简介：摘要目的探讨人眼葡萄膜黑素瘤细胞系M23转染miR-137后对细胞增殖和迁移能力的影响及其分子机制的初探。方法采用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-137mimics转染M23细胞，应用CCK-8法检测转染后细胞增殖变化，划痕实验检测细胞迁移能力变化。Westernblot检测PTEN、总AKT和磷酸化AKT蛋白表达。结果转染miR-137后，实验组的细胞增殖较对照组明显减低（t=-18.754，P=0.000；）；在36h和72h时间点，实验组细胞的划痕愈合程度均明显低于对照；实验组的PTEN蛋白表达增加，p-AKT蛋白减低，AKT蛋白表达无明显变化。结论miR-137通过上调PTEN蛋白表达和减低AKT磷酸化活性从而抑制人眼葡萄膜黑素瘤细胞的增殖和迁移能力。

简介：摘要目的探索长链非编码RNA（lncRNA）068对黑素瘤细胞系A375迁移的影响及潜在机制。方法2015年12月至2020年11月在南通大学附属医院皮肤科门诊收集经病理确诊的皮肤黑素瘤患者21例，采用定量PCR（qPCR）检测其黑素瘤组织与相邻癌旁组织中lncRNA 068的表达。通过慢病毒转染在A375细胞中过表达或敲降lncRNA 068，过表达实验分为LV-GFP组和LV-lncRNA 068组，低表达实验分为LV-LacZ shRNA组和LV-lncRNA 068 shRNA组，其中LV-GFP组和LV-LacZ shRNA组均作为对照；Transwell实验及划痕实验检测过表达或敲降lncRNA 068对A375细胞迁移的影响，EdU细胞增殖实验和CCK8法分别检测各组增殖细胞比例及细胞活力，细胞免疫荧光染色检测过表达或敲降lncRNA 068对上皮-间质转化的影响。将各组慢病毒转染的A375细胞接种于BALB/c裸鼠腋窝，每3天测量并计算肿瘤体积，30 d后处死所有裸鼠，切除肿瘤组织并测量肿瘤体积和质量。将培养的B16F10细胞接种于BALB/c裸鼠背部和足部皮下构建B16F10移植瘤模型，2周后处死裸鼠，qPCR和Western印迹法分别检测B16F10移植瘤及癌旁组织中炎症因子mRNA的表达及IKK/P65信号通路相关蛋白的表达。两组间比较采用t检验，各组间不同时间点肿瘤体积及质量的比较采用重复测量方差分析。结果qPCR显示，人黑素瘤组织及裸鼠B16F10移植瘤组织中lncRNA 068相对表达量（0.414 ± 0.109、0.717 ± 0.041）均明显低于相应的癌旁组织（1.050 ± 0.103、1.011 ± 0.023，t = 19.48、10.83，均P < 0.001）。Transwell实验及划痕实验均显示，LV-lncRNA 068组细胞迁移能力显著低于LV-GFP组（均P < 0.01），而LV-lncRNA 068 shRNA组明显强于LV-LacZ shRNA组（均P < 0.05）。细胞免疫荧光实验显示，与LV-GFP组相比，LV-lncRNA 068组E钙黏蛋白荧光强度增强，而N钙黏蛋白荧光强度减弱（均P < 0.001）；与LV-LacZ shRNA组相比，LV-lncRNA 068 shRNA组E钙黏蛋白荧光强度减弱，而N钙黏蛋白荧光强度增强（均P < 0.05）。体内裸鼠成瘤实验显示，过表达组与敲降组黑素瘤的体积、质量差异均无统计学意义（P > 0.05）。qPCR和Western印迹实验显示，LV-lncRNA 068组A375细胞中白细胞介素（IL）-10、紧密连接蛋白1 mRNA及蛋白的表达均显著高于LV-GFP组（均P < 0.05），而LV-lncRNA 068 shRNA组IL-10、紧密连接蛋白1 mRNA及蛋白表达均显著低于LV-LacZ shRNA组（均P < 0.05）。B16F10黑素瘤组织中IL-10 mRNA的表达量显著低于癌旁组织（P < 0.01），而IL-6、TNF- α mRNA表达及p-P65蛋白表达均显著高于癌旁组织（均P < 0.001），p-IKK蛋白表达量显著高于癌旁组织（P < 0.01）。结论LncRNA 068过表达可抑制黑素瘤细胞A375的迁移，并可能通过抑制IKK/P65信号通路影响炎症的发生，抑制上皮-间质转化过程。

