简介：摘要目的基于癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)和Kaplan-Meier Plotter数据库探讨G蛋白偶联雌激素受体(GPER)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其与预后的关系。方法本回顾性研究利用基因表达谱交互分析(GEPIA)工具下载含有乳腺癌患者GPER mRNA二代测序数据及临床病理资料的TCGA数据集，GPER mRNA表达为偏态分布数据，用[M(P25 ～P75 )]表示，采用Wilcoxon W检验分析1 085例乳腺癌组织样本和291例正常乳腺组织样本GPER mRNA表达的差异，同时用Kruskal-Wallis H检验分析乳腺癌组织中GPER mRNA表达与其临床病理特征的关系，两两比较用Bonferroni-Dunn检验。利用Kaplan-Meier Plotter数据库收集共3 951例乳腺癌患者的GPER mRNA表达情况，根据GPER mRNA表达的上下四分位数确定最佳截点值(103)，从而将其分为GPER高、低表达2组，进而绘制无复发生存曲线，使用log-rank检验比较GPER高表达与低表达组的无复发生存率差异。结果正常乳腺组织中GPER mRNA表达为6.247 9(6.022 4～6.554 6)，乳腺癌组织中为5.700 4(5.357 6～6.022 0)，差异有统计学意义(Z＝－7.338，P<0.001)。不同T分期、N分期的乳腺癌组织中GPER mRNA表达比较，差异无统计学意义(χ2＝3.343、6.084，P＝0.488、0.193)。GPER mRNA在basal-like型、HER-2型、luminal型中的表达分别为－0.239 3(－0.250 7～－0.126 1)、－0.263 9(－0.275 9～－0.225 7)、－0.188 3(－0.239 7～－0.101 9)，差异有统计学意义(χ2＝106.187, P<0.001)。两两比较发现，HER-2型与basal-like型、HER-2型与luminal型、basal-like型与luminal型相比，GPER mRNA表达的差异均有统计学意义(P＝0.019，P均<0.001)。GPER mRNA低表达患者的无复发生存率明显低于高表达患者(HR＝0.67，95%CI：0.59～0.75，P<0.001)。结论GPER mRNA低表达患者预后更差，提示GPER可能成为乳腺癌患者预后的独立预测因子。

简介：摘要解偶联蛋白(UCP)属于线粒体内膜上的线粒体载体蛋白家族，主要包括UCP1、UCP2和UCP3等。研究表明，UCP通过脂质褐变过程参与恶性肿瘤的发生发展。肿瘤细胞分泌锌-α2-糖蛋白刺激过氧化物酶体增殖物激活受体，诱导脂质褐变并表达UCP1，促进肿瘤的生长。磷脂酶C样蛋白1可上调UCP1表达，消耗异常脂质，使肿瘤细胞集落形成能力降低，抑制肿瘤的迁移和侵袭。另外，肿瘤抑制因子p53的辅助因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1β能增强p53缺乏的脂肪细胞中UCP1的表达，UCP2的上调有助于肿瘤细胞逃避p53介导的细胞凋亡，激活活性氧系统，增强肿瘤的活力和增殖能力。

简介：摘要G蛋白偶联受体（GPCR）是一大类膜蛋白受体的统称，通过与G蛋白相互作用将细胞外的信息传递到细胞内。本文通过对G蛋白α亚基受体概况、Wnt信号通路、Janus激酶/信号转导及转录激活因子（JAK/STAT）信号通路、CXCR4-GNAQ-PLCβ通路、PI3K/Akt信号途径和MAPK/ERK途径的研究进展作一概述，同时对G蛋白α亚基受体调控RA主要信号通路的作用机制进行分析，为后期研究RA调控基因G蛋白α亚基q的作用机制提供必要的理论依据。

