中的预测价值。方法研究纳入2017年12月至2018年7月在南京医科大学第一附属医院心血管内科住院房颤患者：为使用RNA测序来构建环状RNA表达谱，纳入5例特发性持续性房颤患者为测序组，同期5例基线资料一致的健康者为测序对照组；为通过实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）来验证房颤相关环状RNA表达，连续纳入71例特发性房颤患者为验证组，80例非房颤患者为验证对照组；为观察房颤消融术后复发情况，纳入首次行导管射频消融手术的特发性房颤患者51例，术后随访1年后分为复发组和未复发组，qRT-PCR检测特定环状RNA的表达量，并通过受试者工作特性曲线预测对消融复发的影响。结果房颤特异性的血浆环状RNA表达谱包含31 697个房颤特异性环状RNA，其中516个环状RNA具有差异性表达，包括129个表达上调和387个表达下调。房颤患者环状RNA hsa_circ_0032931[0.018（0.012，0.034）对0.079（0.053，0.108），Z=-9.112；P<0.001]和hsa_circ_0032097[0.031（0.018，0.046）对0.037（0.030，0.053），Z=-2.986；P<0.05]表达水平显著降低。随访1年后，房颤消融手术复发组6例（11.8%，6/51）和未复发组45例（88.2%，45/51）发现，消融术后复发组患者血浆中环状RNA hsa_circ_0032931表达量升高[0.052（0.019，0.109）对0.016（0.012，0.030），Z=-2.573；P=0.01]，而环状RNA hsa_circ_0032097表达未见明显差异（Z=-0.058；P=0.953）。根据受试者工作特性曲线分析结果，房颤持续时间的曲线下面积（AUC）为0.867 （95%CI 0.706~1.000），环状RNA hsa_circ_0032931的AUC为0.826 （95%CI 0.662~0.990），联合房颤持续时间与环状RNA hsa_circ_0032931的AUC为0.933 （95%CI 0.841~1.000）。结论血浆环状RNA hsa_circ_0032931可作为预测房颤导管射频消融术后复发新的生物标志物和独立的预测因素。

简介：摘要目的探讨环状RNA(circRNA)hsa_circ_0001445在绝经后骨质疏松症(PMOP)患者中的临床意义和调控机制。方法从临床收集的血液样品中提取RNA，使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa_circ_0001445的表达。荧光素酶报告基因分析、RNA下拉实验研究了RNA之间的相互作用。结果与健康对照组相比，PMOP患者血浆hsa_circ_0001445表达下调(P<0.001)。血浆中hsa_circ_0001445以高灵敏度和特异性将PMOP患者与健康对照组区分开来，曲线下面积(AUC)为0.9654(95%CI0.9361~0.9947，P<0.001)，灵敏度为94.0%，特异度为88.0%。Hsa_circ_0001445促进人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)的成骨分化、抑制成脂分化(P<0.001)。Hsa_circ_0001445可以直接与miR-127-5p结合。结论血浆hsa_circ_0001445是PMOP的潜在诊断生物标志物，通过海绵化miR-127-5p，调节hBMSCs中成骨和成脂之间的平衡。

