简介：目的研究食管鳞癌(ESC)组织中survivin蛋白和P63蛋白的表达与ESC生物学行为之间的关系.方法采用免疫组织化学(SP)方法检测65例ESC组织中survivin蛋白和P63蛋白的表达,探讨两者与ESC组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后的关系.结果(1)survivin蛋白在ESC组织中的阳性表达率为55.4%,其表达越强,组织分化程度越低(P=0.00)、TNM分期越晚(ⅡB期和Ⅲ期,P=0.00)、淋巴结转移率越高(P=0.00)、两年生存率越低(P=0.00);(2)P63蛋白在ESC组织中的阳性细胞百分数为(43.2±24.7)%,其阳性细胞百分数越高,组织分化程度越低,但阳性细胞百分数的高低与TNM分期、淋巴结转移、两年生存率无关(P均>0.05);(3)survivin蛋白呈强阳性表达的病例中,其P63蛋白阳性细胞百分数明显高于survivin呈阴性和弱阳性表达的病例(P均=0.00).结论ESC组织survivin蛋白的表达,与ESC的分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况和预后有密切关系,它的高表达提示肿瘤患者预后不良;而P63蛋白对ESC生物学行为的影响相对较小.

简介：摘要目的探讨绿色荧光蛋白作为标记蛋白其荧光强度与胰岛素表达量的相关性。方法构建重组质粒prIns1EGFP，转染HIT-T15仓鼠胰岛瘤细胞，随机分为3组，低糖组（LG）、中糖组（MG），高糖组（HG）,检测基线0小时及葡萄糖刺激后4小时内胰岛素分泌量及单个胰岛β细胞荧光强度。结果HG组单个胰岛β细胞荧光强度，胰岛素分泌量较LG组明显增强（P＜0.05），在一定葡萄糖浓度范围内，绿色荧光蛋白其荧光强度随着葡萄糖浓度的升高而升高，并与细胞胰岛素分泌量呈明显的正相关，相关系数R为0.896。（P＜0.05）结论绿色荧光蛋白作为分子标记物其荧光强度与胰岛素分泌量有正相关性。

简介：目的：构建含人重组牙骨质蛋白1（recombinationhumancementumprotein1，rhCEMPl）基因的真核表达载体，观察其在酿酒酵母细胞中的表达。方法：采用PCR方法扩增rhCEMPl基因，利用定向克隆技术将rhCEMPl基因插入到中间载体pTeasy中，再进一步转插入载体pWX530。重组的pWX530-rhCEMPl在大肠杆菌DH5a中扩增后，通过酶切电泳鉴定和DNA序列测定所构建的质粒。经鉴定正确的表达载体pWX530-rhCEMPl转入酵母感受态细胞中，酵母经氨基酸营养缺陷型筛选后培养表达。利用聚丙烯酰胺凝胶（SDS—PAGE）电泳和酶联免疫吸附测定（ELISA）分析蛋白表达情况，离子交换层析提纯蛋白。结果：构建的重组质粒成功转入酵母细胞，通过SDS—PAGE和ELISA检测rhCEMPl表达成功。结论：成功构建的含m—CEMPl基因的真核表达载体pWX530-rhCEMPl，并能转入酵母细胞中成功表达。

简介：摘要目的探讨鼠双微体基因2(MDM2)和核受体结合SET结构域蛋白2(NSD2)在乳腺癌组织中的表达及意义。方法收集2014年7月至2020年1月广东医科大学附属医院103例乳腺癌组织和配对癌旁组织，采用免疫组织化学方法检测组织中MDM2蛋白以及NSD2蛋白的表达，结合临床资料行χ2检验相关性分析。结果MDM2蛋白在乳腺癌组织中表达率为69.90%(72/103)，显著高于配对癌旁组织中表达率10.68%(11/103)，两者差异有统计学意义(χ2＝75.083，P<0.01)，MDM2表达水平与乳腺癌的TNM分期、组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移明显相关(χ2＝5.501、8.724、4.127、5.415，P<0.05)。NSD2蛋白在乳腺癌组织中表达率为71.85%(74/103)，显著高于配对癌旁组织中表达率11.65%(12/103)，两者差异有统计学意义(χ2＝76.731，P<0.01)，NSD2蛋白表达水平与乳腺癌的淋巴结转移、组织学分化程度、TNM分期明显相关(χ2＝ 7.206、5.793、4.995，P<0.05)，差异具有统计学意义。结论MDM2蛋白以及NSD2蛋白异常高表达可能参与乳腺癌发生发展与转移，检测MDM2以及NSD2有助于判价乳腺癌的恶性程度、判断乳腺癌转移潜能。

