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  • 简介:目的:探讨脑胶质瘤患者O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因MGMT错配修复基因hMLH1、hMSH2启动子CpG岛甲基化状态,及其烷化剂化疗中的意义。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测39例脑胶质瘤6例正常脑组织MGMT、hMLH1hMSH2基因启动子区的甲基化状态,免疫化方法测定蛋白表达。结果:脑胶质瘤患者组织MGMT、hMLH1hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2%、10.3%20.5%,3种基因启动子未甲基化模式与其对应蛋白表达模式相似,并与患者性别、年龄、病理类型病理分级无明显相关性。回顾性分析患者资料,显示39例脑胶质瘤患者中,MGMT基因甲基化的患者生存期显著高于MGMT基因未甲基化患者(P〈0.05,Log-rank检验)。结论:MGMT及错配修复基因甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件,可能与肿瘤的发生有关;检测MGMT、hMLH1hMSH2基因启动子甲基化状态,判断脑胶质瘤患者预后预测烷化剂化疗耐药性中可能具有重要意义。

  • 标签: 脑胶质瘤 启动子CPG岛甲基化 O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因 错配修复基因
  • 简介:目的:了解医学院学生性健康知识认知.方法:随机选取我校的男女大学生各100名,通过问卷调查方法,对调查结果统计分析.结果:医学生知晓性健康知识的途径不同,最常是通过网络查询.男女生性健康知识的了解具有程度具有一定的差异,他们性健康知识储备不完善.结论:加强医学生性健康教育,完善获取健康性知识的途径,不同性别的人群采取针对性的教育.

  • 标签: 大学生 性健康知识 认知
  • 简介:利用DNA重组细胞体内同源重组技术,分别获得了P7.5启动子P11启动子单独带动的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的重组痘苗病毒同一个重组痘苗病毒中含有P7.5P11启动子分别带动一个HBsAg基因(正反两个插入方向)的四种重组痘苗病毒,比较了它们HBsAg表达的影响。含P7.5启动子的比含P11启动子的重组痘苗病毒表达的HBsAg水平更高些;同一个重组痘苗病毒中P7.5P11两个启动子分别带动HBsAg基因时,两个启动子同向转录表达的HBsAg水平较低,而两个启动子又向转录时表达的HBsAg水平较高,但均没有单一P7.5启动子带动的HBsAg基因的表达水平高。

  • 标签: 乙型肝炎病毒表面抗原 重组痘苗病毒 启动子
  • 简介:多子瓜虫是引起淡水鱼类瓜虫病的病原,预防控制是目前国内外较难解决的问题之一。我们系统综述了抗瓜虫中草药的特性、作用机制、国内外应用处方及效果,未来中草药抗瓜虫病研究方向提出展望。

  • 标签: 小瓜虫病 淡水鱼 中草药 研究进展
  • 简介:多发性硬化症(MS)是一种慢性中枢神经系统疾病,目前临床上难以治愈.β-干扰素(IFN-β)是一种多功能细胞因子,具有抗病毒、抑制生长、诱导凋亡免疫调节等作用.近年来IFN-β缓解MS急性发作和延缓病程方面表现出很好的效果,但IFN-βMS的作用机制却仍不明了.本文简要综述近年来有关IFN-β治疗MS的作用机理.

  • 标签: Β-干扰素 多发性硬化症 免疫治疗 细胞凋亡
  • 简介:组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是人体内重要的丝氨酸蛋白酶,它能特异地激活血栓中的纤溶酶原,使之成为具有溶解纤维蛋白能力的纤溶酶,临床上将提纯的t-PA作为心血管栓塞性疾病急救康复治疗的首选药物。由于t-PA天然材料中含量甚微,难以大量制备,基因工程产品产量有限,临床应用货源紧缺且价格昂贵。为探索心血管疾病的基因治疗

