简介：摘要目的分析实时荧光PCR技术在沙门菌与志贺菌筛查中的临床应用价值。方法收集2016年10月～2017年10月于医院门诊就诊患者的520例肛拭子为研究对象，分别采用实时荧光PCR法和传统培养法进行对比检测，分析实时荧光PCR技术的灵敏度、特异度并比较两种方法的检测时间。结果实时PCR法检测沙门菌、志贺菌的时间均显著少于传统培养法（2.24±0.53vs4.52±0.71）d、（2.31±0.44vs4.61±0.65）d；实时PCR法检测沙门菌、志贺菌的灵敏度均为100%，特异度分别为98.63%和97.24%。结论实时荧光PCR技术检测沙门菌、志贺菌的时间短，灵敏度、特异度高。

简介：多重连接探针扩增技术（multiplexligation-dependentprobeamplification,MLPA）是一种高通量、针对待测核酸中靶序列进行定性和定量分析的新技术。该技术仅需20ng/μlDNA,即可通过简单的杂合、连接、PCR扩增及电泳步骤,在同一反应管中对四十多个不同的靶基因进行检测和定量分析。这一技术最先于2002年由荷兰的Schouten等[1]报道。如今短短几年中,该技术已被欧洲、亚洲等几十个实验室采用。迄今为止,已有150多篇不同领域采用该技术方法的报道在重要刊物上发表。

简介：摘要目的探讨非结核分枝杆菌病诊治方向。方法本研究筛选30例非结核分枝杆菌种病患者作为本次的研究对象，2017年1月至2017年12月为收治时间，均行传统罗氏结核培养法、DNA扩增基因鉴定组，并对比差异检测方案间的检测速率、准确度情况。结果本文研究数据显示，通过对非结核分枝杆菌病的测定，其DNA扩增基因鉴定技术检测非结核分枝杆菌病的特异度为100％，且确诊时间为（21.25±3.79）h，但传统罗氏结核培养法检测的非结核分枝杆菌的特异度为，确诊时间为（5.51±2.19）周，2组对比具有显著差异，p＜0.05，DNA扩增基因鉴定更具优势性。结论DNA基因鉴定较传统罗氏培养菌型鉴定具有特异、快速等优势，基因检测可明确非结核分枝杆菌亚菌种，传统罗氏方法仅可区分非结核杆菌、结核杆菌菌属，其DNA基因鉴定更具高效，且可行性高，该技术可在基层医院广泛推广，提高其诊治非结核分枝杆菌病的能力。

简介：荧光素钠用于眼底荧光血管造影（FFA）是当代眼科诊断眼科疾病常用的、重要的检查方法之一。此项检查能直接反映活体视网膜大血管至毛细血管水平的生理与病理情况，对眼底病变的诊断、鉴别诊断、治疗选择、预后的推断、指导光凝治疗及预测视力等方面均有很大的帮助。现将我院2004—01／2008—06以来所做的2620例眼底荧光血管造影出现的9例不良反应报告如下。

简介：摘要目的探讨荧光定量PCR技术检测结核杆菌的方法及应用。方法建立检测结核杆菌的荧光定量PCR技术，并与培养法、涂片镜检法进行效果对比。结果本方法检测结核杆菌具有较高的特异性、敏感性和重复性。对120例结核标本进行检查，荧光定量PCR法阳性率高达52.50%，培养法涂阳性率达24.17%，片镜检法阳性率达15.00%。结论相对于传统的结核杆菌检查方法，荧光定量PCR技术具有高特异性，高敏感性等优势，对于结核病的诊断具有重要意义，值得临床推广应用。

简介：

简介：目的：用荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）法准确地定是检验血清中乙型肝炎病毒（HBV）的数量和免疫指标，以指导临床。方法：采用HBV－DVAFQ－PCR诊断试剂盒，以一种完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术组合所产生的实时检验定量PCR方法，检测了58例临床血清标本。结果：经FQ－PCR检测，9例HBV的HBsAg、HBeAg、HBcAg、HBcAb都阳性标本，其HBV－DNA的阳性率为100％，平均HBV－DNA拷贝数为2．0×10^8/ml；16例HBsAg、HBeAb、HBcAb都阳性的标本，其阳性率为62．5％（10例），平均拷贝数为5．2×10^5/ml，而常规PCR只有33％的阳性率；7例HBsAb、HBeAb、HBcAb都阳性的标本，其阳性率为14．3％（1例），平均拷贝数为4．7×10^3ml。结论：HBV－DNA的FQ－PCR检测较常规PCR更具有较高的灵敏度和特异性，且定量准确，结果可靠，能够避免PCR后处理导致物假阳性污染，可以真实反映HBV的感染和低复制状态，对于乙型肝炎的临床诊断，治病方案的选择和疗效观察有较大的指导意义。

