简介:为推动我国骨科医生教育的国际化、打开骨科医生教育的世界窗口、接受国际最先进的骨科医生培养模式、流程与内容,并建立长期固定的骨科医生国际教育途径与平台,由第四军医大学骨科教育学院(FouahMilitaryMedicalUniversity,InternationalCollegeofOrthopaedicEducation,FOC)与美国约翰·霍普金斯大学(TheJohnHopkinsUniversity,JHU)医学院骨科双方协商,已于2015年5月达成“中美骨科医生合作教育协议”,定于2015年10月正式启动“FOC—JHU骨科医生高级教育项目”(简称“FJO项目”),首期6名骨科医生将于2015年10月下旬启程赴美。
简介:目的建立可用于舌癌耐药蛋白1(TCRP1)基因启动子区CpG岛测序检测的反应体系。方法采用人肺癌A549细胞作为待测样品,以TCRP1启动子区CpG岛为靶片段设计特异扩增、测序引物,建立TCRP1启动子区CpG岛测序检测反应体系,并检测H1299、H460、Huh-7细胞株和2例患者肿瘤组织标本。结果建立了以P2-1[二甲基亚砜(DMSO)终浓度0%,降落聚合酶链反应(PCR)条件]联合P1-2(DMSO终浓度1%,常规PCR反应条件)为优选方案的TCRP1启动子区CpG岛测序检测体系,并成功检测了A549、H1299、H460、Huh-7细胞株和2例患者肿瘤组织标本。结论成功建立可用于TCRP1启动子区CpG岛测序的反应体系。
简介:目的观察bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及调控α1(Ⅰ)原胶原基因序列的作用。方法用组织块法培养人皮肤成纤维细胞并传代,采用BrdU掺入的ELISA法,测定不同浓度的bFGF对成纤维细胞增殖的影响。构建三种人α1(Ⅰ)原胶原基因5′侧翼序列与报告基因氯霉素乙酰基转移酶(CAT)的重组质粒,用FuGENE转染试剂转染成纤维细胞,同时用p—sv—b—GAL表达质粒转染细胞作为阳性对照组,ELISA法测定经bFGF处理后成纤维细胞CAT的表达量。结果在体积分数2%或10%小牛血清培养条件下,bFGF加入浓度从0.25ng/ml增至64.00ng/ml,作用24h后,各组细胞增殖数值之间差异有显著性意义(P<0.05)。用三种重组质粒分别转染细胞,bF-GF处理24h后,CAT相对表达量测定结果提示,bFGF组与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05)。结论bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖有抑制作用,对胶原基因启动序列具有负性调控作用,且存在剂量依赖关系。
简介:本研究旨在通过对广西省重型β地中海贫血患者和正常人外周血中γ珠蛋白基因启动子区CpG岛的甲基化位点的确认和对各个CpG位点甲基化率在重型β地中海贫血患者与正常人之间的差异性分析,初步筛选出可能影响γ珠蛋白表达的主要甲基化位点。采用重亚硫酸盐测序法修饰,递降PCR扩增,最后对PCR产物进行DNA克隆测序,得到目的片段中每个CG位点的甲基化情况,定量检测甲基化的确切位置与程度。结果表明:重型β地中海贫血患者与正常人γ珠蛋白基因启动子区存在4个CpG甲基化位点,在序列中分别位于28、122、231和234bp,均呈高度甲基化,其中122和231bp位点甲基化率明显低于正常对照组,差异均有统计学意义。28和234bp位点甲基化率与正常对照组均无显著性差异。结论:证实γ基因启动子区存在甲基化位点、明确位点位置且经定量分析证实无论地中海贫血患者还是正常人各个甲基化位点均呈高甲基化状态;初步筛选出影响γ珠蛋白表达的主要位点可能在122和231bp,为后续通过调节γ珠蛋白的表达缓解重型β地中海贫血的临床症状、靶向基因治疗研究提供了实验依据。
简介:摘要社会经济的快速发展,对CT-X射线管的应用带来了新的机遇与挑战,有必要对其旋转阳极双速启动与控制系统的应用展开深入研究与探讨,并采取最优化的实施措施,达到事半功倍的应用效果。本文介绍了CT的理论基础,分析了CT的结构组成,研究了如何控制CT机的X射线辐射量,望该课题的研究,对后续相关工作的实践能够起到借鉴与参考作用。
简介:摘要本实验通过设计AQP-1启动子引物,提取乳腺癌细胞的基因组,利用PCR技术扩增出AQP-1基因的启动子序列,通过酶切、连接到荧光素酶报告基因载体--pGL-3basic上,通过荧光素酶活性检测(Luciferase活性分析)分析AQP-1启动子的活性。
