简介:为了探讨纤维素酶对葛根中总黄酮提取的影响,试验采用单因素试验和响应曲面法对其提取工艺进行了研究,建立并分析了各主要影响因子与葛根总黄酮提取率关系的数学模型。单因素试验结果表明,液料比对葛根总黄酮提取率影响不明显、酶浓度影响极明显、酶解时间影响显著。通过RSM响应曲面法的进一步分析显示,回归方程p=0.0165〈0.01,RAdj2为0.8202和Adeq.Precision为8.671,说明所建模型与试验值的拟合度很好。葛根总黄酮的纤维素酶提取工艺参数为液料比12.1mL/g、酶浓度0.46%和酶解时间67.9min;经试验验证,在此条件下得率为0.184%,与理论计算值0.182%基本一致。
简介:生物发光标记以其可视化,便捷,快速,灵敏,可用于活体研究等诸多优点越来越多地应用于科学研究中。本研究通过CaCl2方法将实验室构建的带有青海弧菌荧光素酶基因luxAB的重组质粒导入大肠杆菌Top10中,利用酶切和核酸电泳检测荧光素酶基因的存在,利用SDS-PAGE检测荧光素酶表达的情况,然后对其表达条件进行优化。单因素试验结果表明:在培养基初始pH值6.0,癸醛体积分数1.25‰,接种量1%,IPTG浓度0.1mmol/L,装液量50mL/150mL,温度37℃条件下,重组菌的发光度最大,即表达量最高。正交试验结果表明:当pH6,IPTG浓度0.08mmol/L,接种量1.2%,温度36℃时重组大肠杆菌表达情况最好,发光度达1262.7。本研究中的重组大肠杆菌为在益生菌等食品微生物中的应用提供技术依据。