简介：摘要目的探究机械应力在足底黑素瘤形成中的潜在作用。方法回顾性分析2014—2021年中南大学湘雅医院129例足底黑素瘤的分布位置及临床特征，采用卡方拟合优度检验比较承重区（足趾、足前部、足中部外侧、足跟）与非承重区（足弓）皮损分布的差异，t检验、Fisher精确检验和Wilcoxon秩和检验分析足底承重区与非承重区黑素瘤临床病理特征的差异。结果129例足底黑素瘤患者中，男66例（51.2%），女63例（48.8%），发病年龄（60.6 ± 13.1）岁。最常见的发病部位是足跟（65个病变，1.31个/cm2），其余依次是足前部（31个病变，0.41个/cm2）、足趾底面（15个病变，0.43个/cm2）、足中部外侧（11个病变，0.38个/cm2）、足弓（7个病变，0.16个/cm2）。卡方拟合优度检验显示，承重区较非承重区更易患黑素瘤（χ2 = 66.59，P < 0.001）；与足弓部相比，足跟和足前部发病密度更高（χ2值分别为38.29、5.23，P值分别< 0.001、= 0.022）。承重区与非承重区足底黑素瘤患者性别、年龄、职业、左/右足受累、皮损Breslow厚度、溃疡情况、Clark分级、淋巴结转移、肿瘤分期等差异均无统计学意义（均P > 0.05）。结论足底承重区较非承重区更易患黑素瘤，推测机械应力刺激可能与黑素瘤的发生发展有关。

简介：摘要目的初步探究微小RNA-203（miR-203）调控锌指蛋白281（ZNF281）对黑素瘤细胞增殖、迁移的影响。方法常规培养人血管内皮细胞系ECV304、人黑素瘤细胞系A375、M14、SK-MEL-28、SK-MEL-2，实时荧光定量PCR检测各细胞系中miR-203表达情况，Western免疫印迹法检测各细胞系中ZNF281蛋白水平。A375、M14细胞分别分为5组：对照组（细胞正常培养）、miR-203模拟物对照组（加入miR-203模拟物阴性对照）、miR-203抑制剂对照组（加入miR-203抑制剂阴性对照）、miR-203模拟物组（加入miR-203模拟物）、miR-203抑制剂组（加入miR-203抑制剂）。实时荧光定量PCR检测各组A375、M14细胞中miR-203的表达，CCK8法检测各组A375、M14细胞增殖活性，Transwell实验检测各组A375、M14细胞迁移数量，Western免疫印迹法检测各组A375、M14细胞中ZNF281蛋白的表达。双荧光素酶验证miR-203与ZNF281的靶向关系。多组比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK-q法。结果与血管内皮细胞系ECV304相比，黑素瘤细胞系A375、M14、SK-MEL-28、SK-MEL-2中miR-203表达水平较低（均P < 0.05），ZNF281蛋白水平较高（均P < 0.05）。与对照组、miR-203模拟物对照组、miR-203抑制剂对照组相比，miR-203模拟物组A375、M14细胞中miR-203水平均显著升高（F = 487.632、68.454，均P < 0.05），细胞迁移数量均显著降低（均P < 0.05），ZNF281蛋白表达均显著降低（均P < 0.05）；miR-203抑制剂组A375、M14细胞中miR-203表达均显著降低（均P < 0.05），细胞迁移数量均显著增加（均P < 0.05），A375细胞中ZNF281蛋白表达显著升高（均P < 0.05），36、48、60、72 h A375细胞增殖活性显著升高（均P < 0.05），24、36、48、60、72 h M14细胞增殖活性均显著升高（均P < 0.05）。miR-203与ZNF281之间存在靶位点。结论上调miR-203表达可抑制黑素瘤细胞增殖、迁移，下调miR-203表达可促进黑素瘤细胞增殖、迁移，可能通过调控ZNF281的表达实现。

