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273 个结果
  • 简介:随着不同转基因生物(GMO)制品不断商业化,转基因成分检测技术也需不断更新。由于甘蔗红糖为甘蔗汁经高温熬煮浓缩而成,红糖中残留DNA降解严重、含量低、片段短,且蛋白及糖分杂质含量高,所以甘蔗红糖DNA是比较难以收集并进行分子检测。为了在转基因甘蔗红糖商业化前建立起转基因甘蔗红糖DNA提取及分子鉴定技术,本研究以转基因甘蔗和非转基因甘蔗为材料,模仿传统红糖制作工艺,分别获得了转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖。通过对DNA提取方法进行改进,设计不同扩增片段长度引物,并对传统PCR与荧光定量PCR进行比较,建立了稳定甘蔗红糖DNA提取方法及外源基因分子鉴定技术该技术对转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖进行准确鉴别,为今后转基因甘蔗红糖商业化所需转基因食品鉴定提供技术支持,也为后面更为重要转基因甘蔗白糖DNA提取及分子鉴定提供借鉴。

  • 标签: 甘蔗红糖 转基因生物 外源基因 分子鉴定 荧光定量PCR
  • 简介:利用153个株系组成源自美国半矮秆有限性品种Charleston和亚有限性品种东农594重组自交系群体。在东北农业大学香坊试验站与东北农业大学校内试验田进行了两年试验。采用国际标准对大豆营养生长期进行划分,对观察株系从破土开始记录,每日跟踪调查,直到群体全部成熟。结果表明生育期在群体中呈正态分布,在不同环境条件下,个体间有差异。采用QTLmaper2.0统计软件对生育期进行QTL定位和上位分析。共检测到主效应QTL59个,上位QTL61对。涉及到A1、C2、D1a、D1b、B1、I、N、G等七条连锁群,上位分析也首次揭示出不同位点间互作关系。揭示了大豆营养生长过程中,其QTL发育特点,找到了可以在不同环境下稳定存在QTL位点。

  • 标签: 大豆 营养生长期 环境 上位性 QTL
  • 简介:为了解决‘丹霞’铁皮石斛市场供需矛盾,本研究利用植物组织培养技术,采用10种不同培养基培养‘丹霞’铁皮石斛种子,比较分析其种子萌发、原球茎形成和组培苗生长发育情况。结果表明,‘丹霞’铁皮石斛种子活力为89.54%,原球茎在1/2MS+20%马铃薯培养基上生长发育良好,种子培养49d后形成原球茎。其株高、分蘖数、根长和根数等指标分别可达6.68cm、1.96株、5.16cm和5.88条,均高于其他培养基。在栽后115d统计成活率可达99.45%。说明培养基1/2MS+20%马铃薯适合于‘丹霞’铁皮石斛组培苗培养和快速繁殖。本研究为‘丹霞’铁皮石斛工厂化育苗提供技术支撑。

  • 标签: '丹霞’铁皮石斛 培养基 组织培养 快速繁殖
  • 简介:FLOWERINGLOCUSD(FLD)是植物自主开花途径花发育基因,在植物营养生长向生殖生长转变过程中起重要调控作用。本研究利用同源基因克隆法结合RACE技术克隆了蜻蜒凤梨似echme口触ciat曲花发育基因FLD类似基因AfFLD。序列分析比对表明,AfFLD所推测氨基酸序列包含有LSDl-LIKE亚家族两个高度保守结构域:SWIRM结构域和胺氧化酶结构域,该蛋白与玉米、拟南芥FLD蛋白同源分别为72%3N73%。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析了乙烯处理不同时间FLD基因表达模式,结果表明乙烯处理不同时间各组中,处理后1d时FLD表达量达到最高值,其中表达量最高为0h2.5倍。本结果为开花自主途径中相关基因对乙烯处理后响应机理研究提供理论基础。

  • 标签: 蜻蜓凤梨 乙烯处理 FLD 自主途径
  • 简介:了解菜心光能利用效率规律,可为具优良光合性状菜心品种选育提供参考。据此,本研究选用在二份耐热性强和二份耐热性弱菜心品种作为研究对象,探讨了这些品种叶绿素荧光参数日变化规律。结果表明:随着光强和温度上升和下降日变化,四份菜心材料初始荧光(Fo)、相对可变荧光(VJ)和单位反应中心热耗散能量(DIo/RC)出现先升后降趋势,而最大荧光(Fm)、光能转化效率(Fv/Fm)、光化学性能指数(PIABS)则出现先降后升情况;除Fo最大峰值在四份材料中均在13:00时外,耐热性强材料其余参数最大或最小峰值出现在光照强度最大13:00时且变化幅度较小,而在耐热性弱材料中这些值变化幅度大且出现在日最高温度14:00。另外,随着光强和温度降低,各荧光参数又逐渐向初始水平恢复,但耐热性强菜心品种恢复速率高于耐热性弱菜心品种。这一结果表明叶绿素荧光参数可考虑作为评价菜心材料耐热性强弱一个参考指标。