简介：    摘要：目的：分析NSD2和EZH2在三阴乳腺癌患者中的表达。方法：采用免疫组织化学SP法，研究2021年1月至2022年2月诊断的三阴乳腺癌患者96例及108例非三阴性乳腺癌患者的EZH2和NSD2蛋白表达。结果：三阴乳腺癌组织中EZH2和NSD2的阳性表达率显著高于非肿瘤组织；EZH2和NSD2蛋白表达与病理分级、肿瘤直径和淋巴结转移密切相关。结论： EZH2和NSD2蛋白在三阴乳腺癌中具有高表达，可作为诊断和治疗的潜在生物标记。

简介：目的：研究参麦注射液对肿瘤细胞增殖的抑制效应,检测参麦液对肿瘤细胞中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）基因表达的影响,以及检测参麦液对MMP-2蛋白活性的影响,进而探讨参麦液抑制肿瘤微血管生成的分子机制。方法：采用RT-PCR方法从RNA水平水平检测参麦液对MMP-2和TIMP-1基因表达的影响,采用酶谱的方法检测参麦液对MMP-2蛋白表达的影响。结果：参麦液能抑制MMP-2的基因表达并显著抑制MMP-2蛋白以活性形式存在,增强TIMP-1的基因表达。结论：参麦液可能通过抑制MMP-2的基因表达和增强TIMP-1的基因表达而抑制肿瘤血管内皮细胞的迁移,使肿瘤组织内微血管的生成速度减慢,进而使肿瘤内的微血管密度降低,达到抑制肿瘤生长的目的。

简介：目的研究电磁辐射对家兔小脑谷氨酸受体2（glutamatereceptor2，GluR2）蛋白质表达和磷酸化水平的影响，探讨电磁辐射对小脑运动性学习记忆的神经信号传导通路的损伤特点。方法30只二级日本大耳自家兔随机分为对照组和电磁辐射组（包括辐射后0、3、24和72h等4个时相组）。辐射组给予平均功率密度为65mW／cm^2S波段电磁波持续辐射30min，测定辐射前和辐射后即刻家兔的肛温并计算比吸收率值；采用Westernblot方法检测小脑GluR2蛋白质表达及其磷酸化水平。结果电磁辐射后0h家兔肛温升高2．35℃，SAR值为19．00J／（kg·s）；小脑GluR2蛋白质表达水平无显著变化，但GluR2蛋白质磷酸化水平在电磁辐射后0h显著降低。结论65mW／cm^2电磁辐射30min可使家兔机体产生明显热效应，并导致小脑GluR2的磷酸化水平下降，将最终影响运动性学习记忆功能。

简介：摘要目的探讨同型半胱氨酸（HCY）和超敏C反应蛋白（CRP）在老年2型糖尿病肾病（T2DN）中的表达及意义。方法将我院在2012年6月到2014年6月收治的150例老年2型糖尿病患者按照其不同的蛋白排泄率（UAER）分为单纯糖尿病组、早期糖尿病组和临床糖尿病组，并在我市随机选取50例健康者作为对照组，分别测量四组研究对象的同型半胱氨酸以及超敏C反应蛋白值，分析对比。结果结果显示，对照组、单纯糖尿病组、早期糖尿病肾病组、临床糖尿病肾病组的各项生化指标呈逐渐升高的趋势，差异均具有统计学意义，P＜0.05。结论患者从2型糖尿病逐渐发展为2型糖尿病肾病的过程中，同型半胱氨酸和超敏C反应蛋白值不断升高，且这两项指标与蛋白排泄量成正相关，因此这两项指标在判定2型糖尿病肾病时具有重要意义。

