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  • 简介:葡萄浆果颜色由花色素苷决定,UFGT控制花色素苷合成,Myb相关基因通过时空表达调节UFGT,从而使花色素苷在葡萄发育不同阶段不同部位表达。不同葡萄品种调节花色素苷合成强度模式差异造成了有色葡萄品种果皮有多种颜色,白色葡萄品种果皮由于没有花色素苷合成。Myb相关基因家族主要有八成员,其中MybA种类VlmybA1-1,VlmybA1-2VlmybA2以及MybB种类VlmybB1-1VlmybB1-2得到了较深入研究。

  • 标签: 葡萄 花色素苷 MYB UFGT 色素形成
  • 简介:杂种不育繁殖隔离种主要形式,数年来,尽管繁殖隔离在广泛生物体体进化生物学中已经成为关键问题,但仅有几个基因在繁殖隔离中被鉴定。亚洲种分为两亚种,籼稻(indica)精稻(japonica)。这两亚种杂交种通常为高度不育,水稻胚特殊种群具有广泛亲和,与籼稻精稻进行回交时能产生高度育杂交种。在本研究中,我们利用图位克隆方法

  • 标签: 繁殖障碍 杂交种 亲和性 籼稻 调控因子 杂种不育性
  • 简介:大豆主要油料作物,起源于中国,在我国种质资源十分丰富。大豆孢囊线虫(SCN)(HeteroderoglycinesIchinohe)种土传定居内寄生线虫,不易防治,常引起大豆黄萎病等病害,大豆生产上危害最大病害之。大豆孢囊线虫病生理小种多达十几种,在我国,大豆孢囊线虫病病原主要为3、4号生理小种。大豆抗孢囊线虫研究世界上大豆抗病育种研究热点之。在本课题前期研究中,根据已克隆植物抗孢囊线虫病基因保守序列设计引物,对经常规鉴定为抗(感)孢囊线虫3号生理小种15大豆品种基因组DNA进行PCR扩增,在大豆抗病品种中获得条大豆抗孢囊线虫特异条带。本研究在此基础上利用该对引物,对高抗孢囊线虫3号小种北京小黑豆基因组DNA进行扩增,并克隆了特异扩增片段,命名为RSCN3,经测序及BLAST分析,发现其DNA序列与GenBank、EMBL、DDBJ、PDB中大豆似受体激酶RHG4、水稻TMK(leucinerichprotein,receptor-likekinase)基因等均有80%以上同源。根据该DNA序列推测其氨基酸序列,在其序列中共找到21亮氨酸,将该序列与蛋白质序列同源进行比较,结果发现与植物中受体激酶、富含亮氨酸重复蛋白激酶有较高同源。因此推测RSCN3克隆片断为与受体激酶有类似作用抗病相关基因RGA,并将该序列登录到GenBank中,登录号为:AY580161。

  • 标签: 大豆 孢囊线虫 抗病基因同源序列 基因克隆
  • 简介:利用甘蓝型油菜与播娘蒿融合杂种中不育株与甘蓝型油菜杂交、回交,得到细胞质雄性不育系NJ65A。根据polnap雄性不育高度相关基因orf224orf222设计兼并引物,从NJ65A植株中克隆得到长度为675bp基因,命名为orf224-NJ65A。该基因编码224氨基酸,氨基酸序列与orf224、orf222orf220序列相似分别为:70%、53%、60%。RT—PCR表达分析表明:orf224-NJ65A在所检测组织中都有表达,但在花、花蕾茎中表达量较大。推测orf224-NJ65A与细胞质雄性不育有关。

  • 标签: 甘蓝型油菜 雄性不育 克隆 表达
  • 简介:本研究以普通小麦品种‘中国春’染色体组DNA为封阻,用生物素(biotin-16-dUTP)标记大麦染色体组DNA作为探针,通过基因组原位杂交法解析了来自杂交组合CS×(CS+Betzes2H)杂种后代X99-13遗传组成,此材料含有42条染色体,其中1条大麦染色体,2条小麦-大麦易位染色体39条小麦染色体,鉴定为小麦-大麦代换易位系。以小麦第二部分同源群短臂探针psr131进行RFLP分析,结果表明此代换易位系涉及小麦染色体2B大麦染色体2H代换易位。为进步选育小麦-大麦2H纯合易位系及利用其上α-淀粉酶抑制蛋白基因打下了坚实物质基础

