简介：木糖还原酶是酵母代谢木糖发酵的关键酶之一。根据已报道的木糖还原酶基因的全序列设计引物,从休哈塔假丝酵母中克隆得到1110bp大小的片段。将木糖还原酶基因亚克隆到酿酒酵母的整合表达载体p406ADH1中,醋酸锂转化法将线性化重组质粒pYX-AK-xyl1转化到酿酒酵母W5,对阳性转化子进行酶活测定,结果表明,以辅酶DANH和NADPH为底物诱导,转化子均表现出活性,酶活分别为6.513U/mg和7.080U/mg,是受体菌W5酶活的1.4倍（NADH）和1.3倍（NADPH）,其酶活比为0.919。

简介：维生素A、D是基因表达的重要调节物。本文在介绍基因表达过程的基础上，综述了维生素A及维生素D对相关基因表达调控的主要机制及其结构和生理功能。

简介：为探究荧光素酶编码基因表达产物发光特性,以青海弧菌基因组为模版扩增得到luxCDABE基因,构建表达载体pHSG396-luxCDABE。将载体导入大肠杆菌Top10,成功获得表达菌株Top10/pHSG396-luxCDABE（T-pluxCDABE）,测定重组菌株的表达活性,与实验室构建的菌株Top10/pHSG396-luxAB（T-pluxAB）发光情况进行比较。

简介：生物发光标记以其可视化,便捷,快速,灵敏,可用于活体研究等诸多优点越来越多地应用于科学研究中。本研究通过CaCl2方法将实验室构建的带有青海弧菌荧光素酶基因luxAB的重组质粒导入大肠杆菌Top10中,利用酶切和核酸电泳检测荧光素酶基因的存在,利用SDS-PAGE检测荧光素酶表达的情况,然后对其表达条件进行优化。单因素试验结果表明：在培养基初始pH值6.0,癸醛体积分数1.25‰,接种量1%,IPTG浓度0.1mmol/L,装液量50mL/150mL,温度37℃条件下,重组菌的发光度最大,即表达量最高。正交试验结果表明：当pH6,IPTG浓度0.08mmol/L,接种量1.2%,温度36℃时重组大肠杆菌表达情况最好,发光度达1262.7。本研究中的重组大肠杆菌为在益生菌等食品微生物中的应用提供技术依据。

简介：以罗伊氏乳杆菌基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆获得果聚糖蔗糖酶基因lev。生物信息学分析表明：该基因全长1776bp,编码一个含591个氨基酸残基的多肽。该多肽的预测分子质量为65.47ku,等电点为4.74,二级结构主要有α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲组成。克隆所得的lev基因与GenBank注册的罗伊氏乳杆菌lev基因（注册号：EF534264.1）的核苷酸序列同源性为97.97%。本研究所得lev基因经构建表达载体在大肠杆菌BL21中表达,重组酶具有果聚糖蔗糖酶的活性。

简介：高职生应具备自我学习、与人交流、与人合作、数字应用、信息处理、创新革新、外语应用、解决问题等职业核心能力。职业核心能力有别于专业岗位能力,能让高职生成功和自信地展示自己。＂交流与表达＂课程侧重培养高职生与人交流、与人合作的职业核心能力,主要培养策略是角色扮演。

简介：以分离筛选、鉴定的假单胞菌为研究材料，提取假单胞菌的基因组为模板基因．设计引物进行PCR扩增。扩增的条件为94℃预变性4min，98℃变性10S，58℃退火1min，72℃延伸2min，35个循环，72℃复性10min。用试剂盒回收PCR产物，以PGEM—TEasyVector为载体。产生重组质粒，转化到大肠杆菌（E’coli）JM109细胞中，于LB平板上进行蓝白筛选阳性克隆。提取阳性克隆的质粒，电泳筛选滞后质粒，EcoRⅠ酶切验证后进行测序，检测弹性蛋白酶基因在JM109Ecoli细胞中的表达。结果表明：PCR扩增出1，67kh的基因片段。并成功克隆在EcoliJM109细胞中：挑取白斑提取的质粒，检测有滞后质粒，EcoRⅠ酶切检测到3．0kh的载体和1，67kb的基因片段；以滞后质粒为模板再次进行PCR扩增，扩增出1．67kb基因片段。证明该质粒为重组质粒，经上海博亚生物技术公司测序为1．67kh的基因片段。并在EcoliJM109细胞中表达。

