简介:摘要目的研究Hedgehog信号通路阻断剂(环巴胺)对MC细胞增殖凋亡的影响。方法取对数生长期MC细胞分为环巴胺处理组及阴性对照组,以1、5、10μmol/L环巴胺处理MC细胞,分别在24、48、72h后采用MTT法检测其生长抑制率;流式细胞术检测对照组和10μmol/L环巴胺实验组对细胞周期的影响。结果环巴胺对MC细胞的抑制作用呈时效和量效依赖关系。1、5、10μmol/L浓度组对细胞的生存率分别为(50.03±14.02)%、(49.76±14.14)%和(37.87±19.53)%,组间比较差异有统计学意义(P<0.001)。流式细胞术检测发现,环巴胺浓度达10μmol/L,干预24h后G1期细胞比例明显升高。对照组、10μmol/L浓度实验组的G1期细胞百分比分别为33.94%、49.83%;细胞凋亡率对照组和10μmol/L浓度实验组分别为1.34%、7.09%。讨论环巴胺可以抑制MC细胞的增殖能力和诱导MC细胞凋亡的作用,其机制与抑制Hedgehog信号通路有关。
简介:摘要目的研究caspase-3表达在胃癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化S-P法观察113例胃癌旁上皮细胞、原发灶癌细胞和浸润淋巴细胞以及转移灶癌细胞中caspase-3表达,TUNEL法检测上述组织的细胞凋亡,并分析原发灶癌细胞中caspase-3表达与胃癌临床病理特征的关系,并探讨caspase-3表达与细胞凋亡的关系。结果caspase-3在50.4%(57/113)的胃癌旁上皮细胞中表达,高于原发灶癌细胞中的阳性率32.7%(37/113)(P<0.05);caspase-3在胃癌原发灶浸润淋巴细胞中的阳性率为70.8%(80/113),高于胃癌旁上皮细胞和原发灶癌细胞中阳性率(P<0.05);58.1%(25/43)的转移灶癌细胞中caspase-3表达阳性,其阳性率高于对应原发灶癌细胞(34.2%,13/38)(P<0.05);原发灶癌细胞中caspase-3表达与胃癌患者的年龄、性别以及胃癌肿瘤大小、浸润深度、转移、TNM分期、生长方式和分化程度无相关性(P>0.05)。原发灶癌细胞和浸润淋巴细胞及转移灶癌细胞中细胞凋亡指数明显低于癌旁上皮细胞(P<0.01)。结论胃癌原发灶癌细胞中caspase-3表达下调和浸润淋巴细胞中caspase-3表达上调与胃癌发生有关,由caspase-3介导的细胞凋亡与胃癌的发生与发展有关。
简介:目的体外诱导分化骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)为胰岛样细胞,鉴定诱导细胞并检测其功能。方法取周龄大鼠骨髓细胞,进行MSC培养纯化扩增,用bFGF、EGF、条件培养液、高糖培养液、B27、地塞米松、胰岛素等培养体系诱导MSC向胰岛细胞转化。双硫腙染色鉴定胰岛样细胞;免疫细胞化学鉴定胰岛素抗原表达;Westernblot检测胰岛样细胞胰岛素的表达。结果体外诱导的MSCs由长梭形变成多角形并逐渐聚集成团。双硫腙染色细胞团成亮红色,初步表明为胰岛样细胞。诱导的细胞具有胰岛素抗原表达;Westernblot检测诱导分化为胰岛样细胞的胰岛素表达阳性。结论骨髓间充质干细胞能够分化成胰岛样细胞,并具有分泌胰岛素的功能。
简介:摘要目的探讨细胞因子HMGB1对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制及诊断价值。方法选取2015年1月~2015年12月本科室收治的急性加重期COPD患者90例作为急性组,90例稳定期COPD患者作为稳定组,同时随机选择同时期体检中心健康体检者90例作为健康组。分别检测每组患者的肺功能(FEV1%、FEV1/FVC%)和诱导痰中性粒细胞数目,用ELISA免疫法检测诱导痰中HMGB1的浓度。分析三组患者的HMGB1与肺功能和中性粒细胞关系。结果急性组患者HMGB1水平和中性粒细胞数目要显著高于稳定组、健康组(P<0.05),稳定组患者HMGB1水平和中性粒细胞数目要显著高于健康组(P<0.05);急性组患者肺功能(FEV1%、FEV1/FVC%)要显著低于稳定组和健康组(P<0.05),稳定组患者肺功能(FEV1%、FEV1/FVC%)要显著低于健康组(P<0.05)。结论HMGB1可以促进COPD的发生和发展,其浓度大小与病情严重程度有关。
简介:摘要目的探讨血管紧张素II在不同浓度和不同作用时间下对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因表达的作用及心康对其影响。方法采用流式细胞技术测定在血管紧张素II不同浓度和不同作用时间下血管平滑肌细胞凋亡率及凋亡调控基因Fas、Bcl-2表达的变化和应用心康后对其影响。结果血管紧张素II对血管平滑肌细胞凋亡和凋亡调控基因表达有较明显的诱导作用;心康可抑制AngII作用,对细胞凋亡有一定的影响,同时可影响凋亡调控基因的表达。结论血管紧张素II具有一定促进血管平滑肌细胞凋亡作用和调节凋亡调控基因表达的作用,尤其在大剂量作用较明显;心康可明显抑制AngII对血管平滑肌细胞的作用。
