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  • 简介:锌指蛋白是一类具有手指状结构域的转录因子,对基因调控起重要的作用。根据其保守结构域的不同,可将锌指蛋白主要分为C2H2型、C4型和C6型。锌指通过与靶分子DNA、RNA、DNA-RNA的序列特异性结合,以及与自身或其他锌指蛋白的结合,在转录和翻译水平上调控基因的表达。我们简要综述了近年来锌指蛋白结构、分类及其与核酸及蛋白质相互作用等方面的研究进展。

  • 标签: 锌指蛋白 转录因子 结构 功能
  • 简介:利用蛋白质转导结构域(PTDs)可以将与之融合表达的蛋白质直接送入细胞中.将通过筛选噬菌体展示锌指文库得到的特异作用于SV40启动子上9bp序列的锌指结构的序列插入含有TAT蛋白的蛋白质转导结构域的表达载体pET-TAT-NLS中,构建融合蛋白的表达载体pET-TAT-NLS-clone3.融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中得到了可溶性表达,含量约占总蛋白的18%;并通过镍亲和凝胶层析柱得到了较好的纯化融合蛋白.

  • 标签: TAT 蛋白质转导结构域 SV40启动子 三锌指结构 融合蛋白 可溶性表达
  • 简介:通过遗传工程来使作物增产和抗病虫害的范围,一直受限于缺乏一种高效方法来遵行定向基因修饰。锌指蛋白技术有望填补这一空白。该技术依靠用设计出的锌指核酸酶(人工嵌合蛋白,能够利用细胞DNA修复器的天然识别机制)

  • 标签: 技术 蛋白 应用 成功 遗传工程
  • 简介:摘要锌指蛋白是人类基因组中最大的转录家族,通过促癌或抑癌作用广泛参与消化系统肿瘤的发生发展过程。研究表明多种锌指蛋白的表达异常与胃癌、肝癌、结直肠癌和胰腺癌患者的临床病理特征及预后密切相关。研究锌指蛋白的作用机制有助于为临床治疗消化系统肿瘤提供新的靶点。

  • 标签: 胃肿瘤 癌,肝细胞 结直肠肿瘤 胰腺肿瘤 锌指蛋白
  • 简介:目的我们前期的实验结果显示A20mRNA和蛋白在人脑胶质瘤组织及细胞系(U251、U87、BT325)中高表达,本研究拟构建A20RNAi载体,并检测其对U251细胞A20表达的抑制作用。方法构建种针对人A20基因的真核干涉表达载体,以脂质体法将其分别转染人脑胶质瘤细胞系U251,以RT-PCR、蛋白印迹法检测各干涉载体对U251细胞中A20mRNA和蛋白表达的抑制作用。结果成功构建种针对A20基因的RNAi载体,经RT-PCR、蛋白印迹检测筛选出对A20基因干涉效果最佳的载体,命名为pSilencer3.1-A20R1。结论成功构建A20基因干涉载体,为进一步探讨A20与脑胶质瘤恶性增殖、血管形成以及抗凋亡的关系奠定实验基础。

  • 标签: A20 脑胶质瘤 RNA干涉
  • 简介:摘要:目的 探究细菌感染机体后血清锌指蛋白A20的表达效果,探讨A20在细菌复制中所发挥的作用机制。方法:选取我院248例血培养瓶细菌检测阳性的病例血清样本作为研究对象,选取80例健康体检样本作为阴性对照组,采用ELISA方法检测所有样本血清锌指蛋白A20浓度。结果:(a)细菌感染组血清锌指蛋白A20水平显著高于阴性对照组血清锌指蛋白A20水平(P<0.01);(b)革兰阴性菌感染组、革兰阳性菌感染组血清锌指蛋白A20明显高于阴性对照组(P<0.01);(c)大肠埃希菌感染组与阴性对照组间血清锌指蛋白A20差异具有统计学意义(P<0.01);(d)金黄色葡萄球菌感染组、凝固酶阴性葡萄球菌感染组与阴性对照组间血清锌指蛋白A20差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:细菌感染时血清锌指蛋白A20表达上调,在细菌感染和复制中发挥重要作用。

  • 标签: 锌指蛋白A20 细菌感染 NF-κB 炎症反应
  • 简介:摘要目的探讨锌指蛋白Rnf44上Ring-锌指结构突变297Gln>Arg与小鼠行为能力的关系。方法在小鼠Rnf44基因中Ring-锌指结构编码区寻找突变;在21种品系共398只小鼠中采用旷场实验、高架十字迷宫实验检测小鼠活性、焦虑状态、探索功能及运动功能等行为能力;并分析该基因突变与小鼠行为能力间的关联。结果在小鼠Rnf44基因中Ring-锌指结构编码区寻找到突变297gln>Arg,携带297Arg突变的小鼠活性及运动功能下降(旷场实验及高架十字迷宫实验的1-5min运动距离减少),而更易产生焦虑状态(高架十字迷宫试验的粪便颗粒数增加)(以上P值均<0.05)。但297Arg突变不影响小鼠探索功能(停留在高架十字迷宫中央区时间无改变,P>0.05)。结论Rnf44蛋白上关键活性基团Ring-锌指结构的突变297Gln>Arg与小鼠活性、焦虑状态及运动功能等行为能力改变有关,与小鼠探索功能无关。

