简介：无

简介：摘要目的制备GII.3[P12]型人源诺如病毒(human norovirus, HuNoV)广州株GZ2013-L20的病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)和多克隆抗体，系统表征其免疫原性特征和受体结合能力，为HuNoV防控提供数据支撑。方法以GZ2013-L20毒株基因组为模板，扩增ORF2并构建重组转座载体，转化至大肠埃希菌DH10Bac获得重组杆状病毒质粒Bacmid-L20-ORF2，在昆虫细胞sf9中表达目的VLP，采用透射电镜、SDS-PAGE、Western blot(WB)和受体结合实验等方法对纯化后VLP进行鉴定。此外，将VLP免疫小鼠获得多克隆抗体，通过间接ELISA和受体结合阻断试验进行评价。结果构建了重组杆状病毒Bacmid-L20-ORF2，并成功获得目的毒株VLP；透射电镜显示颗粒直径约为30 nm；SDS-PAGE和WB结果显示蛋白相对分子质量(Mr. ×103)约58；受体结合实验表明，目的VLP与分泌型唾液受体(A型、B型、AB型和O型)、O型非分泌型唾液受体以及猪胃黏蛋白均能有效结合；VLP多克隆抗体效价达到2×105，且与20种(20/28)基因型HuNoV的衣壳蛋白具有交叉免疫反应；受体结合阻断实验显示，多克隆抗体仅对同型VLP具有中和阻断效果，而对GII.2、GII.4、GII.8和GII.17等基因型VLP没有中和作用。结论GII.3[P12]型HuNoV广州株VLP与分泌型和非分泌型唾液受体均呈现较强的结合能力，其多克隆抗体具有免疫结合广谱性，但中和阻断效果仅对同型病毒有效，其结果为疫苗研发的理性设计提供基础数据。

简介：摘要目的建立诺如病毒原型株诺瓦克病毒（Norwalk virus，NV）P蛋白细菌细胞表面展示体系，并对其进行功能评价。方法构建pET28a-inaQn-TB-P(GI.1)重组质粒，并在大肠杆菌中进行诱导表达，建立升级版假NV。以猪胃粘膜提取物中已知NV受体组织血型抗原（human histo-blood group antigens，HBGAs）为对象，验证假病毒特异性识别、捕获HBGAs的能力；以生菜叶中类HBGAs为对象，验证升级版假NV捕获生菜叶中NV配体的特性，并对所捕获的配体进行初步分析。结果获得可高效捕获NV受体/配体的假病毒体系，该体系可特异性识别并捕获猪胃粘膜提取物中A型HBGA和生菜中类HBGAs。另外，所捕获生菜中类HBGAs可以分别被A、H和Lewis a型HBGA单克隆抗体识别，且以H型HBGA抗原位点暴露最多。结论本研究成功建立了NV的P蛋白细菌细胞表面展示体系，可以识别并捕获HBGAs及其类似物，为解析NV与配体互作机制提供技术平台。

简介：摘要目的建立基于原位捕获反转录实时定量PCR方法（in situ capture real time quantitative reverse transcription PCR，ISC-RT-qPCR）检测感染性A组轮状病毒（group A rotavirus，RVA）的体系，并对其进行评估。方法以自行构建的NSP3重组质粒为对象，绘制标准曲线；通过优化ISC-RT-qPCR体系中猪胃粘膜提取物（porcine gastric mucin，PGM）包被浓度、孵育时间、孵育缓冲液pH和封闭时间的参数，建立、完善RVA的ISC-RT-qPCR检测体系，并评估该体系的特异性、检测限及稳定性。结果ISC-RT-qPCR最佳试验参数分别为：PGM包被浓度为1.0 mg/mL、孵育时间为60 min、孵育pH为9.0、封闭时间为60 min；体系的检测限约为5拷贝/mL，检测特异性强、稳定性好。结论本研究所建立的ISC-RT-qPCR是一种可用于检测感染性RVA的方法，具有操作简单、绿色环保、可高通量检测等优点，适合于临床、尤其是低病毒载量的食品和环境样品中RVA的快速检测。

简介：摘要：目的：针对复发转移性头颈部鳞癌患者实施治疗，分析白蛋白结合型紫杉醇联合铂类治疗的效果，关注肿瘤标志物水平变化。方法：针对20例复发转移性头颈部鳞癌患者为对象，时间为2021年1月-2022年9月，分为2组，对照组为紫杉醇联合铂类治疗，观察组为白蛋白结合型紫杉醇联合铂类治疗，对比治疗成果。结果：从数据可见，观察组肿瘤标志物水平低于对照组，具有统计学意义（P＜0.05）。同时，在总疗效观察组患者以70.00%高于对照组的40.00%，差异显著（P＜0.05）。结论：采用白蛋白结合型紫杉醇联合铂类治疗对于复发转移性头颈部鳞癌患者而言可缓解病情，改善血清肿瘤标志物水平，故值得推广。