AGEs对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中β-catenin、ALP的影响及PTH的干预作用

(整期优先)网络出版时间:2021-07-24
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摘要目的初步探讨在培养的骨髓间充质干细胞(BMSCs)层面,晚期糖基化终末产物(AGEs)对BMSCs成骨分化中β-catenin、碱性磷酸酶(ALP)的影响,以及甲状旁腺激素(PTH)的干预及其机制。方法取第三代BMSCs,检测AGEs对其增殖的影响。将BMSCs分为对照组、AGEs组、Wnt3a组、AGEs+Wnt3a组;对照组、AGEs组、AGEs+晚期糖基化终末产物受体(RAGE)抗体组;对照组、AGEs组、AGEs+PTH组;对照组、PTH组、PTH+Dickkopf相关蛋白1(DKK1)组,应用Western-blot法检测β-catenin、ALP蛋白的表达。结果BMSCs的增殖可以被AGEs抑制。0.2 g/L AGEs干预BMSCs 7 d,AGEs抑制β-catenin、ALP蛋白表达有统计学差异;给予Wnt通路促进剂Wnt3a后,AGEs作用被抑制,β-catenin、ALP蛋白表达较AGEs组增加;加入10 mg/L RAGE中和抗体共培养,与AGEs组相比,β-catenin、ALP蛋白表达增高。加入PTH后可以逆转AGEs的负性成骨作用,β-catenin、ALP蛋白表达增高;加入Wnt通路阻滞剂DKK1共培养,β-catenin、ALP蛋白表达较PTH组增加。结论AGEs-RAGE通过Wnt/β-catenin信号通路抑制大鼠BMSCs ALP蛋白表达;PTH逆转AGEs对β-catenin、ALP的负性作用。