  • 标签: 锌指蛋白Rnf44 Ring-锌指结构 基因突变 行为能力
  • 简介:<正>《围城》的结构特点是什么,它具有怎样的审美功能?这一问题到目前尚无文章作专门论述.本文拟就此方面作些探讨.文章要点:一、社会历史时空与人物心理时空的矛盾组合,时空关系的隐显处理及分体时空的构造,是《围城》在时空艺术方面的新探索,也是其结构特征之一;二、淡化情节,将情节作为时空转换的机制,并形成四个链环,是作品的情节结构特点;、《围城》结构就自身(内容与形式的结合)而言是独创的、完整的,但站在审美的立场上,其又是“曲高”而“和寡”的.现分述如下.

  • 标签: 《围城》 审美功能 历史时空 心理时空 时空转换 时空艺术
  • 简介:长诗结构式──谈唐代首著名长诗的结构赵仁珪凡喜爱读诗、写诗的人都知道,长诗最忌平冗散缓,一旦如此,读者便会越读越扫兴,始则想跳过几行,终则不能卒篇。诗写成这样,算是彻底失败了。究其原因,不外有二。一是内容太平庸,只好小题大作,拉长篇幅,这里姑且不...

  • 标签: 《长恨歌》 《秦妇吟》 长诗 中国古典诗歌 《咏怀》 贾宝玉
  • 简介:摘要目的检测锌指蛋白18(ZNF18)在胰腺导管腺癌(PDAC)组织的表达情况,分析其与PDAC临床病理特征和患者预后的关系。方法收集2017年3月至2019年12月间海军军医大学第一附属医院手术切除并经病理证实的131例PDAC患者的癌组织标本,采用免疫组织化学染色法检测癌组织ZNF18蛋白的表达,根据ZNF18表达水平将其分为ZNF18高表达组和低表达组,采用Kaplan-Meier法及Log-Rank检验分析比较ZNF18表达水平与PDAC患者总体生存期之间的关系。分析ZNF18蛋白表达水平与患者临床病理特征的相关性,应用单因素和多因素Cox回归模型分析影响PDAC患者预后的因素。结果131例PDAC组织中ZNF18高表达82例(62.60%),低表达49例(37.40%),ZNF18高表达组的总生存期显著长于低表达组[(21.53±0.69)个月比(12.17±1.57)个月],差异有统计学意义(P<0.001)。ZNF18低表达与肿瘤淋巴结转移有关(P<0.05),而与PDAC患者的性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤大小、分化程度、TNM分期、神经侵犯、脉管癌栓无关。单因素分析结果显示,肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移及ZNF18表达水平均与PDAC患者的预后有关;多因素分析结果显示,肿瘤分化程度(HR=0.463,95%CI 0.279~0.769,P=0.003)、淋巴结转移(HR=2.062,95%CI 1.247~3.409,P=0.005)及ZNF18表达水平(HR=0.416,95%CI 0.255~0.676,P<0.001)为影响PDAC患者预后的独立危险因素。结论PDAC组织ZNF18低表达与肿瘤淋巴结转移及预后差密切相关,ZNF18可作为评估PDAC患者预后生存的潜在分子标志物。

  • 标签: 胰腺肿瘤 锌指蛋白 基因表达 预后
  • 简介:摘要目的探讨Snail对Hela细胞侵袭的作用。方法采用Hilymax法进行细胞转染,RT-qPCR法检测mRNA表达,Westernblot检测蛋白表达,Transwell小室检测细胞侵袭。结果与对照组相比,干扰组SnailmRNA表达下降约72.3%(P<0.01);Snail蛋白水平下降约54.2%(P<0.05)。在24h,48h,72h,干扰组较对照组细胞侵袭能力下降,其抑制率约为17.6%(P<0.05),31.5%(P<0.01),36.1%(P<0.05)。结论Snail下调可显著抑制Hela细胞的侵袭能力。

