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  • 简介:目的建立克罗诺杆菌的特异、灵敏的TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR检测方法。方法根据GenBank公布的克罗诺杆菌MMS基因高保守序列,设计特异引物和TaqMan—MGB探针,建立和优化反应体系,用25种其他常见致病菌评价反应体系的特异性,用克罗诺杆菌MMS基因重组质粒构建实时荧光定量PCR标准曲线,对重组质粒、纯菌和人工模拟污染样本进行灵敏度试验,并与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR比较,配对t检验分析两种方法对Ct值和荧光强度的差异。结果采用TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR检测克罗诺杆菌MMS基因仅需40min,与25种非目标菌无交叉反应,仅对克罗诺杆菌有特异性扩增;所构建方法线性关系良好,相关系数r2=0.999,扩增效率为99.972%,对重组质粒、纯菌、人工模拟污染样品标本的灵敏度分别达10拷贝/反应、3.8和38cfu/ml;与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR相比,TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR的Q值更小、△Rn值更高,灵敏度和分辨率差异均有统计学意义(Ct:t=-14.406,P〈0.01;△Rn:t:14.230,P〈0.01)。结论本研究建立的TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR反应体系能够快速、特异、灵敏地检测克罗诺杆菌MMS基因,可用于婴幼儿奶粉中克罗诺杆菌的快速筛查和鉴定,具有较大的的应用价值和推广价值。

  • 标签: 克罗诺杆菌(原阪崎肠杆菌) 实时荧光定量PCR TaqMan—MGB探针 局部大分子合成操作子 MMS基因 食源性致病菌
  • 简介:建立免疫磁珠分离(ImmunomagneticSeparation,简称“IMS”)联合荧光定量聚合酶链式反应PCR(PolymeraseChainReaction,简称“PCR”)快速检测阪崎肠杆菌的方法。制备以生物素介导偶联的链霉亲和素免疫磁珠,优化偶联和捕获条件。合成阪崎肠杆菌ITS(InternalTranscribedSpacer简称“ITS”)靶基因序列的引物和探针,同时构建内参质粒(InternalAmplificationControl,简称“IAC”),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR反应体系。在1mL体系中添加粒径为80nm的链霉亲和素免疫磁珠0.3mg,孵育30min,可获得80.5%以上的捕获效率。建立的基于内参的荧光PCR体系针对质粒检测时,Ct值(Cyclethreshold,简称“Ct值”)与模板拷贝数有着良好的线性关系(R2=0.998),IMS-PCR检测体系对阪崎肠杆菌菌液的检测灵敏度为33.3CFU/mL,可在3h内完成。针对4株阪崎肠杆菌标准菌株和5株非阪崎肠杆菌菌株的检测也显示出较好的特异性和稳定性,人工模拟样品的检测结果与采用国标法检测的结果完全一致,可用于快速检测样品中的阪崎肠杆菌和疾病预防。

  • 标签: 免疫磁珠 荧光定量PCR 内参 阪崎肠杆菌 快速检测
  • 简介:根据转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9外源基因的旁侧序列,采用ABIPrimerExpress3.0设计引物和TaqMan探针,建立转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异实时荧光定量PCR检测方法。采用该检测方法对DAS-40278-9玉米含量为1%(质量分数)的标准样品进行检测,结果显示,采用建立的方法获得的标准曲线,通过斜率、相关系数、扩增效率判断是可靠的,待测样品的定量检测结果为1.024%,非常接近真实值。本试验表明建立的转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异定量PCR检测方法的特异性好,灵敏度和准确度高,值得推广应用。

  • 标签: DAS-40278-9 z SSIIb 旁侧序列 定量PCR 检测
  • 简介:生产中定量纸的纸机目前国内数量最多,使用最普遍,因此对其进行计算机自动控制也最有意义,本文介绍了中定量纸纸机计算机控制系统的设计思想,建模方法、控制策略、软件结构、仪表与计算机配置等方面内容。

