简介：【目的】二化螟是水稻的重要害虫之一,钙黏蛋白(cadherin,CAD)是一类重要的Bt杀虫蛋白受体,在获得二化螟钙黏蛋白基因(CsCAD1)的基础上,明确CsCAD1蛋白与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【方法】利用PCR技术克隆CsCAD1基因片段,将构建的pET-28a-(+)-CsCAD1重组质粒转入原核表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。目的蛋白经Ni柱亲和纯化后SDS-PAGE电泳检测,利用westernblot和ligandblot技术分析其与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【结果】重组载体可在表达菌株BL21中表达一个约44ku的蛋白,原核表达载体构建成功。SDS-PAGE显示该蛋白条带单一,且纯度较好。Ni柱亲和层析纯化该目的蛋白后进行Ligandblot分析,结果显示CsCAD1重组蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合。【结论】CsCAD1蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合,是潜在的Cry蛋白受体,所得结果有助于阐明Cry1Ac和Cry2Aa蛋白对二化螟的作用机制。

简介：【背景】随着转基因作物的大量种植，其环境安全性已成为目前的研究热点，其中转基因作物的荒地生存竞争能力，是其环境安全性评价的重要内容之一。【方法】以2种转双价抗草甘膦抗虫基因（EPSPS＋crylAc）棉为试验品种，非转基因棉中棉所49为对照品种，分别于4月底和5月底在荒地用地表撒播和3cm深播2种方式播种，并于4～9月份对棉花存活率、株高、真叶数、茎直径、果枝数、蕾铃数等生长参数进行比较，以检测、评价其荒地竞争能力及杂草化风险。【结果】无论是撒播还是深播，荒地中棉花长势均较弱，表现为生长缓慢、植株矮小、生育期延迟。4月底播种的棉花有极个别植株能够结铃，但铃数极少且小，无成熟的种子；5月底播种的棉花长势更弱，至9月底未见蕾铃。【结论与意义】转基因抗草甘膦抗虫棉在荒地中无竞争优势，不能繁殖传代，无杂草化风险。本研究为转基因棉花环境安全评价技术的完善提供了理论依据。

简介：[背景]转基因作物在商业化种植之前,必须评价其环境安全性.其中,荒地生存竞争能力是转基因作物环境安全性评价的重要内容之一.[方法]以转基因（Bn-csRRM2）高产棉为观察品种,受体材料中棉所12及转基因（Bt＋CpTI）抗虫棉中棉所79为对照品种,分别于2013年4月底和5月底在荒地用地表撒播和3cm深播2种方式播种,并于5～9月份对棉花存活率、株高、茎直径、果枝数、蕾铃数等生长参数进行比较,检测、评价其荒地竞争能力及杂草化风险.[结果]无论是撒播还是深播,荒地中棉花长势均较弱,表现为生长缓慢、植株矮小、生育期延迟.4月底播种的棉花至9月底未见棉铃;5月底播种的棉花有个别植株能够结铃,但铃数少且小,无吐絮铃.[结论与意义]转基因高产棉在荒地中无竞争优势,不能繁殖传代,无杂草化风险.本研究为转基因棉花环境安全评价技术的完善提供了理论依据.

简介：【背景】扶桑绵粉蚧是一种对棉花等作物具有严重威胁的新的外来人侵害虫，2008年8月在广州市区扶桑上发现该虫。关于该虫入侵种群的大小是需要明确的基本人侵生物学问题之一。【方法】采用了野外接虫、定点系统跟踪观察的方法，研究了广州地区番茄、棉花田间扶桑绵粉蚧的最小入侵种群规模。【结果】扶桑绵粉蚧初始种群侵入棉花、番茄田3d后数量急剧下降，分别减少了82．7％、61．2％，进入3龄后田间种群数量呈现持续小幅度减少的规律，进入产卵期的雌虫出现概率分别为2．83％、2．5％。棉花上扶桑绵粉蚧单雌产卵量为532．6粒，明显高于番茄（418．4粒）。棉花、番茄田的入侵种群趋势指数分别为15．09、10．46，下一代种群呈明显增长趋势，能够成功定殖。棉花、番茄田扶桑绵粉蚧自然种群存活曲线均符合Ⅰ型（凹型），存活率（S）与接虫后天数（D）的关系模型分别为S=（1．0000＋1．1．505D）-1.1250,S=（Q9996＋Q124810）^-3.0614。根据进入产卵期雌虫的概率，计算出保证扶桑绵粉蚧成功入侵的最小自然种群规模为36—40头。【结论与意义】广州地区6～8月番茄、棉花田新人侵的扶桑绵粉蚧自然种群存活曲线为Ⅰ型（凹型），最小入侵种群规模为36—40头。该结果为深入研究扶桑绵粉蚧的入侵生物学特性和制定防治策略等提供了依据。