  • 标签: 小麦 大麦 代换易位系 GISH RFLP
  • 简介:针对多浆旱生植物霸王富含多酚多糖类物质特点,在常规异硫氰酸胍方法基础进行改进,摸索出种霸王叶根总RNA提取方法。本方法主要通过在提取缓冲液中加入4%β-巯基乙醇以去除多酚物质干扰;用2mol/L醋酸钠(pH4.0)、水饱和酚氯仿:异戊醇(24:1)抽提以去除多糖蛋白物质。采用该方法提取霸王总RNA纯度高、完整好,电泳条带清晰,OD260/OD280值在1.8~2.0之间,其质量完全可以满足进步分子生物学研究要求。

  • 标签: 霸王 多酚 多糖 改进的异硫氰酸胍法 RNA提取
  • 简介:通过增加外源CaCl2钙离子螯合剂EGTA处理后,研究香蕉幼苗在60mmol/LNaCl人工模拟盐胁迫0、4h、8h、12h、24h48h不同时间下,测定其叶片CaMCa^2+-ATPase基因相对表达量。结果表明,在NaCl胁迫过程中,香蕉幼苗在正常生长条件下,其根叶片CaM基因Ca^2+-ATPase基因均有表达。巴西蕉幼苗根在盐胁迫过程中CaM基因没有发生显著变化,但是粉蕉根却发生了显著变化,这可能与粉蕉耐盐高于巴西有关。随着盐胁迫时间延长,巴西蕉粉蕉幼苗根Ca^2+-ATPase基因相对表达量均呈现先上升后下降趋势。

  • 标签: 香蕉幼苗 盐胁迫 CaM基因 Ca2+-ATPase基因 荧光定量
  • 简介:以卷丹、麝香百合品种富田离体鲜切花花蕾为材料,比较Trizol法、异硫氰酸胍法、CTAB改进法SDS改进法提取总RNA效果,结果表明,SDS改进法能有效去除多糖,提取RNA中28SrRNA亮度约为18SrRNA两倍,OD260/OD280值介于1.7-2.2之间,卷丹RNA得率为132.52μg/g,富田RNA得率为186.88μg/g。进步用SDS改进法分别提取富田外轮花瓣、内轮花瓣、雄蕊、雌蕊、叶RNA,同样可以获得完整纯度高RNA,其中28SrRNA亮度约为18SrRNA两倍,OD260/0D280值介于1.7~2.2之间,说明此方法适用于百合各个组织RNA提取。经RT—PCR获得了花发育基因特异性条带,说明用SDS改进法从百合中提取RNA质量好、产率高、完整强,完全适合于百合进分子生物学研究。

  • 标签: 百合 RNA SDS改进法 多糖
  • 简介:应用AFLP、SRAP、RAPD、SSR及同工酶等5种标记构建326标记位点白菜遗传图谱81DH株系群体,采用MapQTL5软件与MQM作图法对白菜叶片数与单株重进行QTL定位及遗传效应分析。结果表明,通过两不同年份试验,在10连锁群上共检测到20QTL,主要分布在R5、R9连锁群上:控制叶片数有5,控制单株重有15;其中,获得两年稳定表达QTL共6:控制叶片数有1,控制单株重有5;另外,估算了单个QTL遗传贡献率和加性效应,发现各QTL加性效应各不相等,各位点遗传贡献率介于9.4%~39.6%之间;控制叶片数控制单株重QTL位点表现为紧密连锁或相似的位置,主要集中在R5连锁群上,这与二者性状表型值相关系数很高相致。这将为白菜品种改良中产量等性状分子标记辅助选择提供理论依据。