简介：摘要目的探讨环状RNA circ_100367在甲状腺癌（thyroid carcinoma，THCA）中的诊断价值及其与免疫相关因子的关系。方法根据美国国家生物技术信息中心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）网站提供的数据芯片分析THCA中差异表达的circRNAs，将circ_100367纳入本次研究。收集175例甲状腺癌患者血清与健康人血清，使用qRT-PCR检测血清样本中circ_100367及其线性转录本DCAF8 mRNA的表达水平，计算circ_100367与DCAF8的相关性。分析circ_100367的表达与患者临床病理特征、免疫浸润水平及免疫抑制因子PD-1的相关性。结果与健康人血清相比（1.00±0.37），甲状腺癌患者血清中circ_100367的表达水平（1.37±0.41）显著升高（t=8.80，P<0.001），DCAF8 mRNA表达差异无统计学意义（t=1.67，P=0.095），但circ_100367与DCAF8 mRNA表达呈现正相关的关系（r=0.17，P=0.028）。分析circ_100367表达与临床病理特征发现，较M0组患者（1.26±0.40），circ_100367在M1和Mx中（1.43±0.40）过表达（t=2.63，P=0.009）；较N0期患者（1.24±0.36），circ_100367在N1和Nx期患者血清（1.45±0.42）中过表达（t=3.48，P=0.001）；较淋巴结检测阴性患者的血清（1.28±0.36），circ_100367在阳性患者血清中过表达（1.42±0.43）（t=2.14，P=0.034）；较T1+T2分期患者（1.30±0.37），T3+T4患者血清中circ_100367过表达（1.40±0.43）（t=2.22，P=0.028）。分析circ_100367表达与免疫浸润水平发现，高表达的circ_100367与CD8+ T细胞（r=0.25，P=0.024）、巨噬细胞（r=0.22，P=0.038）、CD4+T细胞（r=0.25，P=0.020）和B细胞（r=0.23，P=0.033）水平具有显著正相关性。circ_100367表达与免疫抑制因子PD-1也呈正相关（r=0.19，P=0.011）。结论circ_100367可作为甲状腺癌诊断的标志物且其表达与免疫相关因子具有较强关联。

简介：摘要目的探索环状RNA hsa_circ_0005777在肝母细胞瘤中的表达及对肝母细胞瘤细胞增殖周期的影响。方法实验细胞包括人肝母细胞瘤细胞株HepG2和HUH6，将实验细胞培养在含10%胎牛血清及1%双抗的DMEM培养基中，置于37℃、5% CO2的恒温培养箱中。实验组织标本包括肝母细胞瘤肿瘤及癌旁组织标本，来源于中山大学孙逸仙纪念医院小儿外科住院患儿手术切除的组织。所有肿瘤组织标本和癌旁组织标本在手术切除后，均立即浸泡在RNA later保存液中防止RNA降解，随后放在-80℃冰箱保存。在肝母细胞瘤细胞株中转染hsa_circ_0005777过表达质粒，为过表达组；未转染过表达质粒的细胞株作为阴性对照，为对照组。检测内容包括：①鉴定hsa_circ_0005777在肝母细胞瘤细胞株中的性质及分布情况；②检测hsa_circ_0005777在肝母细胞瘤肿瘤、癌旁组织组织标本和肝母细胞瘤细胞株中的表达情况；③检测过表达组对肝母细胞瘤细胞株细胞增殖能力的影响；④检测过表达组对肝母细胞瘤细胞株细胞周期的影响及过表达组对细胞周期蛋白Cyclin D1表达水平的影响。结果①hsa_circ_0005777在肝母细胞瘤细胞株中成环并富集在细胞质中；②hsa_circ_0005777在肝母细胞瘤组织标本中的表达显著高于癌旁组织，在肝母细胞瘤肿瘤组织标本及细胞株中明显高表达；③过表达组可明显提高肝母细胞瘤细胞株的增殖能力；④过表达组可明显促进细胞周期蛋白Cyclin D1的表达，可促进肝母细胞瘤细胞株细胞G1/S期转化。结论hsa_circ_0005777可促进肝母细胞瘤肿瘤细胞增殖，有望成为治疗肝母细胞瘤的新靶点。