简介：苹果蠹蛾是威胁果业生产的检疫性有害生物,已在新疆、甘肃、宁夏、内蒙古、黑龙江、辽宁、吉林等7个省发生分布。陕西省是我国主要的苹果优质产区,阻截苹果蠹蛾向陕西扩散是保护陕西乃至全国果业生产的重要举措。通过对陕西苹果蠹蛾入侵风险、阻截防控过程取得的数据进行分析,明确了入侵路径,探讨防控策略。由新疆、甘肃、宁夏等地果汁加工原料果携带幼虫远距离方式传入陕西的风险较大;由甘肃、宁夏等地经过陕西西部果区自然传播方式进入陕西的风险加剧。提出加强果汁企业监管,拒绝携带苹果蠹蛾果品进入非疫区,是防止远距离传播的最有效措施;做好自然传播的防控策略与措施研究,已迫在眉睫。

简介：【背景】此研究为“十二五”转基因生物新品种培育国家项目中创建新的转基因棉花品种环境安全评价技术而设。【方法】以转双价双成抗虫基因（cry1Ac＋cry2Ab）棉和转双价抗虫、抗除草剂基因（cry1Ac＋肼强阳）棉为观察品种，非转基因棉赣棉11号为对照品种，在荒地用撒播和3cm深度播种2种方式，于2011年5月一2012年3月对棉花出苗率、株高、生育进程、棉吐絮瓣数、絮瓣脱落率、自生苗等生存竞争能力进行比较，检测、评价其杂草化的风险，并探讨、验证检测技术的可行性。【结果】在荒地条件下，以2种方式播种的转cry1Ac＋cry2Ab基因棉和转cry1Ac＋EP5P5基因棉与非转基因棉相比，上述各项指标的竞争能力总体上未表现显著优势。【结论与意义】转cry1Ac＋cry2Ab基因棉和转cry1Ac＋EPSPS基因棉在荒地条件下生长无杂草化风险。同时，研究证明，在荒地自然生态条件下，可以采用撒播和3cm深度播种方法检测新的转基因棉花品种在生存竞争能力上的杂草化风险，在测评上有互为参照效应，为定性评价新的转基因棉花品种的杂草化风险提供了保障。

简介：烟粉虱广泛分布于全球热带和亚热带地区。近20多年，烟粉虱的一些遗传群入侵世界各地，严重危害作物生产。烟粉虱遗传结构的多样性和复杂性早已被关注，但其分类地位，尤其是烟粉虱到底是一个包含多个生物型的种还是一个包含许多隐种的物种复合体，一直颇受争议。近几年，有关烟粉虱种系发生和系统学的研究取得长足进展，有证据推论其是一个包含至少31个隐种的物种复合体，但生殖隔离证据仍显不足，种系发生分析结果也因仅依据COI一个基因而受到质疑。因此，在大多数从事烟粉虱研究的同行接受其为一个物种复合体的概念的同时，仍有同行沿用生物型的概念。在我国境内已先后报道了包括13个本地种和2个全球入侵种在内的15个烟粉虱隐种。本地种主要分布在我国南部及包括海南岛和台湾岛的东南沿海地区，隐种的多样性由南向北逐渐降低。入侵种“中东一小亚细亚1”隐种（MEAMl）（即“B型”）和“地中海”隐种（MED）（即“Q型”）分别于20世纪90年代中后期和2003年前后入侵我国，并在许多地区迅速取代了本地种而占据优势地位。全国范围内的调查数据显示，这2个入侵种可在大部分区域共同存在，但自2005年以来，MED在许多地区陆续取代MEAMl，这很可能与MED对大量使用的新烟碱类杀虫剂有较强抗性有关。本文还讨论了烟粉虱隐种复合体分类所面临的命名等难题以及大范围抽样调查的数据偏差问题。