  • 标签: 大白菜 DH群体 白菜叶片数 单株重 QTL
  • 简介:以番茄为试材,研究了热处理对番茄硬度、Vc含量、可滴定酸含量、可溶性固形物含量贮藏期影响。结果表明:55℃处理番茄硬度最大,其次38℃52℃。说明热处理会减少番茄果实水分,增加果皮韧性;热处理32℃52℃对贮藏期番茄可溶性固形物保存效果较好;高温短时间热处理对贮藏期番茄Vc保存效果较好;55℃热处理可滴定酸含量较高。52℃番茄热处理对延长番茄贮藏时间效果明显。

  • 标签: 热处理 番茄 品质 耐贮性
  • 简介:解析穗粒数、小穗数粒重及其QTLs间遗传关联,有利于大麦穗发育遗传标记辅助选择研究。本研究采用SPSS19.0软件分析了25份试验材料小穗数、千粒重穗粒数表型差异,以及不同性状及其QTLs间遗传关联。结果表明小穗数等3状具有显著或极显著差异,育种品种小穗数穗粒数与地方品种没有明显差异,大多数育成品种千粒重显著或极显著高于地方品种,二棱大麦小穗数、穗粒数千粒重没有显著差异,但六棱大麦具有显著或极显著差异;小穗数与穗粒数极显著正相关,偏相关系数为0.835;在试验材料中共检测到4小穗数QTLs、6穗粒数QTL6千粒重遗QTLs,16QTLs分别位于1H、2H4H等6条染色体上,其中QSn-4HS等8QTLs具有增效作用、其余QTLs具有减效作用。与标记HVM40-258bp连锁QTL对小穗数穗粒数具有因多效特性。小穗数等3穗部性状分别受遗传效应不同QTLs控制,QTL多效导致了小穗数与穗粒数关联遗传。

  • 标签: 大麦品种(或品系) 穗部性状差异 SSR标记 关联分析 QTLs检测
  • 简介:为研究株诺丽内生真菌M50抗菌抗肿瘤生物活性并鉴定此菌株,本研究对实验室保藏诺丽内生真菌M50,采用ITSrDNA测序鉴定内生真菌M50;以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌枯草芽孢杆菌为指示细菌,采用滤纸片扩散法对其次生代谢产物抗菌进行测试;以新暗色柱节孢菌、辣椒疫霉、西瓜枯萎病菌拟盘多毛孢为指示真菌,采用平板对峙法对其抑菌进行测试;以肝癌细胞株SMMC-7721、Lewis肺癌、前列腺癌细胞株PC-3为指示癌细胞,采用MTT法对其次生代谢产物抗肿瘤活性进行测试。内生真菌M50鉴定为Leptoxyphiumfumago;金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌枯草芽孢杆菌抑菌圈大小分别为(13.16±0.22)mm、(12.06±0.31)mm、(7.89±0.17)mm(11.05±0.22)mm;新暗色柱节孢菌、辣椒疫霉、西瓜枯萎病菌拟盘多毛孢抑制率分别为50.00%、18.36%、12.35%46.91%;肝癌细胞株SMMC-7721、Lewis肺癌、前列腺癌细胞株PC-3半抑制浓度分别为45.46μg/mL、53.33μg/mL、80.48μg/mL。说明内生真菌M50具有广谱抗菌抗肿瘤生物活性。本研究为解决药源问题带来新希望契机,为开发诺丽新产品提供理论依据技术支撑。

  • 标签: 诺丽 内生真菌 次生代谢产物 抑菌 抗肿瘤
  • 简介:巨胚米富含γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyricacid,GABA)具有缓解预防血压上升功效。本研究对江苏地方巨胚种质10217巨胚基因进行了克隆,发现其GE基因编码区有三位点发生突变,第1090碱基由C突变为G;第1302碱基由T突变为G;第1467碱基由G突变为A,提前形成终止密码子TGA。10217中ge基因ge等位基因。本研究根据ge基因突变位点设计对共显性CAPS标记GE-2,对10217/日本晴F2分离群体进行分析后,证实GE基因突变导致了10217巨胚表型。本研究开发GE-2标记能区分GEGE、GEgegege三种基因型,可直接用于ge基因分子标记辅助选择育种基因聚合育种。

