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  • 简介:真核细胞房间最惹人注目的形态特征是各种各样围住膜分隔空间存在。包括细胞器和短暂运输中介,这些分隔空间不是静态。更确切地说,蛋白质和膜动态交换被需要维持细胞动态平衡。膜动员最戏剧例子之macroautophagy过程期间被看见。Macroautophagy是为长寿蛋白质和细胞器降级主要细胞小径。响应环境暗示,例如饥饿或应力另外类型,房间生产唯膜结构,phagophore.Thephagophore扣押它形成双膜cytosolic泡细胞质,anautophagosome。结束之后,autophagosome与溶酶体熔化或在酵母液泡,它交付水疗放射激光与它货物,和产生大分子起毁坏内部autophagosome膜回来被释放进cytosol因为reuse.Autophagy因此是正在骑车过程,允许房间熬过滋养限制时期;然而,它有更宽生理角色,参予开发和老化,并且另外在对病原体侵略,癌症和某些neurodegenerative保护疾病。许多情况中,autophagy角色通过autophagy相关蛋白质研究被识别,Atg6/Beclin1。这蛋白质是类脂化合物kinase建筑群部分,并且最近研究建议它在协调autophagy并且反对apoptosis细胞死亡过程thecytoprotective功能起中央作用。这里,我们总结我们Atg6/Beclin的当前知识1在在细胞不同模型有机体和它功能。

  • 标签: 溶酶体 磷酸肌醇 蛋白质 液泡 酵母
  • 简介:兼容丑恶纸巾表面上花粉萌芽是为植物授精必要步。这里,我们报导Arabidopsis变异bcl1是由于花粉萌芽失败不育男性。我们证明bcl1异种等位基因不能被男配偶体播送,没有同型结合bcl1异种被获得。花粉发育阶段分析显示bcl1变化影响花粉萌芽然而并非花粉成熟。分子分析证明花粉萌芽失败被AtBECLIN1混乱引起。AtBECLIN1成熟花粉主要被表示并且与重要相同编码蛋白质到酵母为autophagyandvacuolar蛋白质排序过程(VPS)要求Beclin1/Atg6/Vps30。我们也证明AtBECLIN1为正常被要求植物开发,和那与autophagy,VPS和glycosylphosphatidylinositolanchor系统有关基因,被AtBECLIN1缺乏影响。

  • 标签: 拟南芥 AtBECLIN1 花粉萌发 植物发育
  • 简介:Brassinosteroids(BR)被transmembrane受体和戏察觉植物生长和开发重要角色,以及响应环境刺激房间。transmembrane受体BRI1能直接绑在brassinolide(BL),并且BAK1与BRI1交往提高发信号调停BRI1BR。我们以前研究显示了那膜类固醇绑定蛋白质(MSBP1)1能在vitro绑在BL并且否定地涉及BR发信号。进步阐明内在机制,我们这里证明MSBP1明确地以种BL独立方式vivo与BAK1细胞外领域交往。由MSBP1增加表示压制房间扩大和BR回答能被overexpressingBAK1或它细胞内部kinase领域恢复,建议MSBP1可以压制通过与BAK1交往发信号BR。Subcellular本地化研究表明MSBP1和BAK1血浆膜和endocytic泡局部性,MSBP1加速BAK1endocytosis,它导致由向内涵体转移BAK1平衡发信号压制BR。确实,提高了MSBP1表示还原剂在在vivoBRI1和BAK1之间相互作用,表明那MSBP1发信号BR早步充当否定因素小径。

  • 标签: 油菜素内酯 信号转换 跨膜受体 内吞作用 结合蛋白 类固醇
  • 简介:Changesinthedistributionof1P1-antigeninthedevelopingchickretinahavebeenexaminedbyindriectimmunofluorescencestainingtechniqueusingthenovelmonoclonalantibody(MAb)1P1.Expressionofthe1P1antigenwasfoundtoberegulatedinradialaswellasintangentialdimensionoftheretina,beingpreferentiallyorexclusivelylocatedintheinnerandouterplexiformlayersoftheneuralretinadependingonthestagesofdevelopment,Withtheonsetoftheformationoftheinnerplexiformlayer1P1antigenbecomesexpressedintheretina.Withprogressingdifferentiationoftheinnerplexiformlayer1P1immunofluorescencerevealed2subbandsatE9and6subandsatE18,Atpostnatalstages(afterP3)immunoreactivitywasreducedinaninside-outsidesequenceleadingtothecompleteabsenceofthe1P1antigeninadulthood.1P1antigenexpressionintheouterplexiformlayerwasalsosubjecttodevelopmentalregulation.Thespation-temporalpatternof1P1antigenexpressionwascorrelatedwiththetimecourseofhistologicaldifferentationofchickretina,namelythesynapserichplexiformlayers.Whetherthe1P1antigenwasfunctionallyinvolvedindendriteextensionandsynapseformationwasdiscussed.

