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  • 简介:目的:筛选1型人免疫缺陷病毒(HIV-1)中国流行株包膜蛋白gp41优势抗原片段,构建具有区域流行代表性HIV-1gp41重组抗原,为改进现有HIV-1初筛试剂盒中使用同类抗原奠定基础。方法:利用免疫斑点杂交和生物信息学方法,从收集自重庆、广州、上海区域代表性150份HIV-1感染者血清标本筛选gp41抗原性强候选样本,利用RT-PCR及巢式PCR方法扩增包含重要抗原表位决定蔟gp41基因片段,与原核表达载体pQE30连接,转化大肠杆菌M15构建gp41重组抗原表达菌株,表达后经亲和层析纯化、SDS-PAGE和Western印迹鉴定。结果:兔源HRP标记gp41多抗能识别标本gp41抗原性差异,得到候选样本,扩增包含gp41主要抗原表位片段;构建了包含gp41抗原表达簇重组原核表达质粒,表达、纯化后经His标签抗体Western印迹鉴定为阳性。结论:高纯度重组优势gp41抗原构建和鉴定,为进一步改进现有HIV初筛诊断奠定了基础。

  • 标签: 1型人免疫缺陷病毒 包膜蛋白gp41 抗原表位 斑点杂交 亲和层析
  • 简介:利用同源模建方法预测了t-PAK1三维结构。通过结构叠合确定了t-PAK1、K2区,纤溶酶原K1、K4区及UKK区赖氨酸结合口袋。静电势计算及疏水性分析表明,在t-PAK2区以及纤溶酶原K1、K4区与纤维蛋白裸露赖氨酸之间存在明显静电势互补和疏水面契合。确定了影响Kringle区结合口袋与赖氨酸亲和重要氨基酸,分析了t-PAK1区、UKK区不能结合赖氨酸原因,由此设计了具有赖氨酸亲和力新型t-PAK1区及UKK区突变体。利用模拟残基突变技术预测了突变体结构变化,分析了突变后t-PAK1区及UKK区与赖氨酸亲和力变化,初步在理论上肯定了设计方案合理性。

  • 标签: 同源模建 结构功能关系的计算机模拟 分子设计 Kringle区
  • 简介:目的:构建人血清白蛋白(hSA)与小鼠乳清酸蛋白(mWAP)调控序列杂合基因座。方法与结果:在pBR322载体上连入预先无痕连接3同源臂,利用基于Red同源重组系统缺口修复(gap-repair)技术,分别对8kbmWAP基因座3′调控区、16kbhSA基因组编码序列及13kbmWAP基因座5′调控区进行连续3基因抓捕,最终将全长37kb乳蛋白杂合基因座构入pBR322载体;通过PCR扩增、限制性内切酶消化和序列测定验证,确定mWAP基因座编码序列被精确地置换为hSA基因组编码序列。结论:构建了整合有mWAP-hSA杂合基因座pBR322载体,为研究杂合基因座在乳腺表达效果及置换型基因座表达可行性提供了数据。

  • 标签: 小鼠乳清酸蛋白 人血清白蛋白 缺口修复 细菌人工染色体
  • 简介:目的:探讨核酸适体KMF2-1a为基础乳腺癌细胞靶向化疗药物载体应用价值。方法:采用细胞仪检测人体乳腺癌MCF-1OAT1细胞内吞KMF2-1a药物载体作用,其结果以分光光度计检测。结果:核酸适体KMF2-1a及其药物载体可被MCF-1OAT1细胞特异性内吞。结论:核酸适体KMF2-1a可用于靶向治疗乳腺癌。

  • 标签: 乳腺癌细胞 KMF2-1a 靶向化疗
  • 简介:本文研究了在室外条件下不同光程光生物反应器Palmellococcusminiatus生长速率影响,结果表明在室外,光生物反应器光程越小,藻细胞生长速率越高,在光程1cm反应器达到最高,比生长速率为0.37d-1,生物量产率为163mgL-1d-1。反应器光程越大,培养系统单位表面积生产速率越大,在光程20cm反应器达到最大,为7.24gm-2d-1