简介：摘要目的构建雌激素受体α配体结合域(ERα-LBD)表达载体，优化表达条件得到可溶性ERα-LBD蛋白。方法在Addgene网站检索关键词ESR(雌激素受体，estrogen receptor)，选择符合条件的质粒载体pcDNA-HA-ER WT(Addgene plasmid # 49498; http：//n2t.net/addgene：49498; RRID：Addgene_49498)，设计引物并扩增得到目的片段ERα-LBD，分别构建蛋白表达载体pET-28a-LBD和pGEX-4T1-LBD，改变诱导温度、异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)浓度以及诱导时间对表达条件优化。待细菌裂解并提取蛋白后进行凝胶电泳，可在细菌上清的泳道中观察到明显的紫色蛋白表达条带，即为可溶性ERα-LBD蛋白。结果pET-28a-LBD重组质粒未能表达重组蛋白ERα-LBD，重组质粒pGEX-4T1-LBD在Rosetta和BL21(DE3)感受态中以1 mmol/L IPTG诱导仅能得到包涵体；以0.2 mmol/L IPTG 16 ℃过夜诱导培养，则可得到可溶性ERα-LBD蛋白。结论成功构建ERα-LBD表达载体并优化诱导表达条件，获得可溶性ERα-LBD蛋白。

简介：摘要目的评估肾周脂肪解耦连蛋白1（UCP1）表达对肾透明细胞癌（ccRCC）患者预后的影响。方法选取2013年2月至10月及2015年3月至10月收治的行后腹腔镜根治性肾切除术的ccRCC患者共98例，通过术前CT图像评估肾周脂肪厚度及黏连度。术后RT-qPCR检测肿瘤周围肾周脂肪UCP1，依据肾周脂肪UCP1 mRNA值，将患者分成高UCP1表达组（42例）与低UCP1组表达组（56例）。比较两组患者的一般临床资料、肾周脂肪厚度及黏连度，进一步采用Kaplan-Meier曲线评估两组间无进展生存期（PFS）的差异。采用单变量和多变量Cox回归分析确定PFS的潜在独立预后因素。结果高UCP1表达组的肾周脂肪厚度、肾周脂肪黏连比例、Fuhrman分级中Ⅲ~Ⅳ级比例和T分期中>T2期比例高于低UCP1表达组[（13.84±2.41）vs（10.75±1.99），42.86% vs 16.07%，28.57% vs 8.93%，21.43% vs 5.36%；P值分别为0.000，0.003，0.011，0.037]。随访期间（中位时间62.0个月），15例患者（12例高UCP1表达组，3例低UCP1表达组）发生肿瘤进展。Kaplan-Meier曲线显示，高UCP1表达组较低UCP1表达组PFS更差（71.43% vs 94.64%，P=0.001）。Cox回归分析显示，高UCP1表达和高T分期与低PFS显著相关（β=1.334，RR=3.796，95% CI=1.009~14.280，P=0.048；β=2.886，RR=17.930，95% CI=5.538~58.047，P=0.000）。结论肾周脂肪UCP1表达增加可能为ccRCC患者肿瘤进展的独立危险因素。术后联合肾周脂肪棕色化评估可能有助于临床更好的判断ccRCC患者的预后。

简介：摘要目的探讨急性心肌梗死（AMI）患者血清低密度脂蛋白受体相关蛋白6（LRP6）水平变化在AMI中的临床意义。方法选择浙江省衢州市人民医院2017年1月至2018年12月住院的急性AMI患者150例作为AMI组，疑诊冠心病无冠状动脉狭窄者150例为对照组。Western blot测定血清LRP6水平。酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清B型脑钠肽（BNP）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）水平。结果AMI组总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）高于对照组[（4.42 ± 0.79）mmol/L比（3.79 ± 0.82）mmol/L、（1.52 ± 0.33）mmol/L比（1.37 ± 0.38）mmol/L、（3.15 ± 0.34）mmol/L比（2.91 ± 0.28）mmol/L]，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-D）低于对照组[（0.95 ± 0.26）mmol/L比（1.21 ± 0.33）mmol/L]，差异均有统计学意义（P<0.05）。AMI组血清LRP6和左室射血分数低于对照组[0.12 ± 0.03比0.38 ± 0.07、（53.27 ± 6.89）%比（66.82 ± 7.35）%]，BNP和cTnI水平高于对照组[（78.16 ± 5.27）ng/L比（7.13 ± 1.24）ng/L、（125.83 ± 3.26）ng/L比（0.71 ± 0.24）ng/L]，差异均有统计学意义（P<0.05）。AMI患者血清LRP6水平与LDL-C、BNP、cTnI、SYNTAX积分呈负相关（r=- 0.587、- 0.523、- 0.542、- 0.583，P<0.05），与左室射血分数呈正相关（r=0.515，P<0.05）。结论AMI患者血清LRP6水平降低，血清LRP6与AMI严重程度和冠状动脉病变程度关系密切。

