简介：受体酪氨酸蛋白激酶是细胞信号转导进行的关键信号酶，在生长因子调控细胞生长、发育与功能的过程中起着重要的生理作用。本文主要介绍生长因子受体酪氨酸蛋白激酶的分类、结构与功能及其部分相关信号转导机制的研究进展。

简介：目的：对一例酪氨酸血症患儿进行临床表现和基因突变的分析。方法：采用血氨基酸液相色谱-串联质谱法和尿液有机酸气相色谱-质谱分析患儿血尿代谢情况,采用PCR和一代测序技术分别对患儿的FAH基因和HPD基因的外显子及其旁翼区进行序列分析。结果：检测出先证者血液中酪氨酸水平为404.6μM、甲硫氨酸（Met）水平为126.4μM、苯丙氨酸（Phe）水平为514.8μM,三者浓度均明显高于正常水平;尿液中检测出4-羟基苯乙酸（＋）、4-羟基苯乳酸（＋）和4-羟基苯丙酮酸（＋＋）;基因序列分析FAH基因未见异常,HPD基因上发现突变位点c.G97A（p.A33T）。结论：根据患儿的临床表现及血尿代谢检测结果,提示患儿为酪氨酸血症患者,进一步的基因检测结果提示患儿可能为罕见的Hawkinsinuria症。

简介：目的：分离羽衣甘蓝S13-b位点受体激酶（SRK13-b）基因并进行序列及结构域分析，构建SRK13-b结构域的原核表达载体并进行重组蛋白质的原核表达和纯化。方法：提取羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系花期柱头的RNA，用RT-PCR法分离SRK13-b基因；将编码SRK13-b激酶结构域的序列插入大肠杆菌表达载体pET-14b中，构建原核表达质粒pET-SRK13-bCT，转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS菌株，经0．1mmol／LIPTG诱导，用Ni—NTA亲和层析柱对SRK13-b激酶结构域蛋白进行纯化。结果：分离获得羽衣甘蓝SRK13-b基因的长度为2571bp，编码856个氨基酸，GenBank收录号为EU180597；对SRK13-b激酶结构域蛋白进行诱导表达及纯化，SDS—PAGE显示相对分子质量约43×10^3的蛋白质特异表达，对表达产物进行分离纯化，获得了SRK13-b激酶结构域的融合蛋白。结论：羽衣甘蓝SRK13-b基因的克隆及激酶结构域的原核表达，为研究SRK的功能及自交不亲和性奠定了基础。

简介：IKK复合物由IKKα、IKKβ和IKKγ组成，是NF-κB通路中的重要分子，主要调控NF-κB通路的活化。近年的研究发现，IKK复合物还存在许多NF-κB非相关性的功能，主要涉及肿瘤发生、应激反应、转录调控、免疫功能及细胞周期调控等方面。IKK复合物的NF-κB非相关性的功能研究集中于IKKα和IKKβ亚基，并且存在激酶活性依赖和非依赖2种作用方式。对于该功能的深入探讨，对全面理解IKK分子的生理病理功能十分重要，并且为IKK分子的研究提出了一个新的方向。

简介：目的:结合临床分析肌酸激酶(CK)升高的原因,提高对CK的认识。方法:对我院生化检查CK升高患者结合临床资料进行分析。结果:感染、缺氧、低钾血症、心肌损伤、各种肌肉损伤、药物均能导致肌酸激酶升高。结论:临床医生在应用CK诊断疾病时,应结合临床症状及其他医技检查结果谨慎做出判断。

简介：目的：构建带Myc标签的LC3B—PLA2基因的真核表达质粒，获得LC3B—PLA2融合蛋白，并应用LC3B—PLA2研究Atg4B对LC3B的切割作用。方法：以本实验室保存的乳腺文库为模板，PCR扩增获得LCgB序列，与PLA2G]O拼接后插入pCMV—Myc载体，用构建的重组质粒转染HEK293T细胞，Western印迹检测融合蛋白的表达，用LC3B—PLA2与Atg4B共转染的方法检测Atg4B对LC3B的切割作用。结果：菌液PCR、重组质粒双酶切及测序均表明重组质粒构建成功，Western印迹结果表明融合蛋白在HEK293T细胞中获得表达，LC3B—PLA2真核表达蛋白能够应用于Atg4B对LC3B切割作用的研究。结论：构建了pCMV—Myc—LC3B—PLA2真核表达质粒，LC3B—PLA2融合蛋白在Atg4B对LC3B切割作用的研究中至关重要，为进一步研究Atg4B在自噬过程中的作用奠定了基础。