简介：目的：利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ—RT—PCR)检测强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)mRNA的表达水平，并进行疾病的活动性相关分析。方法：用PrimerExpressv2．0软件，根据GenBank提供的序列，在人IL-2RαmRNA的第2和第3外显子之间设计一对引物和一条TaqMan探针。提取总RNA，加入已优化的一步法FQ—RT—PCR反应体系，扩增产物经凝胶电泳后切胶回收，并与pUCm—T载体连接。制备好的重组质粒转化感受态细胞进行克隆。经测序分析确定为特异性片段后，用T7RNA聚合酶转录为cRNA，作为FQ—RT—PCR系列浓度标准品。评价FQ—RT—PCR检测IL-2RαmRNA的特异性、线性、精密度和探针稳定性等。定量测定HLA—B27阳性活动组与阴性非活动组强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞IL-2RαmRNA基因的表达水平，结合血浆可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)浓度，探讨与炎症活动的相互关系。结果：成功构建了cRNA标准品。该方法的线性范围为7～107cells／ml，其批内CV8．4％，批间CV9．6％；扩增产物克隆的双向测序结果经BLAST比较、分析，证实为IL-2RαmRNA特异性片段。对各30例HLA—B27阳性与阴性的强直性脊柱炎的测定表明：与正常人对照组结果比较，HLA—B27阳性组与HLA—B27阴性组IL-2RαmRNA和sIL-2R都有明显增加(P<0．01)。IL-2RαmRNA对炎症活动评价的灵敏度为96．7％。结论：FQ—RT—PCR具有灵敏、特异、结果重复性好等优点；IL-2RαmRNA与sIL-2R比较更能反映强直性脊柱炎患者的免疫状态，可能为免疫药物的疗效评价和药物筛选提供基因表达水平上的信息。

简介：目的：探讨多重连接探针扩增（multiplexligation-dependentprobeamplification,MLPA）技术在分析胚胎停止发育（以下简称胚胎停育）流产绒毛组织染色体非整倍体异常中的应用,探讨染色体非整倍体异常导致胚胎停育与胎儿性别、患者年龄间的关系。方法：收集324例临床诊断为胚胎停育患者的流产绒毛组织,采用MLPA技术进行染色体检测,并分析检测结果与胎儿性别及患者年龄间的相关性。结果：在324例胚胎停育患者中,检出绒毛染色体非整倍体异常共68例（20.99%）,其中常染色体三体33例（13-三体12例、18-三体6例、21-三体15例）,常染色体缺失3例（13-单体1例、21-单体2例）,性染色体数目异常32例（45-XO15例、47-XXY13例、47-XXX1例、47-XYY3例）。常染色体数目异常组与染色体数目正常组间的胎儿性别分布差异无统计学意义（P〉0.05）。对绒毛染色体数目正常组[平均年龄（32±6）岁]、常染色体数目异常组[平均年龄（34±7）岁]、性染色体数目异常组[平均年龄（28±6）岁]3组患者的年龄进行比较,发现差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：MLPA技术可以作为一种辅助检测手段,用于检测胚胎停育流产绒毛组织染色体的非整倍体异常,染色体数目异常导致的胚胎停育与胎儿的性别无关,但与患者的年龄有关,胚胎常染色体数目异常组的孕妇年龄大于染色体数目正常组及性染色体数目异常组。

简介：目的：探讨卡介菌多糖核酸联合化学药物治疗肺结核的疗效。方法：应用卡介菌多糖核酸治疗肺结核50例与单用化学药物治疗50例比较。结果：应用卡介菌多糖核酸患者痰菌转阴率明显提高,空洞病变吸收明显。结论：卡介菌多糖核酸联合化学药物治疗肺结核疗效较好,值得推广使用。

简介：摘要为了加强门诊药房处方实时审核管理，分析实时审核强化管理在实际工作中的应用效果，本文选取我院门诊药房处方1000份为研究对象，其中500份门诊药房处方为2017年7-12月期间未采取实时审核强化管理，另外500份门诊药房处方为2018年1-5月期间采取实时审核强化管理，将未采取实时审核强化管理的门诊药房处方作为对照组，将采取实时审核强化管理的处方作为试验组，比较两组处方不合格情况和现场点评情况。研究结果显示，试验组门诊药房处方不合格率为6%，远低于对照组的15.8%，同时试验组现场点评情况优于对照组。这表明，加强门诊药房处方实时审核管理有助于提高门诊药房处方合格率和审核管理水平。

