简介：目前,在供体器官短缺的情况下,大家公认猪是最合适的异种器官和组织的提供者,用猪肝细胞治疗急性肝衰病人已有报道.如何将肝细胞最大限度完整地、无损伤地分离出来,这是非常关键和重要的一步.我室在进行猪肝细胞的分离中,逐渐探索出一套比较行之有效的方法.材料与方法:采用中国实验用小型猪,常规麻醉、消毒、开腹,用D-Hank′s液进行肝脏原位灌注,再用0.02%EDTA-Hank′s液(37℃)灌注18～20min,摘取肝脏行多点灌注5min,置肝脏于60目钢网上,用直剪迅速剪开肝脏被膜,用镊子夹起轻轻抖动,并用1640液冲洗,边抖动边冲洗,使细胞滤出漏于烧杯中.与此同时,用剪刀把肝组织剪成小块,再用玻璃注射器芯轻轻研磨,边研磨边冲洗,操作要轻,并保持无菌,收集肝细胞,离心洗涤三次,并逐级用80目、100目、120目、150目钢网过滤.分离出的肝细胞进行计数、台盼蓝拒染试验检查、PAS染色、葡萄糖-6-磷酸酶染色及电镜检查.结果:肝细胞存活率90±1.3%,PAS染色显示肝糖元丰富,葡萄糖-6-磷酸酶染色显示酶的活性良好.电镜观察,肝细胞的线粒体、内质网等亚显微结构未见异常.对于猪肝细胞的分离,国外文献报道多采用Ⅳ型胶原酶循环灌注法,但费用很昂贵.在实践中,我们用EDTA代替胶原酶,采用肝脏原位灌注+多点灌注+机械研磨的方法,取得了较为满意的效果.此法与胶原酶灌注法比较,从分离的肝细胞数量、活力、肝糖元及细胞中一些酶的活性都与胶原酶法无显著差异,且光镜及电镜观察,显示细胞形态及亚细胞结构未见异常.我们认为此方法易于控制,价格低廉;而胶原酶法容易消化过度,造成细胞膜破损,或消化不完全造成多个细胞连在一起,且费用昂贵.实验证明,改良的猪肝细胞分离方法为用猪肝细胞治疗急性肝衰病人的研究提供了一个可行的方法.

简介：树突状细胞(DC)是一类专职性抗原呈递细胞,不仅启动免疫反应和诱导免疫耐受,还在调节免疫反应与免疫耐受的平衡中起决定性作用.肝脏因其固有的移植耐受性而在免疫耐受研究中深受关注,肝移植物容易存活,伴有肝移植的其他器官(如心脏、肾脏等)移植存活时间也较其单独移植明显延长.最近有人提出,在肝移植耐受中DC可能起关键作用,但因其难于分离培养,国外仅美国Pittshburgh大学在做相关研究,国内尚未见报道.材料与方法:1.肝非实质细胞的分离:取6～8w小鼠,麻醉后无菌开腹,门静脉插管,用前灌液(PBS+肝素500μ/100ml)灌流2～3min,改用注射器缓慢推注2mlⅣ胶原酶(GIBCOL公司,0.05%);取材后剪碎,15mlⅣ胶原酶液(0.05%)体外消化30min.尼龙网过滤,PBS液清洗(400g×5min离心)两次,稀释成4～5ml细胞悬液.下铺细胞分离液Percoll(Pharmacia公司)制成的不连续密度梯度液,500g×30min离心后,细胞分三层,先吸弃最上层细胞碎片,再吸取两液体界面的肝非实质细胞,避免吸到最底层的血细胞,RPMI1640液(GIBCOL公司)清洗两次,400g×5min离心,即可得肝非实质细胞.2.肝树突状细胞(HDC)的培养:将肝非实质细胞用含灭活的10%胎牛血清(GIBCOL公司)的RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2.5×106/ml,接种于24孔培养板,每孔1ml,加GM-CSF(GIBCOL公司)10ng/ml.培养第三天轻轻吸去未贴壁细胞,换液.后隔天半量换液,培养第7～8d可收取HDC.结果与讨论每只小鼠可得肝非实质细胞约1.0～1.5×107个,细胞大小不一,类型较多.培养24～48hr后,有大量细胞贴壁生长,少量HDC前体细胞半贴壁状散在分布,经筛选、扩增,第4d时HDC数量增多,出现6～8个细胞组成的小集落.第7～8d,HDC数量增多,此阶段细胞有一明显的增殖高峰,有大量半贴壁半悬浮的集落,集落表面的细胞有小的突起.第7～8d,每只小鼠HDC得率约为2～3×106个.因HDC难于分离培�

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简介：小鼠脾保留、脾切除抗疟原虫感染的免疫作用及形态改变的实验研究候会池，陈维佩第三军医大学重庆６３００３８本实验对脾脏抗疟原虫感染中的作用以及不同手术方式脾保留后的脾脏功能及结构改变进行了研究。３６６只昆明株小鼠随机分为６组：脾切除组（ｎ＝７２），半脾切...

简介：目的探讨基于CDIO教学模型的构建在肿瘤专科护士临床实践培训中的应用价值。方法选取2015年3月至2018年3月我院肿瘤专科的106例护士作为研究对象,按采用的不同教学方法将其分为对照组和观察组(各53例)。对照组采用传统教学法进行临床实践培训,观察组患者采用CDIO教学模式进行临床实践的培训,培训结束后比较两组护士间的培训效果。结果(1)对照组护士理论与操作成绩培训前后无明显差异,但临床实践综合能力在培训后有明显提高,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组护士培训后理论、操作、综合能力较培训前均有明显提高,且高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)培训后观察组护士对教学模式的总满意度(100.00%),明显高于对照组总满意度(84.90%)(P<0.05)。结论CDIO教学模式与传统教学模式比较,更有利于提高肿瘤专科护士的临床理论知识、操作能力、临床实践综合能力,值得临床上推广使用。

简介：四种变异畸形的个例报导付乙，袁琼加成都体育学院一、梨状肌缺如：中年男尸。局解中发现右侧梨状肌缺如，仅有臀中肌在梨状肌的位置。坐骨Ｎ穿臀中肌后部中份纤维出骨盆。臀上Ａ．Ｖ．Ｎ点距骶后正中线６．９ｃｍ，距髂嵴上缘垂直线５．８ｃｍ。坐骨结节内侧缘距大转子外...

简介：骨科医疗教学工作大量涉及局部解剖学知识,由于骨科疾病种类繁多,治疗方法和手术分类复杂,要求骨科医师必须具备丰富扎实的解剖学基础知识,并能将理论知识与临床医疗教学密切结合.在实际工作中,本人深刻认识到局部解剖学知识对骨科医师的重要性,逐步积累一些体会,介绍如下:

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简介：2004年12月，在天津武警医学院陈金源教授的指导下，以解剖教研室全体教师为主体，在三年制专科学生中选拔10名同学，成立解剖科研小组。至今，共进行了两项课题的研究，发表（含稿件已接收同意发表）国家级核心杂志论文10篇。全体教师的专业素质和科研能力有了很大的提高，增强了信心和凝聚力；同时也调动了学生的积极性和主动性，提高了动手动脑实践创新的能力。

简介：成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor,FGF)在体外能促进多种中枢及外周神经元的存活及突起生长,体内也能促进神经元的修复与再生.FGF是1974年Gospadarowicz[1]从牛脑的垂体中分离纯化出的一种多肽分子.根据等电点的不同,FGF分为酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)两类.本文就aFGF与bFGF因子在脊髓中的分布情况与不同作用、急性脊髓损伤后aFGF、bFGF的不同表达以外对急性脊髓损伤体外应用FGF的实验性治疗方面加以综述.