简介：

简介：Uponencounteringtheantigen(Ag),theimmunesystemcaneitherdevelopaspecificimmuneresponseofenteraspecificstateofunresponsiveness,tolerance.TheresponseofBcellstotheirspecificAgcanbeactivationandproliferation,leadingtotheimmuneresponse,oranergyandactivation-inducedcelldeath(AICD),leadingtotolerance.AICDinBlymphocytesisahighlyregulatedeventinitiatedbycrosslinkingoftheBcellreceptor(BCR).BCRengagementinitiatesseveralsignalingeventssuchasactivationofPLCγ,Ras,andPI3K,whichgenerallyspeaking,leadtosurvival.However,intheabsenceofsurvivalsignals(CD40orIL-4Rengagement),BCRcrosslinkingcanalsopromoteapoptoticsignaltransductionpathwayssuchasactivationofeffectorcaspases,expressionofpro-apoptoticgenes,andinhibitionofpro-survivalgenes.ThecomplexinterplaybetweensurvivalanddeathsignalsdeterminestheBcellfateand,consequently,theimmuneresponse.

简介：目的：选择发酵系统中各可控因素的最佳水平组合，从而减少各种干扰的影响，以获得稳健的赖氨酸产量。方法：利用田口法的内外表与Box性能规则优化赖氨酸发酵条件。结果：通过实验得知，转速、硫酸铵和葡萄糖浓度对发酵影响较大；结果稳定的最优发酵条件为初始葡萄糖浓度为80g/L、硫酸铵浓度为42g/L、转速为225r/min、初始pH值为6.7、接种量为8%。经实验验证，最优化发酵条件是低灵敏度的，最优目标值比较稳健。在10L自动发酵罐上培养65h，L-赖氨酸盐酸盐的产量为165.68g/L，比优化前提高了12.4%。结论：基于稳健性设计所得的最优发酵条件参数，可使目的产物产量稳定，便于生产操作。

简介：目的:悬浮细胞的转染较贴壁细胞存在一定难度,用多聚赖氨酸包被的细胞培养板培养悬浮细胞使其贴壁,用脂质体2000按照贴壁细胞转染的方法转染悬浮细胞,提供一种高效的转染悬浮细胞的方法。方法:悬浮细胞Jurkat或CCRF-CEM培养于包被了0.1mg/mL多聚赖氨酸的细胞培养板,16h后洗掉未贴壁的细胞,用脂质体2000分别将pWPXLd质粒或靶向人ABL1基因的小干扰RNA(siRNA)转染细胞,24h后于荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,鉴定质粒的转染效率,或用Western印迹鉴定siRNA的干扰效率。结果:pWPXLd成功转染2种细胞,siRNA成功抑制了ABL1的表达。结论:质粒和siRNA均能成功转染,提供了一种高效可行的转染悬浮细胞的方法。

简介：天冬氨酸蛋白酶是主要的蛋白水解酶之一,广泛存在于细菌、真菌、动物和植物中。近年来,对植物天冬氨酸蛋白酶的结构及功能研究有了一些进展。本文简要总结了植物天冬氨酸蛋白酶的结构,典型的植物天冬氨酸蛋白酶的加工产生成熟过程,植物天冬氨酸蛋白酶在植物生物胁迫、非生物胁迫、种子萌发、有性生殖过程及植物衰老等方面的功能。