简介：摘要共抑制受体又称免疫检查点受体，在调节免疫应答、维持机体免疫稳态中发挥着重要的作用。以共抑制受体所在通路为治疗靶点的生物制剂已被研发并推广至临床应用。作为近年发现的新的共抑制受体之一，业有研究证实T细胞免疫球蛋白及免疫酪氨酸样抑制基序（TIGIT）的异常表达与肿瘤、感染等疾病的发生、发展密切相关。本综述拟对TIGIT的分子结构特点、作用机制及其在自身免疫病中的研究进展进行小结。

简介：摘要疼痛是一种与组织损伤或潜在组织损伤相关的感觉、情感、认知和社会维度的痛苦体验。近年来很多报道表明瞬时受体电位阳离子通道家族（transient receptor potential cation channel, TRPs）中的瞬时受体电位通道蛋白A1(transient receptor potential channel A1, TRPA1）通道参与温度、机械、炎症刺激等引起的不同类型疼痛反应，并且通过多种路径发挥作用。文章从TRPA1的分子结构、表达部位、其激动及拮抗物质的角度出发，探讨其参与不同类型疼痛的机制，对目前关于TRPA1在疼痛治疗中的研究进展进行综述，为开发新的镇痛药物提供参考依据。

简介：摘要目的观察全腔镜甲状腺切除术对甲状腺癌(TC)大鼠模型症状改善情况及血清甲状腺球蛋白(Tg)和肿瘤组织中可溶性Fas受体配体(sFasL)蛋白水平的影响。方法将60只成年雄性大鼠(动物来自广东省医学实验动物中心)作为研究对象，采用随机数字表法分为对照组、TC模型组以及手术组，每组20只。于TC模型组和手术组大鼠颈背部皮下注射100 μl NIH3T3HOOK3-RET肿瘤细胞悬液以建立TC模型，手术组在完成建模后行甲状腺全切除术，3组大鼠均培养8周。观察3组大鼠甲状腺组织病理变化，分别采用蛋白质印迹法(Western blot)法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠甲状腺组织和血清中可溶性Fas(sFas)、sFasL蛋白表达水平及其mRNA表达量，另外采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6及Tg水平。采用SPSS 19.0统计分析软件分析不同组别各项指标间差异，多组间采用方差分析，组间两两比较采用SNq检验。结果苏木素-伊红(HE)染色结果显示TC模型组大鼠甲状腺组织明显增生，且具有严重炎性反应以及平滑肌肥大征象，手术组大鼠甲状腺切除后上述病理改变明显好转。比较对照组，TC模型组血清炎性因子TNF-α[(3.51±0.32) ng/L]、IL-1β[(2.85±0.23) ng/L]、IL-6[(322.28±20.38) pg/L]、Tg[(110.25±14.85) ng/L]表达水平以及sFas(85.65±10.25)、sFasL(87.42±18.23)蛋白吸光度值、sFas(0.62±0.03)、sFasL(0.65±0.04)mRNA相对表达量(t＝40.360、42.056、31.697、21.551、12.962、9.606、46.669、38.000，P<0.05)和手术组TNF-α[(1.39±0.11) ng/L]、IL-1β[(0.89±0.10) ng/L]、IL-6[(175.84±15.62) pg/L]、Tg[(72.32±10.12) ng/L]表达水平以及sFas(60.24±8.17)、sFasL(58.84±12.13)蛋白吸光度值、sFas(0.42±0.02)、sFasL(0.40±0.03) mRNA相对表达量显著升高，差异有统计学意义(t＝27.690、11.524、4.977、14.939、4.675、4.257、26.000、16.125，P<0.05)；与TC模型组比较，手术组TNF-α(1.39±0.11) ng/L、IL-1β(0.89±0.10) ng/L、IL-6(175.84±15.62) pg/L、Tg(72.32±10.12) ng/L表达水平以及sFas(60.24±8.17)、sFasL(58.84±12.13)蛋白吸光度值、sFas(0.42±0.02)、sFasL(0.40±0.03) mRNA相对表达量均显著下降，差异有统计学意义(t＝－28.019、－34.950、－25.505、－9.439、－8.669、－5.837、－24.807、－22.361，P<0.05)。结论全腔镜甲状腺切除术可以通过有效降低Tg、sFas和sFasL蛋白以及sFas、sFasL mRNA表达水平以及炎性因子水平，从而抑制甲状腺肿瘤细胞的生长和转移。

