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  • 简介:目的研究人类疾病模型小鼠可遗传生物学特性,建立品系标准化维持方法.方法选用FVB/TgN、MRL/Mpj和SAMP1/Ka三个疾病模型小鼠品系作为代表性实验对象,通过测定生长曲线、RAPD同工、酶电泳、行为学试验等方法,找出三个品系相对于各自对照品系不同特征,并建立了标准化检测指标作为维持方法依据.结果MRL/Mpj生长曲线相对于对照品系有明显统计学差异;FVB/TgN、MRL/Mpj、SAMP1/Ka等三个品系RAPD图谱在阳性引物及扩增出条带方面均不一致;同工酶电泳结果表明不同品系个体之间表型不完全相同;行为学试验更从多方面直观地显示了各品系不同特征.结论人类疾病模型小鼠除了用常规检测方法外,还应建立各品系在生长曲线、RAPD、同工酶电泳、行为学试验等方面的特殊检测方法,及时检测模型小鼠品系独特性状并作为保种依据,以避免遗传漂变发生.

  • 标签: 疾病模型 标准化 人类 同工酶电泳 生长曲线 RAPD图谱
  • 简介:利用比色法简便、准确和快速地测定发酵生产古尼虫草菌丝中甘露醇含量.结果表明,甘露醇最大特征吸收峰在412nm处,质量浓度在10~50mg/L范围内线性较好,其回归方程ρ=-0.842+97.329A,r=0.9992;平均回收率100.24%,RSD=0.54%(n=5).样品中甘露醇采用水提取法,提取时间2h.甘露醇显色后20min内测定对结果影响不大,在测定时要注意排除果糖对测定结果影响.用此法测得发酵古尼虫草菌丝体中甘露醇含量为7.4%,RSD=0.24%(n=6).

  • 标签: 古尼虫草 古尼拟青霉 虫草酸 D-甘露醇 比色法 含量测定
  • 简介:报告1例面部难辨认癣患者为21岁女性,农民,由于长期外用糖皮质激素软膏而使局部皮损不典型,当地医师怀疑为红斑狼疮建议到我院做全面检查。病损标本真菌镜检发现菌丝,培养分离出须癣毛癣菌。免疫学检查排除红斑狼疮。病理检查在角质层及毛囊周围发现真菌菌丝。内服特比萘芬3周治愈。

  • 标签: 须癣毛癣菌 难辨认癣 面部 红斑狼疮
  • 简介:提高学生综合和创新能力,激励学生求知欲和探索精神是当今教育改革首要课题。我校开设了综合研究型实验课——医学机能实验学,本课程整合了生理学和病理生理学两门课程,将这两门课程实验教学部分从原课程中分离出来,科学有机整合成一门新型独立综合研究型课程。通过此课程教学,发挥学生积极性和能动性,使学生初步具有应用知识和实践能力,培养学生科研和创新能力。

  • 标签: 综合研究型实验课 浙江中医学院 医学机能实验学 课程改革
  • 简介:目的对西双版纳小耳猪群体遗传结构进行RFLP分析。方法采用ECL核酸直接标记和检测系统,以HRP标记ɑ-珠蛋白-3’HVR多基因座小卫星探针,对西双版纳小耳猪HinfⅠ或HaeⅢ酶切片段进行Southern杂交,以化学发光法进行检测,获得了清晰可辨、具有高度多态性DNA指纹图谱。结果2kb以上谱带数在6~15条之间,HinfⅠ酶切产生图带数低于HaeⅢ。JB亚系内805、807家系和JS亚系内111、121、121、151家系不同个体间相似系数分别为0.94±0.09、0.85±0.08、0.84±1.7、0.78±1.6、0.83±0.42、0.87±0.07,显著高于各家系间相似系数,JB亚系内805家系和JS亚系内151家系不同个体间相似系数较大,分别为0.94和0.87。结论西双版纳小耳猪近交程度较高,个体间差异较小,均一性较强。

  • 标签: 家系 珠蛋白 RFLP分析 多基因 HRP 化学发光法
  • 简介:目的克隆和测定剑尾鱼(Xiphophorushelleri)线粒体细胞色素b基因(cytb)全序列。方法提取剑尾鱼肝脏总DNA。设计合成特异引物进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖电泳检测,纯化后克隆到pGEM-Teasyvectorsystem中T载体上,筛选转化子,提取质粒,酶切鉴定。挑取重组质粒pGEM-T-xhcytb11进行序列测定。结果获得了剑尾鱼线粒体cytb基因全序列,共1140bp。结论用BLAST与GenBank中线粒体DNA序列进行比较,显示剑尾鱼与其他鱼类cytb基因具有较高同源性,根据剑尾鱼与其他13种鱼cytb基因序列同源性所建立是进化树,与传统分类地位基本吻合。