简介：摘要目的分析探讨超声在颅脑手术中的应用效果和价值。方法从本次试验中所提取的脑部有正常组织的损伤患者有40例，并对这些患者进行实时定位、合理阐述，且手术中的示踪，关颅前的基本评估和基本的手术效果。结果从本次试验中所提取出来的40例超声定位检查，超声所显示的病变大小、部位、性质以及术前的CT/MRI相吻合，并根据超声的基本提示精确探查病变。结论实时超声不仅定位简单、有效、安全，还十分有利于颅脑手术中的基本效用，术中超声定位其所具有的基本应用价值也十分可观。

简介：目的：摸索及优化肽核酸（PNA）石英谐振式基因传感器（QOGS）阵列的检测条件。方法：设计针对HBV的bis-PNA探针，将其固定在QOGS阵列表面，具体摸索了bis-PNA探针与HBV基因组DNA杂交时的最佳pH值、最佳离子浓度、最佳探针固定量。结果：杂交缓冲液pH值为6.8、离子浓度为20mmol/L、探针浓度为1.5μmol/L时杂交条件最为适宜。结论：摸索出了PNA-QOGS阵列反应时的最佳条件，为成功地构建PNA-QOGS阵列检测系统奠定了坚实的基础。

简介：目的：探讨肾性和非肾性血尿红细胞激光和荧光参数的差异及意义。方法：用UF-100全自动尿液有形成分分析仪测定经肾活检确诊的肾性血尿70份和非肾性血尿86份，记录血尿红细胞激光和荧光参数。所有数据比较均采用SPSS11．5统计软件分析，组间差异用studentt检验。结果：各参数P70—Fse(ch)、Fse—DW(ch)、Non—LysedRBC％、RBC—MFL(ch)、RBC—MFsc(ch)、RBC—MFL—DWSD(ch)肾性血尿组分别为62．0±10．5、30．9±9．1、65．7±26．8、17．0±2．7、56．1±10．9、16．8±4．7；非肾性血尿组分别为111．3±16．1、28．3±11．8、82．6．5±18．6、17．0±2．5、72．8±26．0、15．9±3．6。经统计分析肾性和非肾性血尿的P70-Fsc、Non-LysedRBC％、RBC—MFsc三参数差异有极显著意义(P<0．01)，而其他各参数差异不明显。结论：可以利用红细胞激光和荧光上述参数差异鉴别肾性和非肾性血尿。

简介：目的建立SARS冠状病毒的RT—PCR核酸检测方法。方法合成针对SARS冠状病毒特异性引物，从SARS病人及疑似病人标本中提取RNA，经反转录和巢氏PCR扩增出相应大小的DNA片段。对这些片段克隆后进行DNA序列分析，并将序列与SARS冠状病毒和其它已知冠状病毒进行同源性分析。结果从SARS病人痰、咽拭子或血液标本中得到多例RT—PCR阳性片段，其中8个片段经克隆和DNA序列分析证实为SARS冠状病毒序列(同源性100％)，而所有参照标本RT—PCR均为阴性。结论该方法可用于SARS冠状病毒的RT—PCR核酸检测。

简介：摘要目的研究并探讨核酸检测与酶联免疫检测血液病毒的临床效果。方法此次研究的对象是选取2013年7月—2016年7月该血站检验科血液样本500例，将其临床资料进行回顾性分析，并分别给予核酸检测与酶联免疫检测，并且计算与对比两种检测方法的阳性率。结果在HBV（乙型肝炎病毒）检测中，核酸检测阳性率为3.0%（15/500），同酶联免疫检测的1.2%（6/500）进行比较，差异有统计学意义（P<0.05）；在HCV（丙型肝炎病毒）检测中，核酸检测阳性率为1.8%（9/500），同酶联免疫检测的1.6%（8/500）进行比较，差异无统计学意义（P>0.05）；在HIV（人类免疫缺陷病毒）检测中，核酸检测阳性率为0.4%（2/500），同酶联免疫检测的1.8%（9/500）进行比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论在血液病毒检测中，核酸检测与酶联免疫检测各具优势，存在一定的互补性，因此，可结合实际情况，给予两者联合应用，以此提高血液病毒检测准确性。