简介：摘要目的分析骨形成蛋白2(BMP2)mRNA在不同类型胶质瘤中的表达及其与生存期的关系，明确其作为胶质瘤预后评估指标的应用价值。方法收集中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库中692例脑胶质瘤患者资料，比较不同组织病理类型、不同性别、年龄、原发或复发状态胶质瘤患者及不同WHO分级、异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)突变、1p19q杂合性缺失状态、分子分级胶质瘤患者中BMP2 mRNA表达差异，以及不同分类胶质瘤患者中BMP2 mRNA高表达量患者与低表达量患者生存期的差异。结果(1)不同组织病理类型胶质瘤中BMP2 mRNA表达不同，差异有统计学意义(F=9.392，P=0.000)。少突胶质瘤亚型BMP2 mRNA表达最高，其次是星形细胞瘤亚型，胶质母细胞瘤中最低。男性患者与女性患者间BMP2 mRNA相对表达量分别为9.78±0.65、11.26±0.86，差异无统计学意义(P>0.05)。<43岁组及≥43岁组患者BMP2 mRNA相对表达量分别为12.51±0.81、8.37±0.65，差异有统计学意义(P<0.05)。原发与复发胶质瘤患者BMP2 mRNA相对表达量分别为10.09±0.62、10.90±0.93，差异无统计学意义(P>0.05)。WHO Ⅱ~Ⅳ级胶质瘤患者BMP2 mRNA相对表达量分别为13.98±1.12、12.88±0.88、5.18±0.64，差异有统计学意义(P=30.912，P=0.000)。IDH1野生型与突变型患者间BMP2 mRNA相对表达量分别为2.73±0.16、17.47±0.85，差异有统计学意义(P<0.05)。1p/19q无缺失与1p/19q缺失患者间BMP2 mRNA相对表达量分别为7.02±0.36、25.28±1.66，差异有统计学意义(P<0.05)。较低级别胶质瘤患者及胶质瘤母细胞瘤患者中IDH1突变型患者BMP2 mRNA表达量均高于IDH1野生型患者，差异有统计学意义(P<0.05)。(2)原发胶质瘤患者及复发胶质瘤患者中，BMP2 mRNA高表达(≥4.68)患者生存期均明显长于低表达(<4.68)患者，差异有统计学意义(χ2=62.975，P=0.000；χ2=12.810，P=0.000)。结论BMP2 mRNA表达量可以作为预测胶质瘤恶性程度的指标，高表达者患者生存期更长。

简介：摘要目的观察劳伤药乙醇浸膏对佐剂性关节炎（AA）大鼠滑膜病变及滑膜细胞基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响，探讨其治疗RA可能的作用机制。方法60只SD大鼠随机分成6组空白组，模型组，尼美舒利组，劳伤药高、中、低剂量组（分别用劳伤药A、B、C组表示。下同），建立AA大鼠模型，给药28天后处死大鼠，HE染色观察踝关节滑膜组织形态学变化，酶联免疫吸附法测定大鼠血清炎性因子（IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、NO、PGE2）含量，免疫组化法检测滑膜组织中MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。结果与模型组比较，劳伤药组(5g/kg)明显减轻滑膜细胞的增生，减少滑膜层和滑膜下层淋巴细胞浸润，明显降低AA大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、PGE2的含量和升高IL-10的含量，降低关节滑膜组织MMP-2、MMP-9的蛋白含量。结论劳伤药可显著改善AA大鼠的滑膜病变，通过下调滑膜组织MMP-2、MMP-9的蛋白表达。