简介：人体断层解剖学是用断层方法研究人体形态结构及其相关功能的科学,其主要特点是在保持人体器官于原位状态下,准确地显示各结构的形态、位置及毗邻关系.掌握人体断层解剖学的结构特征,为医学影像专业的学生学好其它影像学奠定坚实的形态学基础.但是对于初学人体断层解剖学的学生来讲,学习人体断层解剖学的思维方式与学习系统解剖学、局部解剖学的思维方式存在很大的差异.因此,学习断层解剖学有一定的难度,为了帮助学生更快更好的掌握这门学科,笔者从以下几方面进行了探索,在教学实践中收到了较好的效果.1要学好断层解剖学,必须以坚实的局部解剖学知识为基础

简介：随着我国教育改革不断深入，教学质量的评价作为未来中国教育运行机制中的一个重要环节已被越来越多的教育工作者所重视，开展和加强教学质量的评价工作也成为教育工作中一个重要而又迫切的问题。大学教育的形式和环节很多，其中心环节是各学科的课堂教学。因而课堂教育乃是提高学校教育质量的关键，是衡量一个学校或一个教师教学水平高低的重要尺度。

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简介：脱细胞组织和器官作为一种生物材料,已经在组织工程和再生医学中成功应用,各种组织的脱细胞方法也受到关注。组织脱细胞的方法可以分为物理、化学和酶学方法,各组织脱细胞的效率和结果与组织的来源、结构和组成、脱细胞的方法等都有关,不同的方法对不同的组织不仅清除细胞的效果不同,对细胞外基质（ECM）的影响也不同,这反过来又会使宿主对移植的脱细胞材料产生不同的反应。因此,我们要根据组织特点和不同脱细胞方法的特点来选择最优的脱细胞方法,以期达到理想的效果。本文介绍了最常用的一些脱细胞方法,包括物理、化学和酶学方法,并简单描述了它们对组织支架的影响。

简介：人体解剖学课堂提问的探讨王美容海南省卫生职工中等专业学校琼海５７１４００课堂教学过程，从社会心理学的角度可视为师生间的交往过程。美国教育心理学家林格伦认为：“教师作为课堂上相互交往的中心，应主导师生间的双向交往，使教学获得最佳效果。”那么怎样才能获得...

简介：组织学特殊染色技术及免疫组织化学技术已广泛应用于基础医学和临床医学的科研工作中.本快速染色法即用组织学醛品红染色法和免疫组织化学SP法在同一张切片上对胰岛B细胞和A细胞进行了双重染色,取得较好的效果,现作简单介绍.取大鼠胰腺,Bouin液固定,石蜡包埋,切5μm厚切片.双染步骤如下:第一步,胰岛B细胞的醛品红染色:切片脱蜡到水;入0.25%浓硫酸和0.25%高锰酸钾等量混和液中3min;蒸馏水洗后入5%草酸2min;蒸馏水洗;再经70%酒精后入醛品红染液15min;70%酒精分色后,蒸馏水洗.第二步,胰岛A细胞的免疫组化染色:将经醛品红染色后的切片,入3%甲醇双氧水室温孵育15min;蒸馏水洗后枸橼酸缓冲液(0.01M,pH6.0)(电炉加热煮沸92℃～98℃)进行抗原修复10min;PBS浸泡5min后,用正常羊血清室温封闭30min;弃去多余羊血清,滴加一抗(抗胰高血糖素抗体,1∶1500),37℃,孵育2hr;PBS室温洗10min后,滴加生物素标记的二抗,37℃,孵育40min;PBS室温洗10min后,滴加辣根酶标记的链霉卵白素工作液,37℃,孵育40min;PBS室温洗10min,DAB显色.结果及讨论:此染色方法在同一张切片上所观察到的胰岛B细胞呈蓝紫色,而胰岛A细胞呈棕黄色,两者颜色对比清晰.细胞核不着色.本方法可在一个工作日内完成,即提高了工作效率,又减少了免疫组织化学多重染色中步骤多、时间长,易受外界因素影响的限制,进而降低了非特异性染色.因此,该方法在科研工作中具有一定的应用价值.