  • 标签: 水稻 巨胚基因 分子标记
  • 简介:本实验在形态学分析基础上,采用5对中国传统菊花芽变品种2组形态相似品种,运用随机扩增DNA多态(randomamplifiedpolymorphicDNA,RAPD)分子标记方法对其进行了品种鉴定。通过反复试验,建立了稳定RAPD反应体系;从2220碱基随机引物中筛选出4高效引物,扩增出13条带,扩增多态片段多在501~1000bp之间,其中有2引物(ch1.21ch1.25)能将试验中7组材料全部清楚地区分开。研究结果表明:4高效引物RAPD分析能够有效地将选定样本区分开。因此作者提出RAPD分析方法可以应用到菊花芽变及相似品种鉴定中。这就为进步开发更多RAPD随机引物,开展菊花品种鉴定保护工作提供了参考资料。

  • 标签: 菊花 芽变 相似品种 RAPD
  • 简介:番茄颜色色素含量决定果实品质重要特性。在本研究中,使用绿色紫色番茄植株分别作为母本父本,分别产生了6遗传群体,即P1、P2、F1、BC1、BC2F2。通过数量性状多代联合分析研究果实颜色色素含量遗传规律。结果表明,绿色紫色果之间果实颜色最佳遗传模型为MX1-AD-ADI。BC1、BC2F2代色度值主基因遗传率分别为82%、59%77%,多基因遗传率分别为8%、10%13%。番茄红素含量遗传符合MX2-ADI-AD模型,BC1、BC2F2主基因遗传率分别为64%、74%93%,多基因遗传率分别为20%、0%0%。叶绿素遗传模型为MX1-AD-ADI,BC1、BC2F2主基因遗传率分别为59%、74%59%,多基因遗传率均为0%。胡萝卜素遗传符合MX2-ADI-ADI模型,BC1、BC2F2主基因遗传率分别为76%、4%/5%54%,多基因遗传率分别为0%、0%13%。

  • 标签: 番茄(Solanum lycopersicum) 果实颜色 色素 遗传率 遗传模型
  • 简介:不同种皮颜色花生即彩色花生,由普通花生通过多世代分离选育而成,种皮颜色包括深紫条纹、浅紫条纹、红色、红-白相间、紫黑色等类别。由于彩色花生营养丰富,并且富含花色苷类物质倍受人们喜爱,市场前景广阔。但是,目前对彩色花生加工品质特性并不清楚。外形性状评价实验表明,5种花生种皮颜色、百果重、百仁重出仁率具有较大差异;脂肪脂肪酸评价发现,5种花生都不是最适宜油用花生品种选择,但其均富含油酸、亚油酸花生烯酸,具有较好食用价值;蛋白质含量最高‘铜仁珍珠’花生,其次‘黑珍珠’,含量最低为‘紫魁’,且其富含氨基酸也有着显著差异;此外,种皮对花生生品感官评价影响加大,深色种皮花生种皮对香味影响大,对甜味脆度影响小。本研究选用贵州地方特色品种‘铜仁珍珠’引进‘黑珍珠’、‘红-白花’、‘四粒红’‘紫魁’5种种皮颜色差异较大花生,对营养成分、质构特性、生品及烘烤制品挥发性风味物质,以及种皮色素进行综合研究,旨在进步了解不同种皮颜色花生品质特征特性,为彩色花生更好地推广开发利用提供科学依据。

  • 标签: 彩色花生 品质特性 感官评价
  • 简介:在叶片中合成由FLOWERINGLOCUST(FT)编码成花素蛋白通过韧皮部运输到顶端分生组织(SAM),与bZIP转录因子FD相互作用形成复合物,激活花分生组织身份基因表达,从而调节植物开花其他些生物学过程。本研究以棉花全基因组数据库为基础,发掘并得到18棉花FD基因序列并确定它们在各基因组染色体上位置。生物信息学分析显示,棉花FD蛋白质分子量在15.69~28.24kD之间,理论等电点在9.24~10.38之间,种非分泌蛋白;亚细胞定位预测显示,棉花FD蛋白分布于细胞核上,典型核蛋白;氨基酸序列分析表明,棉花FD种亲水性蛋白,还存在着糖基位点磷酸化位点以及4保守基序;进化分析表明,棉花FD1FD2与葡萄VvFD基因亲缘关系最近。组织表达分析表明,陆地棉10GhFD基因在不同组织中具有表达特征多样,GhFD5-D在纤维中表达量最高,其余GhFD基因均在SAM中表达量最高,不同表达特征表明它们可能具有不同功能。这些结果为进步解析棉花FD基因功能作用机理积累了有价值资料。

