简介：姚开虎副研究员非常高兴邀清到意大利佛罗伦萨大学附属AnnaMeyer儿童医院ChiaraAzzari教授来北京儿童医院做学术访问，在您的“侵袋性细菌感染的分子学诊断：一个有川的临床一具”的报告中谈到采用分子诊断方法评估意大利肺炎链球菌疾病负担的工作，这些经验对中国开展相关工作具有很好的借鉴意义。

简介：摘要目的对桂林市一起旅游团体腹泻疫情进行诺瓦克病毒Ⅰ型(NVGⅠ型)和Ⅱ型（NVGⅡ型）检测分型，为疫情处理及时做出准确的判断。方法用实时荧光探针（RT-PCR）方法对腹泻病人样本的特异引物进行核酸扩增检测。结果通过用实时荧光PCR法对28份样品进行快速检测，NVGⅠ型阳性6份（21.4﹪），NVGⅡ型阳性3份（10.7﹪），NVGⅠ型和NVGⅡ型同时阳性1份（3.6﹪），阴性19份（67.9﹪）。结论实时荧光PCR在诺瓦克病毒检测中能起到快速、准确和高灵敏的效果，对病人病情的及时诊断治疗和对突发疫情的快速控制和处理起到了积极的作用。

简介：摘要目的开发一次试验即可明确是否有肺炎支原体感染及所感染的肺炎支原体是否耐药的检测试剂。材料与方法本试剂盒以PAGE纯化的引物、HPLC纯化的Taqman水解探针以及基因工程表达的热启动Taq酶作为主要扩增体系组分。结果初步的临床实验结果证明，该试剂组分对痰液样本内肺炎支原体的检测灵敏度是94.93%，特异度是97.17%。结论该试剂相关性能达到了国内临床诊断试剂所要求的主要性能指标。

简介：病毒的紧张的坏死(VNN)在海洋的鱼引起高死亡，特别在grouper，全球并且在中国。因为没有有效疫苗或药处理VNN，早察觉和预防是重要的堵住它的爆发。在这研究，反向的抄写聚合酶链反应(RT-PCR)为VNN病原体的快速、方便、敏感的察觉被开发，紧张的坏死病毒(NNV)，在grouper。整个过程从RNA抽取在3.5h以内被完成到PCR产品可视化。这个方法的察觉限制是NNVRNA标准的200个拷贝，它对应于病毒粒子的200个拷贝。这个RT-PCR方法对NNV察觉没有特定对另外的鱼跨反应病毒的疾病病原体例如传染胰腺的坏死病毒(IPNV)，传染造血的坏死病毒(IHNV)，鲤鱼病毒(SVCV)的春天viraemia，流行于家畜的造血的坏死病毒(EHNV)，并且大黄croakeriridovirus(LYCIV)。与这个方法，看到橘子的grouper(Epinepheluscoioides)从育种站与或没有在福建省的VNN流行病的发生的油炸食品被检测。结果都显示出那或当从没有VNN的二个育种站的40%油炸食品或25%流行病也作为NNV被检测时，从有流行病的发生的二个育种站的93%油炸食品作为积极被诊断积极，显示这个RT-PCR方法能被用于快速，NNV感染的敏感察觉并且在VNN流行警戒适用。

简介：摘要目的通过对我院529例婴幼儿（RT-PCR）检测结果进行分析,了解广州市番禺区手足口病的流行状况，为手足口病预防和控制提供实验依据。方法收集2012年529例疑似手足口病症状的婴幼儿咽拭子标本，采用(RT-PCR)对手足口病病毒RNA，EV71,EV,CA16进行定性检测。应用卡方检验对不同年龄段婴幼儿CA16,EV71,其他EV结果进行比较。结果在529例患者咽拭子中，305例检测结果阳性,总阳性率为57.66%,其中EV71阳性88例,占总阳性率的28.85%,CoxA16阳性50例，占总阳性率的16.39%，其它肠道病毒阳性为167例，占总阳性率的54.75%。结论2012年广州市番禺区手足口病原以其他型肠道病毒感染为主。