  • 标签: 光程 Palmellococcus miniatus 生长
  • 简介:目的:通过客观评价肝病护理应用个性化护理模式效果,寻找提升肝病患者预后效果护理方案.方法:以随机法选择本院2013年07-2015年07接收40例肝病患者(实验组),应用个性化护理模式;同期选择40例肝病患者(对照组),应用一般护理模式,在对所有入选患者护理情况深入观察基础上,客观对比各项临床数据.结果:上述入选患者,实验组入选患者满意率97.50%,对照组75.00%;实验组入选患者生活质量分数(54.02±5.28)分,对照组(40.57±4.69)分,2组满意率及生活质量分数对比有差距(P〈0.05).结论:肝病护理应用个性化护理模式效果突出,已成为提升患者满意率以及生活水平重要手段,可推广.

  • 标签: 肝病护理 个性化护理模式 一般护理模式 生活质量分数 满意率
  • 简介:随着时代进步,社会发展,人们生活水平越来越高,近几年来,我国科学技术水平在不断提升,国家经济状况有了新貌,人们生活水平也在不断提高,同时,身心健康要求标准也在改变,在家庭,每一个家庭成员都是一个家庭核心,家人也都非常重视他们健康.因此,医护研究人员要更加深入地研究医学护理,目前,酒精性肝病临床护理过程中产生安全问题逐渐增多,这些问题由很多因素造成,也给医院以及患者患者家属带来许多难题.所以,在酒精性肝病临床护理工作,我们一定要找出影响护理安全因素,采取一切有效措施来解决这些问题,也能有效地避免许多不必要护理纠纷,提高医院社会信誉度,加快患者恢复进程.本文就影响酒精性肝病临床护理安全因素进行了简要阐述,并且对此提出了相应解决措施,希望有效防护酒精性肝病护理工作安全问题能够有所帮助.

  • 标签: 酒精性肝病 临床护理 医院
  • 简介:慢性肺源性心脏病(简称肺心病)是由肺组织、胸廓、肺血管病变所致肺循环阻力增加、肺动脉压力增高、引起有心扩张或增厚,甚至发生右心衰竭心脏病。本病患病年龄多在40以上,其中50~60岁年龄组为最高[1]随着年龄增长患病率增高,平均患病率为0.41%~0.47%[2]。因其并发症多、病死率高,严重影响着患者生活质量威胁着患者生命安全,因此,做好本病护理工作对减少本病并发症、通过患者生存质量有着重要意义。现58例病例资料报导如下:

  • 标签: 肺源性心脏病 护理诊断 护理措施
  • 简介:病毒感染启动宿主先天免疫反应是通过激活转录因子NF-κB和干扰素调节因子3(IRF-3),它们协同调控Ⅰ型干扰素表达。病毒在复制过程中产生复制中间体双链RNA作为一个病原相关分子模式,被细胞内具有RNA解旋酶活性维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-1)编码蛋白检测到。线粒体抗病毒蛋白(MAVS)作为一个接头蛋白,在RIG-1信号通路下游和NF-κB、IRF-3信号通路上游扮演着重要角色。MAVS通过其疏水跨膜结构域定位在线粒体外膜上,是线粒体中发现第一个与先天免疫相关蛋白质,将线粒体和先天免疫联系在一起。

  • 标签: 线粒体抗病毒蛋白 先天免疫 维甲酸诱导基因Ⅰ 病原相关分子模武
  • 简介:血行播散是乳腺癌转移重要途径,检测腋窝淋巴结已经不能完全准确判断乳腺癌患者是否存在转移。肿瘤细胞进入外周血是肿瘤远处转移前提,乳腺癌患者循环肿瘤细胞检测将有助于判断预后,指导治疗,监测治疗效果。简要综述了乳腺癌循环肿瘤细胞及其检测方法研究进展。