简介：摘要目的研究皮肤黑素瘤细胞与血管内皮细胞间VEGF-IL-6-STAT3信号交互作用机制。方法将血管内皮细胞EC-304分成3组：对照组，常规培养；血管内皮生长因子（VEGF）组，在含VEGF165（50 μg/L）的内皮细胞培养基中培养；A375共培养组，与黑素瘤细胞A375共培养。24 h、48 h、72 h后收集培养液，酶联免疫吸附实验检测白细胞介素6（IL-6）的分泌量。将A375细胞分为4组：对照组，常规培养；A375+ EC-304组，与EC-304共培养；A375+ EC-304+ IL-6组：与EC-304细胞在含STAT3通路激动剂IL-6（50 μg/L）的DMEM中共培养；A375+ EC-304+ JSI-124组：与EC-304在含STAT3通路抑制剂JSI-124（1 μmol/L）的DMEM中共培养。分别在24 h、48 h、72 h后收集细胞，用Western印迹、CCK-8、Transwell侵袭实验分别检测STAT3、p-STAT3蛋白表达、细胞增殖活性及侵袭活性。采用双因素方差分析及t检验统计分析数据。结果与对照组比较，VEGF组、A375共培养组EC-304培养基中IL-6分泌量均升高（FVEGF = 29.63，P < 0.001；FA375 = 11.09，P = 0.020）。与对照组比较，A375+ EC-304组A375细胞p-STAT3蛋白表达升高（P < 0.001），细胞活性增强（P < 0.001），侵袭细胞数从（86.13 ± 7.24）个增加到（152.66 ± 16.04）个（t= 4.43，P < 0.001）；与A375+ EC-304组比较，A375+ EC-304+ IL-6组细胞p-STAT3蛋白表达升高（P < 0.001），细胞活性增强（P < 0.001），侵袭细胞数量增加至（187.34 ± 14.38）个（t= 2.17，P < 0.001）；与A375+ EC-304组比较，A375+ EC-304+ JSI-124组细胞的p-STAT3蛋白表达降低（P < 0.001），细胞活性减弱（P < 0.001），侵袭细胞数减少至（124.92 ± 8.72）个（t=-1.86，P < 0.001）。结论皮肤黑素瘤A375细胞与血管内皮细胞之间存在VEGF-IL-6-STAT3信号交互作用机制，这种机制可促进A375细胞的增殖和侵袭。

简介：摘要目的探讨黑素瘤抑制蛋白2(MIA2)蛋白在肝细胞性肝癌（HCC）和癌旁组织中的表达，以及其表达与临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组织化学方法对43例HCC组织中的MIA2进行检测。结果MIA2蛋白在HCC组织中相对表达值低于癌旁组织，两组差异有统计学意义（P<0.05）。结论MIA2蛋白的表达可能对HCC的诊断及预后判断有一定参考价值。

简介：目的探讨活血化瘀中药对酪氨酸酶蛋白加工成熟的影响。方法体外传代培养人无色素黑素瘤细胞YUGEN8，分别加入红花、桃仁及赤芍3味中药提取液，利用蛋白免疫印迹、基因反转录扩增及内切糖苷酶酶切等方法，观察中药处理组细胞内酪氨酸酶的表达、成熟过程与阴性对照组的差异。结果与阴性对照组比，桃仁处理组细胞酪氨酸酶基因表达并未增加，酪氨酸酶蛋白80ku左右大分子量成熟片断表达增加，能够耐受内切糖苷酶酶切。结论桃仁提取物对人黑素瘤细胞内酪氨酸酶的加工成熟及稳定具有一定促进作用。