  • 标签: 棉花 FD基因 b ZIP转录因子 基因表达
  • 简介:橡胶树起源热带雨林,对低温敏感。在中国橡胶树(Heveabrasiliensis)种植受到严重低温胁迫影响,CBF/DREB1(C-repeatbindingfactor/dehydrationresponsiveelementbindingfactor1)低温信号通路中重要转录因子,但目前橡胶树中仅克隆到HbCBF1。本研究从橡胶树中克隆出两CBF家族基因HbCBF2HbCBF3。经测序,HbCBF2HbCBF3分别编码了234242氨基酸。氨基酸序列分析表明HbCBF2HbCBF3均含有CBF家族特有两短肽序列包括保守DNA结合结构域NLS簇。通过构建进化树发现HbCBF2、HbCBF3与HbCBF1以及拟南芥中CBF序列同源很高。将HbCBF2HbCBF3构建到pGEX4T-1原核表达载体上,在Transetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE电泳检测它们蛋白质表达量为51.8kD53kD,与预期致。对蛋白诱导条件进行优化,构建融合表达质粒pGEX4T-1-CBF2pGEX4T-1-CBF3,在28℃、IPTG浓度为0.4mmol/L情况下表达量最佳。实验为纯化蛋白研究HbCBF2HbCBF3在橡胶树中功能提供理论帮助。

  • 标签: 巴西橡胶树 CBF 原核表达
  • 简介:本研究利用以0—153为父本SGK9708为母本构建196陆地棉重组自交系(F6:8)为材料对棉籽油分含量蛋白质含量进行了遗传分析QTL定位。通过四环境下群体材料棉籽油分含量蛋白质含量分析表明棉籽油分含量蛋白质含量均为典型数量性状,其中棉籽油分含量存在超低亲本超亲分离,而其蛋白质含量呈现超高亲本超亲分离。相关分析显示棉籽油分含量蛋白质含量呈极显著负相关,同步提高两者在棉籽含量较为困难。基于包含186标记,总长827.84cM,标记间平均距离4.45cM,覆盖棉花基因组18.6%遗传连锁图谱,应用WinQTLcart2.5软件对四环境下棉籽油分含量蛋白质含量进行了QTL定位,共检测到8油分含量QTLs,解释表型变异5.42%~13.15%,其中稳定QTL1。4蛋白质含量QTLs,解释表型变异4.35%~14.93%。本研究结果可为进行陆地棉种子营养品质性状分子遗传改良奠定基础

  • 标签: 陆地棉 重组自交系 棉籽油分 蛋白质 QTL
  • 简介:根据刺五加鲨烯合酶基因2(squalenesynthase,SS2)鲨烯环氧酶基因1(squaleneepoxidase,SE1)DNA序列,通过Southern杂交qRT-PCR法确定SS2SE1拷贝数。以actin为内参照基因,利用qRT-PCR法分光光度法确定不同SS2SE1拷贝数下基因表达量皂苷含量。结果表明,刺五加SS2存在12拷贝,SE1存在1、23拷贝类型及其相互组合6种拷贝数组合基因型。刺五加SS2SE1表达量与皂苷含量均随拷贝数增加而显著提高(p〈0.05),两者间存在极显著正相关关系(P〈0.01)。SS2SE1每增加1拷贝可使皂苷含量分别提高0.570.42倍。研究结果为进步揭示刺五加皂苷含量差异形成分子机理奠定了基础

  • 标签: 刺五加 鲨烯合酶 鲨烯环氧酶 拷贝数 皂苷