  • 标签: 菜心 叶绿素荧光参数 日变化
  • 简介:SRAP标记是一种新分子标记技术。本研究以霍山石斛总DNA为模板,对石斛SRAP反应体系重要参数进行优化试验。经过大量重复性实验,建立了一套适用于石斛属植物稳定可靠、重复性强SRAP反应体系:25μl反应体系中,模板DNA量30ng、2.5mmol/LMg2+浓度、0.8μmol/L上下游引物、200μmol/LdNTPs以及Taq酶1U。该体系建立为SRAP标记应用于石斛属植物遗传多样研究及原植物鉴别奠定了基础。

  • 标签: 石斛(Dendrobium) SRAP标记 优化
  • 简介:草酸通常被认为是新陈代谢最终惰性产物。近期研究表明:在植物体内草酸(盐)可以被进一步分解,其分解产物又参与了特定生长发育过程及抗生物胁迫反应,因此植物体内草酸(盐)代谢又引起了人们广泛关注。本文就植物体内草酸(盐)生物合成、存在形态及其被分解过程中生理生化作用作一简要概述。

  • 标签: 草酸盐 形成 降解 作用
  • 简介:普通小麦(T.aestivumL.)为一个异源六倍体物种,具有A、B、D个染色体组,它们具有不同程度同源。对各个染色体组进行有关起源、进化、基因定位及基因与产量、性状关联分析,可更好发掘和利用各染色体上有利基因,拓宽小麦遗传变异基础,为在小麦育种中如何引进新遗传变异及杂优选育提供理论依据。遗传多样是进行小麦改良基础,B基因组含有丰富抗病、抗虫、抗寒、优质等有益基因,多态最高。本文对小麦B基因组组成特点、起源、遗传多样及基因定位等进行了综述,并对其以后研究进行了展望。

  • 标签: 普通小麦 B基因组 研究进展
  • 简介:分子标记辅助聚合育种是累加有利基因有效手段.培育粳型亲籼系是有效克服水稻籼粳亚种间杂种不育,从而利用水稻亚种间杂种优势重要途径之一.本研究利用以PCR为基础分子标记进行辅助选择,对不同粳型亲籼系中不同分化度特异亲和基因进行了聚合,并将4个抗白叶枯病基因和来源于IR24两个恢复基因导入粳型亲籼系中.主要结果如下:1、以粳型亲籼系G2417-2-1和粳型广亲和系G2605为亲本构建分离群体,利用本研究筛选与S-b,S-c,S-d个F1花粉不育基因座位紧密连锁PCR标记进行辅助选择.在F2共选择到特异亲籼聚合植株6株,它们分别是58号,93号,94号,115号,139号,200号;广亲和聚合植株4株,它们分别是11号,14号,121号,177号.2、对当选聚合系亲籼和亲粳综合分析表明:各个特异亲籼聚合系亲粳之间及各个广亲和聚合系亲籼之间都有显著差异.特异亲籼聚合系平均亲籼和平均亲粳与亲本G2417-2-1相比都没有显著差异.广亲和聚合系平均亲籼高于亲本G2605,平均亲粳显著低于亲本G2605.这些聚合系亲和与其MAS基因型相一致.3、利用四类粳型亲籼系与携带有2个恢复基因和4个抗白叶枯病基因品系构建回交群体,应用本研究筛选以PCR为基础分子标记进行辅助选择.在BC1F1共选择到2个恢复基因和4个抗白叶枯病基因全杂合植株19个,其中以IC31为受体5株,以IC32为受体11株,以IC33为受体2株,以IC34为受体1株.4、当选19个单株自交繁殖BC1F2,利用与目标基因紧密连锁单一分子标记进行MAS.共选择到各类可供进一步利用材料393株,其中携带有两个纯合恢复基因植株158株,同时携带有两个纯合恢复基因和两个纯合显性抗白叶枯病基因植株40株.5、从上述158个植株中选出两个显性抗性基因均纯合或者任意个抗性基因均纯合