简介：ApoptosisproducedinBcellsthroughFas(APO-1,CD95)triggeringisregulatedbysignalsderivedfromothersurfacereceptors:CD40engagementproducesupregulationofFasexpressionandmarkedsusceptibilitytoFas-inducedcelldeath,whereasantigenreceptorengagement,orIL-4Rengagement,inhibitsFaskillingandinsodoinginducesastateofFas-resistance,eveninotherwisesensitive,CD40-stimulatedtargets.SurfaceimmunoglobulinandIL-4RutilizeatleastpartiallydistinctpathwaystoproduceFas-resistancethatdifferentiallydependonPKCandSTAT6,respectively.Further,surfaceimmunoglobulinsignalingforinducibleFas-resistancebypassesBtk,requiresNF-κB,andentailsnewmacromolecularsynthesis.TerminaleffectorsofBcellFas-resistanceincludetheknownanti-apoptoticgeneproducts,Bcl-XLandFLIP,andanovelanti-apoptoticgenethatencodesFAIM(FasApoptosisInhibitoryMolecule).faimwasidentifiedbydifferentialdisplayandexistsintwoalternativelysplicedforms;faim-Sisbroadlyexpressed,butfaim-Lexpressionistissue-specific.TheFAIMsequenceishighlyevolutionarilyconserved,suggestinganimportantroleforthismoleculethroughoutphylogeny.InducibleresistancetoFaskillingishypothesizedtoprotectforeignantigen-specificBcellsduringpotentiallyhazardousinteractionswithFasL-bearingTcells,whereasautoreactiveBcellsfailtobecomeFas-resistantandaredeletedviaFas-dependentcytotoxicity.InadvertentoraberrantacquisitionofFas-resistancemaypermitautoreactiveBcellstoescapeFasdeletion,andmalignantlymphocytestoimpedeanti-tumorimmunity.

简介：<正>ThesusceptibilityofprimaryBcellstoFas(APO-1,CD95)-mediatedapoptosisisregulatedbysignalsderivedfromadditionalsurfacereceptors.CD40engagementproducesupregulationofFasexpressionandinducesmarkedsensitivitytoFas-inducedcelldeath,whereasBcellantigenreceptor(BCR)engagementinhibitsFaskillingandtherebyproducesFas-resistance,eveninotherwisesusceptible,CD40-stimulatedtargets.BCRsignalingforinducibleFas-resistancedevelopsoveraperiodof12hoursanddependson

简介：根据转录组测序获得的钙依赖蛋白激酶基因的EST序列设计特异引物,利用RT-PCR和RACE技术从油菜中克隆获得BnCDPK1基因全长序列,NCBI登录号为KF740477,其cDNA和gDNA全长分别为2115bp和2857bp,含有11个内含子和12个外显子。生物信息学分析表明其开放阅读框为1581bp,编码527个氨基酸,具有CDPKs家族典型的特征,含有1个激酶区域和4个钙离子手型结构域,与拟南芥AtCDPK28同源性最高,属于第Ⅳ亚家族。BnCDPK1在油菜的根、茎、叶、花、种子中均有表达,但表达丰度存在差异,叶片中表达量最高,其次为茎、根和种子,花中的表达量最低;在高抗和高感油菜品种中,菌核菌胁迫均能够诱导BnCDPK1上调表达,但是高抗品种比高感品种反应更迅速,表达量更高。接种前、接种后12h、接种后24h,高抗品种的表达量相比高感品种分别提高1.4倍、4倍和3倍,推测其可能参与油菜的生长发育以及油菜对菌核菌侵染的应答和防御反应。

简介：蛋白激酶C(PKCs)最早是由Nishizuka等人于1977年在鼠脑中发现。迄今为止，人们通过分子克隆及酶学分析等已发现了14种PKCs同工酶(亚型)，它们广泛地分布于生物体内的各种组织，其中以神经组织含量最为丰富。PKCs不同亚型可使不同的底物蛋白磷酸化和