简介：尽管geneflow源于群体遗传学和进化生物学，但已成为环境生物安全文献中常见的科学术语。花粉介导的geneflow在自然界中广泛存在并对物种和群体的进化有着特殊重要的意义。随着转基因生物技术的快速发展和转基因作物在全球范围内的广泛种植，转基因随geneflow发生逃逸及其可能带来的潜在生态进化影响已经成为环境生物安全评价和研究的重要内容，备受全球广泛关注，geneflow这个术语在我国也被频繁引用。但是，geneflow的中文术语在我国各种文献资料中存在着十多种翻译版本，这些不同的翻译版本形式不同且内容略有差异，容易给环境生物安全问题的理解和研究造成不必要的混乱。本文对geneflow的概念及其内涵进行了回顾，并对不同形式的geneflow术语在国内外相关研究领域中使用的历史溯源进行了阐述。笔者建议使用“基因流”作为geneflow在中文应用中的统一术语，这也最接近群体遗传学和进化生物学等相关著作中geneflow的原意。基于此，对基因流在转基因逃逸及其相关的环境生物安全评价以及群体遗传学和进化生物学研究方面的理论和应用意义进行了讨论。

简介：[背景]自入侵中国之后,红火蚁已给农林业、健康卫生、生态环境等造成了危害。红火蚁在中国的入侵、扩散路径及方式等仍然是待解决的问题。[方法]利用微卫星分子标记,对来自国内14个地区和国外1个地区共15个红火蚁地理种群的遗传多样性水平及种群遗传结构进行了研究。[结果]应用7对微卫星引物共检测到28个等位基因,15个红火蚁种群在各微卫星位点的基因型频率均符合Hardy-Weinberg平衡。各种群的平均表观杂合度HO、预期杂合度HE、Shannon信息指数Ⅰ、基因多样性指数Nei＇s和多态位点百分率P分别为0.2848、0.2708、0.3174、0.2629和43.63%,研究结果表明这15个红火蚁种群具有比较丰富的遗传多样性。种群间平均分化系数FST为0.4258,说明有42.58%的变异来源于种群间,表明红火蚁各种群之间有较高程度的分化,且遗传分化可能是由地理隔离和基因流障碍（Nem=0.7442）共同引起。遗传距离D显示,河源种群与其他种群间的遗传距离均相对高于其他各种群间的遗传距离,表明河源种群与其他地理种群之间存在较大的遗传差异,可能是较为原始的类型。[结论与意义]短距离的种群主要通过自然扩散方式传播,地理距离与亲缘关系有一定的相关性;长距离的种群主要依靠人为传播,因此地理距离与遗传距离不成正比。对于长距离的入侵事件,监控与检疫是关键的预防措施。

简介：行为特征可在外来动物建立种群和扩张过程中发挥重要作用,因此,要正确理解动物入侵,常常需要仔细研究其行为机制。20世纪80年代以来,随着动物入侵规模在世界各地的迅速加剧,有关其行为机制的研究也受到了广泛关注。最近一些研究表明,一些入侵动物种内攻击和觅食等行为具有可塑性,因此它们能够灵活应对多变的环境条件,这对于种群的建立和维持至关重要;入侵动物与土著物种发生行为互作时,往往占据优势,从而取代土著物种,并有助于其地域扩张;入侵动物长距离扩散可以提高其地域扩张速度,许多行为可与扩散行为结合进一步促进扩张。今后需要加强对入侵动物的行为分析,使之全面地融合到生物入侵的研究之中。这不仅可以提高对外来物种入侵的预警和治理能力,而且为探索动物行为的奥秘以及动物间行为互作在物种进化中的意义提供了独特的机会。

简介：【目的】蛋白样品的制备是获得良好双向凝胶电泳（2-DE）图谱的前提,建立合理的西花蓟马蛋白的双向电泳体系,获得分辨率较高、重复性较好的图谱,能够为后续的研究提供有力支撑.【方法】实验以西花蓟马成虫为实验材料,对比了饱和酚法、TCA/丙酮法和直接裂解法3种蛋白提取方法,从中选出最适宜双向电泳分析的一种蛋白提取方法.【结果】3种方法蛋白提取率差异显著,直接裂解法蛋白提取率最高,饱和酚法的蛋白提取率最低;3种方法的SDS-PAGE条带数差异不明显;TCA/丙酮法的双向凝胶图谱效果最好,蛋白点最多.【结论】TCA/丙酮法能够有效去除西花蓟马蛋白中的干扰物质,是最适合西花蓟马双向凝胶电泳的蛋白提取方法,为后续西花蓟马在蛋白组学方面的研究奠定了基础.