简介：摘要目的探讨受体相互作用蛋白激酶4(RIPK4)在乳腺癌发生、发展中的作用及其机制。方法收集郑州大学第一附属医院乳腺外科2017年10月至2018年7月手术切除的乳腺癌和癌旁正常组织96例，采用免疫组织化学方法检测RIPK4蛋白在96例乳腺癌和癌旁正常组织中的表达及其与乳腺癌临床病理特征间的关系；靶向RIPK4的小干扰RNA(siRNA)瞬时转染乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞，同时以转染阴性对照siRNA和空白细胞为对照，共分为3组：RIPK4 siRNA转染组、空白细胞组和阴性对照siRNA转染组。细胞计数试剂盒(CCK-8)试验和侵袭小室试验检测抑制RIPK4蛋白表达对MCF-7、MDA-MB-231细胞增殖和侵袭转移能力的影响，蛋白质印迹法(Western blot)检测抑制RIPK4蛋白表达对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。采用方差分析进行组间比较，采用t检验进行两两比较。结果免疫组织化学结果显示RIPK4蛋白在乳腺癌组织中的表达明显增高(71.9%，69/96)，与癌旁正常组织比较(21.9%，21/96)，差异有统计学意义(χ2＝48.188，P<0.01)；且RIPK4蛋白异常高表达与乳腺癌患者的TNM分期、组织学类型及淋巴结转移明显相关(χ2＝17.524、40.697、9.458，P<0.05)；靶向RIPK4的siRNA瞬时转染MCF-7、MDA-MB-231细胞后，CCK-8试验和侵袭小室试验结果显示，MCF-7、MDA-MB-231细胞的增殖和侵袭转移能力降低；进一步试验表明RIPK4 siRNA抑制MCF-7、MDA-MB-231细胞中RIPK4蛋白的表达后，Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin表达随之下降，上皮-间充质转化(EMT)的相关蛋白上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达增高而波形蛋白(Vimentin)表达下降。结论RIPK4蛋白在乳腺癌组织中异常高表达，抑制RIPK4蛋白的表达有可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路相关的EMT的发生降低乳腺癌细胞的增殖、侵袭转移能力。

简介：摘要目的探讨金属硫蛋白-1G(MT1G)在肝细胞癌(HCC)恶化过程中发挥的调节作用及调节机制。方法利用无标记定量蛋白质组学技术比较MT1G过表达与参照细胞株之间蛋白质组差异；利用细胞计数试剂盒(CCK-8)、胸腺嘧啶核苷类似物染色试剂盒(EDU法)观察细胞表型变化；利用蛋白质印迹法(Western blot)检测相关信号通路关键因子表达量变化。样本间的比较采用t检验进行统计分析。结果首先成功构建出MT1G过表达细胞株。经质谱(MS)鉴定结果表明与参照细胞比共有182种蛋白在MT1G过表达细胞中出现表达量差异有统计学意义(阈值≥5.0倍或≤0.2倍，且P<0.05)。GO分析显示这些差异表达蛋白(DEPs)可能参与细胞周期调控和磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路。定量聚合酶链反应(PCR)验证表明与参照细胞比，MT1G在MT1G过表达细胞中上调表达，差异均有统计学意义(294.9±33.3)倍(t＝8.837，P<0.01)；吡多醛激酶(PDXK)上调表达(34.02±2.59)倍(t＝13.148，P<0.01)；UBX结构域蛋白7(UBXN)上调表达(19.08±0.47)倍(t＝40.652，P<0.01)；跨膜蛋白9家族成员4(TM9S4)上调(8.91±0.43)倍(t＝20.485，P<0.01)，这些结果与MS鉴定结果趋势一致，差异均有统计学意义。CCK-8和EDU染色结果揭示MT1G过表达可以显著抑制HCC细胞的增殖，而这种抑制作用是通过抑制Akt和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的磷酸化实现的。结论MT1G通过调节PI3K-Akt信号通路活性抑制肝细胞癌细胞的增殖。