简介：摘要目的观察不同质量浓度的当归多糖对人黑素瘤A375细胞黑素合成及抗氧化损伤的作用。方法以终浓度为1.0mmol/LH2O2作用于人黑素瘤A375细胞，制备氧化损伤模型。并以当归多糖进行干预，采用MTT法测细胞活力，并测定黑素含量、TYR活性及氧化应激相关指标。结果不同浓度的当归多糖处理后，其细胞活力、黑素含量、TYR活性、T-AOC和SOD活性均有所增加，MDA含量和NOS活性逐渐降低，以10ug/mL和20ug/mL效果好。结论当归多糖对人黑素瘤A375细胞的氧化应激损伤具有保护作用，可能从抗氧化应激角度对白癜风患者发挥一定的治疗作用。

简介：摘要：目的：探究光动力疗法（PDT）对黑素瘤细胞B16-F10的迁移与侵袭作用机制。方法：选取黑色素瘤细胞B16-F10，体外传代培养，当细胞融合度≥80%时，孵育光敏剂，给予1mmol/L 5-氨基酮戊酸（5-ALA），之后进行红光（635 nm）照射实验，依据照射红光能量分为对照组（0 J）、观察1组（2.4 J）与观察2组（4.8 J）。对三组进行细胞划痕实验、Transwell实验及蛋白印迹检测。比较三组照射后划痕愈合率、侵袭细胞数量以及相关蛋白[Ki-67、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶9（MMP9）]相对表达量。结果：细胞划痕实验、Transwell实验表示，观察1组及观察2组的B16-F10划痕愈合率、侵袭细胞数目及Ki-67、VEGF、MMP9表达水平均低于对照组（P＜0.05），且观察2组上述指标均低于观察1组（P＜0.05）。结论：PDT可抑制黑素瘤细胞B16-F10的迁移及侵袭，临床可考虑采用该方式来提高黑色素瘤治疗效果。

简介：摘要目的探讨沉默三磷酸腺苷酶家族蛋白3A（ATAD3A）对黑素瘤A375细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法2019年8-12月在重庆市渝北区人民医院收集经病理确诊的3例黑素瘤患者的黑素瘤组织及癌旁组织，应用Western印迹检测ATAD3A在上述组织中的表达。分别采用沉默ATAD3A慢病毒和空载慢病毒感染黑素瘤A375细胞系，构建沉默ATAD3A（shATAD3A）实验组和空载对照（shCtrl）组，经实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和Western印迹验证干扰效率。采用CCK-8实验、克隆形成实验比较两组细胞的增殖能力和克隆形成能力，采用Transwell细胞侵袭实验、划痕实验比较两组细胞的侵袭、迁移能力，采用Western印迹检测两组细胞自我更新相关蛋白（NANOG、SOX2、OCT4）和侵袭、迁移相关蛋白[基质金属蛋白酶2（MMP2）、波形蛋白、SLUG]的表达水平。两组间各指标的比较采用独立样本t检验。结果Western印迹显示，相对于癌旁组织，ATAD3A在3例黑素瘤组织中高表达（t = 10.825，P < 0.001）。qRT-PCR和Western印迹显示，shATAD3A组A375细胞ATAD3A mRNA为0.230 ± 0.073，shCtrl组为1.000 ± 0.244，两组比较，t = 9.461，P < 0.001，蛋白表达水平分别为0.279 ± 0.267和0.867 ± 0.115，t = 8.595，P = 0.002，表明成功构建沉默ATAD3A的黑素瘤A375细胞系。克隆形成实验和CCK-8实验显示，shATAD3A组克隆形成率低于shCtrl组（22.667% ± 2.510%比43.667% ± 5.030%，t = 6.464，P = 0.003），且细胞增殖活性自第2天开始直至第4天均显著低于shCtrl组。划痕实验及Transwell细胞侵袭实验显示，与shCtrl组相比，shATAD3A组划痕愈合减慢，划痕愈合率自第12 h开始（32.920% ± 4.642%比49.302% ± 1.448%，t = 5.835，P = 0.004）至24 h明显降低，通过Transwell小室下室的侵袭细胞数减少（68.330 ± 13.050比234.330 ± 19.139，t = 12.411，P < 0.001）。Western印迹显示，shATAD3A组细胞NANOG、SOX2、OCT4、MMP2、波形蛋白、SLUG的表达水平均显著下降（P < 0.05或0.001）。结论ATAD3A在黑素瘤组织中高表达，沉默ATAD3A能抑制黑素瘤A375细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