  • 标签: 酶原激活剂 组织型 心血管疾病 基因治疗 小鼠 启动子
  • 简介:以绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因,通过对比小鼠白蛋白启动子不同来源细胞系中启动_GFP基因的转录活性,小鼠白蛋白启动子的组织特异性进行了研究.结果发现,小鼠白蛋白启动子小鼠肝癌细胞系Hepa1-6人肝癌细胞系HepG2均有很强的转录起始功能,荧光显微镜下可以观察到GFP表达.Hepa1-6细胞转染早期的48h内,CMV的启动子增强子序列是小鼠白蛋白启动子转录活性的4倍.G418加压筛选2周,CMV的启动子的转录活性下降到只有小鼠白蛋白启动子活性的1/2.转染入肝癌细胞系HepG22周,荧光显微镜下可以观察到GFP表达.其他的细胞如中华仓鼠卵巢细胞系CHO人肺癌细胞系PLA801中转染的小鼠白蛋白启动子不能启动GFP的表达,而对照CMV启动子控制下的GFP基因可在CHOPLA801中表达.以上结果说明,小鼠白蛋白启动子仅在肝脏来源的细胞中可以起始下游基因的转录,在其他组织来源的细胞中不能起始转录,这表明小鼠白蛋白启动子具有肝脏组织特异的转录活性,但没有种属特异性.

  • 标签: 小鼠 白蛋白 启动子 组织特异性 功能 绿色荧光蛋白
  • 简介:由于国际上对转基因产品的安全性存在较大争议,因此没有加施标签予以声明的情况下大量进入中国市场的转基因产品进行检测就显得十分迫切且意义重大.本研究以进口转基因抗草甘膦油菜籽大豆为材料,通过比较分析外源的CP4-EPSPS基因的核苷酸序列表达的氨基酸序列,设计出两不同的引物,采用PCR方法分别对转基因油菜籽大豆中外源的CP4-EPSPS基因进行了检测.

  • 标签: 抗草甘膦油菜籽 抗草甘膦大豆 CP4-EPSPS PCR CP4-EPSPS基因 检测
  • 简介:分子生物学理论技术的发展应用已渗透到生命科学的各各领域,动物营养学的发展需要在分子水平上分析及解释营养素动物机体的生理、病理变化调控,如生长发育、新陈代谢、遗传变异、免疫疾病等.本文综述了分子生物学动物营养学中的应用:利用分子生物学技术改造或生产动物性营养物质;从基因水平上研究如何提高动物生产性能及肉用性能:如肉质瘦肉率等;分子水平上研究营养基因表达、调控的关系,以从根本上阐明营养机体的作用机制;利用基因工程技术开发饲料资源.

  • 标签: 分子生物学技术 动物营养 基因表达调控 应用 发展前景
  • 简介:目的:本实验室通过转座突变技术获得了一株高产表面活性物质的芽孢杆菌dhs-330-021,研究其链状亚历山大藻的抑制效果,及其溶藻作用方式。方法:链状亚历山大藻的培养液中添加dhs-330-021的发酵液等,间隔一定时间计数获得藻细胞的数量。结果:菌株dhs-330—021培养后期的发酵液溶藻效果好于培养前期中期;一定浓度范围内,dhs-330-021的发酵液不同生长期的链状亚历山大藻均有溶藻效果,其中延滞期稳定期效果最好;菌株的发酵液无菌上清液的溶藻效果明显,而菌悬液溶藻效果较差。结论:菌株dhs-330-021能显著抑制链状亚历山大藻的生长,溶藻方式属于间接溶藻。

  • 标签: 链状亚历山大藻 芽孢杆菌 溶藻机理 表面活性剂
  • 简介:人之初,性本善。每个人最初都拥有爱心,只是成长的过程中,生活的环境受到的教育不同,人的品行也发生了变化。幼儿时期尤其是孩子个性、品质形成的重要时期,关键是成人怎样正确引导培养。本人通过日常生活中利用各种教育契机有目的、有计划地幼儿进行'爱'的行为教育,坚持幼儿之间树立爱的榜样,利用节日孩子开展爱的教育,充分利用文学艺术作品,幼儿实施爱的熏陶,通过家园共同合作教育,形成爱的教育合力等等,使幼儿学会在享受爱的同时,也懂得将爱付出,最终让孩子成为富有爱心、乐于助人的人。

