简介：摘要目的探讨NLRP在光老化皮肤成纤维细胞表达变化和皮肤光老化机制中的作用。方法2018年8月至2019年4月，在中山大学附属第三医院泌尿外科取3例儿童包皮环切术后包皮组织，分离培养成纤维细胞，并分为UVA照射组和空白对照组，UVA照射组接受连续UVA照射诱导慢性光损伤，空白对照组不接受UVA照射，通过CCK8试剂盒、β-半乳糖苷酶染色(SA-β-Gal)及细胞凋亡率检测验证建模。Western免疫印迹试验检测NLRP1、2、3、8蛋白表达。高通量测序技术检测调控NLRP炎症小体的非编码RNA表达变化。结果UVA照射组细胞活性(70.0±4.7)%明显低于空白对照组(93.0±2.2)%，t＝6.93，P<0.05；细胞老化率(83.1±4.4)%高于空白对照组老化率(9.2±0.85)%(t＝25.21，P<0.05)；细胞凋亡率(34.5±7.1)%高于空白对照组 (9.3±2.2)%(t＝6.42, P<0.05)。蛋白定量检测结果显示，UVA照射组NLRP1、2、3、8表达较空白对照组(0.75±0.43)均上调，分别为5.59±0.99、3.84±0.69、9.98±1.72、1.57±0.56。高通量测序技术检测UVA照射组与空白对照组之间差异表达LncRNA，发现可调控NLRP炎症小体的长链非编码RNA中差异表达LncRNA共23个，其中变化最明显的为lnc-NLRP1、lnc-NLRP3。结论反复UVA照射可上调NLRP炎症小体及其长链非编码LncRNA的表达，可通过参与活性氧自由基聚集、信号通路激活、自噬、基质金属蛋白酶/溶酶体组织蛋白酶家族表达及活性改变等机制，引起皮肤光老化。

简介：摘要目的初步探究circIGF2BP3对光老化皮肤成纤维细胞自噬水平的影响。方法取中山大学附属第三医院泌尿外科6例儿童包皮环切术后包皮组织，分离培养成纤维细胞，以每日10 J/cm2长波紫外线（UVA）连续照射14 d，建立UVA诱导的光老化成纤维细胞模型（UVA处理组），未经处理的正常成纤维细胞作为对照组，β半乳糖苷酶染色、Western印迹法检测P21蛋白表达，CCK8法检测细胞活力验证建模是否成功。Western印迹法检测光老化成纤维细胞中自噬相关蛋白P62、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ表达，qRT-PCR验证光老化与正常成纤维细胞间circIGF2BP3表达差异，并对其进行生物学注释。将原代成纤维细胞分为4组：空载组、UVA +空载组，circIGF2BP3过表达组、UVA+ circIGF2BP3过表达组，Western印迹法检测各组细胞中自噬相关蛋白表达水平。两独立样本均数的比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果UVA处理组β半乳糖苷酶染色阳性率（61.33% ± 5.78%）、P21蛋白表达（1.25 ± 0.03）均显著高于对照组（6.37% ± 0.32%、1.00 ± 0.05，t = 9.49、4.26，P < 0.01、< 0.05），而细胞活力（74.33% ± 3.48%）显著低于对照组（100%，t = 7.38，P < 0.01）。UVA处理组P62蛋白表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值均显著高于对照组（均P < 0.05）。光老化成纤维细胞中circIGF2BP3的相对表达量为0.72 ± 0.04，显著低于对照组（1.00 ± 0.03），t = 5.46，P < 0.01。circIGF2BP3过表达组P62蛋白表达（0.60 ± 0.01）及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值（0.71 ± 0.01）均显著低于空载组（1.00 ± 0.02、1.00 ± 0.01；t = 16.25、2.75，P < 0.01、P < 0.05）；UVA + circIGF2BP3过表达组P62蛋白表达（1.05 ± 0.02）及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值（2.04 ± 0.05）亦均显著低于UVA +空载组（1.31 ± 0.02、2.72 ± 0.14；t = 10.49、6.47，均P < 0.01）。结论circIGF2BP3可调控UVA诱导的光老化皮肤成纤维细胞自噬水平，为防治光老化提供了新的潜在治疗靶点。