简介:菜薹原产中国,是华南地区重要的特产蔬菜之一。目前,分子标记技术已广泛应用于多种作物研究,但在菜薹上的应用研究刚刚起步。ISSR主要是由单一引物且以重复序列为主要引物序列的PCR标记,其反应条件受模板DNA、TaqDNA聚合酶、Mg2+、dNTP和引物等因素的影响。正交试验设计能明确各因素间的互作效应,建立最优化的反应体系。本研究利用正交试验设计,从TaqDNA聚合酶、dNTP、引物、Mg2+4种因素3个水平对菜薹ISSR反应体系进行了优化,确立了适合菜薹的ISSR反应体系并在7个菜薹品种中进行了验证。在20μl反应体系中,含TaqDNA聚合酶1U、dNTP250μmol/L、引物0.25μmol/L、1×PCRbuffer、Mg2+2.5mmol/L、模板DNA30ng。通过梯度PCR测验,确定了适宜的退火温度。这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行菜薹种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。
简介:为了提高抗病性分子标记检测的效率,为番茄病害检测及多抗品种选育提供技术依据,本研究通过改良CTAB法、96孔深孔板快速提取番茄微量叶片DNA;利用抗根结线虫病Mi标记,在L16(45)正交设计试验基础上,采用直观量化分析和方差分析两种方法,对番茄实用化PCR分子标记PCR反应的5个因素(引物,Mg2+,dNTPs,模板DNA和Taq酶)进行优化;随后分别筛选黄化曲叶病毒病、烟草花叶病毒病、根结线虫病、枯萎病、叶霉病和颈腐根腐病6种病害的8个实用化PCR分子标记PCR程序的退火温度;并对循环次数进行筛选;最后利用优化后的PCR体系与程序对供试的1442份番茄材料(包括番茄种质资源,群体材料,组合及品种)进行抗病性鉴定。结果表明番茄实用化PCR分子标记的PCR最佳反应体系(20μL)为引物0.5μmol/L、Mg2+1.5mmol/L、dNTPs0.3mmol/L、DNA480ngDNA、聚合酶1.0UTaq;PCR程序中8个分子标记共同最适退火温度为56℃,最佳循环次数为33次;筛选出585份多抗(含2种以上的抗病基因)番茄材料,可作为中间材料或亲本材料进行多抗品种选育。该实用化PCR分子标记的PCR体系的建立为番茄利用抗病基因分子标记检测与筛选多抗种质资源、品种或群体材料提供了标准化的程序。
简介:Ⅰ农户经营模式下发展农机社会化服务的必要性经济体制改革后,农村普遍实行了家庭联产承包责任制。这一制度创新克服了在集体经营条件下的平均分配制度和管理成本高,所带来的农民生产积极性低和集体、个人经济效益差的问题。在责任制实施之初的头几年,农民生产积极性极大高涨,粮食生产大幅度提高。但在几年之后,由于粮食价格增长幅度低于工业农用产品(化肥、农药、生产工具等)的增长幅度,农民常常会遇到增产不增收的情况。并且由于土地狭窄,从事粮食生产规模过小,商品率低,生产严重不经济,导致农民从事粮食生产的积极性下降。再加上农业以外产业经济迅猛发展,使从事农业生产,特别是粮食生产的机会成本增大。农民作为追求收益最大化的经济主体,在发现进行粮食生产不能实现致富之梦后,就会不断地调整生产
简介:近年来,柿树岗乡农机化工作在县农机局的正确领导和上级业务主管部门的大力支持下,认真组织开展"兴机富民"工程,以加强农机社会化服务体系建设为重点,解放思想,勇于创新,逐步把农机管理职能转变为为农机户服务和创造良好发展环境上来,用部门