  • 标签: 乳腺癌 微转移 循环肿瘤细胞
  • 简介:目的:构建GFE-1多吠与重组人肿瘤坏死因子d(rmhTNF一仅)融合蛋白(GFE-1-rmhTNF),研究该融合蛋白体外活性和体内分布。方法:利用基因工程方法,将人工合成编码GFE—l寡核苷酸片段连接在rmhTNF—d序列3’端,转入大肠杆菌诱导表达,采用Q—SepharoseFF阴离子层析柱和SP—SepharoseFF阳离子层析柱纯化蛋白,SDS—PAGE和Western印迹鉴定,测定该融合蛋白体外活性,观察其在小鼠体内分布情况。结果:构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF,并在大肠杆菌获得高效表达。体外活性实验显示,GFE-1-rⅢhTNFL929细胞有明显杀伤活性;体内分布实验证实,GFE-I-rmhTNF在小鼠肺组织富集远高于肝肾组织。结论:构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF.,可显著杀伤L929细胞特异性富集于小鼠肺组织。

  • 标签: 人肿瘤坏死因子 GFE-1多肽 融合蛋白 体外活性 体内分布
  • 简介:与许多在细胞浆内复制RNA病毒不同,流感病毒复制及转录都在细胞核内进行。流感病毒感染细胞进入细胞浆后,经病毒脱壳将病毒核糖核蛋白体复合物(vRNP)释放到细胞浆。vRNP含有病毒RNA基因和碱性聚合酶1(PB1)、碱性聚合酶2(PB2)、酸性聚合酶(PA)及核蛋白(NP)。vRNP被主动运送到细胞核内,开始病毒基因组复制和转录。流感病毒感染细胞晚期,在细胞浆中新合成PB1、PB2、PA及NP蛋白也需要进入细胞核,参与新vRNP装配。我们简要介绍有关流感病毒vRNP和新合成PB1、PB2、PA及NP蛋白进入细胞核机制。

  • 标签: 甲型流感病毒 病毒核糖核蛋白体复合物 蛋白核内运
  • 简介:目的:探讨脑胶质瘤患者O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因MGMT和错配修复基因hMLH1、hMSH2启动子CpG岛甲基化状态,及其在烷化剂化疗意义。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测39例脑胶质瘤和6例正常脑组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化状态,免疫组化方法测定蛋白表达。结果:脑胶质瘤患者组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2%、10.3%和20.5%,3种基因启动子未甲基化模式与其对应蛋白表达模式相似,并与患者性别、年龄、病理类型和病理分级无明显相关性。回顾性分析患者资料,显示39例脑胶质瘤患者,MGMT基因甲基化患者生存期显著高于MGMT基因未甲基化患者(P〈0.05,Log-rank检验)。结论:MGMT及错配修复基因甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见分子事件,可能与肿瘤发生有关;检测MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态,在判断脑胶质瘤患者预后和预测烷化剂化疗耐药性可能具有重要意义。

  • 标签: 脑胶质瘤 启动子CPG岛甲基化 O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因 错配修复基因
  • 简介:EPA和DHA是人体所需重要不饱和脂肪酸,发挥多种重要生理作用,影响人类生长发育与身体健康.近年来,人们健康保健意识逐渐加强,更为关注EPA和DHA保健营养价值.因此,EPA和DHA生物制品提取开发成为了食物资源开发利用热点问题.作为有较疗效好、安全性高营养品,培养富含EPA、DHA生物制品会有一个光明前景.本文介绍了EPA和DHA生物学特性、来源,着重阐述其在机体脂质代谢作用.