简介：目的利用已经构建好的腺相关病毒-人组织激肽释放酶基因重组体(rAAV-HTK),感染体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察HUVEC细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、凋亡蛋白酶(caspase-3)、内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮素B1受体(ETR-B1)以及缓激肽B1受体、缓激肽B2受体的mRNA表达量变化情况,探讨利用rAAV-HTK治疗高血压、缺血性心脏病的可行性.方法将已经构建好的rAAV-HTK重组质粒感染体外培养的HUVEC细胞,应用半定量RT-PCR方法检测感染rAAV-HTK前后HUVEC中eNOS、caspase-3、ET-1、VEGF、ETR-B1以及缓激肽B1受体、缓激肽B2受体的mRNA表达量变化情况.结果转染有rAAV-HTK的HUVEC细胞内其细胞内eNOS的mRNA合成量增加,caspase-3的mRNA表达量降低,VEGF、ET-1、ETR-B1、缓激肽B1受体、缓激肽B2受体的mRNA表达量没有变化.结论rAAV-HTK重组体感染HUVEC细胞能够使HUVEC细胞内eNOS的mRNA表达量增高,caspase-3的mRNA表达量减低,提示HTK能够改善内皮细胞功能,转HTK能够应用于高血压等血管内皮功能异常的心血管疾病的基因治疗.

简介：谷氧还蛋白（glutaredoxin,GRX）是一类小分子氧化还原酶,在植物生长发育调控及逆境胁迫中起着重要调节作用。本研究拟对玉米MS22基因的生物信息及玉米中GRX基因家族的亲缘进化进行分析研究。通过对MS22基因的生物信息分析,发现MS22基因全长881bp,编码159个氨基酸,属于CC型谷氧还蛋白。玉米基因组中共鉴定出22个GRX类基因,其中有6个基因为GRX-subⅠ,7个基因属于GRX-subⅡ,9个基因属于GRX-subⅢ。通过聚类分析发现MS22属于GRX-subⅢ类型,该蛋白与不同来源CC型谷氧还蛋白的氨基酸序列保守性较高,一致率介于61%-87%之间。通过该研究对玉米中该类型基因的进一步研究具有较好的理论指导意义。

简介：运动能力间的个体差异,一定程度上由遗传因素决定.运动能力关联基因的多态研究迄今为止已产生大量有益的结果,近年来却进展缓慢、内容单一,缺乏对新基因和新位点的探索.文章在查阅整理文献的基础上,从功能、调节机制和多态性研究方面对甲状腺激素路径基因能否作为优秀耐力素质潜在相关基因进行了综述,以期为研究者提供新的研究方向和操作的可行性依据.

简介：摘要目的探讨基因分型、基因测序和基因表达分析在血液肿瘤患者ABO血型鉴定疑难情况中的应用和发现。方法选择2019年6月至2020年5月河北燕达陆道培医院检验科与输血科在血型鉴定时发现血清法正反定型结果不符或凝集不典型的患者3例。分别使用序列特异性引物PCR和Sanger测序法鉴定ABO基因型，用转录组测序分析ABO和FUT1基因表达水平。结果1例12岁女性急性淋巴细胞白血病患者为O.01.02和BA.04基因亚型，对应B（A）血清亚型；ABO基因表达量正常（354.80）。1例41岁女性急性髓系白血病患者为A1.02和B.01基因型，对应A1B血清型；ABO基因表达显著减低（45.70）。1例42岁男性骨髓增生异常综合征伴骨髓纤维化患者为A1.02和A2.05亚型，分别对应A1和A2血清型；ABO基因表达量为0。3例患者FUT1基因表达量均在正常范围。临床根据基因型和对应的血清型制定血制品输注策略，无输血相关不良反应发生。结论血液肿瘤患者可因血型基因亚型或基因表达异常导致血清学血型鉴定困难。ABO基因分型和血型基因表达分析可帮助准确判定原因，为血制品输注提供更好的安全保障。

简介：根据Cry2Aa2的保守基因序列设计引物,从而扩增出完整的Cry2Aa2序列,连接到含有磷酸甘露糖异构酶基因（pmi）的表达载体pCAMBIA1301-PMI上,采用农杆菌介导的方法转化辣椒,利用甘露糖筛选体系对辣椒转化体进行筛选,对转基因植株进行分子生物学检测和抗虫试验,72h后统计抗虫情况。结果表明：获得了含有Cry2Aa2转基因植株;食用转Bt基因辣椒叶片和果实的斜纹夜蛾幼虫的校正死亡率均高于阴性对照,且大多表现出僵化和厌食的状态,对转基因的辣椒伤害较小,说明Bt基因成功导入辣椒中。