  • 标签: 鸡胚 视网膜发育 网织层 IP1抗原 表达 时空分布
  • 简介:囊包含域蛋白质属于phosphoinositide磷酸酶(PIPPase家庭)最新识别的家庭。尽管有描绘得好活动,这个哺乳动物囊领域PIPPase家庭生物功能仍然保持大部分未知。我们识别了新奇囊包含域蛋白质,老鼠Sac3(rSac3)它是广泛地各种各样纸巾表示了并且endoplasmic蜂窝胃局部性,Golgi复杂、再循环内涵体。rSac3vitro作为底层与PI(3)P,PI(4)P和PI(3,5)P(2)显示PIPPase活动,并且囊域催化核心变化废除它活动。rSac3表示起来刺激神经生长因素(NGF)期间调整了PC12细胞neuronal区别,并且在这表示上,蛋白质PC12细胞支持神经突长出。相反地,由反感觉oligonucleotidesrSac3表示抑制减少刺激NGFPC12神经突长出,并且rSac3活跃地点变化消除它neurite-outgrowth-promoting活动。这些结果显示rSac3通过它PIPPase活动区分神经原支持神经突长出,建议囊领域PIPPase蛋白质可以参予从到血浆膜endoplasmic蜂窝胃和Golgi建筑群前面的膜交通国王,并且可以作为neuronal房间生长和区别的这个关键过程管理者工作。

  • 标签: 细胞内薄膜 神经突 PC12细胞 磷酸肌醇
  • 简介:ThesplicingofmanyalternativeexonsintheprecursormessengerRNA(pre-mRNA)isregulatedbyextracellularfactorsbuttheunderlyingmolecularbasesremainunclear.HerewereportthedifferentialregulationofBcl-xpre-mRNAsplicingbyextracellularfactorsandtheirdistinctrequirementsforpre-mRNAelements.InK562leukemiacells,treatmentwithinterleukin-6(IL-6)orgranulocyte-macrophagecolonystimulatingfactor(GM-CSF)reducedtheproportionoftheBcl-xLvariantmRNAwhiletreatmentwith12-O-tetradecanoylphorbol13-acetate(TPA)hadnoeffect.InU251gliomacells,however,TPAefficientlyincreasedtheBcl-xLlevel.Theseregulationswerealsoseenforatransfectedsplicingreportermini-gene.Furtheranalysesofdeletionmutantsindicatethatnucleotides1-176ofthedownstreamintronarerequiredfortheIL-6effect,whereasadditionalnucleotides177-284areessentialfortheGM-CSFeffect.AsfortheTPAeffect,onlynucleotides1-76arerequiredinthedownstreamintron.Thus,IL-6,GM-CSFandTPAdifferentiallyregulateBcl-xsplicingandrequirespecificintronicpre-mRNAsequencesfortheirrespectiveeffects.

  • 标签: 信使RNA前体 交替剪接 BCL-X基因 白细胞间介素-6 12-氧-四价-13-醋酸酯 粒细胞-巨噬细胞菌落刺激因子
  • 简介:Arabidopsisthaliana嘘deacetylase1(AtHD1或AtHDA19),酵母RPD3相当或相同事物,是植物许多生理、发展过程全球管理者。尽管有为植物基因规定和开发AtHD1角色基因证据,AtHD1生物化学、细胞性质糟糕被理解。这里,我们vivo报导AtHD1细胞本地化模式并且嘘vitro项deacetylase活动。绿荧光灯蛋白质(GFP)短暂、稳定表示洋葱房间标注了AtHD1并且分别地,转基因Arabidopsis根,种子和叶子表明AtHD1euchromatic区域大概原子核是局部性并且从核排除。AtHD1本地化模式与涉及核形成和transgenessilencing并且分别地重复了DNA元素AtHD2和AtHDA6那些不同。另外,histdeacetylase活动试金证明细菌生产recombinantAtHD1示威了特定嘘vitro项deacetylase活动。数据建议AtHD1是原子蛋白质并且拥有嘘为对植物生长和开发重要全球transcriptional规定负责项deacetylase活动。

  • 标签: 组蛋白脱乙酰基1 常染色体 基因抑制 植物
  • 简介:TheyeastHAL1genewasintroducedintoArabidopsisthalianabyAgrobacteriumtumefaciens-mediatedtransformationwithvacuuminfiltrationunderthecontrolofCaMV35Spromoter.Thirty-threeindividualkanamycinresistantplantswereobtainedfrom75,000seeds.SouthernblottinganalysisindicatedthatHAL1genehadbeenintegratedintoallofthetransgenicplants'genomes.ThecopynumberofHAL1geneintransgenicplantswasmostly1to3bySouthernanalysis.Phenotypesoftransgenicplantshavenodifferenceswithwildtypeplants.Severalsamplesoftransformantswereself-pollinated,andprogeniesfromtransformedandnon-transformedplants(controls)wereevaluatedforsalttoleranceandgeneexpression.MeasurementofconcentrationsofintracellularK+andNa+showedthattransgeniclineswereabletoretainlessNa+thanthatofthecontrolundersaltstress.ResultsfromdifferenttestsindicatedtheexpressionofHAL1genepromotesahigherlevelofsalttoleranceinvivointhetransgenicArabidopsisplants.