  • 标签: 纸机 定量 水份 使用 计算机控制 设计思想
  • 简介:1概述现桶啤灌装普遍采用两种灌装方式,即上灌装和下灌装。上灌装是将啤酒桶一直灌满为止,由于啤酒桶有大小误差,每桶约多灌0.7公斤左右;下灌装是将啤酒一直灌到满过酒矛管,酒矛管的长短直接影响灌装量,在清洗和运输中,酒矛管松动和装错现象时有发生,导致啤酒计量出现误差。为解决这一矛盾,本公司决定改造传统的灌装方式,通过调研,选用进口啤酒专用流量计,与西门

  • 标签: 啤酒 桶啤定量灌装系统 改造 专用流量计 系统设置
  • 简介:蛋白质为了胎儿及母体需要,每日蛋白质摄取量应增加6~12克.其中最好有一半是来自品质较佳的动物性蛋白质,如蛋、牛乳、鱼、肉等.植物性蛋白质可增加豆浆、豆腐等黄豆制品的摄取量.

  • 标签: 孕妇 营养需求 蛋白质 钙质 饮食平衡 铁质
  • 简介:造纸过程中,由于纸机种类及生产纸种不同,控制对象的结构和参数也各异。本文给出一种纸机定量水分通用模型的表示方法,并着重说明在该通用模型的基础上,通过最忧解耦,控制模型拟合,控制参数选取等通用步骤,获得纸机定量水分的通用控制算法,使系统稳定并具有良好的动态性能。

  • 标签: 纸机 造纸过程 定量 纸种 水分 控制参数
  • 简介:目的建立纸质食品包装材料中荧光增白剂(FWAs)快速筛选的荧光分光光度测定方法。方法以C.I.220为定量标准,试样用重蒸无水乙醇-水(1:4,V/V)经三次超声提取,提取液在激发波长为350nm和发射波长为430nm条件下用荧光分光光度仪测定。结果C.I.220在12.5~400ng/ml范围内呈良好的线性相关(r=0.9997),3个添加浓度水平(1.5、2.5和6.0μg/g)的平均回收率为84.4%-90.9%,定量限为1.2μg/g。结论该方法简便、灵敏和准确,适合纸质食品包装材料中FWAs的快速筛选检测要求。

  • 标签: 荧光增白剂 双三嗪氨基二苯乙烯 荧光分光光度法 纸质食品包装材料 食品安全
  • 简介:ExperimentalstudyofenrichedfroendietondigestiveenzymesandgrowthofjnvenilecuttlefishSepiaofficinalisL.(MolluscaCephalopoda),[刊,英]/PerrinA,LeBihanE,KouetaN,//JournalofExperimentalMarineBiologyandEcology,—2004,311(16)—267∽285.

  • 标签: 外文文献 文献题录
  • 简介:近期外文文献题陈娇(无锡轻工大学无锡,214036)营养冰淇淋[西班牙,期刊]/BanguelaPerez,S.;RodrguezHerrera,T.//Alimentaria(Madrid)1995,260:97~99冰淇淋技术之最新发展[英,期...

  • 标签: 国外文献 文献题录
  • 简介:在造纸过程中,纸幅的定量横向分布是衡量纸张质量的一个极重要的指标。本文介绍了定量横向分布自动控制的意义和国内外现状,定量横向分布控制的原理,控制系统的软硬件结构以及该系统今后的发展趋势。

  • 标签: 造纸过程 纸幅 纸张质量 定量 衡量 国内外
  • 简介:基于定量的横向耦合关系和纵向模型,建立了其横向分布的动态模型,设计了基于该模型的多变量广义预测控制器(GPC),根据模型结构特征将控制算法进行分解,得到相应的GPC并行算法,并绐出其多处理机系坑实现结构。计算机仿真结果表明,本文提出的建模与并行控制方法较好地改善了系统的的静、动态性能。

  • 标签: 并行算法 并行控制 多处理机 GPC 广义预测控制 控制算法