简介:摘要目的研究不同肿瘤间细胞因子的分布情况。方法采用ELISA法定量测定90例肿瘤患者血清IL-2、IL-6TNF-α三项指标,同时以30例健康者作为对照并进行统计分析。结果IL-2、IL-6和TNF-α检测结果在各组恶性肿瘤病例个体之间差异较大,分组结果经统计学分析确无明显差异(P>0.05)。仅膀胱癌组IL-6结果高于对照组(P<0.01)。结论IL-2、IL-6、TNF-α在恶性肿瘤中组织和器官特异性不明显,测定IL-2、IL-6、TNF-α含量不足以区别癌变细胞的组织来源,但由于个体间IL-2、IL-6、TNF-α三项结果差异较大,主要是由于各研究组中只按照恶性肿瘤的起源进行分组,而未将治疗前后病例分开研究以及未对病程进展进行分期分组研究所致,推测IL-2、IL-6、TNF-α含量可能与恶性肿瘤的病情发展及分期相关,也可能与疗效有关,其相关性还有待进一步研究。
简介:摘要目的体外原代培养人大网膜前脂肪细胞,诱导其分化成熟过程中,探讨雌二醇对脂肪细胞分泌瘦素和脂联素的作用。方法选取择期开腹手术患者的新鲜脂肪组织,采用胶原酶消化的方法分离培养人大网膜前脂肪细胞,诱导分化至成熟后分别用1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L的雌二醇干预24h后收集上清液。用酶联免疫吸附法同批检测所收集细胞上清液中瘦素和脂联素蛋白含量。结果成功培养人大网膜前脂肪细胞并诱导其分化,分别应用1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L的雌二醇作用前脂肪细胞24h,显示雌二醇对瘦素的分泌均有促进作用(P<0.05),而对脂联素分泌有抑制影响(P<0.05)。结论雌二醇促进脂肪细胞分泌瘦素,而抑制脂联素的分泌,为临床治疗肥胖及相关代谢异常疾病提供新的思路。
简介:目的本实验观察胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对晚期糖基化终末产物(AGEs)损伤的ECV-304细胞的细胞活性、核转录因子-κB(NF-κB)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响。方法人工制备AGEs。培养ECV-304细胞至80%满瓶后分组:对照组(5.5mmol/L葡萄糖DMEM8h);AGEs组[5.5mmol/L葡萄糖DMEM+50μg/mlAGEs-人血清白蛋白(HSA)8h];加药组1(0.03nmol/mlGLP-1+5.5mmol/L葡萄糖DMEM8h);加药组2(0.03nmol/mlGLP-1+5.5mmol/L葡萄糖DMEM+50μg/mlAGEs-HSA8h)。使用MTT法检测细胞活性,用ELISA试剂盒检测细胞培养上清液NF-κB、VCAM-1的表达量。结果(1)AGEs组与对照组相比,细胞活性下降、NF-κB和VCAM-1的表达量明显升高(P<0.05)。(2)0.03nmol/mlGLP-1和AGEs-HSA共同干预与单用AGEs-HSA干预的组别相比,前者细胞活性升高、NF-κB和VCAM-1的表达量明显减少(P<0.05)。结论GLP-1能抑制AGEs对EC...
简介:摘要目的研究叶绿酸(ChlorophyllinCHL)对DMH(N,N’–Dimethylhydrazinedihydrochloride,1,2-二甲基肼二盐酸盐)诱导的结直肠肿瘤模型鼠的肠粘膜细胞增殖和凋亡的影响。方法以DMH诱导小鼠结直肠肿瘤,从诱导的不同阶段开始,施以相同剂量CHL干预,观察CHL对结直肠肿瘤的抑制作用;采取免疫组织化学方法染色,研究CHL对小鼠结直肠肿瘤PCNA,P21,Caspase-3蛋白表达的影响.结果(1)CHL各组小鼠结直肠癌发生率及平均肿瘤数均低于阳性对照组(P<0.05),腺癌百分率低于阳性对照组(P<0.01);(2)CHL各组小鼠肠肿瘤组织中PCNA及p21蛋白表达水平均显著低于阳性对照组(P<0.001);Caspase-3表达水平在DMH和CHL组间无明显差异(P>0.05)结论CHL能够抑制DMH诱导的小鼠结直肠肿瘤的PCNA,P21蛋白的表达,从而调控肿瘤细胞的增殖和凋亡。
简介:目的探讨壬基酚对大鼠睾丸支持细胞的影响及其作用机制.方法建立体外培养大鼠睾丸支持细胞以及混合培养支持细胞和生精细胞体系,以不同浓度的壬基酚(分别为0.2μg/L、1.0μg/L、3.0μg/L、5.0μg/L)作用于支持细胞和混合培养的支持细胞和生精细胞,采用MTT法测定支持细胞的活性,流式细胞仪测定支持细胞的凋亡率,RT-PCR法测定混合培养的支持细胞和生精细胞中Fas和FasLmRNA表达量的变化.结果随着壬基酚作用剂量的增大和作用时间的延长支持细胞的活性下降,且支持细胞的凋亡率随着壬基酚浓度的增大而提高;混合培养的支持细胞和生精细胞中Fas和FasLmRNA表达量均明显提高.结论壬基酚可引起支持细胞凋亡,进而通过Fas/FasL系统启动生精细胞凋亡.