  • 标签: 水稻 粳型亲籼系 分子标记辅助育种 亚种间杂种 白叶枯病 抗病基因
  • 简介:为了确保反应体系可行,以便更好地开展大蒜野生近缘种SRAP标记遗传多样分析,本研究以新疆大蒜野生近缘种为材料,采用L16(44)正交法,对其反应体系进行4因素4水平优化试验。结果表明:对大蒜野生近缘种PCR扩增影响最大是dNTPs浓度,影响最小是Taq酶浓度。筛选出15对引物,经过程序和温度筛选,最终确定SRAP反应程序为:94℃条件下预变性1min,其次在94℃变性1min、35℃退火1min、72℃延伸1min环境下进行5个循环反应,再与前5个循环相同环境下,提高其退火温度至52℃进行35个循环,最后72℃延伸10min。2μL10×PCRBuffer,dNTPs浓度0.225mmol/L,引物浓度0.250μmol/L,Taq酶用量1.000U,模板DNA用量75.000ng,ddH2O补足20μL,为最佳SRAP-PCR反应体系。研究结果为进一步开展大蒜野生近缘种遗传多样分析、亲缘关系鉴定和分子标记辅助育种提供技术支持。

  • 标签: 大蒜野生近缘种 SRAP 正交试验 反应体系
  • 简介:胚珠是被子植物雌配子体载体,是种子前身,在植物有性生殖过程中占有十分重要地位,研究胚珠发育分子进化机制一直是人们关注热点。拟南芥是植物分子生物学研究模式植物,为植物器官发育研究提供理论基础。本研究结合了近年来拟南芥胚珠发育分子机制研究相关报道,从拟南芥胚珠起源心皮边缘分生组织、胚珠特性形成、胚珠原基发育、珠被发育、胚囊发育五个方面进行了论述,以此为基础提出对今后胚珠发育研究建议。

  • 标签: 被子植物 胚珠发育 分子机理
  • 简介:水稻中许多重要农艺性状属数量性状,由多基因(QTL)控制.研究QTL遗传特性和遗传效应对于培育高产和稳产水稻品种具有十分重要意义.本研究以6个优良品种为供体亲本,以华粳籼74为轮回亲本,通过微卫星标记辅助回交选择培育了一批单片段替换系,随后利用所培育单片段替换系进行了QTL分析和基因定位.主要结果有:1、利用258个微卫星标记对6个供体亲本和轮回亲本间多态进行了筛选.6个供体亲本与轮回亲本间多态率在32.98%至60.78%之间,平均47.81%,粳型供体亲本比籼型供体亲本多态要高.2、随着回交代数增加,植株所含替换片段数逐渐减少.在BC2F1、BC3F1、BC3F2和BC3F3代,平均每个植株携带有12.50、5.98、1.69和1.46个替换片段.替换片段平均长度也随回交和自交代数增加而逐渐变短.在BC2F1、BC3F1、BC3F2和BC3F3代,替换片段平均长度分别为25.43cM、22.38cM、20.78cM和18.15cM.回交世代替换片段变短速率(11.99%)比自交世代变短速率(7.15%)要快.在BC2F1、BC3F1、BC3F2和BC3F3代,轮回亲本基因组恢复率分别为82.24%、92.55%、98.04%和98.52%.3、在BC3F2和BC3F3代,共选育出111个单片段替换系,其中独一无二单片段替换系共42个.BC3F2代替换系中替换片段估算长度在2.00cM到64.80cM之间,平均为21.75cM,而BC3F3代中替换片段估算长度在6.05cM到48.90cM之间,平均为20.95cM.12条染色体中仅第11染色体没有选择到单片段替换系.所选育单片段替换系中替换片段总长为2367.50cM,基因组覆盖长度为704.50cM,覆盖率为39.25%.4、在52个单片段替换系22个性状中共鉴定出了234个QTL.每个性状鉴定出QTL数在3到19个之间,平均4.50个.每个替换系鉴定出QTL在2到15个之间,平均10.64个.QTL加性效应大小因性状和替换系不同而不同,低至-0.02(0.79%)加性效应(如谷粒宽度)均能检测到.在RM237,RM322

  • 标签: 水稻 单片段替换系群体 QTL 数量性状位点 分子标记辅助选择
  • 简介:松树是世界上分布最广且最具经济价值树种之一。近年来随着DNA分子标记技术发展,分子标记已经广泛应用于松树遗传多样、亲缘关系、遗传图谱构建、基因定位及分子标记辅助选择等方向。本文从遗传多样、亲缘关系、遗传图谱构建、基因定位及标记辅助选择等角度,评述了松树遗传与进化上常用DNA分子标记如RFLP、RAPD、AFLP和SSR等应用情况和进展。在遗传多样方面,DNA分子标记技术已成为鉴定松树种间、种内遗传多样有效手段,并用于指导杂交育种;在亲缘关系判定方面,可以在分子水平上阐明生物系统演化及分类情况,揭示育种亲本选配和种质资源有效利用;在松树遗传图谱构建和基因定位及标记辅助选择方面也取得了显著进展,构建了二十多张连锁图谱,并对其生长、材和抗性等性状进行了基因定位,获得了一些重要与抗病相连锁标记。