  • 标签: 耐盐碱性 HAL1基因 基因工程
  • 简介:Brassinosteroids(BR)是植物激素主要组调整植物生长和开发。BRI1,对质膜局部性蛋白质,当BR受体和它被建议了,工作它kinase活动调整BR植物生长和开发有必要角色。这里,我们报导隔离和bri1新等位基因分子描述,bri1-301,哪个表演中等词法显型和减少回答到正常生长条件下面的BR。顺序分析从GG识别了二底改变到,导致到BRI1kinase领域989I989G变换。kinase活动试管内试金证明bri1-301不向BRI1底层TTL和BAK1举办可检测autophosphorylation活动或磷酸化活动。而且,我们结果建议甚至与极其损害kinase活动,bri1-301仍然调整植物生长和开发保留部分功能,它提出BRI1kinase活动是否高等植物为调停BR生长和开发是必要问题。

  • 标签: 芸苔素类固醇 BRI1 植物激素 生物学功能 酶活性
  • 简介:被象染色体冷凝作用,面向双性人锭子形成,染色体大会离子,分离和胞质分裂那样系列紧安排事件精确通过有丝分裂调整。染色体运动被和位于着丝点以内专业化染色体领域锭子微导管相互作用在有丝分裂期间管理。这个专业化区域,叫了kinetochore,是为锭子微导管着丝点地点协会。除了用作染色体和锭子微导管之间物理连接,kinetochore通过微导管马达和定位在或在它附近锭子集会检查点(囊)传感器chromosomal分离展出活跃角色[例如,1]。

  • 标签: 细胞周期蛋白B1 交响乐 管弦乐队 有丝分裂 导体
  • 简介:Galα(1,3)Gal(galepitope)isacarbohydrateepitopeandsynthesizedinlargeamountbyα(1,3)galactosyltransferase[α(1,3)GT]enzymeonthecellsoflowermammaliananimalssuchaspigsandmice.Humanhasnogalepitopeduetotheinactivationofα(1,3)GTgenebutproducesalargeamountofantibodies(anti-Gal)whichrecognizeGalα(1,3)Galstructuresspecifically.Inthisstudy,areplicationdeficientrecombinantadenoviralvectorAd5sGTcontainingpigα(1,3)GTcDNAwasconstructedandcharacterized.Adenoviralvector-mediatedtransferofpigα(1,3)GTgeneintohumantumorcellssuchasmalignantmelanomaA375,stomachcancerSGC-7901,andlungcancerSPC-A-1wasreportedforthefirsttime.ResultsshowedthatGalepitopedidnotincreasethesensitivityofhumantumorcellstohumancomplement-mediatedlysis,althoughhumancomplementactivationandthebindingofhumanIgGandIgMnaturalantibodiestohumantumorcellswereenhancedsignificantlyafterAd5sGTtransduction.AppearanceofgalepitopeonthehumantumorcellschangedtheexpressionofcellsurfacecarbohydratesreactingwithUlexeuropaeusI(UEAI)lectins,Viciavillosaagglutinin(VVA),Arachishypogaeaagglutinin(PNA),andGlycinemaxagglutinin(SBA)todifferentdegrees.Inaddition,noeffectofgalepitopeonthegrowthinvitroofhumantumorcellswasobservedinMTTassay.

  • 标签: 腺病毒载体 半乳糖转移酶 GAL α(1 3) Gao 基因表达
  • 简介:SomerecentstudiesindicatedthatGABAergicsystemisinvolvedinmammalianspermacrosomereaction(AR),butdirestevidencepertainingtotheexpressionofgatlinmammalianspermisnotyetdemonstrated.Inthisstudy,weevaluatedthepresenceof67kDaGAT1proteinandmRNAinrattestisbyWesternblottingandreversetranscription-polymerasechainreaction.Meanwhile,immunohistochemicalandimmunofluorescentanalysesalsoidentifiedGAT1proteinontheelongatedspermatidandsperm.Theseresultsindicatedthatrattestisisanovelsiteofgatlexpression.FurtherstudiesshouldbetakentoexploretheroleofGAT1proteinonspermacrosomereaction.