简介：目的：建立一种灵敏度高、特异性好、精密度高、操作简便的荧光实时定量PCR技术，对临床标本中的TTVDNA进行定量检测。方法：设计针对TTV基因保守序列非转录区(UTR)的一对引物和一条荧光基团双标记探针。将PCR扩增所得的产物片段与PUCm—T载体连接并进行克隆，提取重组质粒以极限稀释法进行定量，作为定量检测的标准品。通过对重组质粒的测序来验证方法的特异性。通过与套式PCR—ELISA方法阳性检出率的比较，显示本方法学的高灵敏度。在临床研究中，通过对36例丙肝患者及123例不同血清标志物阳性的乙肝患者，166例健康体检者血清中TTVDNA的定量检测，评估TTVDNA在不同人群中检出阳性率的差异显著性。此外还观察了乙肝患者不同血清ALT水平组别TTVDNA阳性检出率的差别。结果：本方法检测TTV—DNA的灵敏度高于基于ORFl的普通套式PCR—ELISA方法，重组质粒测序结果显示方法有很好的特异性；通过重组质粒标本梯度稀释检测显示该方法的线性范围为10^2-7拷贝／ml；批间CV为13．2—16．0％，批内CV为6．5．0—11．3％。健康体检者、丙肝患者、乙肝患者三组人群的血清TTVDNA定量结果分别为10^4.11±0.97、10^3.91±1.07、10^3.89±0.99拷贝／ml；三组人群TTVDNA阳性检出率无差异显著性；且乙肝患者(TTVDNA+)血清ALT水平与TTVDNA载量无相关显著性(P>0．1)；乙肝患者血清ALT异常与正常两组TTVDNA阳性检出率无差异显著性(P>0．1)。结论：本方法操作简单、灵敏度高、特异性好、结果数据化，适合于临床实验室进行临床标本的TTV—DNA定量检测。

简介：目的探讨Bcl-2反义核酸治疗Burkitt's淋巴瘤的疗效。方法将不含EB病毒的人类BL的细胞株-CA46移植到BAB/C裸鼠体内，受用体内体外交替传代的方式，建立BL裸鼠模型。并将荷瘤裸鼠随机分为反义治疗（A组），无义对照（B组）和空白对照（C组）三个组，每组5只，A组注射Bcl-2反义核酸，B组注射无义寡核苷酸，C组不注射任何制剂；治疗剂量为5mg/kg/d，给药方式为瘤内局部注射，每天注射一次，连续给药15天。结果A组肿瘤的生长明显受到抑制，其中一只裸鼠的肿瘤消失，其余4只的瘤块明显小于B组和C组，A组对C组的肿瘤抑制率为89.5%;A组对B组的肿瘤抑制率为83.3%。二者无显著差异（P>0.05)；而B组对C组的抑制率为36.9%，与前二者差异非常显著（P<0.01)。结论Bcl-2反义核酸对具有Bcl-2反义核酸对具有Bcl-2高表达的Burkitt's淋巴瘤具有明显的疗效。具有潜在的临床应用价值。

简介：摘要目的研究分析糖尿病视网膜病变眼底荧光造影的护理措施及效果。方法此次研究的对象是选择60例糖尿病视网膜病变患者，将其临床资料进行回顾性分析，并对其进行眼底荧光造影检查和护理。观察护理措施及效果。结果60例患者在造影过程中无严重不良反应发生，均成功造影。结论糖尿病视网膜病变患者进行眼底荧光造影时，首先要通过健康宣教使患者了解该项检查，然后要加强医护患三方的配合，护理人员要做好眼底血管造影的护理，以保证造影的安全顺利进行。

简介：摘要目的观察与探究糖尿病视网膜病变眼底荧光造影的护理要点。方法选取2014年04月~2017年04月期间于本院就诊及行眼底荧光造影的60例糖尿病视网膜病变患者作为研究对象，按照随机数字表法分为两组，每组各有30例患者，对对照组患者给予常规护理，对观察组患者给予综合护理，对比并分析两组患者的效果。结果观察组患者护理干预后的汉密顿焦虑量表（HAMA）评分与对照组患者相对比，组间差异比较明显（p<0.05），观察组患者护理干预后的汉密顿抑郁量表（HAMD）评分与对照组患者相对比，组间差异比较明显（p<0.05），观察组患者的护理满意度（93.33%）与对照组患者（66.67%）相对比，组间差异比较明显（p<0.05）。结论对行眼底荧光造影的糖尿病视网膜病变患者实施有效护理干预的效果较好。