简介：【摘要】目的：探讨VSD联合外固定支架固定术治疗严重小腿开放性骨折的术后护理效果。方法：选取20例经VSD联合外固定支架固定术治疗的严重小腿开放性骨折患者进行实验研究，给予术后优质护理，对比护理前后相关临床指标。结果：20例患者经VSD联合外固定支架固定术治疗并且给予优质术后护理后全部治愈，3例患者愈合后出现钉道感染，经换药后再次治愈。结论：应用VSD联合外固定支架固定术治疗严重小腿开放性骨折并配合术后优质护理能够有效缓解患者疼痛现象，促进患者治疗后的恢复。

简介：摘要目的探索脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells, ADSCs）在脊髓脊膜膨出中的治疗潜能。方法贴壁法提取和培养SD雄鼠ADSCs，流式细胞术鉴定表面标志物表达，并鉴定其向成脂和成骨细胞分化的潜能。8只孕鼠在孕10 d接受全反式维甲酸灌胃处理，孕15 d时向每个羊膜腔内交替注射ADSCs细胞悬液或PBS。孕21 d将有脊髓脊膜膨出（meningomyelocele，MMC）缺损的胎鼠根据羊膜腔内注射液体分为实验组（注射ADSCs，36只）和对照组（（注射PBS，24只），记录并比较胎鼠顶臀长和体重数据及骶尾部皮肤缺损面积。用蛋白质印迹法检测不同组胎鼠脊髓组织中NeuN、PCNA、Cleaved caspase 3、IL-1β、GFAP和Iba-1蛋白表达水平以及膀胱组织中αSMA、SMMHC、Cx43和β3-微管蛋白表达水平。实验组和对照组结果比较采用t检验，P<0. 05为差异具有统计学意义。结果ADSCs镜下呈纺锤形，贴壁生长，表面阳性表达CD29、CD44、CD73和CD90，阴性表达CD11b/c、CD34和CD45，符合间充质干细胞表面标志物表达特点；可成功诱导为成脂和成骨细胞。羊膜腔内注射ADSCs后，MMC胎鼠骶尾部皮肤缺损面积显著减小，相较于对照组，实验组胎鼠脊髓组织中GFAP、Iba-1和IL-1β蛋白表达水平显著下调；膀胱组织中Cx43蛋白表达水平显著上调，两组胎鼠脊髓和膀胱组织中其余蛋白表达水平无差异。结论羊膜腔内注射ADSCs治疗可为干细胞胎内治疗MMC及继发的膀胱功能障碍提供有益探索。

简介：摘要目的以坏死性凋亡为切入点，探讨肝纤维化抵抗D-氨基半乳糖/脂多糖（D-GalN/LPS）诱导致死性损伤的新机制。方法建立四氯化碳（CCl4）诱导的肝纤维化小鼠模型，于纤维化6周时以致死剂量的D-GalN/LPS进行攻击，以同样处理的正常小鼠作为对照。即实验共分为4组：对照组（Control）、急性损伤（D-GalN/LPS）组、肝纤维化（Fib）组、肝纤维化+急性攻击（Fib+D-GalN/LPS）组。定量PCR和免疫荧光法分析坏死性凋亡（necroptosis）关键信号分子受体相互作用蛋白（RIPK）1、RIPK3、混合谱系激酶结构域蛋白（MLKL）和/或P-MLKL在各组中的表达。给予正常小鼠以靶向necroptosis关键信号分子的抑制剂，再给予急性攻击，根据转氨酶水平及肝组织学的变化来评估抑制necroptosis对D-GalN/LPS触发急性肝损害的影响。建立肝纤维化自发消融模型，再给予急性攻击，免疫组织化学法分析和比较各组小鼠肝组织中necroptosis关键信号分子的表达。组间差异的比较采用t检验或方差分析。结果定量PCR和免疫荧光检测结果显示，D-GalN/LPS攻击触发了RIPK1、RIPK3、MLKL和/或P-MLKL的明显上调。抑制necroptosis信号的关键分子可明显减轻D-GalN/LPS诱导的肝损害，表现为血清丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶水平的显著降低以及肝组织学的明显改善。纤维化肝脏中necroptosis信号分子的表达明显受到抑制。肝纤维化对D-GalN/LPS触发necroptosis的抑制随着纤维消融而逐渐削弱。结论肝纤维化可能通过抑制D-GalN/LPS触发的necroptosis而保护小鼠抵抗急性致死性损伤的攻击。