简介：目的比较观察甘草黄酮、熊果苷对体外培养的B16鼠黑素瘤细胞黑素合成的影响。方法选择系列浓度梯度的药物作用于B16黑素瘤细胞株，测定细胞酪氨酸酶活性、黑素含量和细胞增殖率变化。结果在实验浓度时，甘草黄酮具有浓度依赖性黑素合成抑制作用，与熊果苷比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论两种化合物均显示有抑制黑素生成的作用，存在一定细胞毒性。

简介：摘要目的探讨自噬标志基因Beclin1过表达对黑素瘤SK-MEL-2细胞生物学行为的影响。方法Western印迹技术检测黑素瘤细胞A375、SK-MEL-2中Beclin1的蛋白表达水平，选取低表达Beclin1蛋白的SK-MEL-2细胞株作为研究对象，将细胞分为空白组、阴性对照组、实验组，空白组不作处理，阴性对照组转染pcDNA.3.1/myc-His（-）A，实验组转染pcDNA3.1-Beclin1质粒。培养一定时间后，采用CCK8法分析Beclin1对细胞增殖的影响；Transwell实验和细胞划痕实验观察Beclin1过表达对SK-MEL-2细胞侵袭和迁移能力的影响。采用重复测量方差分析和完全随机设计方差分析检验各组间的指标差异，组间比较采用LSD-t检验。结果SK-MEL-2细胞Beclin1蛋白相对表达水平（0.037 ± 0.010）显著低于A375细胞（0.670 ± 0.150），F = 46.62，P<0.05。实验组Beclin1蛋白相对表达水平（0.32 ± 0.04）显著高于阴性对照组（0.06 ± 0.02）和空白组（0.07 ± 0.02），均P<0.05。CCK8实验结果显示，不同组间、不同时间细胞增殖率差异均有统计学意义（F组间 = 1 077.36，F时间 = 4 903.04，均P<0.05），组别和时间之间有交互作用（F交互 = 205.20，P<0.05）。Transwell实验显示，24 h后实验组高倍（× 200）视野下穿过小室的细胞数（18.67 ± 1.19）明显低于阴性对照组（87.89 ± 6.05）和空白组（86.78 ± 5.93），均P<0.05；划痕实验中24、48 h时实验组细胞迁移距离均显著低于空白组和阴性对照组（P<0.05）。结论Beclin1过表达可显著抑制SK-MEL-2细胞的增殖、侵袭和迁移。