  • 标签: 剑尾鱼 线粒体 细胞色素B基因 序列分析
  • 简介:用纯化CTB后腿肌肉注射免疫小鼠,每次12.5μg,每隔14天加强一次,共注射三次,末次免疫后两周收集血清,免疫小鼠诱导产生了特异性抗CTB抗体。在CHO细胞中,免疫小鼠血清能够中和CT细胞病变效应;小鼠肠结扎实验表明,抗CTB血清能够抑制CT结合细胞表面受体GM1神经节苷脂。这表明转基因烟草产CTB在小鼠中能够产生抗细菌毒素保护免疫力。

  • 标签: 霍乱毒素B亚单位 小鼠 疫苗 免疫
  • 简介:竞争性寡聚脱氧核糖核酸识别转录因子DNA结合域,抑制了转录因子对基因转录调控,转录因子E2F作为潜在治疗靶点,可以用于抑制肾小球系膜细胞和血管内皮细胞增生,在部分异常增生疾病中显示了一定应用前景.

  • 标签: E2F 治疗靶点 细胞周期 DNA结合域 异常增生疾病
  • 简介:孢子丝菌病由申克孢子丝菌感染而引起,由于一些医师缺乏对该疾病临床表现认识及实验室检查手段欠缺,易造成误诊。为了提高对该病诊断率,减少因误诊给患者带来痛苦,我们选择了2005年在外院误诊病例51例,后经我院真菌实验室和病理室检查纠正原诊断患者情况进行报道。

  • 标签: 孢子丝菌病 申克孢子丝菌 感染病例
  • 简介:白细胞介素4(IL-4)是一种由TH2细胞分泌具有多种生物学活性细胞因子,是机体免疫系统重要成员,在参与机体免疫调节方面有重要作用。据文献报道,IL-4在临床上与过敏性哮喘、皮炎等疾病有关,美国Genzyme公司已研制开发ELISA试剂盒检测IL-4水平,但价格昂贵。本实验制备rhIL-4抗血清以应用于IL-4生物学活性研究及临床检测IL-4水平等方面。

  • 标签: 抗血清 白细胞介素4 IL-4 IL一4 生物学活性 医学科学院
  • 简介:1.医学院校基础课教研室本质上相当于理工科院校系,因此可看作是二级机构。理工科院校以学科设系,而医学院校基课则以学科建立教研室,所不同是前者规模和权力一般较大,人员编制一般较多。2.医学院校实验教学与理论教学是不可分割,大部分实

  • 标签: 医学院校 教研室 实验教学 理工科院校 基础课 学科
  • 简介:利用蛋白质转导结构域(PTDs)可以将与之融合表达蛋白质直接送入细胞中.将通过筛选噬菌体展示锌指文库得到特异作用于SV40启动子上9bp序列三锌指结构序列插入含有TAT蛋白蛋白质转导结构域表达载体pET-TAT-NLS中,构建融合蛋白表达载体pET-TAT-NLS-clone3.融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中得到了可溶性表达,含量约占总蛋白18%;并通过镍亲和凝胶层析柱得到了较好纯化融合蛋白.

  • 标签: TAT 蛋白质转导结构域 SV40启动子 三锌指结构 融合蛋白 可溶性表达
  • 简介:人工合成了芋螺毒素SO3基因片段,通过链延伸方法获得了SO3全长基因.在此基础上,将SO3基因插入到含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体基因pTIG-Trx表达载体中,构建含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体和SO3融合基因重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)和Origmia(DE3)/DsbC并得到了表达,该融合蛋白主要以包涵体形式存在.为进一步研究芋螺毒素SO3跨血脑屏障转运和治疗作用奠定了基础.

  • 标签: 转铁蛋白受体 单链抗体 芋螺毒素SO3 血脑屏障 大鼠 融合蛋白
  • 简介:研究了东北地区不同肥力下黑土土壤在玉米一个生育期内真菌数量动态变化以及与6种环境因子关系.结果表明,不同肥力土壤真菌数量全年只有一个高峰值,但高峰出现月份不同;在0~20cm和20~40cm土层内,土壤真菌数量均为正常施肥区高于休闲区.0~20cm土层休闲区和正常施肥区土壤真菌数量与土壤含水量呈正相关,20~40cm土层中休闲区土壤真菌数量与碱解氮呈正相关;正常施肥区土壤真菌数量与pH值呈正相关.土壤pH值和土壤含水量分别是休闲区0~20cm和20~40cm土层生态系统主导因素;速效磷和碱解氮分别是正常施肥区0~20cm和20~40cm土层生态系统主导因素.