简介：本研究对基因枪导入了pBAC128F／R质粒（含有玉米Adh1内含子1的CaMV35S启动子驱动的bar基因作为选择标记，以来自拟南芥菜逆境诱导表达类型——亲水蛋白rd29b基因的启动子驱动脱水应答转录因子DREB1B基因的逆境诱导表达类型质粒）的T4代转基因小麦进行了稳定表达研究。PCR、PCR—Southern和Southern杂交分析表明，外源转录因子DREB1B基因已稳定整合到转基因株系的基因组中。半定量RT—PCR结果表明，部分转基因株系的DREB1B基因的相对表达量有所增强。叶片除草剂抗性检测结果显示有8个转基因株系可抗到150mg／L。叶片脯氨酸含量测定结果表明，有4个株系（编号为1，18，30和76）的脯氨酸含量提高幅度较大，同一株系，干旱与未干旱处理相比，脯氨酸含量提高了3～5倍。干旱处理后的转基因植株与非转基因植株相比，脯氨酸含量高2～3倍。在干旱条件下，T4代田间小区产量统计数据分析结果表明，有4个转基因株系（编号为30，51，70和76）的产量与非转基因植株相比有显著增加。研究表明，利用逆境诱导型rd29b基因的启动子来增强外源DREB1B基因的表达，能显著改良小麦的抗旱性。

简介：p53是一种肿瘤抑制基因,它的突变与50%的人类肿瘤发生有关.p73基因编码的蛋白质,无论在结构上,还是在功能及调节上均与p53蛋白相似,且与肿瘤的发生密切相关,本文对此方面的研究结果进行了比较,并对p73能否作为候选抑癌基因进行了讨论.

简介：摘要：遗传和变异知识是高中生物里分量相当重的知识，不但是高考热点，也是老师和同学们都非常关注的热点知识。主要内容：单基因遗传病的概念，形成因素和特征；多基因遗传病的概念，形成因素和特征。随着生物科学的逐渐发展，有关这方面的知识也会不断更新。关键词：单基因多基因遗传病在高中生物教科书里，遗传和变异知识是分量相当重的知识，不但是高考热点，也是老师和同学们都非常关注的热点知识。在多年的教学中，我查阅了大量的有关遗传病的的生物学知识，现结合自己的教学经验和理解对单基因遗传病和多基因遗传病的相关生物学知识阐述如下，仅供大家参考......

简介：木薯是世界第三大薯类作物,所产淀粉广泛用作食品和工业原料,是重要的粮食和经济作物。木薯蔗糖合酶是将光合同化物蔗糖向淀粉转化的第一个关键酶,前期本课题组通过酵母单杂交分析发现αNAC可能是木薯蔗糖合酶Ⅰ基因的调控因子,本研究在此基础上获得了αNAC基因转录序列并克隆其编码序列,发现编码蛋白具有典型的NAC和UBA保守结构域。αNAC基因在木薯地上部叶和地下部块根肉中转录活性较高,为β-actin基因的5%~25%,在施用外源激素条件下转录活性显著上调,其中茉莉酸达到峰值时间最短,水杨酸次之,乙烯、脱落酸、赤霉素和生长素较长。此外,在MeSuSy1Promoter::GUS的转化株中二次过表达αNAC基因,发现二次转化株中GUS酶活显著低于单价转化株,表明过表达αNAC基因可以显著抑制木薯蔗糖合酶Ⅰ基因的转录活性。

简介：近十年来,尽管我们对病理学的了解是突飞猛进,但许多疾病的潜在机制仍不清楚.基因组研究通过基础实验和一系列复杂的研究工具发现了疾病发展过程中所存在的分子异常,从而为阐明疾病的发生机制提供了一个新的时机.本综述将举例说明基因组研究提高了我们对分子病理学的理解,并对一般复杂性疾病的研究具有潜在的优势.