简介：人体胚胎学是重点医学基础课程之一，主要研究人个体发生、生长及其发育机理的一门学科。胚胎生长、发育的整个过程既有细胞形态结构的演变，也有组织结构位置的改变，是一个连续的动态变化过程。因此，在教学中，如何表达胚胎在发生发育中时间和空间的变化，增强学生对胚胎发生发育时空变化的理解，

简介：微循环是脉管系的一个组成部分,主指微小血管(口径为2～250μm内)的血液循环,血液通过微循环直接向组织细胞提供氧和其它营养物质,并带走二氧化碳和废物.微循环的调节机理与脉管系的其它部分有所不同.微循环可根据组织需要调整局部血流.在教学和科研中,如何做好微循环的标本是很重要的.在肠系膜标本中,我采用了大白鼠、小白鼠、豚鼠、大白兔四种动物的肠系膜作了比较,最后认为采用大白鼠的肠系膜较为理想,操作简单,结构典型,对比清晰,能满足教学和科研的需要.动物选择:大白鼠200g左右,水合氯醛麻醉后打开腹腔,用线接扎胃幽门和直肠将整个消化道取下来,放在24cm的蜡盘中,用大头针将肠道的系膜顺其自然而展开,倒于AF固定液(95%酒精80ml;福尔马林20ml)固定45min,用蒸馏水洗2～3次.用Hansen苏木素染色10min,充分水洗约5min,用0.5%盐酸酒精分色1min,充分水洗15min,入70%酒精5min,入0.5%伊红染5～10min.入80%、95%、100%酒精脱水10～15min.入二甲苯透明10min.用眼科剪将肠系膜剪成2mm的正方形平铺在载玻片上镜检,中性树胶封片.结果:微循环的血管呈树枝样蓝色交错成网,内含丰富桔红色的血细胞.在血管的终末处,可见变形为长条形的血细胞和清晰可见的末端小动静脉间的通路以及毛细血管前括约肌.注意事项:结扎肠道必须防止肠道内容物溢出污染固定液和染液.固定液、染液量要适中,以埋没标本为好.取材一定要新鲜,10min内完成.

简介：脊髓损伤(spinalcordinjurySCI)是一种常见而且严重的临床疾患.据统计发达国家的SCI发病率为28.3～45人/百万人/年,在美国每年有11000人遭此损伤[1];我国发病率虽较低,约6.7人/百万人/年,但每年也有1万余人遭此损伤,且以中青年胸腰段损伤最多.外伤性脊髓损伤修复的研究主要围绕以下两方面进行:一是促进诱导神经纤维生长:如给予多种促进神经生长的神经营养因子或促进神经营养因子的表达、为再生的轴突提供桥梁及管道、提供能支持引导神经生长的雪旺氏细胞及细胞外基质成分;二是消除抑制轴突生长的因素:如减少脊髓断端囊腔和瘢痕组织生成以及一些抑制性生长因子产生等.近20多年,尤其是近10余年来随着基础医学、临床研究和材料、工程学等各学科的发展以及相互渗透,在脊髓损伤的研究方法、损伤机制、损伤严重评定、诊断治疗技术等方面取得了很大的进展.

简介：二十一世纪是一个科技突飞猛进,国际竞争日趋激烈的时代,在知识经济历史进程之际,教育已成为国民经济和社会发展全局性、先导性、基础性的关键领域.培养、吸收和用好人才是增强宗合国力的根本保证.多年来,我国研究生培养已取得了显著成绩,以研究生为主力的高成次人才成为推动科技发展的重要力量.面对国际、国内经济和科技发展的形势和国家科教兴国战略的实施,研究生培养既面临着巨大的机遇,也面临着严峻的挑战.在日趋激烈的国际高层次人才争夺战中,如何提高研究生的教育质量,尽快缩小人力资源和知识差距,以增强国际竞争力,应付激烈的国际经济和科技竞争是我们在今教育改革中需要认真思考的问题.