简介：摘要目的研究全反式维A酸（ATRA）对人恶性黑素瘤A375细胞中上皮-间质转化（EMT）相关分子表达的影响。方法用含10 μmol/L ATRA的DMEM培养基和DMEM培养基分别处理A375细胞24和48 h作为ATRA-1组和ATRA-2组、对照1组和对照2组，采用实时定量PCR法检测EMT相关基因上皮钙黏着蛋白、神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白mRNA的表达。Western印迹法检测ATRA-1组、ATRA-2组、对照1组中上述蛋白的相对表达量，直接免疫荧光法检测上皮钙黏着蛋白和波形蛋白的荧光强度。统计分析采用两因素方差分析、单因素方差分析及LSD-t检验。结果ATRA-1组和ATRA-2组分别与对照1组和对照2组相比，上皮钙黏着蛋白mRNA的表达均显著增加（F = 13.148、31.529，P < 0.05），而神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白mRNA的表达均显著降低（均P < 0.05）；ATRA-2组上皮钙黏着蛋白mRNA的表达显著高于ATRA-1组（F = 13.148，P < 0.05），而其他3种蛋白mRNA的表达显著低于ATRA-1组（均P < 0.05）；对照1组与对照2组上述蛋白的mRNA表达差异无统计学意义（均P > 0.05）。Western印迹法显示，与对照1组相比，ATRA-1组和ATRA-2组上皮钙黏着蛋白表达上调，而神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白表达均下调（均P < 0.05）；与ATRA-1组相比，ATRA-2组上皮钙黏着蛋白表达上调（P < 0.05），神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白表达下调（均P < 0.05）。直接免疫荧光显示，ATRA-1组、ATRA-2组上皮钙黏着蛋白的荧光强度（6.23 ± 0.08、10.37 ± 0.13）显著高于对照1组（2.37 ± 0.14，均P < 0.05），而波形蛋白的荧光强度（15.17 ± 0.18、10.29 ± 0.03）显著低于对照1组（50.16 ± 0.26，均P < 0.05），抑制上皮向间质转化。结论ATRA可上调A375细胞中上皮钙黏着蛋白的表达，降低神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白的表达，可能抑制A375细胞发生EMT现象。

简介：摘要目的研究银屑病患者皮损处中性粒细胞胞外诱捕网（NET）对角质形成细胞中黑素瘤缺乏因子2（AIM2）炎症小体的活化作用。方法收集2018年1 - 12月于第四军医大学西京皮肤医院就诊的进展期寻常型银屑病患者皮损与外周血标本各4份。另外收集4份健康对照皮肤组织标本和3份15岁以下儿童包皮环切术后的包皮标本。采用组织免疫荧光检测正常人皮肤及寻常型银屑病患者皮损处NET及AIM2表达情况。采用磁珠分选患者外周血中性粒细胞，提取NET结构。从包皮组织中分离原代角质形成细胞，分为4组，分别采用PBS（对照组）、NET提取物（NET组）、经DNaseⅠ处理的NET提取物（NET降解组）、DNaseⅠ（降解剂对照组）刺激细胞48 h，Western印记检测4组AIM2炎症小体及其下游分子的表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测NET组及对照组细胞培养上清液中白细胞介素1β（IL-1β）的浓度。采用单因素方差分析，组间两两比较采用Dunnett-t检验。结果银屑病皮损表皮处可见NET结构形成及AIM2的表达，而健康对照皮肤未见明显的结构或表达。Western印记显示，不同处理组细胞AIM2蛋白及下游分子IL-1β前体及IL-1β的蛋白相对表达水平差异均有统计学意义（F = 23.80、5.82、15.64，P < 0.001），NET组AIM2（1.42 ± 0.03）、IL-1β前体（1.32 ± 0.08）和IL-1β（1.40 ± 0.05）水平均高于对照组（t = 15.14、4.26、8.71，均P < 0.05），NET降解组AIM2（1.15 ± 0.07）、IL-1β前体（0.93 ± 0.03）和IL-1β（1.07 ± 0.05）水平与对照组差异均无统计学意义（t = 2.10、2.18、1.40,均P > 0.05）。NET组细胞上清液IL-1β浓度（13.15 ± 3.77 pg/ml）高于对照组（3.61 ± 0.20 pg/ml，t = 2.53，P < 0.05）。结论银屑病皮损表皮处存在NET，可能通过活化角质形成细胞AIM2促进IL-1β的剪切及分泌，加重银屑病的炎症进程，参与银屑病发生发展。