简介：瓜实蝇BactroceracucurbitaeCoquillett是世界上重要的检疫性害虫,通过在14、18、22、26、30、34℃温度下孵化和饲养实验,测定该虫卵、幼虫、蛹、产卵前期、世代的发育起点温度和有效积温分别是8.0982℃、4.5245℃、4.5245℃、7.4751℃、10.0019℃和28.8506、162.7462、145.7249、166.5126、503.8343日度。根据该虫的致死温度和有效积温模型,运用数学分析和地理信息系统技术,预测了瓜实蝇在中国的适生区和年发生代数,结果表明:该虫可在中国48.96%地区发生(气象站点所代表的地区),1年发生2-12代,以4～6代为主。

简介：【背景】白花鬼针草为农区恶性杂草,原产于美洲,现已广泛分布于世界热带及亚热带地区,但其在全球和中国的适生区域及适生等级还不明确.【方法】利用MaxEnt生态位模型对白花鬼针草在全球以及中国的潜在适生区进行预测.【结果】白花鬼针草在全球的分布更多受到温度因素的影响.白花鬼针草的适生区主要集中在北半球和南半球15°-30°之间的热带和亚热带地区.其中,北美南部、南美中南部、非洲南部、东南亚北部以及大洋洲中南部沿海地区为白花鬼针草中、高度适生区.白花鬼针草在中国的适生区主要位于广东、广西、海南、云南、福建、台湾.到2070年,白花鬼针草在全球的适生区面积与当前相似,但在中国的适生区有所增大.【结论】白花鬼针草在我国有进一步扩张的风险.

简介：[背景]青檀绵叶蚜是近几年在山东枣庄市发现危害青檀的新物种,该蚜虫对青檀造成了一定的危害.[方法]2013年对山东和安徽青檀分布地实地调查确定青檀绵叶蚜的分布情况,并结合我国环境变量,采用Maxent生态位模型对青檀绵叶蚜在中国的潜在地理分布进行预测.[结果]青檀绵叶蚜潜在高风险区大面积集中在山东,江苏和北京有零星分布;中风险区大面积集中在河北、河南、安徽和江苏;低风险区集中在山西、四川、江西、辽宁、湖北、湖南和浙江等地区.[结论与意义]青檀绵叶蚜潜在分布区集中在中国中东部地区,这对青檀分布地区预防青檀绵叶蚜发生有重要意义.

简介：本文以中季稻区稻田主要害虫稻飞虱、稻纵卷叶螟和捕食天敌蜘蛛的田间系统调查资料为基础，以害虫—天敌—农药系统为研究对象，应用害虫管理系统工程的原理，处理害虫、捕食天敌与农药三者之间的关系。建立了稻纵叶螟—蜘蛛—甲胺磷和稻飞虱—蜘蛛—甲胺磷两系统优化管理模型，绘制了它们的优化反馈控制策略图，利用微机对系统进行最优监控。使用时输入当前田间害虫与天敌数量，就可对系统作出即时的预测和最优决策。该策略确立的控制害虫的最优性能指标，是使害虫对农作物的为害所造成的损失与防治费用之和最小，并且使害虫和天敌的数量处于系统平衡状态。文中比较分析了该策略与基于经济阈值的常规害虫管理策略，指出了新策略在害虫综合治理中对天敌数量进行控制和管理的作用及其意义。

简介：遗传转化标记是将遗传修饰昆虫从野生型种群中分辨出来的根据，遗传转化昆虫的鉴定、转化品系的维持及其遗传稳定性的监测都依赖于可靠的标记系统，发展易于应用和监测的转化标记能够极大地促进害虫遗传防治的相关研究。用于遗传修饰昆虫的转化标记主要有昆虫眼睛颜色标记基因、抗药性标记基因和荧光蛋白标记基因等。非果蝇类昆虫首个遗传转化品系的鉴定是通过眼睛颜色突变而实现，但大多数昆虫物种没有可用的突变体或缺少相应基因的信息，从而限制了眼睛颜色标记的应用。抗药性基因标记虽然能够通过对转化昆虫进行集体选择而大幅度提高筛选转化体的效率，但由于其鉴定的准确性不高且存在安全性问题，未得到广泛应用。荧光蛋白标记基因的发展则显著拓宽了能够转化的昆虫种类。从水母分离的绿色荧光蛋白（GFP）经突变方法获得了多种不同荧光性质的突变体，经人为修饰后与适宜的强启动子构成转化标记载体，能够有效鉴定更多昆虫物种的遗传转化个体，其中应用较多的是增强型绿色荧光蛋白（EGFP）。此外，从珊瑚属海葵中分离得到的红色DsRed标记基因提供了多样化的红色荧光蛋白选择，在某些生物中DsRed与GFP联合应用的表现明显优于GFP突变体，所以其应用前景也非常广泛。本文着重从眼睛颜色、抗药性和荧光蛋白等3个方面阐述了标记基因的发展历史与现状，并对其今后的发展方向进行了展望。