  • 标签: Snail 宫颈癌 侵袭
  • 简介:摘要目的初步探究微小RNA-203(miR-203)调控锌指蛋白281(ZNF281)对黑素瘤细胞增殖、迁移的影响。方法常规培养人血管内皮细胞系ECV304、人黑素瘤细胞系A375、M14、SK-MEL-28、SK-MEL-2,实时荧光定量PCR检测各细胞系中miR-203表达情况,Western免疫印迹法检测各细胞系中ZNF281蛋白水平。A375、M14细胞分别分为5组:对照组(细胞正常培养)、miR-203模拟物对照组(加入miR-203模拟物阴性对照)、miR-203抑制剂对照组(加入miR-203抑制剂阴性对照)、miR-203模拟物组(加入miR-203模拟物)、miR-203抑制剂组(加入miR-203抑制剂)。实时荧光定量PCR检测各组A375、M14细胞中miR-203的表达,CCK8法检测各组A375、M14细胞增殖活性,Transwell实验检测各组A375、M14细胞迁移数量,Western免疫印迹法检测各组A375、M14细胞中ZNF281蛋白的表达。双荧光素酶验证miR-203与ZNF281的靶向关系。多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用SNK-q法。结果与血管内皮细胞系ECV304相比,黑素瘤细胞系A375、M14、SK-MEL-28、SK-MEL-2中miR-203表达水平较低(均P < 0.05),ZNF281蛋白水平较高(均P < 0.05)。与对照组、miR-203模拟物对照组、miR-203抑制剂对照组相比,miR-203模拟物组A375、M14细胞中miR-203水平均显著升高(F = 487.632、68.454,均P < 0.05),细胞迁移数量均显著降低(均P < 0.05),ZNF281蛋白表达均显著降低(均P < 0.05);miR-203抑制剂组A375、M14细胞中miR-203表达均显著降低(均P < 0.05),细胞迁移数量均显著增加(均P < 0.05),A375细胞中ZNF281蛋白表达显著升高(均P < 0.05),36、48、60、72 h A375细胞增殖活性显著升高(均P < 0.05),24、36、48、60、72 h M14细胞增殖活性均显著升高(均P < 0.05)。miR-203与ZNF281之间存在靶位点。结论上调miR-203表达可抑制黑素瘤细胞增殖、迁移,下调miR-203表达可促进黑素瘤细胞增殖、迁移,可能通过调控ZNF281的表达实现。

  • 标签: 黑色素瘤 微RNAs 细胞增殖 细胞迁移分析 锌指蛋白281 微小RNA-203 A375细胞 M14细胞
  • 简介:对于结构造型中的重心要素,上期提到的开合之势是针对魏碑结构“斜画紧结”的特征而言。“斜画”涉及结构中的笔画线条形态,“紧结”涉及结构动势的核心——重心。结构的重心概念源于陈振濂教授新碑学下的碑学课题研究。他说:“就整体结构而言,

  • 标签: 结构造型 书法 摩崖 课题研究 重心 陈振濂
  • 简介:据国外媒体报道.欧洲的研究人员已于上月开始进行一种全新的维激光打印机研发。这不是普通的打印机,它的功能将是用激光把结构“印”在玻璃中。业内人士称,这种设备的出现,将促进工业和娱乐业等的发展,或许有一天,我们可以看到由这种“打印机”制作的维影像。

  • 标签: 三维结构 激光打印机 研究人员 业内人士 三维影像 娱乐业
  • 简介:摘要目的检测早幼粒细胞白血病锌指结构( promyelocytic leukemia zinc finger,PLZF)在哮喘(asthma)患者外周血中的表达水平及临床意义。方法选取上海市第五人民医院2021年5月至2021年10月诊治的稳定期Asthma患者外周血标本为研究对象(n=40),以及健康体检者为对照组(Control组,n=40),采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中细胞因子的含量,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测血浆中PLZF的mRNA表达。分离外周血的单个核淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),并使用流式细胞术检测PBMC中PLZF+细胞的水平和分布。采用SPSS 26.0及Graphpad Prism 7.0软件进行独立样本t检验、Mann-Whitney U检验、χ2检验、ROC曲线及Logistic回归等统计学分析。以P<0.05为差异有统计学意义。结果与Control组相比,在Asthma组中细胞因子干扰素-γ(interferon γ,IFN-γ)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-17表达水平增加,差异有统计学意义(P<0.05),而IL-10两组相比差异无统计学意义。Asthma组PBMC中PLZF的mRNA表达明显增高(P<0.05),PLZF+细胞明显增加(3.40%±2.52%,Control组:1.23%±0.78%,P<0.05),其中以CD8+PLZF+及Vβ11+PLZF+T细胞为主,提示PLZF主要在CD8+、恒定自然杀伤T细胞(invariant natural killer T cell,iNKT)细胞亚群中表达增加。Logistic回归分析及ROC曲线结果显示,PBMC中PLZF+细胞增高显著增加了哮喘发生的风险(OR=3.63>1,AUC=0.87,P<0.05)。结论哮喘患者外周血中PLZF增加,可能在哮喘疾病发展中起到重要作用,结果尚需更大样本实验数据进一步证实。