简介：摘要近些年，研究发现代谢重编程影响肿瘤的发生发展，其中，脂质代谢的失调是癌细胞最重要的新陈代谢标志之一。凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)在胃癌、胰腺癌、结肠癌等多种肿瘤中都有异常表达，影响肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭等，与肿瘤的不良转归具有相关性，被认为是极具研究潜力的肿瘤标志物。本文就LOX-1的生物学特性以及近年来LOX-1在肿瘤中的研究进展进行综述。

简介：摘要近年来，Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体及细胞焦亡在支气管哮喘(哮喘)中的作用日趋受到关注。NLRP3炎性小体一旦被激活，可招募活化半胱天冬氨酸蛋白酶-1，激活并释放炎性因子白细胞介素(IL)-1β和IL-18，加重哮喘气道炎性反应；进而Gasdermin D蛋白裂解，诱发细胞焦亡，细胞损伤加重哮喘气道重塑。现就NLRP3炎性小体相关炎性反应和细胞焦亡机制及在哮喘中的作用进行综述。

简介：摘要目的分析癫痫发作后24 h内P2X7受体(P2X7R)和神经连接蛋白(NLGN)的表达特点，并探讨P2X7R抑制剂负性调控癫痫发生过程的可能机制。方法将健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为6组，分别为1 h、3 h、6 h、12 h、24 h组及空白对照组(每组3只)；除空白对照组外，其余组均制备为氯化锂－匹鲁卡品癫痫模型，Racine评分量表评级达4或5级为造模成功。依次于癫痫发作后1 h、3 h、6 h、12 h及24 h将各组大鼠处死，空白对照组与1 h组一同处理，采用蛋白免疫印迹法检测P2X7R、NLGN1及NLGN2在各组大鼠海马和内嗅皮质中的表达情况。进一步按随机数字表法将健康雄性SD大鼠分为干预组(造模前腹腔注射P2X7R抑制剂＋载体)和对照组(造模前腹腔注射等剂量生理盐水＋载体)，每组3只。记录两组大鼠药物诱发癫痫的潜伏时间，以判断癫痫持续状态的严重程度；之后采用蛋白免疫印迹法检测两组大鼠海马和内嗅皮质中NLGN1、NLGN2的表达情况，以判断P2X7R抑制剂对其表达的影响。结果1 h、3 h、6 h、12 h及24 h组大鼠均造模成功。蛋白免疫印迹法结果显示，癫痫发作后1 h或3 h，P2X7R、NLGN1及NLGN2在癫痫模型海马和内嗅皮质中的相对表达量(海马：分别为1.194±0.053、2.367±0.336、2.319±0.234，内嗅皮质：分别为1.185±0.104、2.094±0.178、1.512±0.332)均高于空白对照组(海马：分别为1.014±0.046、1.108±0.101、1.134±0.177，内嗅皮质：分别为0.917±0.081、1.046±0.093、1.017±0.028；均P<0.05)；且随发作时间延长，表达均有降低的趋势(均P<0.001)。干预组药物诱发癫痫的潜伏时间较对照组长[分别为(34.5±2.6)min、(20.0±3.1)min，P＝0.029]。蛋白免疫印迹法检测结果显示，干预组海马中NLGN1和NLGN2的相对表达量(NLGN1：0.678±0.011，NLGN2：0.904±0.060)均低于对照组(NLGN1：1.031±0.039，NLGN2：1.135±0.079；均P<0.05)，而内嗅皮质中NLGN1和NLGN2的相对表达量，两组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论癫痫发作后1 h或3 h内，P2X7R和NLGN蛋白在海马和内嗅皮质中的表达量均明显增加，且在发作后24 h内，随发作时间延长呈降低的趋势；P2X7R抑制剂可通过抑制海马区NLGN的表达进而负性调控癫痫发生过程。

