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  • 简介:目的:利用小分子肽ATWLPPR(A7R)对人舌癌细胞SCC9进行靶向拮抗神经纤毛蛋白1(Neuropilin-1,NRP-1),研究其对人舌癌细胞SCC9迁移、分化影响。方法:通过免疫印迹实验检测NRP-1蛋白在舌癌组织及人舌癌细胞SCC9中表达情况,利用划痕实验Transwell检测小分子肽A7R对SCC9细胞迁移影响,以及利用实时定量荧光PCR检测相关上皮、间充质标记蛋白mRNA表达变化,研究小分子肽A7R对SCC9细胞分化影响。结果:NRP-1在SCC9中呈高表达,A7R拮抗后SCC9细胞迁移能力明显下降,同时SCC9细胞上皮相关标记蛋白(E-cad,β-cate)mRNA表达水平增高,而间充质相关标记蛋白(snail,FN,琢-SMA)mRNA表达水平下降。结论:外源性拮抗SCC9细胞NRP-1可抑制迁移能力并影响细胞分化。

  • 标签: 神经纤毛蛋白1 拮抗 迁移 分化
  • 简介:目的:克隆人肿瘤坏死因子配体超家族tumornecrosisfactorsuperfamily,TNFSF)成员4—1BBL基因,构建真核表达载体,并检测4—1BBL基因在Tca8113中表达。方法:从淋巴细胞中提取RNA,用RT—PCR方法将4—1BBL编码序列cDNA扩增。然后将该基因编码序列插入真核荧光蛋白载体pEGFP—C1质粒中,构建成最终表达载体DEGFP—C1—4—1BBL。运用脂质体方法将pEGFP—C1—4—1BBL转染Tca8113细胞,转染24h后,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达.RT—PCR和免疫印迹检测4—1BBL在该细胞表达。经G418筛选后。用有限稀释法建立稳定高表达带有4—1BBL基因Tca8113细胞系。结果:从淋巴细胞中提取RNA经RT—PCR扩增出目的基因4—1BBL,全长大小为768bD。测序鉴定该序列与GenBank中序列相同。转染pEGFP—C1—4—1BBL载体细胞Tca8113中.荧光显微镜下可见表达绿色荧光蛋白,RT—PCR方法检测到目的基因4—1BBL768bp大小cDNA扩增产物。裂解4—1BBL/rca8113基因转染细胞膜蛋白中相对分子质量约27.5Kd特异性条带。结论:转染4—1BBL基因细胞建立.为该基因功能后续研究和单克隆抗体研制奠定了基础。

  • 标签: TCA8113 4—1BBL 共刺激分子 质粒构建 基因转染
  • 简介:目的:进行颞区腮腺区解剖研究,为颧骨复合体骨折手术中应用近发际缘冠状切口提供依据,以减少并发症发生。方法:利用5具经4%甲醛固定成人男性标本,对颞区腮腺区相关解剖进行观察、摄像,同时结合12例颧骨复合体骨折患者,应用近发际缘冠状切口实施手术。结果:12例患者手术顺利,术后随访3个月-1a,无术后并发症发生。结论:熟知颞区腮腺区解剖,可明显减少手术创伤预防手术并发症发生。

  • 标签: 冠状切口 颧骨复合体骨折 解剖
  • 简介:牙周膜干细胞(periodontalligamentstemcell,PDLSC)是在干细胞理论和技术发展较为成熟基础上提出。PDLSCs具有分化形成牙槽骨、牙骨质和牙周膜潜能,在牙周生理、病理和牙周病再生治疗中发挥极其重要作用。对PDLSCs生物研究是解读这一系列事件钥匙。本文就PDLSCs生物作用、来源、组织定位、分离和鉴定等方面研究最新进展做一综述。

  • 标签: 牙周膜干细胞 生物学 进展
  • 简介:成釉细胞癌是一种罕见恶性骨内肿瘤,目前文献报告例数较少,因而该疾病流行病、治疗方式以及预后仍不清楚。作者报告成釉细胞1例,采用病灶病灶周围2cm颌骨、软组织扩大切除方式,病理检查证实为成釉细胞癌,术后未行放疗或化疗。目前患者正随访中,无复发远处转移迹象。