简介：摘要目的比较髓样细胞触发受体2(triggering receptor expressed on myeloid cell 2，TREM2)在不同月龄酪氨酸激酶结合蛋白(tyrosine kinase binding protein，TYROBP)基因敲除小鼠和野生型小鼠不同脑区的表达差异，探讨TREM2、TYROBP与早发型阿尔茨海默病(early onset Alzheimer's disease，EOAD)的关系。方法健康TYROBP基因敲除的小鼠根据基因测序结果分成3组：纯合型(TYROBP-/-)组、杂合型(TYROBP-/＋)组和野生型(wild type，WT)组，3组小鼠分别在2、4、6月龄各选10只，运用Western blot和RT-qPCR技术检测TREM2在前额叶、海马中的表达情况。结果(1)在前额叶中：Western blot和RT-qPCR共同显示，与各月龄WT组[2月龄：(0.993±0.048)，(1.654±0.033)；4月龄：(0.503±0.019)，(2.169±0.023)；6月龄：(0.600±0.036)，(1.468±0.057)]相比，TREM2蛋白和mRNA在2月龄TYROBP-/＋组[(0.746±0.062)，(1.137±0.067)]和TYROBP-/-组[(0.661±0.028)，(0.644±0.012)]的表达均降低，而在4月龄和6月龄TYROBP-/＋组[4月龄：(1.140±0.006)，(5.483±0.088)；6月龄：(0.827±0.043)，(3.020±0.082)]和TYROBP-/-组[4月龄：(1.071±0.010)，(3.012±0.150)；6月龄：(0.627±0.026)，(1.633±0.027)]的表达均升高，差异具有统计学意义(F＝12.946，134.445；725.318，289.202；12.172，202.791；均P<0.05)，且4月龄小鼠升高更明显。(2)在海马中：Western blot显示，与各月龄WT组[2月龄：(1.268±0.036)；4月龄：(0.813±0.010)；6月龄：(0.312±0.021)]相比，TREM2蛋白在2月龄TYROBP-/＋组[(0.804±0.034)]和TYROBP-/-组[(0.534±0.020)]的表达降低，而在4月龄和6月龄TYROBP-/＋组[(0.932±0.011)；(0.769±0.031)]和TYROBP-/-组[(0.910±0.014)；(0.609±0.018)]的表达均升高，差异具有统计学意义(F＝142.807，27.884，94.067；均P<0.05)，且4月龄小鼠升高更明显。结论TREM2在2月龄TYROBP基因敲除小鼠脑组织中表达降低，在4月龄和6月龄TYROBP基因敲除小鼠脑组织中表达升高，推测TREM2/TYROBP信号通路参与EOAD的病理过程并且在EOAD的不同病理阶段发挥着不同的作用。

简介：摘要目的探讨外周血UL16结合蛋白2（ULBP2）表达水平在结直肠癌早期诊断和评估预后中的价值。方法选取2016年5月至2019年5月湖北医药学院附属东风医院结直肠癌患者80例（结直肠癌组）和健康体检者60例（健康对照组）。采用酶联免疫吸附试验法检测两组血清ULBP2表达水平；采用受试者工作特征（ROC）曲线评价血清ULBP2对结直肠癌的诊断效能；Cox回归模型分析影响结直肠癌患者生存的危险因素；Kaplan-Meier法绘制生存曲线，比较采用log-rank检验法。结果结直肠癌组血清ULBP2水平明显高于健康对照组[（85.52 ± 12.18）ng/L比（66.20 ± 8.28）ng/L]，结直肠癌组Ⅰ~Ⅱ期患者血清ULBP2水平[（76.44 ± 7.56）ng/L]也明显高于健康对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清ULBP2诊断结直肠癌的最佳临界值为79.53 ng/L，曲线下面积（AUC）为0.869，敏感度为73.75%，特异度为91.67%；血清ULBP2诊断Ⅰ~Ⅱ期结直肠癌的最佳界值为71.86 ng/L，AUC为0.827，敏感度为78.57%，特异度为78.33%。按中位血清ULBP2水平将患者分为高表达（血清ULBP2水平>85.52 ng/L）38例，ULBP2低表达42例。血清ULBP2表达水平与淋巴结转移和组织分化有关（P<0.05）。单因素Cox回归分析结果显示，淋巴结转移、远处转移、组织分化和血清ULBP2是影响结直肠癌患者不良预后的危险因素（P<0.01或<0.05）；多因素Cox回归分析结果显示，仅血清ULBP2是影响结直肠癌患者不良预后的独立危险因素（HR = 0.194，95% CI 0.077~0.490，P = 0.001）。血清ULBP2高表达患者中位生存期明显短于血清ULBP2低表达患者（28个月比50个月），差异有统计学意义（P<0.05）。结论血清ULBP2可以作为结直肠癌患者早期诊断和预后评估的指标。