简介：摘要目的通过观察我院收治的对宫颈病变患者的临床诊断资料，探讨分析采用实时荧光PCR检测高危型HPV的价值。方法对我院收治的158例宫颈病变患者患者，进行实时荧光PCR检测，分析检测结果，并与第2代杂交捕获法(HC-Ⅱ)的检测结果对比。结果HPV在宫颈癌患者阳性表达率达90%以上,与HC-Ⅱ相比，差异无统计学意义；PCR检测宫颈病变与HC-Ⅱ的检测结果的阳性率分别为74.7%与70.9%，差异无统计学意义（P>0.05）；但两种方法检测HSIL的HPV阳性率明显高于宫颈炎症、湿疣（P<0.01），除LSIL外，其他病变中的PCR检出率均略高于HC-Ⅱ。结论采用实时荧光PCR检测高危型HPV，可用于确诊患者是否患有宫颈癌，提示高危型HPV感染与宫颈病变、宫颈癌发生有一定的相关性，值得进一步推广与应用分析。

简介：目的建立能快速准确检测发热病人咽拭子样本中2013新型H7N9禽流感病毒的四重RT—PCR方法。方法针对甲型流感病毒的M基因设计通用引物，针对2013新型H7N9禽流感病毒的HA和NA基因设计特异性引物，选择人源看家基因beta—aetin设计质控引物，通过优化实验条件建立一步法四重RT—PCR反应体系。与商品化实时荧光RT—PCR试剂盒进行方法比对。结果成功建立四重一步法RT—PCR筛查2013新型H7N9禽流感病毒的检测技术。结论该方法简便、实用、成本低廉，适用于2013新型H7N9禽流感病毒的快速检测。

简介：目的：探讨PCR＋膜杂交法CT／UU／NG三联检测在临床性病筛查中的应用价值。方法：分别采用PCR＋膜杂交法和实时荧光PCR法检测CT、UU、NG，并分析比较两种方法的一致性以及相关性。结果：PCR反向膜杂交法和实时荧光PCR法的CT、UU、NG的筛查结果接近（P〉0．05），而男女筛查结果差异较大（P〈0．05）。结论：PCR反向膜杂交法操作简便，筛查快速、准确，有与实时荧光PCR法相当的检测准确性，具有较高的临床应用价值，值得在临床中推广应用。

简介：摘要目的检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA拷贝数，分析乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)与血清免疫标志物的关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清样本中HBV-DNA含量；同时酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBV血清标志物(HBVM)，并对检测结果进行分析。结果在HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)组(大三阳组)和HBsAg(+)HBeAg(+)组HBV-DNA阳性率分别为96.1%（298/310）和96.6%（28/29），病毒含量为1.85×108copies/ml；HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)组(小三阳组)和HBsAg(+)HBcAb(+)组患者血清HBV-DNA阳性率分别为44.2%(80/181)和82.9%（31/41），病毒含量为4.8×106copies/ml。血清中HBeAg与HBVDNA含量密切相关。结论荧光定量PCR在乙肝的诊断、判断传染性强弱及评价抗病毒治疗效果方面具有较大的临床应用价值。

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简介：摘要目的观察rt-PA溶栓后凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)的变化。方法搜集接受rt-PA治疗的32例患者溶栓前及溶栓后2h、8h、24h凝血参数值。结果溶栓前凝血参数均在正常范围，溶栓2h后PT、APTT、TT均延长，FIB降低，溶栓8h后TT仍延长，FIB仍降低，24h后无明显差异。结论rt-PA溶栓后PT、APTT、TT、FIB均有变化。

简介：摘要目的（1）比较rt-PA静脉溶栓治疗组的疗效和安全性；（2）比较rt-PA静脉溶栓治疗病例中3h与3h-6h两个时间窗亚组的疗效和安全性差别；方法23例发病时间<4.5h的急性脑梗死患者接受rt-PA静脉溶栓治疗,剂量(0.6～0.9)mg/kg。溶栓前及溶栓后2h、24h及7d接受美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分,3个月接受改良Rankin评分,并观察安全性。结果溶栓后7d的NIHSS评分较基线值显著改善(P=0.04),20例完成3个月MRS评估者中,0～1分7例,死亡2例,为症状性脑出血患者。NIHSS评分高(P=0.002)及完全前循环梗死型(P=0.01)者易发生症状性脑出血。结论早期静脉溶栓治疗急性脑梗死能改善患者的远期预后。