简介：摘要目的观察先天性心脏病肺动脉高压患儿肺组织中芳香烃受体核转位蛋白(ARNT)水平及其对肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移的影响，探讨ARNT在先天性心脏病肺动脉高压发病中的作用机制。方法选择我院2018年1月至2018年12月先天性心脏病室间隔缺损相关性肺动脉高压患者60例作为先天性心脏病-肺动脉高压组(CHD-PAH)和先天性心脏病室间隔缺损无肺动脉高压患儿60例作为先天性心脏病组(CHD组)。将人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)细胞分为常氧组和缺氧组，分别给予常氧和缺氧诱导。将HPASMC细胞分为空白对照组(BC组)、阴性对照组(NC组)和siR-ARNT组，siR-ARNT组细胞转染ARNT-shRNA慢病毒，NC组细胞转染阴性对照慢病毒，BC组细胞不转染。采用蛋白质印迹法(Western blot)和反转录-聚合酶连反应(RT-PCR)测定肺组织细胞中ARNT蛋白和mRNA水平。细胞计数试剂盒(CCK-8)测定细胞增殖能力。Transwell和划痕实验测定细胞迁移能力，应用SPSS 20.0统计软件分析。结果CHD-PAH组患儿肺组织ARNT蛋白和mRNA水平(0.53±0.06、2.36±0.17)均高于CHD组(0.09±0.02、1.00±0.12，t＝53.889、50.626，P<0.05)，差异有统计学意义。缺氧组HPASMC细胞中ARNT蛋白和mRNA水平(0.47±0.09、2.15±0.13)均高于常氧组(0.14±0.06、1.00±0.09，t＝8.072、19.243，P<0.05)，差异有统计学意义。与BC组[0.65±0.13、1.00±0.08、0.43±0.09、0.81±0.12、1.13±0.14、(95.46±11.37)个、(85.17±6.42) μm]和NC组[0.62±0.14、0.98±0.09、0.41±0.07、0.79±0.13、1.14±0.15、(97.43±12.62)个、(83.91±6.58) μm]比较，siR-ARNT组HPASMC细胞中ARNT蛋白和mRNA水平(0.17±0.06、0.37±0.05)、吸光度(A)值(0.33±0.05、0.56±0.10、0.72±0.13)、迁移细胞数[(72.15±10.94)个]和迁移距离[(32.27±6.12) μm]均降低(F＝37.863、158.406、3.794、9.814、20.442、10.171、156.873，P<0.05，差异有统计学意义)；BC组和NC组HPASMC细胞中各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论先天性心脏病肺动脉高压患儿肺组织ARNT水平升高，ARNT可能通过影响HPASMC细胞增殖和迁移参与先天性心脏病肺动脉高压的发生发展过程。