简介：目的：研究RECK（reversion—inducingcysteinerichproteinwithKazalmotifs）和基质金属蛋白酶-2（matrixmetalloproteinase-2，MMP-2）在成釉细胞瘤（ameloblastoma，AB）中的表达及其相关性，探讨两者与成釉细胞瘤临床生物学行为的关系。方法：应用免疫组化EliVisionTMplus法，检测69例成釉细胞瘤（原发AB45例，复发AB24例）、6例成釉细胞癌和16例牙源性角化囊性瘤（keratocysticodontogenictumor，KCOT）中RECK、MMP-2蛋白的表达，采用SPSS13．0软件包对数据进行统计学分析。结果：RECK在KCOT、AB和成釉细胞癌中的阳性表达率依次降低，组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05），且复发AB的RECK表达显著低于原发AB（P〈0．01）。MMP-2在AB和成釉细胞癌中的阳性表达率均显著高于KCOT（P〈0．05），且MMP-2的表达在AB与成釉细胞癌以及原发AB与复发AB间均无显著性差异（P〉0．05）。RECK与MMP-2在AB中的表达呈负相关（r=-0．431，P〈0．001）。结论：RECK与AB的临床生物学行为密切相关，可能通过调控MMP-2参与AB的浸润、复发和恶性转化过程。

简介：摘要目的探讨过表达线粒体融合蛋白2(Mfn2)对阿霉素(Dox)诱导下血管内皮祖细胞(EPCs)衰老及凋亡的影响。方法抽取SD雄性大鼠外周动脉血，分离培养EPCs，进一步分为，正常EPCs组、空载体组、Mfn2过表达组，经0.2 μmol/L和2.0 μmol/L Dox诱导，通过激光共聚焦显微镜观察线粒体分裂情况；通过β-半乳糖苷酶活性检测、原位末端标记法(TUNEL)染色，检测细胞衰老和凋亡情况；蛋白印迹法检测细胞衰老标志蛋白多肿瘤抑制基因1(p16INK4A)的表达；实时荧光定量聚合酶链反应检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及血管性血友病因子(vWF)的表达。多组间均数比较采用单因素方差分析。结果在0.2 μmol/L和2.0 μmol/L Dox处理下，Mfn2过表达组[(5.83±1.71)%、(6.72±0.57)%]线粒体分裂的细胞比例低于正常EPCs组[(19.16±0.82)%、(68.56±5.31)%]和空载体组[(17.53±2.86)%、(66.54±2.86)%，F＝40.403、302.725，P<0.05]，差异均有统计学意义；在0.2 μmol/L Dox处理下，Mfn2过表达组[(15.0±0.33)%]β-半乳糖苷酶活性升高的细胞比例低于正常EPCs组[(35.0±0.61)%]和空载体组[(36.0±1.23)%，F＝637.291，P<0.05]，差异均有统计学意义；在2 μmol/L Dox处理下，Mfn2过表达组[(11.90±0.50)%]TUNEL+细胞的比例低于正常EPCs组[(34.50±0.80)%]和空载体组[(35.20±1.60)%，F＝458.327，P<0.05]，差异均有统计学意义；在0.2 μmol/L Dox处理条件下，Mfn2过表达组eNOS mRNA(0.65±0.02)和vWF mRNA(0.65±0.01)的相对表达高于正常EPCs组(0.43±0.03、0.50±0.02)以及空载体组(0.34±0.02、0.48±0.02，F＝134.643、71.646，P<0.05)，差异均有统计学意义；在2.0 μmol/L Dox处理条件下，Mfn2过表达组eNOS mRNA(0.71±0.02)和vWF mRNA(0.66±0.03)的表达高于正常EPCs组(0.33±0.02、0.28±0.02)以及空载体组(0.38±0.03、0.35±0.01，F＝225.712、262.934，P<0.05)，差异均有统计学意义。结论过表达Mfn2可以抑制线粒体分裂，拮抗Dox诱导下EPCs的衰老及凋亡，恢复EPCs的功能。