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简介：目的建立梅毒螺旋体的荧光定量PCR检测方法。方法依据梅毒螺旋体（Treponemapallidum，TV）DNA多聚酶I（polA）基因序列，设计MGB—Taqman探针和PCR引物，对TPPA法检测到的不同国家和人种梅毒螺旋体抗体阳性患者和阴性人员血液样本进行检测，验证该PCR方法的灵敏度和特异性，以及2种检测方法的一致性。结果PCR产物测序证实新建的荧光PCR方法可以扩增到梅毒螺旋体polA基因区200bp长DNA片段。该方法特异性强、灵敏度高，可检出每微升血液中10拷贝梅毒DNA。在31例TPPA法检测结果为阳性的样本中，有21例为PCR阳性。证明其中10例TPPA法阳性为非现行感染，可能不具有传染性。统计分析表明该荧光PCR方法与TPPA方法对不同国家和种族人群检测结果未出现显著差异。结论新建的荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好，可排除TPPA法阳性梅毒患者中非现行感染的旅行者，是适用于不同地区和种族的旅行者进行梅毒检测的新方法。

简介：分析传统会计控制提供信息滞后性的缺陷，提出建立ERP环境下实时会计控制的设想：借鉴企业流程再造的思想。以ERP建立的实时信息平台为基础，配合再造会计业务流程实现实时会计控制。同时根据需求导向、财务业务协同和成本效益3个会计业务流程再造的原则，描述了再造之后ERP环境下的会计业务流程。

简介：目的建立基于TaqMan探针技术的皮炎外瓶霉荧光定量PCR检测方法.方法通过对皮炎外瓶霉ITS区域基因组序列（GenBank：JN675373.1）进行分析,设计合成特异性引物和荧光标记探针,优化荧光定量PCR反应条件.以临床标本中分离的皮炎外瓶霉为阳性菌株,及其他种类真菌和细菌作为阴性对照菌株,从特异性、敏感性及重复性方面对该方法检测效果进行评价.结果该研究设计的引物和探针能扩增皮炎外瓶霉特异性序列.临床分离得到的皮炎外瓶霉在反应中有明显扩增曲线,而甄氏外瓶霉、棘状外瓶霉、烟曲霉、白色念珠菌、新生隐球菌、马内菲青霉等20株菌在CT值≤38范围内均未有扩增;利用基因重组构建的标准品完成了标准曲线的绘制,在1.0×103～1.0×107拷贝数（Cp）内具有良好的线性关系（R2=1.000）,最低可检出量为10Cp/μL.结论成功建立了荧光定量PCR检测皮炎外瓶霉方法,该法特异度强、敏感度高、重复性好,将有助于临床皮炎外瓶霉感染的早期诊断和针对性治疗.

简介：犬细小病毒病感染是由犬细小病毒（cPv）引起犬只死亡的最重要传染病之一，目前诊断该病的方法主要是胶体金快速检测试板法，虽然检测方法较简便快速，但其敏感性较差。通过对NCBI网站GenBank发表的CPV-2基因组序列的分析，选择该病毒VP2基因保守序列设计引物，通过对阳性病料扩增及扩增产物测序，与NCBI发表的相关基因对比，同源性在99．8％-100％，成功建立了特异性、灵敏度高的PCR方法，最低只需2．5PgDNA模板。在对28例可疑CPV病例检测中，本方法检出25例阳性、3例阴性，阳性率为89．28％；胶体金检测板检测出20例阳性、8例阴性，阳性率为71．42％，证实PCR方法比胶体金检测更敏感。

简介：据中国医药网消息今年6月，上海的医联网将覆盖全市所有层级的全部医院，医院的任何经营管理和诊疗业务将被纳入实时监控。

简介：摘要目的自制临床基因扩增实验室HBVDNA检测的室内质控品并对其应用进行评价。方法将试剂盒自带的弱阳性对照品、自制未灭活质控血清、自制灭活质控血清作为室内质控品的选择对象，每天与样本一起检测，连续30天，通过不精密度、L-J质控图，t检验，单因素方差分析来评价三者哪一个更适合基层医院PCR实验室作为室内质控品。结果弱阳性对照品检测结果日间不精密度为7.72%,未灭活自制质控血清检测结果日间不精密度为2.92%,灭活自制质控血清检测结果日间不精密度为3.70%；灭活与未灭活自制质控血清配对t检验,t=-0.860，P=0.397，P＞0.05，两组检测结果无显著性差异；对灭活前后两组数据进行单因素方差分析，F=0.901，P=0.346，P＞0.05，两组检测结果均值无显著性差异；SPSS17.0统计学软件绘制弱阳性对照品、未灭活自制血清质控品L-J质控图11月份30天的变化情况。结论自制质控血清无需灭活及其他特殊处理，完全能够满足PCR实验室室内质量控制的需要。