  • 标签: EPA DHA 脂质代谢
  • 简介:以梗丝填充值为参考指标,在正交试验基础上,通过DOE试验设计,运用曲面响应法研究梗丝工艺参数梗丝填充值影响。在其它参数不变前提下,试验结果表明,工艺气体温度、膨胀节蒸汽流量和入口含水率均梗丝填充值有显著影响;梗丝填充值最佳工艺参数值为入口含水率34.5%、工艺气体温度215℃,膨胀节蒸汽流量21000kg/h。在该条件下,梗丝填充值最高。

  • 标签: CTD气流烘丝机 梗丝 正交试验 响应曲面法 填充值
  • 简介:为了探讨不同酿造条件蓝莓果酒酒精发酵以及蓝莓果酒品质影响,以贵州麻江县种植蓝莓“粉蓝”为原料,酿酒酵母1203作为菌种,在不同发酵条件下进行蓝莓全果果酒酒精发酵.研究表明:影响蓝莓果酒前发酵因素依次为初始糖度〉初始PH〉酵母接种量〉主发酵时间;酒精发酵结果造成差异性影响因素仅有初始糖度;不同发酵条件并不影响酒精发酵程度:实验组蓝莓果酒发酵28天后残糖量均低于2g/l;但大量接种酵母实验组由于产生酵母异味,且致花色苷迅速降解,导致果酒色泽、香味、营养价值均较低(p〈0.05);最后,低温陈酿可减缓蓝莓果酒中最主要营养成分花色苷降解(p〈0.05).因此,初始糖度22Brix,初始PH3.5,酵母接种量4%,前发酵时间13天,后发酵时间15天,低温陈酿,最有利于蓝莓果酒发酵且得到较好感官品质,同时还可较好保留蓝莓抗氧化活性.

  • 标签: 蓝莓 发酵工艺 果酒品质
  • 简介:自然杀伤细胞(NK细胞)是机体抗肿瘤第一道防线,是机体天然免疫主要承担者,也是获得性细胞免疫核心调节细胞。NK细胞肿瘤杀伤活性与其细胞表面受体和肿瘤细胞表面的配体密切相关,由于肿瘤细胞表面配体表达不同致使NK细胞杀伤敏感性有很大差异,临床疗效不一。我们简要介绍了影响肿瘤细胞NK细胞杀伤敏感性机制,目前提高肿瘤细胞敏感性策略和方法进行了总结。

  • 标签: 自然杀伤细胞 MHCⅠ类链相关分子A/B 肿瘤 敏感性
  • 简介:随着国民生活水平提高,人们交通工具更是多种多样,交通治安导致车祸屡见不鲜,而车祸中最常见损伤就是胸腰椎骨折,也是人类致残率最高一种疾病,目前最理想治疗方法就是手术治疗.本文主要针对胸腰椎骨折围手术期相关护理展开叙述.

  • 标签: 手术 护理 常规
  • 简介:目的:构建一个牛dSl酪蛋白调控序列指导人溶菌酶(hLYZ)基因组序列杂合基因座。方法:采用本实验室发明连续3步缺口修复技术。将6个无痕连接同源臂插入以pBR322为载体骨架,构成能进行3连续基因抓捕载体,利用Red同源重组系统介导缺口修复技术,分别抓捕牛aSl酪蛋白3’端调控序列(9kb)、hLYZ基因座序列(5kb)、牛axSl酪蛋白5’端调控序列(20kb),使这3个基因片段自动无痕地连接在基因抓捕载体上,形成牛oLSl酪蛋白一hLYZ杂合基因座。结果:实验经过PCR扩增、限制性内切酶酶切验证和序列测定,验证了hLYZ基因组序列牛仪S1酪蛋白编码基因组序列精确置换。结论:这种修复技术为乳腺生物反应器高效表达大载体制备提供了可行思路及方法。

  • 标签: 牛αS1酪蛋白 人溶菌酶 杂合基因座 缺口修复技术
  • 简介:本文培养20天后葛仙米不同氯化钙浓度下三种酶活性进行对比发现,超氧化物歧化酶(SOD)活性随着钙离子浓度升高而降低,多酚氧化酶(PPO)活性随着钙离子浓度升高而降低。苯丙氨酸转氨酶(PAL)在较低钙浓度下表现出较高活性,而在较高钙浓度下活性较低。

  • 标签: 葛仙米 钙浓度 超氧化物歧化酶 多酚氧化酶 苯丙氨酸转氨酶