简介：摘要目的评价核因子E2相关因子2(NRF2)在糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用及其与铁死亡的关系。方法SPF级健康雄性SD大鼠48只，6～8周龄，体重200～220 g，采用随机数字表法分成5组：假手术组(S组，n＝6)、心肌缺血再灌注组(NIR组，n＝12)、糖尿病+假手术组(DS组，n＝6)、糖尿病+心肌缺血再灌注组(DIR组，n＝12)和糖尿病+心肌缺血再灌注+NRF2激动剂萝卜硫素组(DIR+SFN组，n＝12)。采用腹腔注射1%链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液60 mg/kg的方法制备大鼠1型糖尿病模型。DIR+SFN组于缺血前连续3 d腹腔注射萝卜硫素500 μg·kg-1·d-1。糖尿病建模成功8周后，采用结扎左冠状动脉前降支30 min恢复灌注的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。于再灌注2 h时记录左心室收缩压(LVSP)、HR和左心室收缩压上升和下降最大速率(±dp/dtmax)；颈动脉取血后处死大鼠，采用ELISA法测定血清cTnI浓度，比色法测定心肌Fe2+、MDA含量和SOD活性，TTC法检测心肌梗死面积，HE染色法观察病理学结果，Western blot法检测NRF2、铁转运蛋白1(FPN1)和长链脂酰辅酶A合成酶家族成员4(ACSL4)的表达。结果与S组比较，NIR组LVSP、HR和±dp/dtmax降低，血清cTnI浓度、心肌Fe2+、MDA含量升高，SOD活性降低，ACSL4表达上调，NRF2和FPN1表达下调(P<0.05) ；与DS组比较，DIR组LVSP、HR和±dp/dtmax降低，血清cTnI浓度、心肌Fe2+、MDA含量升高，SOD活性降低，ACSL4表达上调，NRF2和FPN1表达下调(P<0.05)；与NIR组比较，DIR组LVSP、HR和±dp/dtmax降低，血清cTnI浓度、心肌Fe2+、MDA含量升高，SOD活性降低，心肌梗死面积增加，ACSL4表达上调，NRF2和FPN1表达下调(P<0.05)；与DIR组比较，DIR+SFN组LVSP、HR和±dp/dtmax升高，血清cTnI浓度、心肌Fe2+、MDA含量降低，SOD活性增加，心肌梗死面积减小，ACSL4表达下调，NRF2和FPN1表达上调(P<0.05)。结论NRF2参与了糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的过程，与促进铁死亡有关。

简介：摘要目的评价组蛋白去乙酰化酶3 (HDAC3)在原代大鼠心肌细胞高糖缺氧复氧损伤中的作用及其与自噬的关系。方法将1~3 d左右的新生SD乳鼠提取原代心肌细胞，铺板。按随机数字表法分为5组(n＝24)：对照组(C组，糖浓度5.5 mmol/L)、缺氧复氧组(H/R组)、高糖组(H组，糖浓度30 mmol/L)、高糖缺氧复氧组(HH/R组)和高糖缺氧复氧+HDAC3抑制剂RGFP966组(HH/R+RG组)。采用50%葡萄糖注射液制备高糖培养基(终浓度为30 mmol/L)。H/R组细胞置于低氧环境(5%CO2-0.9%O2-94.1%N2)中培养6 h，再置于常氧环境中复氧2 h制备心肌细胞缺氧复氧模型。HH/R+RG组于缺氧复氧前24 h加入RGFP966，终浓度10 μmol/L。于细胞复氧2 h时，采用CCK-8法检测细胞活力；ELISA法检测细胞上清LDH活性；自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3)转染下共聚焦显微镜检测细胞自噬水平；Western blot法检测心肌细胞HDAC3、p62、LC3Ⅱ和LC3Ⅰ的表达，计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。结果与C组比较，H/R组和H组心肌细胞活力降低，上清液LDH活性升高，H/R组自噬小体数增加，心肌细胞HDAC3表达上调，p62表达下调，LC3 Ⅱ/I比值升高，H组自噬小体数减少，心肌细胞HDAC3和p62表达上调，LC3 Ⅱ/I比值降低(P<0.05)；与H/R组比较，HH/R组心肌细胞活力降低，上清液LDH活性升高，自噬小体数量降低，HDAC3和p62表达上调，LC3 Ⅱ/I比值降低(P<0.05)；与H组比较，HH/R组心肌细胞活力降低，上清液LDH活性升高，自噬小体数量增加，HDAC3和p62表达上调，LC3 Ⅱ/I比值升高(P<0.05)；与HH/R组比较，HH/R+RG组心肌细胞活力升高，上清液LDH活性降低，自噬小体数量增加，HDAC3和p62表达下调，LC3 Ⅱ/Ⅰ比值升高(P<0.05)。结论HDAC3表达上调参与了原代心肌细胞高糖缺氧复氧损伤的过程，与降低细胞自噬水平有关。