简介：摘要目的建立中国汉族女性转移性黑素瘤来源的黑素瘤细胞系，并研究其基本生物学特性。方法从1例17岁女性恶性黑素瘤患者腋窝淋巴结分离转移细胞体外培养，建立细胞系。通过短串联重复序列（STR）基因型检测对比细胞系与其来源组织信息，并检测基因突变情况；CCK8实验检测细胞增殖，软琼脂克隆实验检测细胞锚定非依赖性恶性增殖能力；染色体核型分析确定染色体数量及结构；以高侵袭性黑素瘤细胞系A2058、角质形成细胞系HaCaT细胞为对照，通过Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力差异，细胞免疫荧光和Western印迹检测黑素瘤特异性标记物HMB45、S100、Melan-A蛋白表达情况；通过裸鼠荷瘤，观察在体内的致瘤性。结果成功建立1株黑素瘤细胞株，命名为ZJMM-45，在超1年的时间中培养70余代次，显示出稳定的形态和增殖，细胞呈梭形、多角形，可产生黑素颗粒。STR匹配分析显示，样本ZJMM-45与患者冻存淋巴结组织匹配度96%，为同一来源。ZJMM-45细胞系存在肿瘤相关基因突变位点BRAFV600E（c.1799 T>A）；染色体核型分析显示，ZJMM-45细胞染色体多为三倍体，呈异常结构。ZJMM-45体外培养呈指数增长，至第5天达到平台期；在琼脂中呈克隆样生长并形成克隆球，显示出锚定非依赖性和恶性增殖能力。细胞免疫荧光和Western印迹结果显示，ZJMM-45与A2058细胞均表达HMB45、S100和Melan-A；Transwell实验显示，ZJMM-45侵袭、迁移细胞数量（300 ± 14、260 ± 14）均高于A2058细胞（150 ± 6、160 ± 19，t = 13.25、11.76，P < 0.001）。裸鼠荷瘤实验4周后5只小鼠均发展成内径为1.0 cm的肿瘤，病理组织学特征包括增殖性黑素瘤细胞核深染，形成小巢，与原实体瘤相似。结论成功构建1株来源于中国黑素瘤患者的转移期细胞系ZJMM-45，携带BRAFV600E突变，表达黑素瘤特异性标记物，在体外培养中有快速增殖、侵袭、转移等多种恶性特点，体内实验有明显致瘤性。

简介：摘要目的探讨载芬维A铵脂质体（4-HPR-L）对裸鼠皮下人恶性黑素瘤的抑制作用。方法采用薄膜-超声分散法制备4-HPR-L。通过皮下接种黑素瘤A375细胞至BALB/c裸鼠右侧腋窝建立黑素瘤荷瘤裸鼠模型。取10只荷瘤裸鼠模型，随机等分为两组，分别给予尾静脉注射同浓度细胞膜近红外荧光探针（DiR）溶液和DiR脂质体（DiR-L），应用小动物活体成像仪观察给药后6、12、24 h药物在体内分布情况。取30只荷瘤裸鼠，随机等分为3组，即对照组、4-HPR组和4-HPR-L组，分别经尾静脉每次注射5%（质量分数）葡萄糖溶液0.2 ml、25 mg/kg 4-HPR和4-HPR-L溶液，于接种A375细胞后第8、10、12、14、16、18、20、22天给药，动态监测给药后各组裸鼠的体重和肿瘤体积，观察生存情况。于末次给药后第2天处死裸鼠，取心、肝、脾、肺、肾及肿瘤组织，HE染色和免疫组化染色观察黑素瘤体内转移情况，并用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测肿瘤细胞凋亡情况。计量资料采用单因素方差分析和独立样本t检验进行分析。结果小动物活体成像仪显示，DiR-L能较长时间滞留于肿瘤组织，给药24 h后在肿瘤部位仍可观察到较强荧光；定量分析显示，肿瘤组织中DiR-L荧光强度（22.85 ± 1.66）显著高于DiR（8.45 ± 0.97，t = 12.957，P < 0.01）。与对照组和4-HPR组相比，4-HPR-L组末次给药后第2天离体瘤重明显降低（F = 27.055，t值分别为4.768、6.640，均P < 0.05）。HE染色显示，4-HPR-L组2只裸鼠发生肝脏转移，而对照组、4-HPR组全部裸鼠发生肝脏转移。荷瘤鼠的生存期观察显示，4-HPR-L组裸鼠于接种后76 d内全部死亡，对照组和4-HPR组分别于接种后56 d和59 d内全部死亡。对照组凋亡指数为（12.14 ± 1.33）‰，4-HPR组为（67.17 ± 15.18）‰，4-HPR-L组为（152.73 ± 11.27）‰，3组间差异有统计学意义（F = 167.588，P < 0.05），4-HPR-L组与对照组和4-HPR组相比，t值分别为18.162、11.075，均P < 0.05。结论4-HPR-L能够有效抑制裸鼠皮下黑素瘤体积增长和黑素瘤细胞转移，并延长裸鼠生存期。