简介：目的观察β淀粉样蛋白25—35片断（Aβ25-35）对海马神经元的损伤，及神经元上烟碱型乙酰胆碱受体胆亚单位（β2-nAchR）表达的变化。方法实验组用不同浓度（1、5、10、20βmol／L）的Aβ25-35诱导原代培养的海马神经元损伤，用倒置显微镜及四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法观察各组的神经元形态及存活的变化；用免疫荧光法观察神经元上标记的β2-nAchR的表达的变化，并用激光扫描共聚焦显微镜行半定量。结果各实验组的神经元形态上有不同程度地受损表现；各实验组的吸光度（A）值较不加Aβ25-35的对照组减小，神经元上标记的β2-nAChR的平均相对荧光强度较对照组减小。结论Aβ25-35可引起海马神经元损伤，并减少海马神经元上β2-nAChR表达量，Aβ25-35浓度越高，β2-nAchR表达量越低。

简介：

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简介：摘要目的观察含有Jumonji结构域的蛋白质2D(JMJD2D)在胃癌组织的表达并探讨其临床意义。方法收集2013年1月至2014年12月期间来自中国科学院大学附属肿瘤医院(浙江省肿瘤医院)手术治疗并经病理诊断证实的133例胃腺癌标本。采用免疫组织化学法检测133例胃癌组织及其配对的癌旁正常组织中JMJD2D的表达，应用SPSS-22统计软件分析其临床意义及与预后的关系，采用比例风险回归模型(proportional hazards model，Cox模型)多因素回归分析JMJD2D蛋白表达及其他病理参数对胃癌患者预后的预测价值。结果胃癌组织中JMJD2D的高表达率为75.9%(101/133)，显著高于癌旁正常胃组织(高表达率2.3%，3/133，χ2＝64.821，P<0.01)，差异有统计学意义。肿瘤组织中JMJD2D高表达与患者幽门螺杆菌感染状态(χ2＝22.163，P<0.01)、肿瘤分化程度(χ2＝7.022，P<0.05)、浸润深度(χ2＝5.061，P<0.05)、淋巴结转移状态(χ2＝14.123，P<0.01)、临床TNM分期(χ2＝23.194，P<0.01)显著相关，而与患者性别、肿瘤诊断时年龄、肿瘤部位和大小无相关(χ2＝0.072、1.451、2.562、1.383，P值均>0.05)。普兰-迈耶(Kaplan-Meier)生存分析显示，JMJD2D高表达的胃癌患者与正常/低表达患者中位生存时间分别为34个月和65个月，两者差异有统计学意义(P<0.05)。比例风险回归模型(proportional hazards model，Cox模型)多因素回归分析表明JMJD2D高表达是胃癌患者独立预后因素[危险比(HR)＝2.38，P<0.01]。结论JMJD2D在胃癌组织中高表达，且与胃癌进展及患者预后显著相关。

简介：干细胞因子(SCF)是一种与造血细胞、生殖细胞和色素细胞生长发育相关的细胞因子。本研究利用pEX31B载体,在大肠杆菌中成功地表达出重组人SCF融合蛋白。该融合蛋白以包涵体形式存在,约占菌体蛋白的20％,经制备电泳纯化,纯度达90％以上,为制备人SCF单克隆抗体奠定了基础。