  • 标签: 成釉细胞癌 成釉细胞瘤 颌骨
  • 简介:目的:检测缺氧诱导因子1α(hypoxia-induciblefactor1α,HIF-1α)在成釉细胞瘤中表达,并探讨与成釉细胞瘤侵袭和复发相关性。方法:对5对成釉细胞对应正常瘤旁组织进行转录组测序,并对60例原发60例复发患者第1次手术标本行免疫组织化学染色,检测2组患者中HIF-1α蛋白表达。采用SAS9.3软件包对数据进行统计学分析。结果:5对新鲜标本转录组测序发现,3对标本中HIF-1α及其相关分子转录水平呈明显一致性改变。免疫组织化学染色发现,复发组成釉细胞瘤中,40%肿瘤HIF-1α染色高于未复发组;复发组中,48.33%肿瘤slug染色高于未复发组,差异具有统计意义(P〈0.05)。结论:成釉细胞瘤复发与HIF-1α相关,HIF-1α表达高患者较表达低患者更容易复发。HIF-1α可能通过调控slug表达,影响成釉细胞局部复发。

  • 标签: HIF-1Α 成釉细胞瘤 SLUG
  • 简介:牙髓干细胞是最早体外成功分离培养牙源性干细胞,具有较强增殖能力多向分化能力,是组织工程牙再生、骨再生研究中极具潜能种子细胞。牙髓干细胞生物性能容易受到外界环境影响,进而影响在组织工程中应用,因此选择一个适合牙髓干细胞培养微环境是非常重要。本文基于现有文献,从细胞因子、条件培养液、支架材料、物理因素对牙髓干细胞生物性能影响展开综述。

  • 标签: 牙髓干细胞 微环境 增殖 分化
  • 简介:目的研究从人脂肪组织中提取血管周干细胞(humanperivascularstemcells,hPSCs)特点,并探讨成骨、成脂成软骨分化能力。方法采用流式荧光细胞分选技术(FACS)在12例行吸脂手术患者脂肪标本中分选出人基质血管成分(humanstromalvascularfraction,hSVF)和由周皮细胞(CD34^-、CD146^+、CD45^-)与外膜细胞(CD34^+、CD146^-、CD45^-)组成hPSCs进行培养,比较克隆增殖能力,然后将2种细胞进行成骨、成脂和成软骨诱导,诱导结束后分别进行茜素红染色、油红O染色和阿尔新蓝染色,并检测成骨诱导后成骨相关基因mRNA表达。结果hSVF和hPSCs均以纺锤形成纤维样细胞生长,hPSCs呈现出更快融合趋势,且细胞形态更均一。hPSCs细胞相比于hSVF具有更强克隆增殖能力(P〈0.05)。hPSCs细胞在成骨成软骨方向比hSVF具有更强优势,而hSVF在成脂方向比hPSCs具有更强优势。成骨诱导后,hPSCs成骨基因碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)和骨钙素(osteocalcin,OCN)相对表达量要明显高于hSVF(P〈0.05)。结论hPSCs细胞具有干细胞多项分化潜能,且在成骨方向具有很强优势,可成为骨组织工程中理想种子细胞来源。

  • 标签: 人血管周干细胞 人基质血管成分 成骨分化 成脂分化 成软骨分化
  • 简介:目的:体外分离培养兔脂肪细胞(adipose—derivedstemcells,ADSCs),鉴定分化能力并观察富血小板纤维蛋白(platelet—richfibrin,PRF)对ADSCs成骨分化影响。方法:取新西兰兔腹股沟处脂肪组织,将其分离获得脂肪细胞,培养至第三代用于实验。分别以油红O、茜素红染色鉴定成脂和成骨分化能力。取兔耳中央动脉血一次离心法制备PRF膜。将脂肪细胞分为2组:对照组不含PRF膜;实验组含PRF膜。用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测不同时间点PRF对ADSCs成骨分化影响。结果:脂肪细胞呈长梭形贴壁生长;油红O茜素红染色均呈阳性;在不同时间点,实验组ALP活性值均高于对照组(P〈0.05)。结论:ADSCs具有成骨潜能,且PRF可以促进ADSCs向成骨细胞分化。

  • 标签: 脂肪干细胞 富血小板纤维蛋白 成骨分化
  • 简介:牙周炎是牙菌斑引起牙周组织破坏且不可逆转一类疾病,而宿主对牙周致病菌炎症反应不一是由环境和遗传共同作用决定.本文将对近年来牙周炎遗传方面的研究,包括牙周炎遗传特征、牙周炎易感基因多态性、某些遗传性疾病与牙周炎关系作一综述.