  • 标签: 大鼠 精子 睾丸 GAT1 表达 GABA
  • 简介:以便学习TGF-beta1结构功能细节,重组体老鼠TGF-beta1成熟形式细菌被表示。TGF-beta1(氨基酸279-390)112氨基酸carboxyl终端部分合成被可诱导基因表示系统基于抗菌素T7RNA控制。这个系统允许重组体TGF-beta1活跃、选择合成。减少条件下面SDS-polyacrylamide胶化上决定表示TGF-alpha1单体分子量是大约13kD。连续净化洗与纯化步是足够净化表示产品到同质单个胶化过滤结合了。氨基终端定序表明重组体蛋白质N终端与出版数据相同。西方污点分析,重组体多肽polyclonalTGF-beta1抗体显示出优秀antigenicity。在这研究表示成熟重组体老鼠TGF-beta1提供有用工具因为未来详细说明了结构、功能研究。

  • 标签: 转化生长因子-β1 重组表达 包涵体 提纯 抗原性
  • 简介:Thereareabout17chromosomesinyeastSaccharomycescerevisiae.Amiddlesizedchromosome,chromosomeV,waschoseninthisworkforstudyingandconstructingthephysi-calmaps.ChromosomeVfromstrainA364awasisolatedbypulsed-fieldgradientgelelectrophoresis(PFGE).GelslicescontainingchromosomeVDNAweredigestedwithtworarecuttingenzymes,NotⅠandSfiⅠ,andthree6-Ntrecognizingenzymes,SmaⅠ,SstⅡandApaⅠ.Severalstrategies-partialorcompletedigestions,digestionwithdifferentsetsoftwoenzymes,andhybrid-izationwithclonedgeneticallymappedprobes(CAN1,URA3,CEN5,PRO3,CHO1,SUP19,RAD51,RAD3)——wereusedtoaligntherestrictionfragments.Thereare9,9,15,17,and20sitesforNotⅠ,SfiⅠ,SmaⅠ,SstⅡandApaⅠrespectivelyinthemapoftheA364achromosomeV.Itstotallengthwascalculatedtobe620Kb(Kilo-bases).Thedistributionsofthecuttingsitesforthesefiveenzymesthroughthewholechromosomearenotuniform.Acomp-arisonbetweenthephysicalmapandthegeneticmapwasalsomade.

  • 标签: YEAST chromcsome V macro-physical map DNA
  • 简介:<正>WeandothershavefirmlyestablishedthatsurfaceIgMreceptor(sIgM-R)crosslinkingwithantibodiestotheiheavychain(anti-i)leadstogrowtharrestandapoptosisinaseriesofwellcharacterizedB-celllymphomas.Thisrequiresablationofc-Mycproteinexpressionandtheconcomitantinductionofthecyclin-dependent-kinaseinhibitor,p27Kip1.Thesignalingmechanismsregulatingc-Mycandp27Kip1proteinexpressionarepoorlyunderstood.However,werecentlyestablishedthatsIgM-Rmediateddown-modulationofthePI-3Kpathwaydirectlyaffectedc-Mycandp27Kip1expressionandaccuratelypredictedgrowtharrest

  • 标签: CH12B细胞淋巴瘤 细胞生长阻滞 细胞凋亡 PI-3K通路 信号转导 IgM受体抗体
  • 简介:细胞内部氧化还原作用动态平衡决定肿瘤房间敏感到导致药apoptosis起关键作用。这里,我们调查了thioredoxin-1(TRX1)角色,氧化还原作用规定关键部件,砷三氧化物(作为(2)O(3))导致apoptosis。HepG(2)房间野类型TRX1表示上导致了抑制当(2)O(3)导致了细胞色素c(cytoc),释放,caspase激活和apoptosis,并且由RNAiTRX1表示绒毛规定敏化HepG(2)房间到当(2)O(3)导致了apoptosis。有趣地,到重量单位(32/35)从Cys(32/35)TRX1活跃地点变化从apoptotic保护者把这个分子变换成apoptotic倡导者。以理解这变换机制,我们从老鼠肝使用了孤立线粒体并且发现了野类型TRX1能保护那重组体从apoptotic线粒体变化。相反,TRX1变异形式独自得到了线粒体相关apoptotic变化,包括mitochondrial渗透转变毛孔(mPTP)洞,mitochondrial膜潜力损失,和cyto从线粒体c版本。这些apoptotic效果被cyclosporineA(CsA)禁止,显示指向到mPTP那变异TRX1。到由2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB)氧化形式体内从它减少形式TRX1改变,TRXreductase特定禁止者,也敏化HepG(2)房间到当(2)O(3)导致了apoptosis。这些数据建议TRX1由任何变化由堵住cytoc版本调整apoptosis,并且TRX1激活起中央作用或活跃地点半胱氨酸氧化可以敏化肿瘤房间到当(2)O(3)导致了apoptosis。

  • 标签: 肝癌 三氧化砷 线粒体 细胞色素 细胞凋亡