简介：利用基因工程表达的志贺毒素Ｂ亚基纯化产物研究志贺毒素的分子组装机理。首先对ＳｔｘＢ进行了分离纯化，并将蛋白质纯品溶解在磷酸缓冲液中。利用蛋白质交联的方法证实，在磷酸缓冲液体系中ＳｔｘＢ可以自发聚合为不同的分子结构形式（单体至五聚体），并可以与游离和细胞膜表面的受体结合，对志贺毒素全毒素的细胞毒性有竞争抑制作用。结果表明，在没有Ａ亚基存在的情况下，单独的ＳｔｘＢ也可以自发组装为多聚体，说明ＳｔｘＢ具有自身组装的能力。

简介：被象染色体冷凝作用，面向双性人的锭子形成，染色体大会离子，分离和胞质分裂那样的一系列紧安排的事件精确通过有丝分裂调整。染色体运动被和位于着丝点以内的一个专业化染色体领域的锭子微导管的相互作用在有丝分裂期间管理。这个专业化区域，叫了kinetochore，是为锭子微导管着丝点的地点协会。除了用作在染色体和锭子微导管之间的一个物理连接，kinetochore通过微导管马达和定位在或在它附近的锭子集会检查点(囊)传感器在chromosomal分离展出一个活跃角色[例如，1]。

简介：CIPK蛋白激酶家族（CBL-interactingproteinkinase）是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,与类钙调磷酸酶B亚基CBL（calcineurinB-likeprotein）蛋白共同形成CBL-CIPK网络,在植物的生长发育和逆境胁迫响应过程中发挥重要作用。烟草中该家族的研究还比较少,本研究从林烟草（Nicotianasylvestris）中获得一个CIPK家族基因,该基因与拟南芥和杨树中的CIPK3同源性分别为68.4%和87.5%,将其命名为NsylCIPK3。氨基酸序列分析表明,NsylCIPK3具有CIPK蛋白家族的典型结构特征,在N端和C端分别具有典型的激活环结构域和NAF结构域。进化树分析显示,NsylCIPK3属于CIPK蛋白亚家族Ⅱ。表达模式研究表明,该基因在林烟草的叶和腋芽中的表达量相对较高,在主根中的表达量次之,在侧根、茎、花瓣和萼片中的表达量相对较低,并且在烟草成熟期的叶中表达量明显升高。在高盐、紫外光和低钾胁迫下该基因的表达发生不同程度的上调。酵母双杂交结果显示,NsylCIPK3可与NsylCBL9互作。推测NsylCIPK3可能通过与NsylCBL9互作形成信号通路,激活下游靶蛋白,参与烟草响应非生物逆境胁迫的信号转导过程。

简介：脑和心脏等重要器官的缺血，低氧损伤可导致患者语言障碍、瘫痪、意识丧失及死亡等一系列严重后果，因此一直是基础医学研究和临床治疗的重点。1986、1990年，美国学者Murry和日本学者Kitagawa等分别在心脏和脑发现了一种内源性保护机制，即缺血，低氧预适应现象（I／HPC），为临床治疗中风等缺血／低氧性疾病开辟了新的道路。因此，对I／HPC机制的研究，尤其是对参与I／HPC形成的细胞信号传导通路的研究，已成为近年的研究热点。本文就蛋白激酶C家族（PKCs）在缺血广低氧损伤和预适应形成中作用做一简要概述。

简介：研究在BEP2D细胞中，作为Smads蛋白家族的抑制分子，Smad7对胞外信号调节的蛋白激酶(ERK1／2或p44／42)磷酸化水平的调控。将Smad7真核表达载体或人工合成的Smad7-siRNA转染BEP2D细胞，TGF—β刺激，通过Western印迹检测Smad7对p44／42蛋白磷酸化的影响。结果在永生化BEP2D细胞中，TGF-β1刺激后5min开始，可以检测到磷酸化的p44／42；到60min达到高峰，之后逐渐降低。细胞转染Smad7，TGF-β作用60rain后，p44／42磷酸化水平明显增高；而转染Smad7-SiRNA，TGF-β作用60min后，p44／42磷酸化水平显著降低。p44／42蛋白水平基本上不受TGF—β1刺激及Smad7表达水平的影响。以上结果说明，在BEP2D细胞中，Smad7可参与TGF—β对ERK／MAPK通路的活化作用。