简介：【背景】西花蓟马自2003年传入我国以来，呈扩张趋势。辣椒上西花蓟马以化学防治为主，国内尚无抗性资源保护、抗（耐）虫性资源筛选等相关研究。【方法】以20个辣椒品种和西花蓟马为材料，采用幼苗接虫法，根据危害症状分级，计算为害指数并作为抗（耐）评价指标，然后测定不同抗（耐）材料苗期受西花蓟马危害后防御酶活性的变化，探讨其与抗性的关系。【结果】在20个供试辣椒品种中，湘研13号和博辣4号对西花蓟马的抗性较强，其他品种抗性较差,兴蔬绿剑抗性最差；不同辣椒品种抗（耐）虫性与过氧化物酶变化呈正相关，但与过氧化氢酶相关性不显著。【结论与意义】本研究建立了辣椒抗（耐）西花蓟马的筛选评价体系，为挖掘抗西花蓟马的种质资源和西花蓟马的有效防控提供了依据。

简介：【背景】大小蠹属昆虫是重要的林木害虫，我国口岸有多次截获记录，确定大小蠹的来源地可以有针对性地加强对大小蠹的检验检疫工作。【方法】测定了5种高风险大小蠹（红脂大小蠹、红翅大小蠹、中欧山松大小蠹、落叶松大小蠹和间大小蠹）共12个样本的线粒体DNA细胞色素氧化酶c亚基I基因（COI）的部分序列。【结果】利用巢式PCR技术，在不同种类的大小蠹样本中均获得了530bp的靶标片段，比对分析显示，不同种大小蠹之间的COI序列差异显著，同种大小蠹不同个体之间的COI序列存在一定的差异，但差异不显著。系统进化树分析结果显示，大小蠹可以明显分为2支，其中，间大小蠹单独为一分支，另一分支由红脂大小蠹、红翅大小蠹、中欧山松大小蠹和落叶松大小蠹组成；同时，同种大小蠹不同个体的来源情况在进化树中有一定体现。【结论与意义】COI基因可以较好地反映样本的来源地，对今后制定大小蠹的具体检验检疫措施有实际指导意义。

简介：作为防治或根除重大害虫最为有效的手段之一，害虫遗传防治在世界范围内被广泛采用并取得了巨大成功。本文综述了不育昆虫技术、雌性致死系统和昆虫显性致死技术等经典害虫遗传防治策略的发展历史、技术特点和应用情况。近年来，许多新的分子生物手段被不断提出并整合到害虫遗传防治策略中，包括归巢核酸内切酶基因、锌指核酸酶、转录激活因子样效应因子核酸酶、CRISPR／Cas9系统、Medea元件、Killer．Rescue系统、Wolbachia．细胞质不亲和性系统等。基于这些新的工具手段，许多国家已经在不同程度上启动了下一代害虫遗传防治项目。而我国在该领域的研究相对薄弱，需要在借鉴国外成功经验的同时，进一步加强害虫遗传防治的基础和应用研究，从而实现本地有害生物的可持续治理和外来人侵生物的有效狙击．确保我国未来的粮食和生态安全。

简介：本文主要以雪橙Citrussinensis（um）Osbeckcv．XueCheng为研究对象，研究了成年雪橙树对印楝素药液的吸收速率，印楝素注射雪橙树后在雪橙叶片中的富集和消解动态，结果显示：采用药水吸收系数评价雪橙树对印楝索水溶液的吸收速率和日平均吸药量的试验结果表明，雪橙树对印楝素水溶液的吸收速度在不同时间存在明显差异，以14时至15时为吸药量最高点，吸收值为35．8mL／h，该时段也是试验当天最高温度时段。日平均累积吸药量为221．8mL，药水系数为2．98。不同浓度印楝素注射雪橙树后，在叶片中的富集量和消解动态一致。印楝素富集量在注射后9一lO天达到了峰值，注射后56天各注射浓度的雪橙树叶片中仍能检测到印楝素，而印楝素喷雾处理的雪橙树植株的叶片在药后7天即无检测量。