  • 标签: 牙周炎 家族聚集性 基因多态性
  • 简介:引言尽管有报道认为间质细胞性因子(SDF)-1α/CXCR4轴存在于牙髓组织中,但关于牙髓干细胞(DPSCs)中该轴调控知之甚少。本研究目的就是要搞清炎症或组织缺氧状态对牙髓细胞SDF-1α/CXCR4轴是否有调控作用。方法:用不同浓度脂多糖LSP刺激原代牙髓细胞

  • 标签: 基质细胞衍生因子-1Α 牙髓细胞 调控作用 人类 SDF-1Α 牙髓组织
  • 简介:目的使用小干扰RNA(siRNA)干扰舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中营养缺乏自噬因子1(NAF1表达,观察对NAF1基因沉默效果,并测定沉默后Tca8113细胞生长增殖侵袭能力变化。方法建立小干扰RNA(si-NAF1)组、阴性对照(si-NC)组、对照(vector)组。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和Westernblotting法检测NAF1细胞周期素D1(cyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达。MTT实验检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell法观察各组细胞侵袭能力变化。结果与vector组相比,NAF1-siRNA干预Tca8113细胞后,si-NAF1组NAF1mRNA和蛋白表达水平都明显降低(χ^2=25.65,t=-17.1,P〈0.05),cyclinD1、MMP-2蛋白表达水平降低(tcyclinD1=-14.7,tMMP-2=-9.6,P〈0.05),细胞增殖能力明显降低(t=-36.77,P〈0.05),克隆形成能力明显减弱(t=-12.33,P〈0.05),侵袭能力明显降低,si-NAF1组穿过Transwell膜细胞少于vector组。结论通过siRNA技术降低NAF1表达可能通过降低cyclinD1水平抑制舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖能力,通过影响MMP-2蛋白表达水平,抑制Tca8113细胞侵袭能力。

  • 标签: 舌肿瘤 肿瘤 鳞状细胞 RNA干扰 营养缺乏自噬因子1
  • 简介:阻塞性涎腺疾病在临床较为常见,随着涎腺镜技术发展应用,人们对认识不断深入。本文主要通过回顾近几年来涎腺镜技术临床应用,探讨阻塞性涎腺疾病病因治疗进展。

  • 标签: 涎腺镜 阻塞性涎腺炎 涎石症
  • 简介:目的:评估骨髓基质细胞(bMSCs)体外分化为成肌样细胞能力,探讨骨髓基质细胞作为肌肉组织工程新种子细胞可能性。方法:体外分离培养兔骨髓基质细胞,经腺病毒介导MyoD(Ad—MyoD)基因转染后,观察细胞形态变化增殖情况,并行成肌细胞标志物检测。结果:转染后细胞形态发生明显变化,可见肌管样结构。myogenindesmin免疫细胞化学染色呈阳性。结论:体外培养骨髓基质细胞可以向成肌方向转化,有望成为肌肉组织工程新种子细胞

  • 标签: 骨髓基质细胞 成肌样细胞 MyoD基因 种子细胞
  • 简介:蛋白质组是对基因编码蛋白质进行大规模分析一门新兴学科,对于寻找骨相关疾病诊断标志物、筛选药物作用靶点,以及对探讨成骨细胞分化相关机制提供了新方向和方法。本文对蛋白质组基本概念、研究方法,以及其在骨疾病和成骨细胞分化中研究进展进行综述。

  • 标签: 蛋白质组学 骨疾病 骨髓基质细胞 成骨细胞分化
  • 简介:目的:研究体外果蝇裸露角蛋白2(nakedcuticlehomolog2,Nkd2)对大鼠牙囊细胞(ratdentalfolliclecells,rDFCs)成骨向分化调控机制。方法:体外培养rDFCs,鉴定组织来源并进行成骨向分化诱导,茜素红染色验证成骨向分化能力,激光共聚焦检测检测Nkd2在中rDFCs表达;采用小RNA干扰技术,干扰rDFCs中Nkd2表达后进行成骨向分化诱导,westernblot检测小RNA干扰对rDFCs表达成骨向分化因子Runx2、Col-1和OCN影响;免疫荧光染色检测β-catenin在rDFCs中分布变化,westernblot检测小RNA干扰对rDFCs表达蓬乱蛋白1(Dishevelled-1,Dvl-1表达变化和Wnt/β-catenin信号通路激活剂Wnt3a与阻断剂FH535处理rDFCs后Nkd2表达改变。结果:获得体外培养rDFCs,并成功诱导成骨向分化,茜素红染色显示矿化结节形成。Nkd2在rDFCs中表达主要分布于胞浆和胞核周围。Nkd2小RNA干扰后rDFCs中Runx2、Col-1蛋白表达明显下调,Dvl-1表达下调。同时,Wnt3a处理组rDFCs中Nkd2蛋白表达量升高,而FH535处理组表达量下降。结论:Nkd2通过Dvl-1调控Wnt/β-catenin信号通路促进rDFCs成骨向分化;Nkd2是Wnt/β-catenin信号通路靶基因,对Wnt/β-catenin信号通路起正反馈调节作用。