  • 标签: 转录因子PLZF 哮喘 iNKT PBMC 外周血 ELISA qPCR 流式细胞术
  • 简介:摘要目的观察锌指蛋白A20(A20)在慢性丙型肝炎患者肝脏组织中的表达和定位情况,并探讨其与瞬时肝弹性测定(FibroScan)、血清纤维化指标在肝脏纤维化分期中的关系。方法对150例慢性丙型肝炎患者肝组织中的A20按照肝脏病理纤维化分期,行免疫组化定量检测,并检测FibroScan、血清纤维化指标(透明质酸、Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原),进行统计学分析。结果肝组织A20表达、FibroScan、血清纤维化指标随肝脏病理纤维化加重而增加。肝脏纤维化各期前述指标与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);肝脏A20与FibroScan之间呈正相关,r=0.756(P<0.05)。结论慢性丙型肝炎患者A20、FibroScan、血清纤维化指标与肝脏纤维化程度均呈正相关,A20与细胞外基质沉积致纤维化形成有一定关系。

  • 标签: 丙型肝炎 锌指蛋白A20 瞬时肝弹性测定 肝纤维化 免疫组化
  • 简介:摘要目的观察甲状腺癌(TC)细胞中微小RNA-630(miR-630)对上皮-间充质转化(EMT)标志物锌指转录因子(Slug)表达的影响,及对细胞侵袭能力的影响。方法收集河北医科大学第二医院普外科2018年1月至2019年12月之间的40例乳头状甲状腺癌及其癌旁标本。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法检测甲状腺癌及其癌旁组织中miR-630的表达水平;将miR-630模拟物(mimics)转染至人乳头瘤状甲状腺癌细胞(TPC-1)细胞中,应用荧光定量PCR的方法观察Slug基因的表达水平,使用双荧光素酶报告基因实验观察miR-630对Slug基因的调控作用;同时,将过表达Slug质粒与miR-630 mimics共转染至TPC-1细胞,应用Transwell细胞侵袭实验观察miR-630和Slug表达变化对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响,组间比较采用t检验。结果miR-630在乳头状甲状腺癌组织中的表达水平为(1.13±0.07),其表达水平明显低于癌旁组织表达水平(5.33±0.08),差异有统计学意义(t=15.472,P<0.05);miR-630 mimics上调甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中miR-630后,Slug mRNA表达水平(0.48±0.09)明显低于对照组细胞(1.03±0.07,t=7.132,P<0.05),差异有统计学意义;miR-630 mimics与Slug 3’非翻译区野生型共转染组荧光素酶活性明显低于对照组(0.38±0.03,t=13.021,P<0.05),差异有统计学意义。而miR-630 mimics与Slug 3’非翻译区突变型共转染组,荧光素酶活性却无明显变化(1.08±0.02比1.02±0.03,t=1.122,P>0.05),差异无统计学意义;miR-630 mimics组侵袭细胞数(241.3±42.4)明显低于对照组侵袭细胞数(467.5±51.7),差异有统计学意义(t=3.214,P<0.05);miR-630 mimics和Slug过表达质粒共转染组细胞的侵袭细胞数(411.6±28.3)与阴性对照组(NC,418.3±31.2)组比较,差异无统计学意义(t=1.131,P>0.05)。结论miR-630能够通过靶向抑制Slug的表达,抑制甲状腺癌细胞的侵袭能力。

  • 标签: 甲状腺癌 微小RNA 侵袭
  • 简介:摘要  目的:研究RET锌指蛋白(ret finger protein,RFP)基因敲除对帕金森病模型小鼠神经退行性改变的影响。方法:RET锌指蛋白基因敲除的 C57BL/6 雄性小鼠通过腹腔注射 1-甲基-4-苯基-1, 2, 3, 6-四氢吡啶(1-methy-4- phenyl-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine, MPTP)制备 PD 模型,注射的第 6 天取小鼠全脑,用 TUNEL 试剂盒检测中脑黑质部细胞的凋亡, 用免疫组织化学法和 Western Blot 法检测黑质酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH),Caspase-3,RFP表达。 结果: RFP基因敲除能够降低由MPTP所导致的多巴胺能神经元的凋亡。 结论:RFP基因敲除减轻了 PD 模型小鼠的神经退变。

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  • 简介:<正>旋律的对称5.横纵交错的对称序列线在现代序列音乐中,序列线象一串佛珠一样,可以完全平放在桌子上,也可以局部“折叠”起来或“悬挂”起来,成为水平线和垂直线交替的序列线。如意大利现代作曲家达拉皮科拉(1904-1975)的钢琴曲《音乐年表》:

  • 标签: 节奏 意大利 主题 对称序 音乐语言 对称结构