简介:【摘要】 目的 观察神经肌肉电刺激(NMES) 对卒中后咽期吞咽启动延迟患者治疗性进食的研究。方法 选取31例卒中后咽期吞咽启动延迟患者,将全部患者分为两组:观察组(15例)与对照组(16例)。对照组在常规吞咽治疗后进行治疗性进食,观察组于治疗后结合神经肌肉电刺激治疗同时进行治疗性进食。每次治疗20min,每周5次,连续治疗2周。治疗后对比两组GUSS、SSA、FOIS等级。结果 不同方法应用后,观察组优于对照组(P
简介:目的了解钙离子对人永生化KC株HaCaT细胞整合素β1启动子活性、蛋白表达及细胞迁移的影响.方法(1)体外培养HaCaT细胞(12孔板),按随机数字表法分为5组,每组18孔.分别用pGL3启动子(阳性对照组)、pGL3空载体(阴性对照组)及pGL3-1756bp(全长启动子组)、pGL3-1442bp(远端启动子组)、pGL3-261bp(近端启动子组)报告质粒转染HaCaT细胞,转染分别在含0.00、0.03、0.09、0.30、0.80、1.20mmol/L钙离子的无血清RPMI1640培养液中进行(每组每种浓度3孔).24h后用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶相对活性.(2)取本室构建的稳定转染小干扰RNA-整合素β1载体(简称稳定转染)的HaCaT细胞,常规培养后按随机数字表法将细胞分为6部分,用前述6种浓度钙离子处理,每种浓度3个样本.采用蛋白质印迹法检测整合素β1蛋白表达水平.(3)于6孔板中培养正常HaCaT细胞和稳定转染的HaCaT细胞,每种细胞18孔.按常规进行划痕处理后,用含前述6种浓度钙离子的培养液(按随机数字表法划分.每种浓度3孔细胞)培养12h.观察并检测细胞迁移率.(4)对各实验结果进行单因素方差分析和独立样本t检验.结果(1)全长启动子组细胞在钙离子浓度由0.00mmol/L升至0.09、0.30mmol/L时,荧光素酶相对活性由0.16±0.09升至0.39±0.09、0.35±0.05(t值分别为3.143、3.140,P值均小于0.05);当钙离子浓度升至0.80、1.20mmol/L时,荧光素酶活性下降.远端启动子组细胞荧光素酶相对活性随钙离子浓度变化的趋势与全长启动子组相似,但在0.09、0.30mmol/L时,该酶活性分别为0.56±0.32和0.64±0.06,明显高于全长启动子组(t值分别为0.887、6.122,P值均小于0.05).各种浓度钙离子对近端启动子组荧光素酶相对活性无明显影响.(2)当钙离子浓度为0.00mmol/L时,稳定转染的HaCaT细胞整合素β1蛋白表达量为0.53±0.10.当钙离子浓度为
简介:本研究通过对急性白血病病人及体外肿瘤细胞株的DNA甲基化及基因表达的实验,探讨死亡相关蛋白激酶(death-associatedproteinkinase,DAPK)基因在急性白血病中的表达情况及其启动子区域甲基化的状态,并分析两者之间的相关程度.应用RT-PCR检测DAPK基因在白血病细胞及正常骨髓细胞中的表达;用巢式甲基化特异性PCR(n-MSP)法检测急性白血病患者及细胞株DAPK基因启动子甲基化状况;从第二轮巢式MSP扩增出的随机产物中挑选2个随机引物,交予专业机构克隆后进行序列分析.结果表明:DAPK基因在10例正常对照者骨髓标本中均有表达,DAPKmRNA在急性白血病病人骨髓标本中表达平均值为0.61±0.40,低于正常对照者,差异有显著性(P<0.05),其中52.94%(9/17例)的急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本DAPKmRNA表达降低或缺失,急性髓系白血病病人数据为41.18%(42/102);细胞株U-937显示基因表达正常,HL-60表达缺失;102例急性髓系白血病病人骨髓标本中33例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为32.4%(33/102);17例急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本中8例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为47%(8/17);7例正常人骨髓标本DAPK启动子区均为非甲基化;细胞株U-937DAPK启动子区非甲基化,HL-60DAPK启动子区甲基化.ALL组与AML组患者骨髓细胞DAPKmRNA表达与其启动子甲基化均呈显著负相关(ALL组r=-0.855,P<0.05;AML组r=-0.343,P<0.05),提示两者有密切的关联.结论:急性白血病患者中DAPK基因启动区甲基化与其mRNA的异常表达或失表达有关.