简介：摘要目的探讨维生素D受体（VDR）在糖尿病肾病（DKD）足细胞中的表达水平及在足细胞损伤及蛋白尿缓解中的作用。方法（1）本研究纳入了65例诊断患有2型糖尿病（伴或不伴蛋白尿）的患者，并纳入了25例年龄和性别相匹配的健康体检者为对照组。根据白蛋白/肌酐（ACR）的尿排泄比例对2型糖尿病患者进行分组，分别为无蛋白尿（ACR<30 mg/g，n=24）、微量白蛋白尿（ACR 30~300 mg/g，n=18）和临床蛋白尿（ACR>300 mg/g，n=23）。另选择25例经肾活检确诊的DKD患者作为DKD组。正常肾脏组织标本均取自泌尿外科同一时期肾脏肿瘤切除患者10例。将各组检测指标进行对比，同时采用实时定量PCR、ELISA法和免疫组化法检测VDR在各组患者的血液、尿液样本和肾脏组织中的表达情况，以及使用Pearson相关分析分析VDR与尿蛋白的相关性。（2）在2型糖尿病肾病小鼠模型中对上述结果进行验证，将遗传背景均为C57BLKs/J的雄性db/db小鼠及同窝出生的db/m小鼠，随机分为正常对照组（A组）、DKD对照组（B组）、DKD二甲基亚砜处理组（C组）、DKD帕立骨化醇（VDR激动剂）处理组（D组），C、D组连续腹腔注射处理8周，对照组不做任何处理。小鼠10周龄时开始连续干预8周，在小鼠22周龄（开始干预后12周）检测各组小鼠体重、血、尿生化指标对比；Western印迹法检测β-catenin、VDR的变化；免疫荧光观察足细胞标志蛋白podocin及足细胞损伤蛋白α-SMA的表达变化。结果（1）与正常健康对照组相比，无蛋白尿组、微量白蛋白尿组和临床蛋白尿组的糖尿病患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平均较低（均P<0.05）；与无蛋白尿组的糖尿病患者相比，微量白蛋白尿组和临床蛋白尿组的糖尿病患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平均较低（均P<0.05）。（2）与正常健康对照组相比，无蛋白尿糖尿病组和DKD组患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平均较低（均P<0.05）；与无蛋白尿糖尿病组患者相比，DKD组患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平亦较低（均P<0.05）。（3）免疫组化结果显示，DKD组肾组织中VDR的表达明显少于正常对照组。（4）DKD患者血浆中VDR mRNA相对水平与ACR呈负相关（r=-0.342，P<0.05）。（5）各组尿液上清液中VDR的水平与血浆中的水平呈相反趋势。（6）Western印迹结果显示，B组、C组肾小球足细胞β-catenin蛋白表达高于D组（均P<0.05），VDR蛋白的表达低于D组（均P<0.05）；免疫荧光结果显示，B组、C组肾小球足细胞podocin的表达低于D组（均P<0.05），α-SMA的表达高于D组（均P<0.05）。结论VDR高表达缓解DKD足细胞损伤及蛋白尿。

简介：摘要目的比较髓样细胞触发受体2(triggering receptor expressed on myeloid cell 2，TREM2)在不同月龄酪氨酸激酶结合蛋白(tyrosine kinase binding protein，TYROBP)基因敲除小鼠和野生型小鼠不同脑区的表达差异，探讨TREM2、TYROBP与早发型阿尔茨海默病(early onset Alzheimer's disease，EOAD)的关系。方法健康TYROBP基因敲除的小鼠根据基因测序结果分成3组：纯合型(TYROBP-/-)组、杂合型(TYROBP-/＋)组和野生型(wild type，WT)组，3组小鼠分别在2、4、6月龄各选10只，运用Western blot和RT-qPCR技术检测TREM2在前额叶、海马中的表达情况。结果(1)在前额叶中：Western blot和RT-qPCR共同显示，与各月龄WT组[2月龄：(0.993±0.048)，(1.654±0.033)；4月龄：(0.503±0.019)，(2.169±0.023)；6月龄：(0.600±0.036)，(1.468±0.057)]相比，TREM2蛋白和mRNA在2月龄TYROBP-/＋组[(0.746±0.062)，(1.137±0.067)]和TYROBP-/-组[(0.661±0.028)，(0.644±0.012)]的表达均降低，而在4月龄和6月龄TYROBP-/＋组[4月龄：(1.140±0.006)，(5.483±0.088)；6月龄：(0.827±0.043)，(3.020±0.082)]和TYROBP-/-组[4月龄：(1.071±0.010)，(3.012±0.150)；6月龄：(0.627±0.026)，(1.633±0.027)]的表达均升高，差异具有统计学意义(F＝12.946，134.445；725.318，289.202；12.172，202.791；均P<0.05)，且4月龄小鼠升高更明显。(2)在海马中：Western blot显示，与各月龄WT组[2月龄：(1.268±0.036)；4月龄：(0.813±0.010)；6月龄：(0.312±0.021)]相比，TREM2蛋白在2月龄TYROBP-/＋组[(0.804±0.034)]和TYROBP-/-组[(0.534±0.020)]的表达降低，而在4月龄和6月龄TYROBP-/＋组[(0.932±0.011)；(0.769±0.031)]和TYROBP-/-组[(0.910±0.014)；(0.609±0.018)]的表达均升高，差异具有统计学意义(F＝142.807，27.884，94.067；均P<0.05)，且4月龄小鼠升高更明显。结论TREM2在2月龄TYROBP基因敲除小鼠脑组织中表达降低，在4月龄和6月龄TYROBP基因敲除小鼠脑组织中表达升高，推测TREM2/TYROBP信号通路参与EOAD的病理过程并且在EOAD的不同病理阶段发挥着不同的作用。