  • 标签: 幼儿感受 爱心教育
  • 简介:目的:探讨创伤骨科中应用人工关节治疗技术的效果。方法:选取2012年12月-2014年5月收治于本院的45例老年股骨颈骨折患者作为研究对象,收集患者的临床资料进行回顾性分析,32例应用人工股骨头置换进行治疗,13例予以全髋关节置换进行治疗,患者情况采用Harris髋关节评分标准进行评估,观察总结治疗方法疗效。结果:经治疗,45例患者全部安全度过围期,1例出现轻度尿路感染,无假体松动脱位发生,Harris髋关节评分为(88.67±4.85)分,优良率为95.6%。结论:创伤骨科中应用人工关节治疗技术治疗股骨颈骨折疗效显著,具有较高的安全性,可在临床上进行推广应用。

  • 标签: 创伤骨科 人工关节治疗技术 效果
  • 简介:目的研究心肺复苏急诊救治的临床疗效.方法选取2012年3月至9月期本院或者院前进行心肺复苏急诊救治的66例患者作为研究对象,分析患者的临床资料.结果本次研究的66名患者中,复苏救治成功的有44例,成功率为66.67%,另外死亡22例,死亡率为33.33%.结论急诊救治中采取心肺复苏能够提高抢救成功率,同时还能够有效的减少患者的并发症以及降低死亡率.

  • 标签: 心肺复苏 急诊救治 临床疗效
  • 简介:目的:中老年冠心病(CHD)患者阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)的发病相关因素分析.方法:将我院2012年4月至2015年5月收治的50例CHD患者作为对照,并同期选取我院收治的50例CHD合并OSAS患者作为观察,患者的临床指标情况进行观察分析.结果:观察患者的胆固醇、三酰甘油及空腹血糖值明显高于对照,并且SPO2水平明显低于对照,两数据差异显著,P值小于0.05.结论:老年冠心病合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征的发病率较高,临床接诊冠心病患者时应注意观察患者的SPO2、胆固醇、三酰甘油、空腹血糖等临床指标,出现异常时,应尽早干预,降低OSAS的发生率.

  • 标签: 中老年冠心病 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征 发病相关因素
  • 简介:目的:合成新型蛋白转导域PTD4,研究其细胞内穿膜效应及组织分布。方法:设计采用固相合成法合成新型蛋白转导域PTD4,用FAM(羧基荧光素)进行标记,采用高效液相色谱仪(HPLC)质谱仪测定纯度相对分子质量;采用荧光倒置显微镜激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内的穿膜情况;采用裸鼠活体成像观察穿膜肽体内的组织分布及代谢特性,切片观察各组织器官的分布情况。结果:合成了新型蛋白转导域PTD4,纯度为95.76%,相对分子质量为1776.5;PTD4体外的穿膜效应有时间浓度依赖性,约24h代谢完毕,且共聚焦显微镜细胞扫证实穿膜肽进入胞内;尾静脉注射的PTD4裸鼠体内可迅速分布于各组织器官,但组织分布不均一,且有时间浓度依赖性,6h荧光强度下降了大半,且腹腔注射方法不如尾静脉注射的穿膜效率高。结论:采用Fmoc固相肽合成法可成功合成蛋白转导域PTD4;PTD4能高效穿透细胞膜,穿膜效应呈时间浓度依赖性;PTD4体内能迅速分布于各组织细胞。