  • 标签: 松树 分子标记 遗传 进化
  • 简介:以卷丹、麝香百合品种富田和离体鲜切花花蕾为材料,比较Trizol法、异硫氰酸胍法、CTAB改进法和SDS改进法提取总RNA效果,结果表明,SDS改进法能有效去除多糖,提取RNA中28SrRNA亮度约为18SrRNA两倍,OD260/OD280值介于1.7-2.2之间,卷丹RNA得率为132.52μg/g,富田RNA得率为186.88μg/g。进一步用SDS改进法分别提取富田外轮花瓣、内轮花瓣、雄蕊、雌蕊、叶和茎RNA,同样可以获得完整纯度高RNA,其中28SrRNA亮度约为18SrRNA两倍,OD260/0D280值介于1.7~2.2之间,说明此方法适用于百合各个组织RNA提取。经RT—PCR获得了花发育基因特异性条带,说明用SDS改进法从百合中提取RNA质量好、产率高、完整强,完全适合于百合进一步分子生物学研究。

  • 标签: 百合 RNA SDS改进法 多糖
  • 简介:本研究以蜻蜓凤梨为材料,利用RACE技术获得一个与拟南芥AGAMOUS(AG)同源编码基因cDNA,并将其命名为AfAG。AfAG基因cDNA全长1422bp,开放阅读框为723bp,可翻译成240个氨基酸。利用NCBI对AfAG蛋白进行序列分析,结果显示AfAG蛋白含有MADS-box蛋白家族共有的功能结构域:MADS和K-BOX两个结构域。与水稻(OsAG);玉米(ZmAGL);拟南芥(AtAG);菜心(BrAGL);椰子(CnAGL);白兰花(MaAGL)同源比对结果分别为65%、63%、68%、65%、83%、75%。本研究成功构建了CaMV35S-AfAG过表达载体,用农杆菌介导方法将表达载体成功转入到拟南芥中,为进一步研究蜻蜓凤梨开花分子机理提供了理论依据。

  • 标签: AGAMOUS 基因 MADS-box家族 蜻蜓凤梨
  • 简介:NBS类抗病基因是植物中最大一类抗病基因。亚麻荠是一种新型能源及特用油料作物,抗病、虫、杂草及逆境能力极强。然而,有关其抗性分子机理鲜有报道。本研究采用NB-ARC标准结构域HMM模型,对亚麻荠本地蛋白质数据库进行检索分析,在全基因组水平上鉴定NBS类抗病基因。结果表明亚麻荠基因组共有472个NBS类抗病基因,分布于17条染色体上,56%基因成簇分布。所有串联重复基因也都以基因簇形式出现,这表明串联重复有利于基因簇形成。系统发生树分析显示TIR-NBS-LRR(TNL)和CC-NBS-LRR(CNL)两类亚家族抗病基因可能在进化过程中遵循不同进化路径,导致其在应对病原菌侵染时发挥不同功能。本研究发现将为鉴定新植物抗病基因和解析亚麻荠高抗病机制提供科学参考。

  • 标签: 亚麻荠 抗病基因 NBS家族 基因簇 生物信息学
  • 简介:为建立简单高效黄瓜转基因技术体系,本研究以携带有抗除草剂Bar基因农杆菌工程菌浸泡处理开花期黄瓜嫩梢,进行活体植株转基因方法研究。研究结果表明最佳转化体系为:表面活性剂silwet-77适宜浓度0.01%-0.05%;菌液浸泡最佳位置为顶部以下10cm嫩梢,最适子房发育时期为开花前5-12d子房;农杆菌菌株EHA105浸染效果优于LBA4404;3次重复浸泡处理有利于提高转化频率。黄瓜苗期除草剂抗性筛选适宜浓度为17%草胺膦1100倍稀释液。研究获得除草剂抗性植株1320株,PCR阳性植株36株,其中30株经Southern斑点杂交后有阳性信号,最高转化效率为9.5%。

  • 标签: 黄瓜 转基因 活体植株 抗除草剂
  • 简介:为建立穿心莲甲基化敏感扩增多态(methylationsensitivityamplificationpolymorphism,MSAP)反应体系,本研究以穿心莲叶片为材料,提取总基因组DNA,采用L25(55)正交试验对穿心莲MSAP预扩增和选择扩增相关参数进行了优化,并对MSAP引物进行了筛选,以期建立穿心莲MSAP最佳反应体系。优化后体系具有稳定图谱,清晰丰富条带。运用优化后体系,在穿心莲MSAP80对引物中筛选出8对有效引物。筛选出引物组合特异性良好,能够用于后续穿心莲甲基化相关研究。为其他药用植物MSAP分析提供参考。

  • 标签: 穿心莲 MSAP 预扩增 选择性扩增 引物筛选