简介:目的:研究SFRP2启动子中CpG岛高甲基化与结直肠癌临床特点之间的相关性。方法:通过基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术检测特定CpG岛甲基化程度,采用SequenomEpiTYPER技术检测20例结肠癌中正常组织和肿瘤组织中SFRP2启动子甲基化状态。结果:SFRP2_01_CpG_5(P=O.018)、SFRP2_02_CpG_5(P=O.018)与肿瘤位置相关,SFRP2_02_CpG_6、7、8、9(P=O.039)与淋巴结转移个数有关。SFRP2_01_CpG_1.2(P=O.043)、SFRP2_02_CpG_16(P=O.044)与肿瘤直径大小相关。结论:启动子CpG位点甲基化水平与结直肠癌的临床及病理特点有相关性,表明SFRP2启动子可能是结直肠癌的现阶段和未来进展的潜在的表观遗传学的生物学标志物。
简介:摘要:随着现代教育理念将“以人为本”提升至重要战略地位,中等职业院校的专业课程教学成为了教学改革的主要阵地。在现代社会,互联网的飞速发展促进着我国逐步迈入大数据时代,为中等职业院校的信息化发展提供了良好的平台,但由于信息化人才紧缺、前期探索路途较长等多方面原因导致其总体发展进程略微缓慢。新时代教育倡导利用网络带来的优势,将专业课程教学知识点转为图片、视频等手段,加快重难点在学生脑海中的理解与记忆速度,改变传统教学模式带来的学生学习积极性不高等问题。本研究通过对中职院校护理解剖学输出式学习必要性的深究,基于三阶涂色教学方式,努力强化当前中职院校的专业课程体系建设,提高中职解剖学课堂的教学效率,通过营造舒适、轻松、活泼的教学氛围,立足实践得真知的原理,深化中职院校教学的教育改革;通过信息技术等形式的辅助,用全新的理念和策略开展课堂教学活动,促进教学评价体系的构建,改变教师传统的教学理念以及教学模式。
简介:摘要:目的:探究使用改良式乳房按摩手法结合院级仿生吸乳器的方法对初产妇早期启动泌乳II期的影响效果。方法:选用2022年1月1日至2022年3月30日我院年龄18-45岁、孕周37-41+6周、单胎活产经阴道分娩初产妇40例,根据分娩日期的单双日来分对照组和观察组,单日分娩分为对照组和双日分娩分为观察组,对照组使用普通吸乳器每日吸吮乳房6次、每日使用传统的乳房按摩手法疏通乳房,观察组使用院级仿生吸乳器(美德乐)每日吸吮乳房6次、每日使用改良式乳房按摩手法疏通乳房。统计两组初产妇产后24小时、48小时、72小时的单侧乳房(产妇前一次喂奶的对侧乳房)30分钟的吸奶量。结果:观察组初产妇产后24小时、48小时、72小时的单侧乳房(产妇前一次喂奶的对侧乳房)30分钟的吸奶量高于对照组(P
简介:【摘要】目的:探讨配对盒家族基因1(PAX1)和肿瘤蛋白63(TP63)基因启动子甲基化程度在宫颈人乳头瘤状病毒阳性患者中的临床应用效果。方法:选取在本院诊治的200例女性HPV病毒阳性患者和200例女性健康体检者为观察对象,收集所有患者的病理组织细胞和癌旁组织细胞,细胞经处理后检测PAX1和TP63基因启动子甲基化水平,分析PAX1和TP63基因启动子甲基化水平在HPV患者临床诊断中的效能。结果:与健康体检者比较,宫颈癌患者组织样本中PAX1和TP63基因启动子甲基化水平明显更高,且差异具有统计学意义(P<0.05),PAX1和TP63基因启动子甲基化水平联合检测在HPV诊断中的诊断灵敏度为90.67%、诊断特异度为86.55%,诊断准确率为93.85%。结论:PAX1和TP63基因启动子甲基化联合检测在HPV病毒阳性患者中的临床诊断中具有显著效果,其可作为疾病临床诊断的重要指标。