  • 标签: 蛋白转导 细胞穿膜肽 组织分布 固相合成
  • 简介:研究t-PA过程中,区分t-PA与其它纤溶药物的较特异方法是采用抗体中和抑制试验。本文用200μgt-PA经背部皮下多点免疫家兔,待产生的抗体效价经ELISA测定达1∶1000,经兔动脉放血收集抗血清。该血清有DE-32直接过滤法纯化,检定纯度及特异性,用于中和抑制试验检定t-PA的基因工程产品。结果表明本组构建表达的野生型t-PA突变体t-PA的活性均能被兔抗t-PA抗体抑制,为特异产品。

  • 标签: 组织型纤溶酶原激活剂 抗血清 中和抑制实验
  • 简介:目的:利用慢病毒载体建立稳定表达猪载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F(pAPOBEC3F,简称pA3F)的PK15细胞系。方法:以实验室前期构建的pBPLV-flag-pA3F质粒为模板,PCR扩增pA3F基因,克隆到pLenti-Puro-3Flag载体构建成pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒,Western印迹鉴定HEK293T细胞中的表达;将pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒包装载体共转染HEK293T细胞,包装成Lenti-pA3F慢病毒测定病毒滴度;将Lenti-pA3F慢病毒感染PK15细胞,通过嘌呤霉素压力筛选结合有限稀释法,筛选稳定表达pA3F的细胞单克隆株,最终Western印迹检测细胞单克隆株中pA3F的表达。结果:菌落PCR序列测定表明pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒构建正确,Western印迹显示该质粒可在HEK293T细胞中表达pA3F蛋白;包装了Lenti-pA3F慢病毒,滴度为1.32×10^8TU/mL,慢病毒感染PK15细胞可检测到pA3F蛋白的表达;经Western印迹鉴定,筛选得到的单克隆细胞可稳定表达pA3F蛋白。结论:建立了稳定表达pA3F的PK15细胞单克隆株,为进一步深入研究猪内源性反转录病毒pA3F作用下的免疫逃逸机制奠定了基础。

  • 标签: 猪载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F 慢病毒载体 猪内源性反转录病毒
  • 简介:利用植物木质纤维资源发酵产乙醇越来越受到人们的重视,但是要达到工业生产仍然存在很多难题。最近在利用植物基因工程技术改善植物自身性状,以利于能源植物的研究方面取得了一定的进展,这些研究包括减少植物自身细胞壁中的木质素含量、细胞中积累表达纤维素酶木聚耱酶等的方法,使产生的生物质更利于降解利用

  • 标签: 生物质 木质纤维素 植物
  • 简介:目的:通过大肠杆菌中分段表达禽流感病毒聚合酶酸性蛋白(PA蛋白),探索PA基因中可能影响表达的区域。方法:构建分段缺失的PA蛋白突变体,用IPTG大肠杆菌RosettaGamiB(DE3)中诱导表达,比较各突变体的表达效率。结果:N端缺失长度143~408个氨基酸残基之间的9个突变体大肠杆菌中的表达水平较高;而突变体PA/K(Δ1-40aa)、PA/M(Δ1-56aa)、PA/N(Δ41-56aa)PA/P(Δ57-75aa)的表达水平很低;全长PA蛋白缺失N端20个氨基酸残基的突变体PA/L则检测不到表达。结论:PA基因的61~225bp325~426bp可能是影响PA蛋白表达的2个重要区域,为下一步表达全长PA蛋白奠定了基础。

  • 标签: 禽流感病毒 聚合酶酸性蛋白 表达 大肠杆菌
  • 简介:利用7个微卫星标记4个绒山羊品种共计18个个体的遗传多样性进行了分析研究.计算了有效等位基因数、遗传杂合度、遗传距离等,分析了群体相关的遗传变异.结果表明,辽宁多绒山羊的有效等位基因数最大,杂合度最高;而辽宁绒山羊的有效等位基因数最小,杂合度最低.奈氏遗传距离表明,库布齐杂种绒山羊辽宁多绒山羊的亲缘关系最近,而阿尔巴斯绒山羊的亲缘关系最远.

  • 标签: 微卫星KNA标记 绒山羊 群体遗传 遗传多样性