简介：目的：构建高产转谷氨酰胺酶且具有活性的基因工程菌。方法：以茂原链霉菌总DNA为模板,利用PCR技术扩增目的基因,构建重组质粒pET-22b-MTG,使其在大肠杆菌中得到高效表达并优化表达时间和温度。结果：成功构建产转谷氨酰胺酶的基因工程菌,酶活为15.9U/mL,最优表达时间5h,温度25℃。结论：成功构建TG基因工程菌,TG基因在大肠杆菌中得到高效表达,为后续试验提供原材料,为微生物发酵生产TG打下基础。

简介：

简介：采用含有亚抑菌浓度（1／2×MIC）山梨酸钾的LB琼脂平板连续传代的方法，对大肠杆菌（Escherichiacoli）进行诱导，获得具有一定耐受性的大肠杆菌菌株；通过定量竞争性RT—PCR检测诱导后的各个菌株与未经诱导的各个菌株的acrA—mRNA的表达水平。结果表明，各个菌株经过含有亚抑菌浓度山梨酸钾的LB琼脂连续培养10代后获得的诱导菌株，与普通LB琼脂平板连续培养10代后获得的菌株相比可以耐受更高浓度的山梨酸钾，并且acrA-mRNA表达水平在诱导后的各个菌株中比未经诱导的各个菌株均有一定程度的提高。说明大肠杆菌主动外排系统AcrAB-TolC中acrA基因的表达水平提高可能与大肠杆菌对山梨酸钾的耐受程度增加有一定相关性。

简介：目的探讨富含黄酮类物质的果蔬汁对大鼠肝脏内氧化损伤相关Ⅱ相代谢酶基因表达的影响。方法SPF级雄性成年大鼠54只按体重随机分为对照组、低剂量果蔬汁干预组和高剂量果蔬汁干预组,对照组每日给予生理盐水灌胃、干预组给予低剂量和高剂量果蔬汁灌胃。干预5周后,腹主动脉采血用于生化指标检测;取肝脏组织检测基因表达情况。RT-PCR方法检测肝脏中氧化损伤相关Ⅱ相代谢酶mRNA的表达情况;试剂盒法测定血清总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量。结果与对照组相比,低、高剂量果蔬汁饮食干预组大鼠的血清抗氧化能力增强,同时上调肝脏中药物代谢Ⅱ相酶人醌NADH脱氢酶（NQO1）和谷氨酰-半胱氨酸连接酶催化亚基（GCLC）mRNA的表达（P〈0.05）,但对GSTP1、GCLM、GSTM2、GSTA2Ⅱ相代谢酶基因mRNA表达无影响。结论富含黄酮类物质果蔬汁可以增强大鼠血清抗氧化能力,同时诱导肝脏中抗氧化Ⅱ相代谢酶NQO1及GCLC基因mRNA的表达。

简介：乳铁蛋白作为一种活性蛋白，在功能营养食品及医药等方面具有广阔的应用前景。但很久以来，如何获得廉价的人乳铁蛋白一直是开发乳铁蛋白遇到的最大难题，而利用基因工程技术生产重组蛋白给乳铁蛋白的开发利用提供了可行性途径，这也是乳铁蛋白研究的发展趋势。随着基因工程技术和遗传学的迅速发展，以及人们对乳铁蛋白基因及其表达调控机制深人了解，重组生产将成为的人乳铁蛋白来源的主要渠道。