简介：摘要目的探讨误诊皮肤黑素瘤的临床特点、误诊原因及防范措施。方法收集第四军医大学西京皮肤医院2005年1月至2019年12月临床初诊为其他疾病后经病理确诊为皮肤黑素瘤的患者资料，分析其临床表现、误诊原因。结果临床误诊的皮肤黑素瘤118例，男38例，女80例，误诊时中位年龄48岁，发病中位年龄40.5岁，病程中位数为54个月。皮损表现以黑色斑疹、丘疹为主。临床初诊为色素痣（53例，44.92%）、甲母痣（12例，10.17%）、脂溢性角化病（14例，11.86%）、血管肿瘤（10例，8.47%）、鳞状细胞癌（5例，4.24%）、基底细胞癌（4例，3.39%）、其他疾病（20例，16.95%）。按黑素瘤ABCDE法则（A：病灶不对称；B：边缘不规则，界限不清；C：颜色不均匀；D：直径> 6 mm；E：进展迅速），符合A 78例（66.10%）、B 64例（54.24%）、C 57例（48.31%）、D 66例（55.93%）、E 39例（33.05%），符合ABCDE 14例、ABCD 13例，13例均不符合。53例原位黑素瘤中，28例（52.83%）误诊为色素痣，11例（20.75%）误诊为甲母痣；65例浸润性黑素瘤中，25例（37.88%）误诊为色素痣，9例（13.64%）误诊为血管肿瘤，5例（7.58%）误诊为鳞状细胞癌。67例误诊患者有送检医师信息，42例的医师出诊年资≤ 5年；27例至少符合ABCD的患者中，9例有送检医师信息，其中7例的医师出诊年资≤ 5年。结论皮肤黑素瘤皮损形态多样，易误诊，临床医生经验和是否遵从"ABCDE"标准甄别非常重要。

简介：摘要黑素瘤是高度恶性的免疫原性肿瘤，尽管以免疫检查点抑制剂为代表的免疫治疗可显著提高转移性黑素瘤患者的生存率，但仍有近半数患者对免疫治疗产生耐受和抵抗，且免疫相关不良反应发生率高。本文聚焦目前黑素瘤免疫治疗存在的耐受、抵抗及免疫相关不良反应等关键难点，总结相应的对策与研究进展。通过干预黑素瘤免疫抑制性微环境、筛选精准的生物标记物及优化免疫治疗联合策略等能够帮助解决免疫治疗耐受和抵抗的问题，同时传统免疫治疗与纳米技术的结合也可大幅减少免疫相关不良反应的发生。未来，对肿瘤免疫微环境更为广泛和深入的研究将有助于探索黑素瘤免疫治疗的最佳方式。

简介：无

简介：摘要黑素瘤是一种侵袭性很强的皮肤恶性肿瘤，具有快速生长和早期转移的特点，目前的治疗仍以手术切除为主。黑素瘤在早期诊断、彻底切除方面仍然存在一些挑战，影响患者的预后。目前荧光探针在黑素瘤的诊断、手术切除、前哨淋巴结定位及切除等方面均取得长足的进步，具有化学稳定性好、不良反应少、特异性高、准确率高、可视化等优点，可为黑素瘤的诊治提供新的思路。