简介：摘要糖尿病是由遗传因素和环境因素共同导致的一类代谢性疾病，国际糖尿病联盟估计2017年全球有糖尿病患者4.25亿，预计到2045年，糖尿病患者将达到6.29亿。持续的高血糖会导致心、眼、肾的损伤，严重影响了患者的生活质量，并造成巨大的社会经济负担。因此，防治糖尿病及其相关并发症具有重要意义，但糖尿病并发症的发病机制目前尚未完全明确。近年来有研究表明，NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的激活在糖尿病并发症的发病过程中具有重要作用。本文就NLRP3炎症小体在糖尿病并发症中的作用机制作一综述。

简介：摘要目的探讨细菌性血流感染患者血清1-磷酸鞘氨醇受体1(sphingosine 1-phosphate receptor 1，S1P1)、1-磷酸鞘氨醇受体3(sphingosine 1-phosphate receptor 3，S1P3)和载脂蛋白M的表达及其诊断效能。方法纳入2018年9月至2019年2月成都中医药大学附属医院的90例细菌性血流感染患者，50例非细菌性血流感染患者和30名健康体检者。比较3组研究对象血清中载脂蛋白M、S1P1和S1P3的表达，以受试者操作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线下面积评估各项指标的诊断效能。组间比较采用方差分析。结果细菌性血流感染组患者血清载脂蛋白M、S1P1和S1P3表达水平分别为(11.06±8.02) μg/L、(305.26±107.45) ng/mL和(320.83±117.62) ng/mL ；非细菌性血流感染组分别为(16.32±5.27) μg/L、(392.38±79.40) ng/mL和(223.76±85.98) ng/mL；健康对照组分别为(25.43±7.05) μg/L、(462.15±115.70) ng/mL和(134.16±51.27) ng/mL，差异均有统计学意义(F＝－4.716、4.315、－4.94，均P<0.01)。载脂蛋白M、S1P1和S1P3诊断细菌性血流感染的ROC曲线下面积分别为0.959、0.830和0.939; 3项指标联合检测诊断细菌性血流感染的ROC曲线下面积为0.994。菌血症、脓毒症、严重脓毒症和脓毒性休克患者的载脂蛋白M分别为(18.08±1.58)、(11.63±4.85)、(9.32±6.58)和(7.95±2.70) μg/L，S1P1分别为(373.00±95.89)、(286.34±105.52)、(264.21±72.98)和(216.97±75.98) ng/mL，S1P3分别为(230.78±71.40)、(305.32±75.39)、(402.83±88.44)和(455.57±87.14) ng/mL，差异均有统计学意义(F＝14.005、11.452、32.988，均P<0.01)。载脂蛋白M、S1P1和S1P3诊断脓毒症的ROC曲线下面积分别为0.837、0.812和0.878；3项指标联合检测诊断脓毒症的ROC曲线下面积为0.956。结论S1P1、S1P3和载脂蛋白M可作为细菌性血流感染和脓毒症的诊断指标，多指标联合检测可以提高诊断效能。

简介：摘要目的通过研究中国马源P[12]型轮状病毒GST-VP8*-HorseP[12]E403蛋白与寡糖、唾液受体的结合特征，进而为轮状病毒的跨种传播及受体间的作用机制提供重要科学依据。方法通过大肠杆菌表达系统表达、纯化中国马源P[12]型轮状病毒GST-VP8*-Horse P[12]E403蛋白，并利用唾液及寡糖结合实验分析该基因型的受体结合特征。结果马源GST-VP8*-Horse P[12]E403蛋白与黏蛋白核心mucin core 2糖结合良好，与A、B、Lewis型等寡糖及唾液中的HBGAs均不结合。结论VP8*-Horse P[12]E403蛋白的潜在受体可能是黏蛋白核心2，未与人唾液发生结合。