  • 标签: Nkd2 牙囊细胞 成骨向分化 WNT/Β-CATENIN信号通路
  • 简介:目的探讨线粒体肿瘤抑制基因1(MTUS1)在舌鳞状细胞癌(TSCC)中表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学检测80例TSCC、27例舌白斑和13例正常舌黏膜中MTUS1表达,并对表达水平进行统计学分析。定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常舌黏膜与TSCC中MTUS1亚型表达水平并进行统计学分析。Kapalan-Meier法分析TSCC患者生存率,并统计分析MTUS1在TSCC中表达与生存率之间关系。SPSS13.0统计软件分析数据。结果在正常舌黏膜上皮中MTUS1主要表达于棘层细胞胞浆内,部分位于胞核。正常舌黏膜中MTUS1表达水平明显高于舌白斑(t=5.876,P=0.037)和TSCC(t=7.638,P=0.00083);舌白斑中MTUS1表达明显高于TSCC,差异有统计意义(t=5.281,P=0.0042)。MTUS1在高分化TSCC组织中表达高于中分化和低分化者,但表达差异无统计意义(F=1.873,P=0.071)。定量RT-PCR检测显示,ATIP1、ATIP3a和ATIP3b是舌黏膜组织中MTUS1/ATIP主要亚型;与正常舌黏膜相比,TSCC组织中MTUS1/ATIP亚型表达明显降低,差异有统计意义(t=5.627,P=0.0153)。高表达MTUS1TSCC患者生存率明显高于低表达者(F=5.876,P=0.0286)。结论MTUS1在TSCC发生、发展中起着重要作用。

  • 标签: 线粒体肿瘤抑制基因1 鳞状细胞 免疫组化
  • 简介:目的探讨甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Aza)对CDH1启动子甲基化状态舌鳞状细胞癌(TSCC)细胞侵袭迁移影响。方法5-Aza处理TSCC细胞株UM1和UM2,倒置相差显微镜下观察处理前后细胞形态排列情况;划痕试验和Transwell试验检测处理前后细胞迁移和侵袭能力;Westernblot法和免疫荧光检测E-cadherin表达;甲基化特异PCR(MSP)检测处理前后UM1、UM2细胞E-cadherin编码基因CDH1甲基化状态。细胞相对侵袭率比较采用χ2检验,P〈0.05为差异有统计意义。结果UM1细胞呈小圆形、多边形或梭形,细胞排列松散,未见明显细胞紧密连接;UM2细胞则表现为多边形,细胞细胞之间紧密接触,呈典型"铺路石"样排列。UM1细胞E-cadherin表达较UM2低,细胞划痕经过48h后完全铺满,而UM2细胞划痕48h后不足75%。加入去甲基化药物5-Aza后,UM1细胞形态稍不规则,以多边、多角形细胞为主,且出现类似UM2细胞铺路石样排列细胞团,可见细胞紧密连接,细胞划痕经过48h后仍不足70%,细胞相对侵袭率为加药前102%(χ2=0.651,P〉0.05),E-cadherin表达上调。MSP结果显示,UM1细胞E-cadherin编码基因CDH1呈现过甲基化,去甲基化药物5-Aza作用后甲基化程度降低。结论5-Aza可诱导E-cadherin编码基因CDH1去甲基化,导致E-cadherin上调抑制迁移能力。

  • 标签: 鳞状细胞 迁移 甲基化 E钙粘着糖蛋白 上皮细胞-间质细胞转换
  • 简介:Kimura病是临床少见一种主要累及头颈部浅表淋巴结和软组织局部慢性肉芽肿性病变。该病由Kim等于1937年以“嗜酸性细胞增多性淋巴肉芽肿”首次报道并予论述。1948年,Kimura以“伴有淋巴组织增生特殊肉芽肿”对本病作了较系统描述.故本病又叫金氏病或木村病。该病病因不明、临床少见。因此临床医生对该病往往认识不足,临床易误诊且复发率高。

  • 标签: KIMURA病 临床医生 头颈部 病理分析 多发性 肉芽肿性病变