简介：

简介：目的：对炎症细胞因子TNF-α及IFN-γ刺激下，人NOX1基因的表达调控进行初步分析。方法：将NOX1基因5′-端上游序列连接到无启动子的PGL3-BASIC质粒，构建了PGL3-BASIC／NOX1报告质粒。PGL3-BASIC／NOX1质粒转染A549细胞，用TNF-α、IFN-γ刺激12h，双荧光素酶报告基因系统检测基因表达情况。结果：克隆的NOX1片段具有较强的启动子活性，在TNF-α和IFN-γ共同刺激下，转染报告基因的A549细胞萤光素酶活性与对照相比有明显的增高（约4．3倍）。分析显示NOX1基因5′端上游序列片段含有NF-KB结合位点，提示细胞因子刺激的荧光素酶表达增强可能与NF-KB位点激活相关。结论：NOX1基因表达水平明显受到炎症细胞因子的调控，提示该基因可能参与机体免疫防御（特别是上皮细胞免疫防御），值得进行深入研究。

简介：目的应用cDNA芯片技术进行胃癌患者抑郁症状相关基因表达谱差异分析及信号转导通路分析,探讨其可能的作用机制。方法采用Zung抑郁量表判定胃癌患者的精神状态,分为两组,抑郁组10例患者,非抑郁组10例患者。手术切除原发灶肿瘤,30min内液氮保存。Trizol一步法提取细胞总RNA并纯化mRNA,逆转录法分别标记荧光素Cy3和Cy5,合成cDNA探针与人类全基因组芯片杂交,扫描荧光信号图像,分析比较两组差异表达基因,行GeneOntology分类和通路分析。结果基因芯片筛选出1088个基因表达水平发生改变且有统计学意义,包括787个上调基因和301个下调基因。GeneOntology分类提示显著变化的基因网络是＂Notch信号传导通路＂及＂神经肌肉突触传递功能＂。BioCarta通路分析得到通路网络中相关基因的表达改变情况,Notch通路中5个基因表达上调,为NOV、CNTN1、YY1、Maml2和Spen,5个基因表达显著下调,为PSEN2、APH1A、PSENEN、TP63和TLE1,神经肌肉突触传递相关基因中2个显著下调,为DTNA和KIF1B。结论肿瘤相关性抑郁可能与能量代谢、细胞骨架、营养因子以及酶等多层次的基因表达改变有关,其中Notch信号传导通路和神经肌肉突触传递功能可能发挥了重要作用。

简介：摘要目的旨在了解浙闽地区人群恙虫病东方体感染的基因型，并分析其基因变异。方法从浙闽地区5例散发恙虫病发热期患者血中分离病原体并进行细胞培养；提取感染细胞DNA，巢式PCR扩增完整恙虫病东方体56-kD型特异性抗原（TSA）基因和热休克蛋白基因（groESL）并测序；采用MEGA 7.0软件，进行序列比对和系统发育分析。结果病原学确认5例恙虫病患者，并分离到恙虫病东方体菌株。序列比对表明，5菌株中有2株的56-kD TSA基因和groESL基因100%一致，另2菌株的此二个基因序列一致性亦为100%，分别将两组菌暂时命名为浙江-1型和浙江-2型。56-kDa TSA基因比对和系统发育分析表明，浙江-1型和浙江-2型分别与台湾-A基因型和Gilliam-C基因型亲缘较近（98.45%和98.50%），但有明显变异；另1株菌Wuj/2014与台湾-A基因型高度相似（99.94%）。56-kDa TSA基因各基因型支系的时间树分析表明，台湾-A基因型、浙江-1型和浙江-2型3支系与祖先的分歧时间相对其他原型株晚，尤其是浙江-2型，说明这些基因型或亚型在恙虫病东方体的进化过程中出现较晚。结论本研究病例所感染恙虫病东方体基因型不同，可能为未被认识的新的基因亚型，迫切需要进行全基因组测序确认，并探讨其基因变异与人恙虫病严重程度间的关系。