  • 标签: 黑土 不同肥力 土壤真菌 通径系数
  • 简介:目的阐明β-葡糖醛酸酶(β-)在正常恒河猴组织中分布。方法对实验恒河猴主要组织冰冻切片采用后偶合技术进行了染色和显微观察。结果肾上腺皮质柬状带和网状带细胞,肝脏、睾丸、卵巢、胃肠道实质细胞、枯否细胞、软骨细胞、卵巢间质腺细胞等富含β-G而深染蓝色。肾上腺皮质球状带细胞、血细胞、脑、肌肉、胆囊和胰腺实质细胞等酶含量少而染色较弱。软骨基质,小脑皮质分子层和颗粒层等部位酶呈阴性。结论动物种系和品种不同,器官组织内β-G含量也不相同。

  • 标签: 恒河猴 肾上腺皮质 细胞 葡糖醛酸 骨基质 冰冻切片
  • 简介:本研究以羔羊卵巢母细胞为材料,把体外受精技术应用到绒山羊育种工作中,观察了羔羊体外受精卵体外发育及移植产羔效果,以便探讨通过体外受精技术缩短绒山羊育种周期技术途径。对406枚羔羊体外受精卵用M199+hcG、M199+LH和M199+hcG+EGF三种培养基进行体外发育培养。结果是,2-4细胞期胚发育率平均分别为40.0%、43.6%和49.6%;桑椹胚和囊胚发育率平均分别为17.5%、15.8%和18.8%。将49枚Fl代羔羊2-8细胞期胚移植给31只受体母羊,结果有11只妊娠(35.5%)并产羔12只(F2代);将24枚F2代羔羊2~4细胞期胚移植给15只受体母羊,结果有2只妊娠(13.3%)并产F3代羔羊2只。

  • 标签: 羔羊 育种周期 绒山羊 体外受精卵 细胞期 母羊
  • 简介:建立了商业化种植NeWLeaf-YTM转基因马铃薯筛选检测和鉴定PCR方法.该方法根据马铃薯自身patatin基因作为内源特异参照基因扩增216bp片段,检查模板DNA提取质量,避免了假阴性结果;同时扩增FMV35S启动子基因225bp片段和PVY-cp基因161bp片段.PCR反应循环参数是94℃2min;94℃40s,55℃60s,72℃60s,35次循环;之后72℃延伸5min.本实验中F-primer(PVY01-5′)/R-primer(PVY01-3′)引物是针对商业化种植NewLeaf-YTM转基因马铃薯PVY-cp抗病毒基因而设计,具有很强特异性,可以达到对NeWLeaf-YTM转基因马铃薯鉴定目的.

  • 标签: NewLeaf-Y^TM 转基因马铃薯 PCR检测鉴定方法
  • 简介:粘膜免疫是机体防御系统主要成分.致病性细菌侵入机体后,首先遭遇到天然免疫抵抗,随后产生获得性免疫,两者共同执行机体防御功能,消灭入侵细菌.最近研究表明上皮细胞对细菌感染有重要免疫调节作用,在天然免疫与获得性免疫防御机制中起重要作用.本文重点介绍肠上皮细胞在天然免疫中作用.

  • 标签: 肠粘膜上皮细胞 天然免疫 作用 粘膜免疫
  • 简介:阿维菌素(avermectin)是由除虫链霉菌(Streptomycesavermitilis)产生一种具有杀虫活性大环内酯类抗生素,在农业和畜牧业中应用广泛.本文综述了有关除虫链霉菌基因组序列分析、阿维菌素生物合成以及阿维菌素育种和代谢工程研究进展.

  • 标签: 除虫链霉菌 阿维菌素 生物合成 代谢工程
  • 简介:目的建立具有潮霉素(hygromycin)抗性3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE-Ins-human)ES阳性细胞克隆筛选饲养层.方法通过脂质体转染方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因质粒pHyg导入3T3细胞中,利用潮霉素药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR鉴定.结果经500μg/ml潮霉素压力筛选后,获得了抗性细胞克隆.抗性3T3细胞形态和生长速度与正常3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应核苷酸片段.结论成功地培育了潮霉素抗性3T3细胞,为进行目的基因(pTRE-Ins-human)转染ES细胞阳性细胞克隆筛选奠定了基础.

  • 标签: 潮霉素 抗性 细胞 饲养层 基因